猪捷申病毒Swine/CH/IMH/03株免疫原性的研究

为确定猪捷申病毒(Porcine Teschovirus,PTV)Swine/CH/IMH/03株免疫原性,本研究将该PTV分离株灭活后分别与氢氧化铝佐剂和Montanide ISA 50V2佐剂混合,制成油佐剂疫苗,并采用不同免疫程序接种实验猪后对病毒抗体进行检测。抗体检测结果表明:PTV Swine/CH/IMH/03分离株能够诱导实验动物产生较高抗体水平,并显著高于对照组;与氢氧化铝佐剂混合制成的佐剂疫苗免疫效果优于Montanide ISA 50V2佐剂;而且一次免疫组与二次免疫组没有明显差异。通过PTV Swine/CH/IMH/03株免疫原性的研究,为后续猪捷申病的预防工作提供技术支持。     

猪捷申病毒3D蛋白的原核高效表达及其反应活性

根据猪捷申病毒（PTV）Swine／CH／IMH／03株核苷酸序列，设计了1对特异性引物，以全长基因组重组质粒pSK—PTVFL为模板扩增了3D基因，并将扩增产物定向克隆到原核表达载体pET30a（＋）中，阳性质粒转化BL21（DE3），阳性菌经0．3mmol／L IPTG诱导后，进行Western—blotting检测。结果显示，3D蛋白获得了高效表达，表达量占菌体总蛋白的66．1％，且重组蛋白能与PTV Swine／CH／IMH／03株阳性血清发生特异性反应。表明，3D蛋白能在大肠杆菌中高效表达，并具有良好的免疫原性，这为开发相应的鉴别诊断技术奠定了基础。     

稳定表达猪IRF 7基因的PK-15细胞系建立及其抗病毒效果评价

为探讨猪IRF7基因对某些猪源病毒在PK-15细胞系中增值的影响,利用Piggy Bac真核转座子系统将猪源IRF7基因转染入PK-15细胞中,通过嘌呤霉素和绿色荧光进行双重筛选获得阳性转化细胞,再经克隆纯化得到单个阳性细胞克隆株。通过观察细胞荧光和荧光定量PCR鉴定,最终获得了稳定表达IRF7基因的PK-15细胞系。在Poly I:C诱导下,该细胞系能够显著上调IFN-β的表达。初步研究了该细胞系对病毒复制的影响,结果表明过表达IRF-7基因能够显著抑制猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪水泡性口炎病毒(VSV)的复制。本研究为进一步探索猪IRF7基因的功能与作用机制提供有效工具。     

猪星状病毒的分离鉴定及其致病性研究

猪星状病毒(porcine astrovirus,PAstV)感染猪后可引起腹泻、呕吐、脱水和生长迟缓等临床症状,对断奶前仔猪侵害尤为严重,对养猪业造成一定的经济损失。本研究对猪星状病毒广西流行株用PK-15细胞进行分离,用RT-nPCR、间接免疫荧光、电镜和免疫印迹分析进行鉴定并进行致病性试验,结果分离到2株具有细胞病变和致病性的猪星状病毒,为进一步研究猪星状病分子生物学、致病机制及构建发病动物模型等奠定了基础。     

猪细小病毒S-1A株对细胞的适应性及其培养条件的优化

将猪细小病毒S-1A株在不同的细胞中培养,测定病毒含量,以确定适合猪细小病毒S-1A株增殖的细胞。结果表明：猪细小病毒S-1A株能在猪肾传代细胞系(PK-15)、猪肾原代细胞(PK)、猪睾丸细胞(ST)和仔猪肾细胞(IBRS-2)中生长增殖,不能在幼仓鼠肾细胞系(BHK-21)、绿猴肾细胞(Vero)和鸡胚成纤维细胞(CEF)中增殖;当ST细胞生长至2/3单层时,将猪细小病毒S-1A株种毒液100倍或1000倍稀释后接种ST细胞,37℃培养96～144h,获得的病毒载量最高。     

我国猪圆环病毒2型感染的危害

<正>猪圆环病毒(porcine circo virus,PCV)属于圆环病毒科圆环病毒属的成员,根据致病性、抗原性及核苷酸序列的差异,PCV可分为两个血清型,即PCV1和PCV2。其中源自污染猪源细胞PK-15的称为PCV1,对猪无致病性,但广泛存在猪体内及猪源细胞系。PCV2具有致病性,是仔猪断奶后多系统衰竭综     

我国猪圆环病毒2型感染的危害

<正>猪圆环病毒(porcine circo virus,PCV)属于圆环病毒科圆环病毒属的成员,根据致病性、抗原性及核苷酸序列的差异,PCV可分为两个血清型,即PCV1和PCV2。其中源自污染猪源细胞PK-15的称为PCV1,对猪无致病性,但广泛存在猪体内及猪源细胞系。PCV2具有致病性,是仔猪断奶后多系统衰竭综     

一例猪伪狂犬病病毒的分离鉴定及综合防治措施

无菌采集疑似猪伪狂犬病病猪脑组织,进行病毒的分离鉴定。经PCR检测为阳性的病料接种PK-15细胞进行病毒分离,将所分病毒暂命名为SC株。蚀斑实验测定病毒滴度,并采用PCR和琼扩实验对其进行进一步鉴定。结果:PRV阳性病料接种PK-15细胞,传至第5代后产生稳定细胞病变,主要表现为细胞变圆、变亮、聚堆且可见典型的空斑,而对照组细胞贴壁生长良好;基于PRV gE基因的PCR检测,扩增产物为378 bp,与预期目的条带一致;用病毒蚀斑技术测定该分离株的滴度为2.65×104 PFU/mL;琼扩实验显示病毒原液至32倍稀释后均能与PRV阳性血清形成可见沉淀线。以上结果均表明所送检病猪为PRV阳性,据此为猪场提出综合防治措施。     

猪圆环病毒3型的分离及致病性分析

猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)是2016年由美国首次报道引起母猪繁殖障碍的一种新型猪圆环病毒，该病毒的致病性尚不完全清楚。为研究PCV3对断奶仔猪的致病性，本研究用PK-15细胞自临床病料分离到1株PCV3毒株，命名为PCV3/CH/HB/XY/2018,全基因组测序分析表明，该毒株属于PCV3a-IM基因亚型。分别用PCV3阳性病料初始匀浆液和第8代细胞培养物采用滴鼻和肌肉注射2种方式感染28日龄断奶仔猪，每组试验猪5头，并设置空白对照组。通过观察和分析试验猪的临床表现、体温、增重、病毒血症、各组织的病毒载量和病理变化等方面评价仔猪感染试验结果。结果显示：PCV3阳性病料初始匀浆液和细胞培养物在感染断奶仔猪后均会引起仔猪出现体温上升、消瘦、皮炎和生长缓慢等现象；病毒血症时间超过14 d,但21 d消失，病毒的组织分布结果表明，PCV3主要感染扁桃体、淋巴结等免疫器官，在脾、肺和扁桃体等组织中的病毒载量最高；感染猪可出现间质性肺炎、淋巴小结增生和嗜酸性粒细胞增多等病理变化。本研究表明PCV3/CH/HB/XY/2018毒株对断奶仔猪有致病...     

发酵中药渣对犊牛生长发育和健康状况的影响

[目的]为研究发酵中药渣对犊牛生长发育、健康状况的影响。[方法]在宁夏固原市肉牛良种繁育示范园随机选取150头犊牛作为试验牛群,采用配对试验设计,试验分为对照组和发酵中药渣组。[结果]日粮中添加发酵中药渣,犊牛采食量增加0.09 kg,日增重增加0.09 kg,料重比(F/G)减少0.06 kg;体重多增加5.2 kg,提高4.4% ,体高、胸围、体斜长分别增长 4.2 cm、5.6 cm、4.4cm,分别提高了4.5%、5.1%、4.1%;试验组滨州筛第 1,2 层筛上物比例下降,说明犊牛消化能力增加,饲料消化率提高;血液总蛋白和白蛋白含量均显著高于对照组;谷丙转氨酶含量显著低于对照组;谷胱甘肽、过氧化物歧化酶、免疫球蛋白G含量显著高于对照组。[结论]在犊牛日粮中添加发酵中药渣可增加犊牛的采食量和日增重,提高饲料报酬,提高血清总蛋白,降低谷丙转氨酶水平,增加过氧化物歧化酶活性,提高犊牛免疫力。     

我国和欧盟兽药质量监督抽检工作机制对比研究

为更好地完善我国兽药质量监督抽检计划,通过对欧盟药品抽检管理工作机制的研究,本文分析了欧盟和我国兽药监督抽检管理方式的不同,从抽检责任部门、抽检目的、抽检计划内容、抽检计划制定流程、抽检品种的遴选和检测参数的确定等6方面进行了对比分析,探讨我国兽药质量监督抽检工作的管理中可以借鉴的方面。     

新城疫病毒分离株APMV1/chicken/China/JL-11/02的致病性研究

将在吉林省分离到的一株新城疫病毒APMV1／chicken／china／JL-11／02(基因Ⅶ型)蚀斑纯化后，与我国标准毒株F48E9分别接种42日龄无抗体SPF雏鸡和已获得LaSota疫苗、Clone30疫苗(基因Ⅱ型)抗体的高免雏鸡(抗体效价为1：64～1：128)。结果表明无抗体雏鸡感染JL—11和F48E9后，144h内全部死亡，病死鸡的大部分组织中都检测到病毒；但JL—11与F48E9对高免抗体鸡致死效果不同，JL—11的致死率为28．5％，F48E9的致死率为7．14％。由此可见，生产中常用的ND疫苗并不能完全保护目前流行株的攻击，这可能是养禽生产中高免抗体鸡群发生免疫失败的主要原因之一。为此建议应在传统疫苗免疫的基础上进行新型流行株灭活苗的加强免疫，以提高免疫效果，降低ND的发生率。