过硫酸氢钾对贝类育苗水体中溶藻弧菌的杀灭效果

本文以海蚌育苗池海水中的溶藻弧菌作为研究对象,探讨过硫酸氢钾对溶藻弧菌的杀灭效果。通过单因素试验和3因素3水平正交试验探讨不同温度、不同过硫酸氢钾浓度、不同菌液浓度对抑制溶藻弧菌效果的影响。从单因素试验结果可知,当温度处于20～30℃、过硫酸氢钾浓度20～40 mg/L、菌液浓度10⁵～10⁷CFU/mL时,杀菌抑制效果显著;正交试验结果 显示,温度25℃、过硫酸氢钾浓度40 mg/L、菌液浓度10⁵CFU/mL,是过硫酸氢钾溶液对溶藻弧菌杀灭效果最佳的条件;药物浓度11 mg/L时,灭菌率≧99%;药物浓度大于9 mg/L时,药物作用时间1～24 h的杀菌率差异均不显著,过硫酸氢钾药效可以维持24 h。     

铅对蟾蜍蝌蚪急性毒性的研究

为了研究铅对蟾蜍蝌蚪急性毒性效应,试验在室内条件下(水温21~23℃),采用单因子急性毒性试验法,研究水环境中重金属离子铅(Pb2+)对蟾蜍蝌蚪的急性毒性效应。结果表明:重金属离子Pb2+对蟾蜍蝌蚪的24小时、48小时、72小时、96小时、120小时时毒性死亡率与浓度对数的回归方程分别为y=9.446 1x+6.158 4,y=30.307x+14.188,y=32.833x+15.274,y=26.164x+14.264,y=12.368x+10.721;半致死浓度(LC50)分别为0.754 0 mg/L、0.498 0 mg/L、0.486 5 mg/L、0.442 5 mg/L、0.344 7 mg/L。说明Pb2+不但对蝌蚪的生存造成严重威胁,而且使蝌蚪的身体畸形,表现为尾部弯折、鼻孔大增、头部和腹部膨大、皮肤透明等,并且不能直线游泳。     

反相高效液相色谱法测定牛奶中土霉素残留

建立了测定牛奶中土霉素残留的RP-HPLC方法.采用草酸甲醇液提取牛奶中的土霉素,离心,用C18色谱柱(5 μm,250 mm×4.6 mm),甲醇 乙腈 0.01 mol/L草酸溶液(20∶ 12∶ 68)为流动相,流速1 mL/min,检测波长360 nm,以HPLC外标法测定牛奶中土霉素的残留量.结果:土霉素峰面积与浓度呈良好的线性关系,其线性范围为50～1 500 μg/L(r=0.999 9),平均回收率为88%.本法简便、准确、快速,是一种较好的测定牛奶中土霉素残留的方法.     

铜、铁、锌、锰不同组合水平对鲤鱼生长的影响

试验采用均匀设计U9(95)经60d试验,研究Cu(x1)、Fe(x2)、Zn(x3)、Mn(x4)不同组合水平对鲤鱼生长的影响。结果表明,在本试验条件下,各因素与增重呈显著的回归关系:①y=6.8167+0.021515x4+0.0021885x1x4-0.00009120x2x4+0.00000924x32,拟和度R2=95.1%(P<0.05),最优组合为x1=23.5mg/kg,x2=141.7mg/kg,x3=89mg/kg,x4=31.8mg/kg,此时增重为70.42g,比试验最优组处理7增重高17.05%。②Cu、Fe、Zn、Mn与体增长呈显著的回归关系,y=0.55167+0.0001557x3-0.00019352x1x4-0.0000089x22,拟和度R2=93.9%(P<0.05),最优组合为x1=0.4mg/kg,x2=72.4mg/kg,x3=104mg/kg,x4=24.4mg/kg。各试验组的净增重、相对生长率、饵料系数优于对照组,其中以处理7最优。     

生长肥育猪日粮铜添加水平与组织铜残留量动态关系初探

采用54头杂交猪(杜×大×约)研究大剂量日粮铜添加水平对组织铜含量的影响,建立日粮铜添加水平与组织铜残留量之间的动态模型,探讨保证猪肉及其副产品食用安全性的最适铜添加量。试验采用单因子设计,分别设0、100、200、300、400mg/kg的铜添加水平,试验从20kg开始,100kg结束。结果表明:添加100～400mg/kg的铜不同程度地增加了组织器官中铜的残留量,肝脏和肾脏中铜含量随饲粮添加水平的增加呈二次曲线变化规律。肝脏铜残留量(y,单位为mg/kg)与日粮铜添加水平(x,单位为mg/kg)之间的回归方程为:80kg体重时,y=5.4697-0.0814x+0.0009x2(R2=0.930,P=0.07);100kg体重时,y=11.3963-0.2920x+0.0022x2(R2=0.814,P=0.036)。肾脏铜残留量(y,单位为mg/kg)与日粮铜添加水平(x,单位为mg/kg)之间的回归方程为:y=8.7583-0.0043x+0.0002x2(R2=0.975,P=0.025)。在80kg屠宰时,为了保证肝脏中的铜含量不超过10mg/kg,饲粮铜添加水平不应高于129mg/kg。在100kg屠宰时,为了保证肝脏或肾脏中的铜含量不超过10mg/kg,饲粮铜添加水平不应高于128或90mg/kg。     

土霉素在猪组织和血浆中残留分布规律的不同数学模型比较

采用高效液相色谱法检测猪组织(肌肉、肝脏、肾脏)和血浆中的土霉素(OTC)残留量,通过对饲料中土霉素添加量和组织、血浆中土霉素残留量回归关系不同数学模型的分析,确立残留分布规律的最佳数学模型.饲料中土霉素的添加量在30～70 μg/g范围内,饲料添加量与猪组织(肌肉、肾脏、肝脏)、血浆的残留教学模型分别为:y=0.0096x-0.1727;y=0.165e0.0235x;y=0.4062e0.0115x;y=0.2428lnx-0.7284.通过对猪活体血浆样品的检测,根据建立的最佳残留数学模型,可算出饲料中土霉素的添加量和肌肉、肾脏、肝脏中土霉素的残留量.从而提供实现间接活体残留监测数学分析模型.     

日粮铜水平对绒山羊血铜状况的影响

将12只1.5周岁的装有永久性瘤胃瘘管的非产绒期内蒙古白绒山羊半同胞羯羊,按体重随机分为4组,分别饲喂含铜7.38,17.38,27.38和37.38mg/kg的试验日粮,研究日粮铜水平对绒山羊血浆铜浓度、血清铜蓝蛋白酶(Cp)及超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果显示:①日粮添加铜显著(P<0.05)提高了血浆铜浓度,但添加10,20与30mg/kg彼此之间差异不显著(P>0.05);②随日粮铜水平的提高,血浆铜浓度、血清Cp和SOD活性上升,它们与日粮铜浓度的相关关系分别为:y=0.0074x+0.7394(R2=0.6932,P=0.1674),y=0.6174x+30.183(R2=0.8781,P=0.0629),y=1.0366x+152.25(R2=0.9203,P=0.0407);③非产绒期绒山羊日粮铜的适宜水平为17.38mg/kg。     

32种常用渔药对大黄鱼致病菌哈维氏弧菌的体外抗菌试验

采用试管二倍稀释法测定了32种常用渔药对本实验室分离鉴定的一株大黄鱼致病菌-哈维氏弧菌GYC1108-1的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。其中中草药7种,抗菌药8种,常用水体消毒剂17种。结果显示,7种中草药对受试菌GYC1108-1的MIC介于0.039～625 mg/L,MBC介于0.078～1 250 mg/L;8种抗菌药对该菌的MIC介于0.078～1.25mg/L,MBC介于0.156～2.5 mg/L;17种水体消毒剂对该菌的MIC介于0.062～3.125 mg/L,MBC介于0.078～6.25 mg/L。试验表明,这些渔药都对哈维氏弧菌有较好的抗菌效果。     

红茂草治疗羊口疮试验研究

将50只健康羊只随机分为10组,每组5只。用羊口疮强毒感染试验羊,建立羊口疮病理模型。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别用浓度7.5 mg/m L、15.0 mg/m L、30.0 mg/m L、60.0 mg/m L、120.0 mg/m L的红茂草乙醇制剂进行治疗。试验Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ组分别用浓度5.0 mg/m L、10.0 mg/m L、20.0 mg/m L、40.0 mg/m L的红茂草总生物碱盐酸盐制剂进行治疗,Ⅹ组为对照。结果表明,Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组羊口疮愈合率分别与Ⅰ组、Ⅱ组之间均存在极显著差异(P0.01);Ⅰ组与Ⅱ组之间也存在极显著差异(P0.01);Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组之间相互差异不显著(P0.05),剂量与溃疡面愈合率之间的回归方程为:y=1.675 6x+3.488,R2=0.958 3,其EC50=7.986 6mg/m L。盐酸盐制剂羊口疮愈合率除了Ⅷ组和Ⅸ组之间差异不显著(P0.05)外,其余各组两两之间均存在极显著差异(P0.01),剂量与溃疡面愈合率之间的回归方程为:y=1.709 3x+3.547 7,R2=0.977 2,其半数效应浓度EC50=7.073 7 mg/m L。     

猪组织和血浆中金霉素残留分布规律的数学模型分析

试验采用高效液相色谱法检测猪组织(肌肉、肝脏、肾脏)和血浆中的金霉素残留量,通过对饲料中金霉素添加量和组织、血浆中金霉素残留量回归关系不同数学模型的分析,确立残留分布的规律最佳数学模型。饲料中金霉素的添加量在50～150μg/g的范围内饲料添加量与猪组织(肌肉、肾脏、肝脏)、血浆的残留数学模型分别为:y=0.5535e0.0072x;y=1.666e0.0116x;y=4.4048ln(x)-14.669;y=1.4527e0.0092x。     

饲喂不同种类粗饲料的辽宁绒山羊瘤胃内酸碱环境及氮代谢的研究

本试验选择9只年龄3．2±0．2岁、体重50．4±2．6kg的装有永久性瘤胃瘘管的成年辽宁绒山羊公羊为试验动物。采用随机区组设计,将动物分为3组,分别饲喂给以玉米秸、大豆秸、花生秸为主的1、2、3号试验日粮,每天8：00和16：00饲喂,全天自由饮水。试验预试期15d,试验期15d,连续7d测排尿量,采集瘤胃液、尿液,研究瘤胃内酸度和氮代谢参数。结果表明：三组的瘤胃液pH、乳酸浓度、总酸度、TVFA和戊酸均差异不显著（P〉0．05）。从试验1组到3组,瘤胃液TVFA浓度、乙酸浓度、丙酸浓度、异丁酸浓度、丁酸浓度、异戊酸浓度均呈增加趋势;其中试验3组的丙酸和异丁酸、异戊酸均显著（P〈O．05）高于1组;并且试验3组的丁酸极显著（P〈0．01）高于1组;其他的差异不显著（P〉0．05）。试验1组瘤胃NH4-N极显著（P〈0．01）低于试验2组和试验3组,而后两组差异不显著（P〉0．05）;试验1组uN浓度显著（P〈0．05）低于试验3组,但与试验2组差异不显著（P〉0．05）;三个试验组瘤胃液BCP浓度和MCP合成量均差异不显著（P〉0．05）,但试验2组与3组BCP浓度和MCP合成量均高于试验1组。相关分析表明,瘤胃MCP（Y,g／d）合成量与瘤胃液TVFA（x,mmol／L）浓度存在显著相关关系：y=2．32x＋2．22,r2=0．61,P〈0．05;瘤胃MCP（y,g／d）合成量与瘤胃液丙酸浓度（X,mm01／L）存在显著相关关系：y=0．23x＋9．68,r2=0．64,P〈0．05;瘤胃液MCP（Y,g／d）与UN（x,mg／L）存在显著的线性关系：y=1．32x＋2．53,r2=0．78,P〈0．05。因此,以花生秸为主的日粮瘤胃液BCP浓度、MCP合成量较高,秸秆粗饲料转化利用效率较好,提高该日粮的能量蛋白水平会进一步增加微生物蛋白的合成和动物对其的利用。     

霍乱弧菌及肠出血性大肠杆菌多重PCR检测方法的建立

针对霍乱弧菌肠毒素和肠出血性大肠杆菌志贺毒素基因（ctx、stx1和stx2）设计引物,扩增大小不同的特异性片段,优化反应条件,建立多重PCR方法,对人工污染的水样品进行模拟检测。结果显示,多重PCR扩增系统针对目的菌具有高度的特异性。敏感性试验证实,当多重PCR反应体系中模板含量在10CFU时仍能检出。模拟水样品多重PCR检测的敏感性试验证明,人工污染的河水直接集菌检测敏感性为100～1 000CFU/mL,增菌培养后多重PCR检测敏感性可达1CFU/mL。本试验于同一PCR体系检测霍乱弧菌和肠出血性大肠杆菌的毒素基因,可用于这2种致腹泻性病原菌的快速检测。     

台湾输入甲鱼中检出O1群霍乱弧菌

将甲鱼体表涂抹物在碱性蛋白胨水中进行增菌培养,分离单菌落后分别用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)、血清学方法及PCR进行鉴定,结果从台湾输入大陆的甲鱼中检出O1群稻叶型霍乱弧菌一株,不含ctx基因和toxR基因。为此,应加强水产品尤其是甲鱼的监测工作,防止霍乱弧菌在不同地区间的传播和流行。     

反相高效液相色谱法测定硝碘酚腈含量

采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定了硝碘酚腈含量。以乙腈-0.01 mol/L磷酸盐pH6.5(20∶80,V/V)为流动相,Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流速1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长273 nm。结果表明,在0.050～1.20 mg/mL范围内硝碘酚腈浓度与峰面积呈良好线性关系(r=0.9995),最低检出浓度为2.5 ng/mL,最低定量浓度为5.0 ng/mL。低、中、高3种浓度回收率分别为100.21%、99.07%、101.90%,RSD=0.48%(n=9)。本方法专属性强,准确、简便、灵敏度高,结果稳定,可用于硝碘酚腈的含量测定。     

高效液相色谱法测定尼卡巴嗪含量的方法建立

为了建立高效液相色谱法测定尼卡巴嗪的含量,采用WatersX—BridgeC18（150mm×4．6mm,5μm）色谱柱,乙腈-水（用磷酸调pH至3．0）为流动相,梯度洗脱,流速为1．0mL．min^-1．检测波长0～5min为297nm,5min开始为350nm,柱温30℃,进样体积为20μL。2-羟基-4．6-二甲基嘧啶（HDP）的回归方程为：Y=23452x-456,相关系数r=0．99999,4,4’-二硝基均二苯脲（DNC）的回归方程为：Y=102388x＋5296,相关系数r=0．9999,即HDP在0．29-29．12μg/mL范围内具有良好的线性,DNC在0．71～70．90μg／mL范围内具有良好的线性。该方法简便、准确、灵敏度高、重复性好,可以通过同时测定尼卡巴嗪中HDP和DNC来计算尼卡巴嗪的含量。     

固相萃取-高效液相色谱法测定乳制品中三氯蔗糖

建立乳制品中三氯蔗糖的固相萃取高效液相色谱检测方法.采用0.2％乙酸水溶液沉淀蛋白,提取三氯蔗糖,然后通过C18固相萃取柱进行净化浓缩后,采用高效液相色谱-蒸发光散射检测仪进行检测,该方法0.1～0.8g/L范围内以三氯蔗糖进样质量的对数和相应峰面积的对数做标准曲线,R2为0.9991,相关性良好,加标回收率在94％～102％之间,检出限为2.0mg/L(RSN=3).     

常山提取物和常山乙素对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

为了明确常山提取物和常山乙素的免疫学活性,应用MTT法测定2种药物体外对小鼠脾T、B淋巴细胞增殖的影响。结果显示,常山碱提取物质量浓度达到200mg／L时显著抑制了小鼠脾淋巴细胞的增殖（P〈0．05）;质量浓度在10mg／L时对ConA诱导T淋巴细胞增殖有显著的促进作用（P〈0．05）;质量浓度在10～200mg／L对LPS诱导B淋巴细胞增殖有一定的促进作用（P〉0．05）。常山乙素质量浓度达到0．1mg／L时显著抑制了小鼠脾淋巴细胞的增殖（P〈0．05）;质量浓度在0．001～0．01mg／L时对ConA诱导T淋巴细胞增殖有一定的促进作用（P〉0．05）,质量浓度在0．0001mg／L时具有显著的促进作用（P〈0．05）;质量浓度在0．0001～0．005mg／L对LPS诱导B淋巴细胞增殖有一定的促进作用（P〉0．05）。结果表明,常山提取物和常山乙素具有良好的免疫增强活性,为今后相关研究提供了免疫学参考。     

紫外分光光度法和高效液相色谱法测定盐酸土霉素可溶性粉的含量

采用紫外分光光度法和高效液相色谱法测定盐酸土霉素可溶性粉中土霉素的含量。紫外分光光度法试验表明,用0.01 mol/L盐酸溶液作参比液,以268 nm为测定波长,土霉素在4~32μg/mL范围内吸光度与浓度呈良好的线性关系,相关系数r=0.9999,平均回收率(n=5)为101.04%,RSD=1.02%。高效液相色谱法试验表明,以0.05 mol/L草酸铵溶液-二甲基甲酰胺-0.2 mol/L磷酸氢二铵溶液(75∶20∶5)为流动相,以280 nm为检测波长,土霉素在0.02~0.14mg/mL范围内浓度与峰面积线性关系良好,相关系数r=0.9999,平均回收率(n=5)为100.52%,RSD=0.25%。紫外分光光度法、高效液相色谱法与抗生素微生物检定法比较,结果基本一致。     

达氟沙星间接竞争ELISA检测方法的建立

将达氟沙星（danofloxacin, DFLX）与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)偶联分别作为免疫原与包被原, 达氟沙星为竞争的半抗原，建立间接竞争ELISA检测方法。试验结果表明,理想的包被抗原浓度为1.25 μg/L, 多抗(DFLX-PcAb)工作浓度为1∶10000,酶标二抗的工作浓度为1∶4000,最适检测范围为0.1～10 ng/L,最低检测限为0.2 ng/L, 批内和批间变异系数分别为3.81%和6.25%。得到回归方程y=0.7975-0.125x（R2=0.989）和标准曲线，从而建立了DFLX的快速检测残留的间接竞争酶联免疫吸附试验（ci-ELISA）。     

高效液相法测定复方氟苯尼考注射液中氟苯尼考的含量

建立了测定氟苯尼考注射液中氟苯尼考含量的高效液相色谱法。采用C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相为甲醇∶水（pH值为3.0）为40∶60（v/v）,流速为1 mL/min,检测波长为222 nm,进样10μL,柱温为室温。氟苯尼考浓度在0.1-3 mg/mL范围内,峰面积与浓度的线性关系良好（R^2=0.999 6）;平均回收率为99.49%,RSD为1.12%（n=4）。此法简便、快速、灵敏度高、重现性好。