鸡传染性喉气管炎病毒和肾型支气管炎病毒同胚增殖的研究

将鸡传染性喉气管炎(ILT)病毒悬液和鸡传染性支气管炎(IB)病毒悬液,采取不同浓度,不同时间在同一个鸡胚上进行接种,可使两种病毒之间互不干扰,并能在同一鸡胚上共同增殖。取鸡胚绒毛尿囊膜检测传染性喉气管炎病毒(ILTV),其EID50为105.5/0.2ml,取尿囊液检测传染性支气管炎病毒(IBV),其EID50为106.3/0.2ml。与单项接种对照组相同;用同胚增殖的绒毛尿囊膜和尿囊液按一定比例混合,制造二联油乳剂灭活苗,免疫后30d和6个月后分别用ILT、IB强毒进行攻毒试验,结果免疫后30d,ILT和IB的保护率均为100%,免疫后6个月,ILT和IB的保护率分别为95.3%、86.7%。本试验结果表明,用此方法增殖病毒,既降低了成本,又保证了免疫效果,为今后制造二联苗提供了科学的依据。     

鸡传染性喉气管炎弱毒疫苗免疫异常的分析

鸡传染性喉气管炎(ILT)弱毒疫苗系用鸡传染性喉气管炎病毒弱毒株接种SPF鸡胚，收获感染鸡胚的绒毛尿囊膜，混合研磨，加适宜稳定剂，经冻干制成。该苗用于预防鸡传染性喉气管炎。     

鸡传染性喉气管炎病毒培养特性的研究

本试验从发病鸡群分离一株鸡传染性喉气管炎病毒(命名为NM98a)，并用分离株和ILT王岗株对鸡胚绒毛尿囊膜、鸡胚尿囊腔及鸡胚肾细胞上培养进行比较研究。结果表明：ILTV经不同途径接种鸡胚和鸡胚肾细胞上培养，在鸡胚绒毛尿囊膜和鸡胚肾细胞上引起的病变不同，但最终增殖达到的感染性病毒量没有明显区别。鸡胚尿囊腔接种是ILTV增殖最佳途径。     

白喉型鸡痘病毒Gibbs株免疫特性研究

白喉型鸡痘病毒Gibbs株能在鸡胚绒毛尿囊膜上良好增殖，接种后１２０小时，绒毛尿囊膜明显水肿，且淡黄色痘斑，其毒价达到１０^5.25-10^5.83EID50/0.2ml。用１０倍稀释的病毒悬液肌肉注射１３日龄雏鸡，无任何不良反应。用１００倍稀释病毒液皮下刺种免疫１４－４０日龄鸡，接种后３－６天，接种局部出现痘痂，接种后１４天，用１０倍稀释的Ｇibbs株病毒液二次皮下刺种或用鸡痘野毒株经腿部毛作擦，免疫未见任何局部反应或其它异常，保护率达１００％。，免疫后１６５天，保护率仍达８０％，试验结果证实该毒株具有良好的免疫原性和安全性。     

鸡传染性喉气管炎弱毒疫苗生产工艺改进试验

鸡传染性喉气管炎（ILT）是由疱疹病毒科喉气管炎病毒引起的鸡的一种急性呼吸道传染病，我国已有许多地区爆发流行，给养鸡业带来了严重危害。通过疫苗接种可以有效防止本病的爆发和流行。我国使用的国产鸡传染性喉气管炎弱毒疫苗基本上都是采用鸡胚绒毛尿囊膜接种鸡胚，收获感染的鸡胚绒毛尿囊膜，混合研磨，加适当的稳定剂，经冷冻真空干燥制成。但是这种方法要制造人工气室，操作难度大，并且接毒后死胚率较高。为了简化生产工艺、降低生产成本，在不影响产品质量的前提下，我们采用直接接种尿囊腔培养病毒的方法，生产出几批传染性喉气管炎弱毒疫苗，质量检测达到《兽用生物制品质量标准汇编》（以下简称标准》）要求，并且使用效果较好，现将试验过程报告如下。     

鸡传染性喉气管炎疫苗生产工艺改进初探

在鸡传染性喉气管炎活疫苗生产中，用尿囊腔接种法代替绒毛尿囊膜接种法，收获的胚液和绒毛尿囊膜的含毒量(EID5D)均可达到《中华人民共和国兽用生物制品规程》对制苗的要求，提高了种蛋的利用率。     

采用鸡胚尿囊腔接种培养鸡传染性喉气管炎弱毒疫苗的试验

采用鸡胚尿囊腔接种培养鸡传染性喉气管炎弱毒疫苗的试验王少英，赵丽明，陈任重，赵素霞（广东省生物药厂，广州．５１０６３０）鸡传染性喉气管炎病毒（ＬＴＶ）在鸡胚复制的位置主要在鸡胚绒毛尿囊膜（ＣＡＭ），传统的生产方法是采用在鸡胚做人工气室，通过人工气室接...     

鸡传染性喉气管炎活疫苗生产工艺的改进——鸡胚绒毛尿囊膜渗透法接种应用实验

采用鸡胚绒毛尿囊膜渗透法给鸡胚接种病毒,收获感染的鸡胚绒毛尿囊膜制备鸡传染性喉气管炎活疫苗,相比于传统的人工气室绒毛尿囊膜接种法和尿囊腔接种法可降低鸡胚的早死亡率,提高鸡胚利用率,降低生产成本,提高单产量。     

鸡传染性喉气管炎弱毒活疫苗生产工艺的优化及改进试验

《中华人民共和国兽用生物制品规程》规定,在生产鸡传染性喉气管炎弱毒活疫苗时,采用鸡胚尿囊腔接种和人工气室绒毛尿囊膜接种工艺生产成品。由于人工气室绒毛尿囊膜接种早死胚多,而且工艺比较繁琐,所以我国大多数生产企业在生产中多采用尿囊腔接种方法,但尿囊腔接种后病毒繁殖时间要比人工气室绒毛尿囊膜接种后延长1~2 d,增加了孵化成本,而且绒毛尿囊膜病变(增厚、水肿等)也不如人工气室绒毛尿囊膜接种后产生的病变严重(膜重)。为此,借鉴了鸡痘鹌鹑化弱毒活疫苗的新生产工艺———鸡胚绒毛尿囊膜渗透法[1],并将此方法用于鸡传染性喉气管炎…     

鸡新城疫、传染性支气管炎病毒同胚接种试验

通过对五个批次的无特定病原体(SPF)鸡胚进行鸡新城疫病毒（NDV）、鸡传染性支气管炎病毒（IBV）同胚接种,收获72～120 h死胚及120 h活胚尿囊液,分别测定NDV和IBV的病毒含量,结果表明NDV病毒含量达到了108.3～108.7EID50/0.1mL, IBV的病毒含量达到了106.3～106.5EID50/0.1mL。两种病毒含量均达到《中华人民共和国兽用生物制品制造及检验规程》（2000版）中鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗病毒含量要求的标准。表明该方法即可降低成本,又简化了生产工艺。     

鸡传染性喉气管炎病毒(江苏株)的分离与初步鉴定

本研究从江苏省某养鸡场采集临床疑似鸡传染性喉气管炎(infectious laryngotracheitis,ILT)的病鸡喉头气管,接种鸡胚绒毛尿囊膜分离病毒,命名为LJS091151。以分离毒人工感染SPF鸡,于攻毒后d3出现了ILT的典型临床症状,剖检亦可见喉头气管黏膜充血肿胀、消化道空虚、黏膜充血等病理变化。根据GenBank发表的鸡传染性喉气管炎病毒(Infectiouslaryngotracheitis virus,ILT)gB、TK基因保守序列设计2对引物对分离株基因组DNA进行扩增和序列测定。序列分析表明,获得的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列与GenBank发表的序列相似性均在99%以上,证明了分离株LJS091151为鸡传染性喉气管炎病毒。     

鸡同时接种新城疫和传染性喉气管炎疫苗的免疫效果

作者对用气雾免疫法预防鸡新城疫(ND)和传染性喉气管炎(ILT)同时免疫的方法、接种剂量及免疫程序进行了研究,观察了免疫效果。 1 材料与方法 试验用鸡,在鸡场选择杂交的蛋雏鸡和肉雏鸡。Lasota疫苗株对ILTV在鸡胚内增殖的影响的研究,向尿囊腔接种1000EID50NDV,隔24h 后分别接种ILTV10、100、1000EID50,在接种ILTV5d后检查记录引起的绒毛尿囊膜坏死斑数。同时对Lasota疫苗对Lasota疫苗对ILT病毒株(全苏家禽疾病研究所株)和野毒株24a的致病的抑制作用。     

鸡新城疫病毒B95株免疫研究

本试验采用鸡胚增殖培养鸡新城疫B95株病毒，经对培养的尿囊液病毒价达EID5010^7.75。无菌性检验和安全性检验均符合疫苗要求，将其选作试验用疫苗进行了试验，结果表明，该苗滴鼻点眼免疫的最小剂量为10^5.75，拌料免疫最小剂量为10^6.75，以B95株疫苗滴鼻点眼免疫的鸡，在免疫后5天时就可产生坚强的免疫力，免疫期可达4个月，同居接触免疫鸡能获得了良好的免疫效果，攻毒总保护率与滴鼻点眼免疫差异不显著，拌料免疫效果良好，与NDV滴鼻点眼免疫差异不显著，B95株苗在0－4℃条件下保存4个月，免疫攻毒保护率达80％，在室温下保存2个月，免疫攻毒保护率达100％。     

鸡传染性喉气管炎重组鸡痘基因工程疫苗免疫效果试验

用鸡传染性喉气管炎重组鸡痘基因工程疫苗、英特威鸡传染性喉气管炎弱毒疫苗分别免疫鸡群后,观察接种反应并做免疫保护力试验。结果表明,鸡传染性喉气管炎重组鸡痘基因工程疫苗几乎没有接种反应,基因工程疫苗与英特威疫苗对ILT免疫保护率是相同的。一般鸡群通过两次的疫苗免疫接种5个月后,对ILT的免疫保护率能够达到100%。通过对鸡传染性喉气管炎重组鸡痘基因工程疫苗田间试验和区域试验结果表明,用该疫苗免疫鸡群,不仅接种反应小、安全、能有效地防止ILT的发生,而且由于鸡群几乎没有接种反应,育成期死淘率低,鸡群生长发育整齐,在产蛋期能表现优良的生产性能。     

鸡传染性喉气管炎病毒江苏分离株的分离鉴定

江苏某养殖场28周龄蛋鸡发生以呼吸困难、咳血和产蛋下降为主要症状的疾病。利用特异性引物,从发病鸡喉头及其分泌物中扩增出鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus,ILTV)TK基因的1.3 kb大小片段;发病鸡喉头及分泌物接种鸡胚后,在鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上形成痘斑,产生特征性的多核巨细胞和核内包涵体;第3代分离毒的毒价为10-6.2EID50/0.2 mL;分离毒株可被ILT标准阳性血清中和,中和价为1∶40;人工发病试验显示,接种鸡有ILT典型的呼吸道症状和病理变化。以上结果表明,分离病毒为ILTV,将此分离株命名为XZ09。     

鸡新城疫—传染性法氏囊病二联油剂灭活苗的研究

采用新城疫病毒克隆７９株和传染性法氏囊病病毒Ｆ１６及Ｖｉｌｅ株为种毒，分别接种ＳＰＦ鸡胚，收取尿囊液毒及胚毒，经甲醛灭活，按一定比例混合，以白油为佐剂制成二联油剂灭活苗。用该苗接种易感鸡，免疫后１４天产生免疫力，２１天攻毒保护率达１００％。１９９３－１９９５年在我省烟台，威海、青岛的一些鸡场免疫２０余万只鸡，获得满意效果。     

同胚接种IBV和ILTV制备二联疫苗

用鸡传染性支气管炎病毒(IBV)和鸡传染性喉气管炎病毒(II。TV)以不同的稀释度按一定比例混合，接种同一鸡胚，同时收获胚液和有病斑的绒毛尿囊膜制成IB-ILT二联冻干疫苗，按《中华人民共和国兽用生物制品规程》方法进行检验。结果，其安全性和效力检验均达到2种单苗的质量标准，证明2种病毒在鸡体内产生互不干扰的抗体。     

抗禽流感或传染性喉气管炎两种重组鸡痘病毒疫苗联合免疫的相互影响

“表达H5N1禽流感病毒HA和NA基因的重组鸡痘病毒（rFPV—AI）疫苗”以及“表达传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒（rFPV—ILT）疫苗”均已在实现商业化生产。由于两种疫苗使用了相同的载体病毒,如何使用才能减少相互干扰而产生最好的免疫效果。本研究设计了三个试验组：1）免疫rFPV—AI后间隔4周接种rFPV—ILT;2）rFPV—AI和rFPV—ILT混合后接种;3）将rFPV—AI和rFPV—ILT分别在两个翅膀同时免疫。结果表明,试验鸡接种rFPV—AI后4周接种rFPV—ILT,对传染性喉气管炎病毒WG株攻击的保护率为60％（6／10）,低于rFPV—ILT单独免疫组的保护率（100％,10／10）;rFPV—AI和rFPV—ILT混合后免疫组对禽流感病毒强毒攻击的保护率为80％（8／10）,对传染性喉气管炎病毒强毒攻击的保护率为70％（7／10）,而rFPV—AI和rFPV—ILT分两点同时接种对两种病毒攻击均能产生完全保护。本试验结果建议将这两种相同载体的重组病毒疫苗分两点同时接种以避免相互之间的干扰。     

新城疫传染性支气管炎病毒单胚同胚接种试验的比较

通过对五个批次的无特定病原体(SPF)鸡胚进行鸡新城疫病毒(NDV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)同胚接种,收获72～120 h死胚及120 h活胚尿囊液,分别测定NDV和IBV的病毒含量,结果NDV病毒含量达到了108.3～108.7 EID50/0.1mL, IBV的病毒含量达到了106.3～106.5 EID50/0.1mL.两种病毒含量均达到<中华人民共和国兽用生物制品规程>(2000年版)中鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗病毒含量要求的标准.表明该方法即可降低成本,又简化了生产工艺.     

鸡传染性支气管炎病毒M41株鸡胚增殖工艺研究

为研究鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41标准毒株在鸡胚上的最佳生产工艺,试验用IBV M41株分别以不同剂量接种同一胚龄不同鸡胚、不同胚龄普通鸡胚,以及IBV M41株接种普通鸡胚后不同培养时间收获鸡胚尿囊液,比较不同培养条件下制备病毒液的产量及病毒效价。结果显示:IBV M41株接种无传染性支气管炎病毒母源抗体的SPF鸡胚最佳病毒接种剂量为104.5EID50,接种含有IBV母源抗体的普通鸡胚最佳病毒接种剂量为105.1EID50,最佳接种胚龄为11日胚龄,最佳收毒时间为48 h。按照此工艺制备疫苗,免疫SPF鸡,IBV抗体效价均符合规程标准。研究结果为用鸡胚高效、大量生产IBV M41株病毒抗原进而生产合格的IB疫苗提供了数据支持。