具有地方性呼吸系统病史的50个猪群中3～6周龄出现咳嗽症状仔猪中猪肺炎支原体病的发生

到目前为止,意大利已经分离到了H1N1、H1N2和H3N2 3个亚型猪流感病毒。2006年,在一例有咳嗽症状的猪上分离到了一种新的猪流感病毒亚型(H3N1)。通过对肺组织的RT-PCR检测,对试验猪人工感染该新亚型流感病毒及利用空斑试验对该毒株的克隆鉴定,证实了这一独特的H和N组合的猪流感病毒的存在。同时,对该新型毒株进行了抗原及遗传特性鉴定。基因系统发育分析结果表明,H3N1亚型的完整HA基因序列与3株意大利H3N2亚型具有高度的一致性。这3个意大利亚型中有一株分离于2001年,其它2株分离于2004年,而该毒株的NA序列全长与2004年于意大利分离得到的3株H1N1亚型猪流感病毒极其相似。其余的基因片段也分别与当前意大利流行的H1N1与H3N2猪流感病毒极为相似。这表明,该新亚型猪流感病毒可能是H1N1与H3N2亚型的一个重组体。     

猪流感病毒H1N1、H1N2和H3N2亚型多重RT-PCR诊断方法的建立

对我国分离到的猪流感病毒和GenBank数据库中已有的猪流感病毒H1N1、H1N2和H3N2亚型毒株的HA、NA基因核苷酸序列进行分析,分别选出各个病毒亚型HA和NA基因中高度保守且特异的核苷酸区域,设计扩增猪流感病毒H1和H3、N1和N2亚型的2套多重PCR特异性引物,建立了猪流感H1N1、H1N2和H3N2亚型病毒多重RT-PCR诊断方法。采用该方法对H1N1、H1N2、H3N2亚型猪流感病毒标准参考株进行RT-PCR检测,结果均呈阳性,对扩增得到的片段进行序列测定和BLAST比较,表明为目的基因片段。其它几种常见猪病病毒和其它亚型猪流感病毒的RT-PCR扩增结果都呈阴性。对107EID50/0.1mL病毒进行稀释,提取RNA进行敏感性试验,RT-PCR最少可检测到102EID50的病毒量核酸。对40份阳性临床样品的检测结果是H1N1、H1N2和H3N2亚型分别为16份、1份和20份,其它3份样品同时含有H1N1和H3N2亚型猪流感病毒,和鸡胚分离病毒结果100%一致。试验证明建立的猪流感病毒H1N1、H1N2和H3N2亚型多重RT-PCR诊断方法是一种特异敏感的诊断方法,可用于临床样品的早期快速诊断和分型。     

H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因双重RT-PCR定型检测方法的建立与应用

为了建立适用于临床诊断的H1N1亚型猪流感病毒快速检测方法,本研究根据GenBank已登录的H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因序列设计RT-PCR扩增引物,以H1N1亚型猪流感病毒、H3N2亚型猪流感病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒为试验对照,通过优化RT-PCR反应条件和反应体系,建立了H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因双重RT-PCR定型检测方法。同时,运用H1N1亚型猪流感病毒血凝和血凝抑制试验方法和本研究建立的方法对165份猪病料样品进行了对比验证。结果表明,本研究建立的H1N1亚型猪流感病毒双重RT-PCR具有良好的特异性、敏感性、重复性,所扩增的目的基因片段大小分别为428 bp和678 bp左右,可检出最小基因组RNA浓度为2.9×10-5μg/μL。本研究建立的方法和H1N1亚型猪流感病毒血凝和血凝抑制试验方法均从同一份猪肺脏样品中检测出H1N1亚型猪流感病毒,其余样品中均未检出H1N1亚型猪流感病毒,两种方法符合率为100%。本研究建立的方法适用于H1N1亚型猪流感病毒双基因定型检测,可在H1N1亚型猪流感病毒流行病学调查和临床诊断中应用。     

猪流感与公共卫生

猪流感(Swine influenza,SI)是目前危害全世界养猪业的重要呼吸道传染病之一.导致猪发病的致病毒株主要有H1N1、H1N2、H3N1、H3N2、H2N3、H5N1和H9N2等亚型流感病毒,特别是从猪体分离H5N1和H9N2亚型流感病毒对禽流感的控制及人类公共卫生有重要意义.针对目前流行的甲型H1N1疫情,对猪流感病毒的分子生物学、临床症状、病理变化及公共卫生意义等方面进行了综述,以期对其有一个较为全面的了解.     

西班牙养猪密集地区同时流行A型流感病毒H1N2、H1N1和H3N2亚型的证据

本文报道了对西班牙养猪密集地区进行的猪流感病毒(SIV)血清学和病毒学调查结果,其目的是检测H1N2亚型猪流感病毒是否和在欧洲其它地区一样也流行于这些地区。在西班牙北部和东部地区100个未接种猪流感疫苗的繁育群采集了600份母猪血清,以进行抗H1N1、H3N2和H1N2亚型病毒的血凝抑制试验(HI);再借助鸡胚病毒分离法和商品薄膜免疫分析法,对采自有呼吸道疾患的225份病猪肺样本进行检测以确定是否存在猪流感病毒。通过HI和逆转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,再辅以cDNA部分序列的测定,对分离毒株进行鉴定。对血清所作的HI试验表明,在83%受测猪群和76·3%受测猪中至少存在抗一种猪流感病毒亚型的抗体。在受检的600份母猪血清中,仅含抗H1N2、H3N2或H1N1亚型病毒抗体的样本数分别为109份(占总样本比例的18·2%)、60份(10%)和41(6·8%)。从有呼吸道疾患的猪肺样本中分离到12株H3N2亚型病毒、9株H1N1亚型病毒和1株H1N2病毒。对H1N2亚型分离株的神经氨酸酶基因436个核苷酸序列进行的分析,进一步证实了其身份。显然,猪流感依然流行于所研究猪群中,同时一种新的亚型病毒(即H1N2亚型病毒)可能正在开始流行,并且也在西班牙引起了临床发病。     

2016年我国部分地区屠宰场猪流感血清学调查

目前,全球范围内流行的猪流感病毒亚型主要有3种:H1N1、H3N2、H1N2,此外,H1N7、H4N6、H9N2、H5N1、H3N3、H3N1和H2N3等亚型病毒也在猪体内分离到,但没有证据显示这些病毒在猪体内建立稳定的谱系。为了解我国屠宰场猪群中流感病毒的感染与流行情况,选取2009年甲型H1N1(pdm/09)、欧洲类禽H1N1(EA H1)、经典H1N1(经典H1)、新型三源重排H1N1(ReH1)、H3N2(H3)、H9N2(H9)流感病毒制备的血凝抑制(HI)标准抗原作为检测抗原,对全国25个屠宰场的猪血清进行了HI抗体的检测。结果显示,2016年我国屠宰场样品中,pdm/09、EA H1、经典H1、Re H1、H3、H9抗体阳性率分别为23.18%、28.12%、19.34%、24.97%、7%、7.41%;在所监测地区中,华南地区屠宰场猪流感血清平均抗体阳性率最高。结果表明,2016年我国屠宰场猪群中H1N1亚型猪流感病毒感染比较普遍,H3N2和H9N2亚型猪流感病毒抗体阳性率较低。     

猪流感疫苗的研究进展

猪流感（swine influenza,SI）是由流感病毒引起的一种严重呼吸道疾病,临床以突发、高热、咳嗽、呼吸困难、衰竭、高发病率、低死亡率为特征。迄今已发现的A型猪流感病毒（swine influenza virus,SIV）有H1N1、H1N2、H1N7、H3N1、H3N2、 H3N3、H3N6、H4N6、H5N1和H9N2等10种不同血清亚型。自被发现以来,猪流感已成为严重危害猪群的疾病之一,已遍及亚洲、欧洲、非洲、南美洲、北美洲等,可谓全球流行。目前,世界范围内流行的猪流感血清型主要有人源H3N2、经典猪H1N1和类禽源H1N13种。     

供港猪群流感病毒的分离鉴定及流行病学调查

为了对供港猪群中的猪流感流行情况进行分析,从华南地区供港猪群中用无菌棉拭子采集鼻腔粘液样品,采用鸡胚接种方法,从供港猪群中分离出了2株不同亚型的猪流感病毒株,经国家流感中心鉴定分别为H1N1和H3N2亚型。本研究设计了猪流感常见亚型的HA和NA分型特异性引物,建立了猪流感型特异性RT-PCR检测方法;对分离鉴定的2株猪流感病毒和禽流感H5N1 HI检测抗原进行了RT-PCR检测,并对其部分HA和NA基因进行克隆测序分析。对供港猪群的血清检测结果表明:供港猪群中H1N1和H3N2亚型抗体阳性率分别为26.87%、38.26%,禽流感H5N1和H9N2亚型抗体阳性率均为0%。     

猪流感分子流行病学及免疫预防研究进展

猪流感是世界性流行的呼吸系统传染病之一,当与其他病原混合感染时会造成更严重的损害。它的免疫机制主要为黏膜免疫和体液免疫,滴鼻和肌肉注射都能产生高效的免疫应答。当前流行的猪流感病毒亚型主要为H1N1、H1N2和H3N2,常用的疫苗都是灭活苗。因为猪流感病毒亚型较多、抗原易发生变异和可在种间传播,给流感疾病的预防乃至人类的健康带来很多挑战。核酸疫苗、合成肽苗和基因工程苗的研究为猪流感的预防提供了广阔前景。     

猪流感疫苗的研究进展和应用前景

猪流感是由正粘病毒科、流感病毒属的A型流感病毒引起的一种急性、热性、高度接触性的猪呼吸道疾病,以H3N2.H1N1和H1N2 3种血清亚型最为常见.其病原还具有重要的公共卫生意义.目前临床上防控本病的主要手段是接种疫苗.本文对猪流感全病毒灭活疫苗和各种亚单位疫苗的研究进展进行了简要阐述,旨在为研制新型猪流感疫苗提供参考.     

猪流行性感冒及其防治

1病原 分为甲（A）、乙（B）、丙（C）型。猪流感病毒属于正粘病毒科,甲性流感病毒。猪流感病毒已发现至少有5个亚型,即H1N1、H3N2、H1N2、H3N1和H1N7,各亚型之间有不同程度的血清学交叉反应。只有H1N1和H3N2能引起猪广泛发病。     

东莞市猪流感的监测及风险评估

为了探讨东莞地区猪流感的感染情况和流行动态,及时进行风险评估,提出预警预报,对东莞市猪群的猪流感进行了ELISA、HI等项目的血清学监测和荧光PCR方法病原学监测。结果表明：东莞猪场的猪流感感染较为普遍,血清学ELISA监测结果显示H1N1亚型猪流感感染比H3N2亚型猪流感感染要严重,且用荧光PCR方法监测到H1N1亚型猪流感病毒的存在。东莞地区猪流感的感染情况值得兽医人员及养殖户加以重视,应加强防控,减小损失。     

猪流感的诊断及防治

猪流感是急性的呼吸道传染病,以发病急、传播快、发病率高、死亡率低为特征.此病呈世界流行,严重危害畜牧业的发展. 1病原 猪流感病毒大多是H1N1型,但其他亚型也会在猪群传播,例如H1N2、H3N1、H3N2,其中H3N2型被认为最初是由人传播到猪的.流感病毒可凝集20多种动物的红细胞,对干燥和低温抵抗力强,60℃作用20min可将其灭活,一般的消毒药有很好的杀灭作用.     

沧州地区H1N1亚型猪流感血清学调查

猪流感是由猪流感病毒引起的在临床上以高热、咳嗽、呼吸困难为特征的一种急性、热性和高度接触性呼吸道传染病。该病毒主要有3种血清亚型(经典H1N1、类禽H1N1和类人H3N2亚型),危害最重的是经典H1N1亚型。由于该病可损害呼吸道上皮细胞,容易诱发猪繁殖与呼吸综合征、支原体、传染性胸膜肺炎、副猪嗜血杆菌和巴氏杆菌等疾病,间接给养猪业带来了极大的危害。为了摸清猪流感的感染情     

猪流行性感冒(Swine Influenza,SI)

<正>2009年3月底至4月中旬,墨西哥、美国等地接连暴发甲型H1N1流感(或称H1N1亚型猪流感),此病毒为甲型H1N1流感病毒,携带有H1N1亚型猪流感病毒毒株,包含有禽流感、猪流感和人流感3种流感病毒的DNA基因片断,同时拥有亚     

H3N2亚型猪源流感病毒NS基因的克隆与序列分析

根据Gen Bank上已发表的H3N2亚型的猪流感病毒NS基因序列,设计合成一对引物,对四个猪流感病毒广东株提取RNA,运用RT-PCR方法获得了4株H 3N2亚型猪源流感病毒广东分离株A/Swine/Guangdong/01/04(H 3N2)、A/Swine/Guangdong/02/04(H 3N2)、A/Swine/Guangdong/03/04(H 3N 2)、A/Swine/Guangdong/04/04(H3N2)的NS基因序列,并对所得序列进行比较分析.序列分析表明,四个毒株NS基因的核苷酸序列与参考毒株的NS基因相似性高迭90%以上,说明近年来广东的H 3N2亚型猪流感病毒NS基因变异较小.遗传进化关系表明本实验四个毒株的NS基因和香港2000-2002年间的猪流感病毒的NS基因与1998-2002年间美洲流行的人流感病毒的NS基因在遗传进化树中位于同一个分支,这说明它们可能有着相近的亲缘关系.     

猪流感的防控技术措施

<正>猪流感是由A型猪流感病毒引起的猪的一种急性呼吸道传染病。临床上以突然发热,精神沉郁,眼结膜潮红,流鼻涕,咳嗽,气喘,呼吸困难为特征。本病虽然传播快,发病率高,危害性较大。但该病仍然是一种可防可控可治疗的传染病。1病原体甲型(A型)流感病毒属于正粘病毒科,有15个H亚型,9个N亚型,在猪群中常发生流行的血清型多为H1N1、H3N2、H1N2、     

2015～2017年东莞市H 3N 2亚型猪流感血清学调查

为了解本地养猪场H3N2亚型猪流感的流行情况,2015~2017年,在东莞市本地养殖场采集了873份猪血清,采用酶联免疫吸附试验方法检测H3N2亚型猪流感抗体,结果为H3N2亚型猪流感抗体阳性501份,抗体阳性率为57.39%,其中2015~2017年的抗体阳性率分别为24.20%、66.21%、69.66%,抗体阳性率呈上升的趋势。结果表明,东莞市本地养猪场存在H3N2亚型猪流感的流行,2015~2017年抗体阳性率的上升趋势可能与近年来东莞市人流行的H3亚型甲型流感有相关性。     

东莞市H1N1亚型猪流感抗体血清学调查

为了解东莞市猪群感染H1N1亚型猪流感病毒的情况,2015~2017年在东莞市猪养殖场采集猪血清937份,采用ELISA方法进行H1N1亚型猪流感抗体检测,抗体阳性数411份,抗体阳性率为43.86%,其中2015~2017年的抗体阳性率分别为62.83%、57.08%、26.06%。结果表明,东莞市养殖场的猪群普遍存在H1N1亚型猪流感病毒的感染,分析3年的感染抗体阳性率,2015~2017年有下降的趋势可能与猪流感流行的毒株有关。     

多重RT-PCR检测猪流感病毒及血清亚型

根据GenBank登录的猪流感病毒各血清亚型NP基因,H1、H3亚型HA基因,N1、N2亚型NA基因核苷酸序列,经DNAstar软件类比选择保守区设计引物,sPCR筛选出引物对,用于扩增猪流感病毒NP基因、血凝素H1/H3亚型、神经氨酸酶N1/N2亚型基因片段。根据NP、H1N1、H3N2亚型引物扩增片段大小和反应条件的差异,将各引物配比组合,形成引物组合,建立多重RT-PCR体系。经对不同亚型模板的扩增、检验,建立的2个多重RT-PCR体系可用于猪流感病毒及H1/H3血凝素亚型、N1/N2神经氨酸酶亚型的快速鉴别、诊断。特异性试验检测多重RT-PCR不能扩增其他猪病毒核酸,核酸的最低检测量达0.2ng。采集临床具有呼吸道症状的猪肺、鼻腔棉试子等85份,与鸡胚分离及血凝/血凝抑制试验比较,阴性样品检测符合率达100%。