两种消毒剂对猪瘟病毒的杀灭试验

采用培养的林氏管PK15细胞和荧光抗体染色法对灭毒净（有机酸类消毒剂）和毒菌清（过硫酸盐消毒剂）杀来猪瘟病毒的效能进行了试验，结果600倍稀释的灭毒净和400倍稀释的毒菌清分别为50倍稀释的猪瘟石门系强毒等量混合，室温作用30min可以完全将病毒杀灭。     

达康灭毒灵对猪瘟病毒的杀灭试验

采用直接荧光法进行了达康灭毒灵对猪瘟病毒的杀灭效果试验.分别将有效氯浓度为100 mg/L和50 mg/L的达康灭毒灵消毒液与含有104 FA-TCID50猪瘟病毒Thiverval株病毒液的混合物于20 ℃水浴作用10 min和20 min,均可以完全将病毒杀灭.     

菌毒净对猪O型口蹄疫病毒和猪水泡病病毒的杀灭效果

用试管中和灭毒,实验动物验证的方法测定菌毒净消毒剂对猪Ｏ型口蹄病毒和猪水泡病病毒的杀灭效果。试验结果表明,１：１００００的菌毒净消毒剂可完全杀灭猪Ｏ型口蹄疫病毒,１：８０００的菌毒净可完全杀灭猪水泡病病毒。     

北京小鸭病毒性肝炎的研究——(三)鸡胚化鸭肝炎病毒(DHV)在鸡胚中的生长曲线及分布

本文是研究鸡胚在接种鸡胚化 DHV 后的四个问题:(1)鸡胚死亡发展的格局;(2)病毒在鸡胚中的生长曲线;(3)38℃恒温对死胚里病毒的影响;(4)鸡胚中各部分 DHV 的含量。接种病毒后48小时至56小时为鸡胚死亡的高峰;病毒滴度在接种后48小时至64小时之间都保持在最高水平,约10~8ELD50/0.1ml。当死胚继续孵化24小时后,病毒含量下降2个滴度单位,若再保温24小时,则病毒滴度几乎等于零。在鸡胚的不同部位中,胚胎合病毒的滴度为10(?)ELD50/0.1ml;羊水为10(?)ELD50/0.1ml;尿囊液为10(?)ELD50/0.1ml;卵黄囊为10(?)ELD50/0.1ml。讨论了这项研究的实用意义。     

鸭病毒性肝炎A66弱毒株的安全性及稳定性试验

DHV－A毒株连续通过鸡胚25代后，已失去对雏鸭的致死性，至60代时已对雏鸭无致病力，用A66鸡胚混合毒50万－200万个半数免疫量（DIMD50）经皮下途径接种1日龄雏鸭，无异常反应。A60、A66鸡胚混合毒的毒价分别为10^7.64CELD50/0.1ml和10^7.36CELD50/0.1ml；对1日龄龄急诊鸭经皮下免疫的半数免疫量分别为10^6.36DIMD50/0.1ml和10^6.16DIMD50/0.1ml.A66鸡胚毒连续回归雏鸭5代，全部健活，剖检亦无肉眼可见病变。     

蛋鸡新城疫病毒的分离与初步鉴定

采用鸡胚接种法从河北一些蛋鸡场分离到3株病毒,分别标号为WJ1、WJF2和WJF3.经血凝、血凝抑制试验及血清学中和试验鉴定3株分离毒株均为新城疫病毒;鸡胚半数致死量测定,WJ1株毒价为107.3ELD50/0.1 mL,WJ2株和WJ3株毒价分别为107.9ELD50/0.1 mL.动物回归试验鸡的临床表现与自然病例基本一致.再用分离毒攻ND Ⅳ系疫苗免疫鸡,显示ND Ⅳ系疫苗可以保护WJ1和WJ3分离毒株,而不能保护WJ2分离毒株.     

12种消毒剂对猪O型口蹄疫病毒的杀灭效果

应用试管中和灭毒，实验动物验证法测定１２种消毒剂对猪Ｏ型口蹄疫病毒的杀灭效果。结果表明，１２种消毒剂完全杀灭猪Ｏ型口蹄疫的有效浓度分别为：益康露１：２００、、绿迪奥１：３００、消毒威１：１００００、菌毒灭１；３５０、、受得福１：３００、迪威１：３００、力保１：８０００、消特灵１：１５０００、百迪１：１０００、好力１：１５００、消毒净１：２０００、菌毒净１：１０００。     

试纸探针条检测鸡传染性法氏囊病疫苗中病毒含量的试验

试纸探针条可识别市售的国产或进口鸡传染性法氏囊病（IBD）代表性疫苗毒株及其鸡胚培养毒或细胞培养或其接种鸡的囊毒，并可检出经甲醛灭活的IBD标准强毒、田野囊毒、鸡胚培养毒或细胞培养毒。活的或灭活待检疫苗水溶液中IBDV的含量越高，试纸探针条上阳性线显现越快、颜色越深且明显；在30分钟的结果观察时间内，该条可检出每0.1mL样品中800ELD50或10^7.0TCID50的病毒含量，该条检测灭活IBDV的效价是AGP测定效价的32倍以上，试纸探针条为估价疫苗中IBDV的含量或疫苗质量提供了一条简便、快速、经济的新途径。     

菌毒净对家禽主要病毒杀灭效果试验

菌毒净是广东省农科院兽医研究所研制的一种新型、广谱、高效消毒剂,主要由具有消毒、杀菌、漂白作用的三氯异氰脲酸(强氯精)与助溶剂、增效剂、稳定剂等佐剂经科学配合制成,含有效氯不低于28%。为证实菌毒净对畜禽主要病毒灭活效果,已进行了对猪一、五号病及猪瘟病毒杀灭效果试验(广东畜     

鸡传染性法氏囊病（B87株）组织毒液生产工艺探讨

通过计算ELD50,将已知效价的鸡传染性法氏囊病(B87株)生产种毒分几个滴度进行稀释,分别接种SPF鸡胚,结果各组鸡胚随病毒接种量的提高,高峰期死亡时间逐渐靠前,高峰期死亡率也逐渐增加,抗原效价也逐渐提高,抗原产量也有明显变化,病毒滴度以102.0 ELD50/0.1mL接种鸡胚更合适.     

法氏囊(B87株)活疫苗生产工艺改进试验

分别采用尿囊腔接种法和绒毛尿囊膜接种法将IBD B87株接种鸡胚，并对不同叶段收获的胎儿测定ELD50。对比其结果发现，尿囊腔接种也能达到绒毛尿囊膜接种的效果，病毒含量妻≥10^5.0 ELD50，且两种接种方法均在66—96h之间出现死亡高峰。经病毒含量测定，该时段死亡胎儿较其它叶段死亡的胎儿病毒含量高出1．5倍以上，表明尿囊腔接种可以用于IBD B87株种毒的繁殖。     

贵州省鹅副黏病毒分离株的病原学特性鉴定

鹅副黏病毒D1分离株能致死鹅胚、鸭胚和鸡胚,致死率达到100%,感染的尿囊液能产生较高的血凝效价.血凝素对热不稳定,经56℃水浴处理10min血凝活性消失.副黏病毒感染鹅血清与D1分离株和La Sota毒株均发生血凝抑制现象,大多数血清样本对2株病毒的HI效价存在两个以上的滴度差异.病毒粒子呈球形、椭圆形、杆状或棒状,呈现显著多形性的特征.D1分离株ELD50经测定为10-7.84/0.1 mL,油乳剂灭活疫苗接种鸡能够抵抗20000ELD50病毒的攻击,免疫保护率达到88.9%.     

鸡传染性喉气管炎病毒和肾型支气管炎病毒同胚增殖的研究

将鸡传染性喉气管炎(ILT)病毒悬液和鸡传染性支气管炎(IB)病毒悬液，采取不同浓度，不同时间在同一个鸡胚上进行接种，可使两种病毒之间互不干扰，并能在同一鸡胚上共同增殖。取鸡胚绒毛尿囊膜检测传染性喉气管炎病毒(ILTV)，其EID50为10^55/0.2ml，取尿囊液检测传染性支气管炎病毒(IBV)，其EID50为10^63/0．2ml。与单项接种对照组相同；用同胚增殖的绒毛尿囊膜和尿囊液按一定比例混合，制造二联油乳剂灭活苗，免疫后30d和6个月后分别用ILT、IB强毒进行攻毒试验，结果免疫后30d，ILT和IB的保护率均为100％，免疫后6个月，ILT和IB的保护率分别为95.3％、86．7％。本试验结果表明，用此方法增殖病毒，既降低了成本，又保证了免疫效果，为今后制造二联苗提供了科学的依据。     

鸡传染性法氏囊病组织病毒液（B87株）生产工艺探讨

通过计算ELD50,将已知效价的鸡传染性法氏囊病（B87株）生产种毒分几个滴度进行稀释,分别接种SPF鸡胚,结果各组鸡胚随病毒接种量的提高,高峰期死亡时间逐渐靠前,高峰期死亡率也逐渐增加,抗原效价也逐渐提高,抗原产量也有明显变化,病毒滴度以102.0ELD50/0.1mL接种鸡胚更合适。     

鸡新城疫病毒的分离和鉴定

旨在为发病鸡场找到致病原,本研究利用SPF鸡胚从发病鸡组织中分离到1株病毒,病毒对1%鸡红细胞的血凝价为28,病毒的ELD50为107.83/0.1 m L,病毒可以被新城疫病毒阳性血清特异性中和,攻击该病毒的SPF鸡表现出典型的新城疫病毒感染症状,RT-PCR鉴定显示该病毒为新城疫病毒。     

猪流行性腹泻病毒培养的工艺参数优化试验

为了提高猪流行性腹泻病毒的病毒滴度,建立最优的病毒培养条件,对影响病毒培养的细胞培养时间、接毒剂量、收毒时间等条件进行了研究。结果表明:细胞培养时间为主要因素,对于流行性腹泻病毒毒价影响较为显著,细胞培养72 h接毒平均毒价为107.44TCID50/0.1 m L,均高于其他两组;而收毒时间则为次要因素,平均毒价为107.21TCID50/0.1m L;接毒剂量影响不显著,平均毒价为107.08TCID50/0.1 m L,本试验最佳工艺组合为细胞培养72 h接毒、接毒剂量为0.1%、收毒时病变程度为60%。     

鸭病毒性肝炎活疫苗(CH60株)规模化生产工艺改进试验

在鸭病毒性肝炎活疫苗(CH60株)生产时,用10日龄和11日龄进行病毒增值,同时把病毒稀释倍数由100倍改为5000倍,将鸡胚死亡高峰期、最终死亡率、单胚平均收获单产、病毒含量ELD50进行对比分析,结果表明将病毒进行100倍稀释后,用11日龄鸡胚增值鸭病毒性肝炎弱毒(CH60株)与10日龄鸡胚相比死亡高峰期时间、最终死亡率、病毒含量ELD50、单胚平均收获单产等基本相同;将病毒进行5000倍稀释后,用11日龄鸡胚增值鸭病毒性肝炎弱毒(CH60株)与10日龄鸡胚相比死亡高峰期时间推迟12~24h,最终死亡率基本相同、单胚平均收获单产可提高30%左右、病毒含量ELD50略有上升;采用5000倍稀释病毒,接种11日龄鸡胚的生产工艺可以提高收获单产,降低生产成本,提高产品效价.     

呼肠孤病毒弱毒S1133株特性研究

呼肠孤病毒S1133株细胞毒在鸡胚成纤维细胞(CEF)上生长良好，每0．1mL病毒液可达10^6.5～10^7.5TCID50。以10^4.5TCID50／只接种3周龄SPF雏鸡无致病性。免疫雏鸡可抵抗强毒足垫攻击，未免疫对照鸡则不能抗强毒攻击。表明该毒株安全且具有良好的免疫原性。     

靶向VP1和VP2双拷贝shRNA重组表达质粒抑制传染性法氏囊病病毒复制的研究

为抑制传染性法氏囊病病毒(IBDV)的复制,本研究构建了靶向IBDV VP1和VP2基因的鸡双向U6启动子(chU6)双拷贝shRNA重组表达质粒pchU6-shRNA12,将其转染鸡胚成纤维细胞(CEF),再接种IBDV,72 h后,未出现细胞病变(CPE),病毒滴度小于101 TCID50/0.1mL;而转染空质粒和未转染两个对照组均出现明显的CPE,病毒滴度均达到108.75 TCID50/0.1 mL.此外,将pchU6-shRNA12与IBDV混合,接种于10日龄SPF鸡胚尿囊腔,96 h后,鸡胚发育正常,病毒滴度小于101 ELD5,0/0.1 mL,实时荧光定量RT-PCR检测VP1和VP2基因,比单纯接种IBDV组分别降低92％和95％;而含有空质粒和不含质粒两个对照组鸡胚则全部死亡,病毒滴度均达到107.00 ELD50/0.1mL.本研究结果表明,chU6启动子在双拷贝shRNA表达质粒pchU6-shRNA12中能高效驱动双拷贝shRNA的转录,生成的siRNA在CEF(in vitro)和鸡胚体内(in vivo)均能有效抑制IBDV的复制.     

不同日龄鸡胚接种不同浓度病毒对鸽新城疫病毒PB9601株鸡胚适应毒产毒量比较

利用不同浓度的鸽新城疫病毒（NDV）PB9601株在不同日龄的鸡胚上繁殖，观察鸡胚的死亡时间、尿囊液的收获量，并分别测定尿囊液中HA滴度和ELD50值，比较结果表明，以1：500稀释液0．1ml接种9日龄SPF鸡胚或1：100稀释液0．1ml接种10日龄胚产毒量最高。