小鼠血浆中吡喹酮的高效液相色谱检测方法的建立

吡喹酮（praziquantel,PZQ）别名环吡异喹酮,化学名称2-环己基-1,2,3,6,7,11b-六氢-4H-吡嗪并【2,1-α】异喹啉-4-酮,为白色或类白色结晶粉末,味苦。溶于氯仿、乙酸乙酯、乙醇、甲醇等有机溶剂,在乙醚或水中不溶,是一种高效广谱的抗寄生虫药,使用广泛的是吡喹酮的片剂或粉剂。口服吡喹酮存在生物利用率低、首过剂量大、引起的副作用较大等不利因素,吡喹酮的剂型在不断改进,     

HPLC法检测水牛血浆中吡喹酮的研究

建立了一种简便、灵敏、可重复的高效液相色谱法检测水牛血浆中吡喹酮(Praziquantel,PZQ)的含量。吡喹酮在C18(250 mm×4.0 mm,5μm)柱中可以很好地与杂质峰分离开。其保留时间、紫外检测波长、流动相、流速、色谱柱温度分别为10.6 min、220 nm、甲醇∶水(70∶30,V/V)、0.8 mL/min和40℃。水牛血浆样品(0.5 mL)经乙酸乙酯(6 mL)两步提取后,采用旋转蒸发仪蒸干,1 mL流动相溶解定容,取上清滤液20μL进样做HPLC分析。吡喹酮的血浆药物浓度在0.062 5~8 mg/L范围内,呈现良好的线性关系,相关系数r0.999。在0.062 5、1、16 mg/L的3个药物浓度水平下,吡喹酮的平均回收率均在90%以上。日内和日间变异系数小于5%。PZQ的LOD可达0.01 mg/L,LOQ为0.03mg/L。该方法的专属性强、灵敏度高,适用于水牛血浆中PZQ的药动学检测。     

高效液相色谱法测定赛鸽用复方吡喹酮胶囊中吡喹酮和伊维菌素的含量

用高效液相色谱法同时测定赛鸽用复方吡喹酮胶囊中吡喹酮和伊维菌素的含量.采用Nova-Pak C18柱(150 mm×3.9 mm,4 μm),以乙腈-甲醇-水(53:35:12)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温25℃.在此色谱条件下,吡喹酮和伊维菌素的分离良好,吡喹酮和伊维菌素分别在511～1 534μg/mL和10.1～30.6μg/mL浓度范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系(r＞0.999).按外标法以峰面积计算进行测定,吡喹酮和伊维菌素的平均回收率分别为99.9%和98.3%,RSD分别为0.3%和0.6%(n=9).本方法简便、快速、准确,适用于赛鸽用复方吡喹酮胶囊中吡喹酮和伊维菌素含量的测定.     

RP-HPLC检测复方注射剂中伊维菌素和吡喹酮的含量

为了用高效液相色谱法同时测定复方注射剂中伊维菌素和吡喹酮的含量。采用Hyper-C lone 5u C18柱（250 mm×4.60 mm,5μm）,以乙腈-甲醇-水（53∶35∶12）为流动相,流速为1.0mL/m in,检测波长254 nm,柱温30℃的液相检测方法。结果表明,在此色谱条件下,吡喹酮和伊维菌素的分离良好,吡喹酮和伊维菌素分别在30~500μg/mL和5~40μg/mL浓度范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系（r2〉0.99）。按外标法以峰面积计算进行测定,吡喹酮和伊维菌素的平均回收率分别为98.93%和95.89%,RSD分别为0.33%和1.58%（n=9）。说明该方法简便、快速、准确,适用于复方吡喹酮注射液中吡喹酮和伊维菌素含量的测定。     

吡喹酮混悬注射液的质量标准研究

建立吡喹酮混悬注射液的质量标准,为其质量控制提供依据。采用紫外光谱扫描法和高效液相色谱法对吡喹酮混悬注射液进行鉴别。吡喹酮混悬注射液的粒度、分散性、装量、无菌等检查项目按照2010年版《中国兽药典》进行。采用HPLC法测定吡喹酮混悬注射液中吡喹酮含量。结果表明,吡喹酮混悬注射液的各项检查指标均符合国家相关质量要求。建立的含量测定方法简便、可靠、灵敏、重复性好,平均回收率为99.24%,RSD为0.77%,吡喹酮混悬注射液中吡喹酮含量为标示量的99.8%~100.5%。结果表明,吡喹酮混悬注射液质量可靠,质控方法可行。     

HPLC检测猪血浆和尿液中的喹烯酮及其主要代谢物

本试验旨在建立猪血浆和猪尿液中喹烯酮及其主要代谢物3-甲基-喹噁啉-2-羧酸(MQCA)、脱一氧喹烯酮、脱二氧喹烯酮同时检测的高效液相色谱法。血浆样品用乙腈沉淀蛋白,经高速离心后直接检测。尿液样品用乙酸乙酯提取喹烯酮、脱一氧喹烯酮、脱二氧喹烯酮,用盐酸提取MQCA,再用乙酸乙酯萃取,50 ℃氮气吹干后过HLB固相萃取小柱。以0.1%甲酸水-乙腈为流动相梯度洗脱,314 nm波长下检测。喹烯酮及3种代谢物在血浆中的回收率在72.54%~104.2%之间,尿液中的回收率在63.20%~86.24%之间。4种目标化合物在血浆和尿液中定量限均为0.05 μg/mL。     

吡喹酮注射剂早期治疗小鼠血吸虫病效果的初步研究

为探索吡喹酮新制剂早期治疗血吸虫病效果,对人工感染日本血吸虫20d的小鼠皮下给药进行减虫率、肝脏减卵率统计,并在不同时间点对口服组和皮下注射吡喹酮新制剂组的未感染小鼠在给药后采集血浆,高效液相色谱法建立药时曲线。结果显示新制剂600mg/kg剂量治疗的3次试验的减虫率分别为72.88%、82.69%和56.7%,肝脏减卵率分别为81.7%、94.8%和70.7%,对感染20d期别的血吸虫有较好效果。而高效液相色谱法检测血药浓度显示,新制剂经皮下给药方式可使有效杀虫浓度(约0.3μg/mL)持续10d以上,具有缓释作用。吡喹酮新注射制剂能杀灭20d童虫,减少血吸虫病的危害,对血吸虫病的防治有较大的意义。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋中氯霉素的两种前处理方法比较

为选择氯霉素超高效液相色谱串联质谱分析前处理方法,分别对乙酸乙酯提取,正己烷液液萃取净化和乙腈提取,LC-Si固相萃取柱萃取净化(GB/T22338-2008方法),两种前处理方法进行对比分析。结果显示:乙酸乙酯提取法的检测限为0.1μg/kg,在0.5~10ng/mL范围内线性关系良好,r>0.99,回收率为98.2%~104.8%,RSD为1.5%~7.2%;乙腈提取法的检测限为0.05μg/kg,在0.25~10ng/mL范围内线性关系良好,r>0.995,回收率为100.0%~104.0%%,RSD值为0.5%~2.1%。结果表明:两种方法的线性范围、回收率、检测限和相对偏差均能满足畜产品检验要求。乙酸乙酯提取法步骤简单,样品处理效率高,乙腈提取法虽步骤繁琐,但结果的精密度和灵敏度更高。     

RP-HPLC检测注射型复方驱虫剂中吡喹酮和伊维菌素的含量

采用反相高效液相色谱系统,以Shim-pack VP-ODS 150*4.6色谱柱进行.检测吡喹酮时,以甲醇:水(65:35,v/v)为流动相,扑米酮为内标物,紫外检测波长为215 nm;伊维菌素的检测以甲醇:水(90:10, v/v)为流动相,紫外检测波长为245 nm.在所测5~200 μg/mL浓度范围内线性关系均良好,相关系数r分别为0.9988(吡喹酮)和0.9994(伊维菌素).     

伊维菌素吡喹酮咀嚼片溶出度方法的建立

为了建立同时测定伊维菌素吡喹酮咀嚼片两种主药溶出度的测定方法,采用高效液相色谱法测定在不同pH值溶出介质、不同浓度表面活性剂和不同转速的条件下伊维菌素吡喹酮咀嚼片两种主药的溶出曲线,确定了伊维菌素吡喹酮咀嚼片的溶出方法。结果显示,三批样品45 min时伊维菌素、吡喹酮两种主药的溶出度均大于85%。建立的溶出度测定方法可用于伊维菌素吡喹酮咀嚼片溶出度的测定。     

吡喹酮注射液的含量测定及稳定性研究

本试验旨在建立吡喹酮注射液中吡喹酮含量的测定方法,并考察其稳定性。采用高效液相色谱(HPLC)法测定吡喹酮注射液中吡喹酮含量。色谱条件:Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃,流动相为乙腈-水(60:40),流速1.0 mL/min,检测波长210 nm,进样量20μL。通过影响因素试验、加速试验及长期稳定性试验考察吡喹酮注射液的稳定性。吡喹酮在6.037~90.555μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(R²=0.9993),平均加样回收率为99.24%,RSD为0.77%,吡喹酮注射液的平均含量为标示量的100.3%。在影响因素试验10 d后吡喹酮注射液对高温(60℃)稳定,但对强光照射(4500 lx±500 lx)有一定的敏感性。在加速试验6个月及长期稳定性试验24个月后,吡喹酮注射液的性状、含量等指标均无明显变化。试验结果表明,所建立的含量测定方法简便、可靠、灵敏、重复性好,可用于吡喹酮注射液的质量控制;吡喹酮注射液在室温、避光条件下存放稳定,有效期暂定为2年。     

HPLC法测定大鼠血浆中乙酰胆碱酯酶抑制剂N-甲基巴婆碱含量研究

目的:建立一种灵敏度高的高效液相色谱法,测定大鼠血浆中乙酰胆碱酯酶抑制剂N-甲基巴婆碱的浓度.方法:流动相为甲醇∶水∶三乙胺(65∶35∶0.1)；血浆样品用乙酸乙酯萃取；检测波长:270 nm；流速:1.0 mL/min.结果:线性范围为10-400 g/mL,线性关系良好,最低检测限为5 g/mL.N-甲基巴婆碱日内RSD≤3.7％,日间RSD≤3.1％,提取回收率为98.03％～105.42％(n=5).结论:本方法灵敏度高,精密度、重现性好,适用于N-甲基巴婆碱在生物样本中的检测和药理、药动学研究.     

液相色谱串联质谱法在检测鸡肉和鸡蛋中氯霉素残留的应用

建立了鸡肉、鸡肝和鸡蛋中氯霉素的高效液相色谱串联质谱测定方法,试样经三氯乙酸除蛋白及乙酸乙酯液液萃取提取和净化后,C18柱HPLC进行分离,多反应选择离子检测。方法的回收率和变异系数分别在80%~110%和8%~10%。该方法对鸡肉中氯霉素检测限为0.1μg/kg。     

两种固相萃取柱在乙酰氨基阿维菌素药动学前处理中的比较

为评价乙酰氨基阿维菌素(EPR)药动学前处理中两种固相萃取(SPE)柱的净化、萃取效果,首先在空白胎牛血清中加入一定量的EPR标准溶液,经色谱甲醇提取后,分别经Agilent和Waters公司的C_(18) SPE柱对其进行萃取,再经N-甲基咪唑和三氟乙酸酐衍生化,最后用超高效液相色谱-荧光检测器进行测定;同时,将等量的EPR标准溶液进行衍生化,用超高效液相色谱-荧光检测器进行测定,将其结果作为对照;以绝对回收率作为评价两种SPE柱净化、萃取EPR效果的标准。结果显示,含有EPR的胎牛血清分别经Agilent和Waters公司的C_(18) SPE柱萃取后,两者的EPR峰形均尖锐对称且无明显杂质峰,但绝对回收率有差异,分别为94.50%和85.79%。结果表明,Agilent公司的C_(18) SPE柱对EPR的萃取效果更理想。     

牛肉组织中玉米赤霉醇及相关物残留的气相色谱-质谱法测定

建立了能够同时检测牛肉组织中玉米赤霉醇（又名α-玉米赤霉醇）及3种相关物（β-玉米赤霉醇、玉米赤霉酮和α-玉米赤霉烯醇）残留的气相色谱-质谱联用法。样品均质后,用甲醇提取样品中的待测物,浓缩,用水稀释后,乙酸乙酯萃取,浓缩。用氢氧化钾溶液溶解,正己烷去脂,乙醚萃取,氨基固相萃取柱净化,衍生化后,用气相色谱-质谱联用仪检测,外标法定量。玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、玉米赤霉酮和α-玉米赤霉烯醇线性范围均为0.5-10.0 ng/mL,检测限均为1.0 ng/g,在添加5.0 ng/g时,回收率为71.5%-81.4%,变异系数为1.4%-5.0%。     

伊维菌素吡喹酮咀嚼片含量测定方法的建立

为了建立伊维菌素吡喹酮咀嚼片同时测定两种主药含量的方法,采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈∶水的梯度洗脱系统作为流动相,伊维菌素检测波长为245 nm,吡喹酮检测波长为210 nm。在该色谱条件下,溶剂和辅料对伊维菌素和吡喹酮出峰均无干扰,伊维菌素和吡喹酮与相邻杂质峰分离良好。伊维菌素在2～400μg/m L的浓度范围线性关系良好;吡喹酮在1～100μg/m L的浓度范围内线性关系良好。伊维菌素回收率为102.5%,吡喹酮回收率为99.4%。该方法操作简便,准确度高,重复性好,可用于伊维菌素吡喹酮咀嚼片同时测定两种主药的含量。     

高效液相色谱串联质谱法检测家禽组织中氯霉素残留量的研究

为了检测氯霉素在家禽组织中的残留量,本文建立了一种超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分析方法。通过对肌肉和鸡蛋样品采用碱性乙酸乙酯提取,20%甲醇水饱和正己烷液萃取净化,对鸡的肝脏和肾脏样品采用β-葡萄糖醛酸苷酶酶解后采用乙酸乙酯提取,C18固相萃取柱(500mg/3cc)净化,进行液相色谱-串联质谱负离子模式测定。结果表明,氯霉素在0.5~10.0ng/mL范围内均呈现良好的线性关系,相关系数(r)均大于0.990;样品中氯霉素的检测限为0.1μg/kg,定量限为0.2μg/kg。UPLC-MS/MS对氯霉素在0.2、0.4、2μg/kg范围内的平均回收率均为70%~120%,相对标准偏差均小于20%。     

超高效液相色谱法同时测定饲料中盐酸多巴胺等五种β-兴奋剂

本文建立了固相萃取-超高效液相色谱(UPLC)法同时测定饲料中盐酸多巴胺、西马特罗、沙丁胺醇、特布他林和莱克多巴胺等五种β-兴奋剂的方法。饲料样品用甲醇提取,提取分别采用Alumina A柱和MCX柱净化,外标法定量。五种β-兴奋剂的检测低限为6.0～8.5μg/kg,回收率为72.8%～97.0%,RSD为:1.8%～4.1%。方法有效、简便、准确,并能同时测定饲料中五种β-兴奋剂。     

高效液相色谱法快速测定甘加藏羊肉中VA含量的研究

建立了用高效液相色谱法测定甘加羊肉中维生素A含量的方法,肉中的脂溶性维生素在皂化过程中与脂肪分离,经乙醚萃取后,采用ODS-C18(5μm,4.6 mm×150 mm)色谱柱,流动相为甲醇(100%),流速0.8 ml/min,柱温25℃,用紫外检测器在波长290 nm下定量测定。结果表明:甘加羊肉中维生素A的平均检出含量为11.690 6μg/100g,平均回收率为89.99%(RSD=0.06%),含量高于土种羊肉。     

吡喹酮注射剂含量测定方法比较

采用两种不同的色谱条件测定吡喹酮注射剂中吡喹酮的含量,色谱柱为迪马DiamonsilC18（4．6mm×250mm,5μm）柱,流动相为甲醇-水及乙腈-水,检测波长为263nm及210nm,流速1mL/min。结果显示,在两个不同的检测范围内,线性关系均良好（分别为r=0．9998和r=0．9996）,吡喹酮的平均回收率为100．38％和99．90％,RSD=1．13％和1．1％（n=9）。两种方法简便易行,精密度、回收率、重现性均符合要求。结果表明,两种方法均可用于吡喹酮注射剂的含量测定。