鸡毒霉形体油乳剂灭活苗对实验攻毒蛋用鸡产量的影响

将３０只２０周龄鸡毒霉形体（ＭＧ）阴性的蛋用种鸡分为４组，攻毒有Ⅰ组于颈部皮下接种２次油乳剂灭活苗；Ⅱ组免疫接种１次；Ⅲ组于攻毒后１周免疫接种１次，Ｃ组不接种疫苗，为对照线。４组鸡均在２９周龄是攻击ＭＣ致病株ＢＧ４４Ｔ。攻毒后通过７周观察，发现３个免疫组鸡的产蛋量下降率均明显低于对照组。攻毒后第７周剖杀Ⅰ组和对照组的全部鸡进行ＭＧ的分离培养，结果从对照组鸡的气管、肺和气囊中均分离到了ＭＧ，而Ⅰ组仅在气管和肺中分离到ＭＧ。２组鸡的输卵管中均未分离到ＭＧ。     

鸡毒支原体HS株病原性研究

鸡毒支原体ＨＳ株（ＭＧ－ＨＳ）是作者从湖北省某场场的一只患支原体病鸡心包膜中分离的，用该菌株传代６次的液体培养的接种健康的５周伊莎小公鸡，接种途径分别以气囊，气管，皮下及口服＋滴鼻等四种方法，攻毒８天后以１０个剂量的传染性支气管弱毒疫苗（Ｈ１２０）作为激发感染，结果，攻毒后试验鸡全部感染，并出现临床症状，激发感染后发病严重，气囊组，气管组及口服＋滴鼻组１００％发病，皮下攻毒组发病变达８０％，病鸡表     

IB疫苗同时免疫不会影响鸡毒支原体疫苗效力

在研究鸡毒支原体(MG)感染的时候,不仅要了解疾病发展过程还要清楚MG疫苗保护宿主的机制。美国农业部农业研究服务署的科研人员比较了实验室条件下商品母鸡两种不同的途径(气管和眼睛)接种MG寻找不同接种途径对鸡的致病性差异,检测指标包括气囊和器官损伤评分、气管黏膜厚度、体液免疫反应。并且对同时免疫传染性支气管炎疫苗对疾病进程的影响进行了评估。结果显示,气管接种MG一周后气囊     

广东规模化鸡场死鸡胚中鸡毒支原体的分离鉴定、致病性及药物敏感性

旨在从广东某规模化鸡场死鸡胚进行鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)的分离,并进行遗传进化分析、致病性及药物敏感性研究。本研究从广东某规模化鸡场的带菌死胚卵黄组织中分离禽支原体,通过菌落观察、血清学试验、16S rRNA支原体通用引物序列鉴定等方法,对分离的菌株进行种属鉴定,同时将分离的毒株对鸡胚和SPF鸡进行攻毒试验及抗菌药物敏感性试验。结果显示：显微镜下菌落呈典型的“荷包蛋”状。平板凝集试验显示其与MG阳性血清有凝集反应,与MS阳性血清不反应;16S rRNA序列测序发现各分离株与MG相似性达99.9%,因此确定分离株为MG。将各分离株感染7日龄SPF鸡胚,结果显示感染鸡胚大多于临近出壳时死亡;感染3周龄的SPF鸡,3周后解剖发现鸡气囊发生显著病理变化,说明其具有较强致病力;药物敏感性试验结果显示,5株分离株对盐酸沃尼妙林、多西环素、泰万菌素及泰妙菌素有较高敏感性,对替米考星、泰乐菌素、恩诺沙星、红霉素、吉他霉素、林可霉素呈现出不同程度耐药性。综上,从广东某规模化鸡场死鸡胚中成功分离到5株MG分离株,各分离株均可引起红细胞凝集,导致鸡胚死亡,对SPF...     

反向遗传技术致弱的基因Ⅶ型新城疫病毒对SPF鸡的免疫效力评价

为评估致弱的基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)的免疫效力,本研究采用反向遗传技术构建的一株基因Ⅶ型NDV减毒疫苗株(MG7株),通过滴鼻点眼接种4周龄SPF鸡后,检测其体液免疫、细胞免疫以及攻毒后保护效率和排毒情况等指标,评价MG7株的免疫效果。结果表明:MG7株免疫3周后,能够诱导SPF鸡抗体的产生,且抗体水平(6.08log_2)高于La Sota株免疫组(5.2log_2)。MG7株免疫1~3周内,PBMCs中CD8α+T淋巴细胞亚群比例呈逐渐上升趋势;MG7免疫后第3周,PBMCs中CD4~+T淋巴细胞亚群的比例明显增加(p0.05);同时,MG7株免疫组的血清IFN-γ含量也呈递增趋势,与空白对照组存在极显著差异(p0.01)。此外,以基因Ⅶ型NDV强毒株进行攻毒试验,在攻毒后第2 d~6 d,MG7株免疫组SPF鸡未检测出排毒;LaSota株免疫组则存在不同程度排毒现象,而空白对照组全部死亡。实验表明,与LaSota株免疫组相比,MG7株能够有效诱导NDV特异性抗体产生和T细胞免疫反应,提高SPF鸡的保护效率和有效阻止排毒。本研究对MG7株免疫效力的评估结果表明其具有作为新型基因Ⅶ型NDV疫苗株的潜力,有助于我国ND的防控和根除。     

表达鸡传染性支气管炎病毒S1基因重组鸡痘病毒对SPF鸡的免疫保护作用

将表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因的重组鸡痘病毒(rFPV-IBVS1)以5×106PFU剂量翅皮下注射接种4周龄的SPF鸡。血清抗体检测表明,该重组鸡痘病毒能刺激鸡体产生特异性抗体,外周血液中CD4 、TCRγδ T淋巴细胞比例显著高于对照组,而CD8 T淋巴细胞比例低于对照组。免疫后4周用1×103.0EID50的传染性支气管炎病毒LX4株进行攻毒,结果表明,重组鸡痘病毒免疫组与IB弱毒疫苗免疫保护率分别为12/16和13/16;攻毒后喉拭子IBV分离结果表明,IB弱毒疫苗和重组鸡痘病毒免疫组的IBV气管排毒时间比对照组缩短了2 d,病毒的分离率显著低于对照组;肾脏、气管、肺脏、腺胃、脾和肝脏的病理损伤也较对照组轻,而且病变持续时间缩短。     

氢化可的松诱导鸡毒支原体感染模型的建立

试验旨在建立鸡毒支原体人工感染动物模型,为鸡毒支原体致病的分子机制研究提供基础。首先在7日龄时使用氢化可的松建立鸡的免疫低下模型,15日龄时在左右胸气囊分别注射0.5 m L浓度为1×109CCU/m L的鸡毒支原体R株菌液,观察鸡的临床症状并进行剖检,采集咽拭子、气囊和肺进行PCR检测,采用血清平板凝集试验(SPA)检测血清抗体,对气管和肺进行光镜检查。结果显示,攻毒4 d后,鸡表现出明显的呼吸道症状,解剖发现气囊浑浊、增厚并有黄色干酪样渗出物,PCR和SPA检测呈阳性,光镜下观察到气管中纤毛脱落,上皮细胞增生,黏膜下层淋巴细胞浸润,肺出血并有炎性细胞渗出。表明鸡毒支原体感染病理模型造模成功。     

鸡传染性支气管炎弱毒疫苗株安全性和免疫效力初步评价

通过对QX基因型IBV分离株SDZB0808进行鸡胚连续100次传代致弱后获得子代病毒P100。为了明确P100的的致弱效果和免疫原性,对其进行了安全性和免疫效力评价。安全性试验结果显示,P100以105.5 EID50/只的剂量对3日龄的SPF鸡进行免疫后试验,与正常对照组相比没有明显临床症状和病理变化,气管和肾脏组织也没有病理组织损伤。免疫效力试验结果发现,P100以104.5 EID50/只的剂量免疫3日龄SPF鸡,14d后对同源强毒SDZB0808和异源强毒SDIB821/2012的攻击都具有100%的临床保护,病理组织学检查发现P100免疫攻毒组试验鸡气管和肾脏与正常对照没有差异,排毒检测结果显示P100免疫攻毒组试验鸡内脏组织病毒检出率大大低于攻毒对照组。本研究结果表明P100对SPF鸡具有良好的安全性和免疫效力,可以作为IBV弱毒疫苗候选株。     

鸡毒支原体F弱毒疫苗株细胞免疫特性研究

为了解鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum,MG）F弱毒疫苗株的细胞免疫特性,分别以活菌浓度为109（A组）、106（B组）ccu/mL的MG F株及生理盐水（C组）点眼接种SPF鸡,采用流式细胞技术及T淋巴细胞增殖试验对免疫前后淋巴细胞亚类Th/T、Tc/T、Th/Tc及刺激指数（SI）的动态变化规律进行研究。结果显示免疫后A、B组的Th/T、Tc/T、SI明显升高,其中Th/T于d5、d7,Tc/T、SI于d7、d14,A组显著高于B组（P〈0.05）。研究结果表明,免疫MG F株可较好的提高鸡的细胞免疫,且MG F株活菌浓度与接种鸡外周血Th/T、Tc/T、SI呈正相关。     

H7亚型禽流感病毒血凝素基因重组鸡痘病毒活载体疫苗免疫原性评估

本研究以细胞感染-转染技术构建了一株表达H7亚型禽流感病毒(AⅣ)血凝素(HA)基因的重组鸡痘病毒rFPV-HA.以5×105PFU的rFPV-HA经翅下刺种免疫8周龄SPF鸡,免疫后第3周用100 CID5o的HA基因同源AⅣ A/Arfi St/eng-Q/983/79(H7N1)进行人工感染,1周后采集泄殖腔棉拭子进行病毒分离.免疫后第三周及攻毒后第1、2周对所有动物进行静脉采血,检测血凝抑制(HI)抗体和免疫沉淀(AGP)抗体.结果,攻毒前部分rFPV-HA免疫鸡可检测到HI抗体,但检测不到AGP抗体,野生型病毒(F017)接种组和空白对照组HI抗体和AGP抗体均为阴性.攻毒后rFPV-HA免疫组的HI抗体上升速度明显高于野生型病毒接种组和空白对照组.rFPV-HA免疫组有6/8的鸡为流感病毒分离阴性,野生型病毒接种组和空白对照组的试验鸡病毒分离全部为阳性.结果表明rFPV-HA可诱导鸡产生有效的免疫保护反应,阻止或降低消化道病毒排泄.rFPV-HA的成功构建为研制开发H7亚型禽流感活载体疫苗奠定了良好的基础.     

鸡毒霉形体粘附素

随着霉形体研究的迅速发展，国内外对鸡毒霉形体的研究也较为活跃， 特别在鸡毒霉形体的粘附素方面的研究、对鸡毒霉形体膜蛋白的粘附素MGC1、MGC2、GapA的生化特性、基因组分析、及其在免疫逃逸机制诊断探针方面的研究做了较为详细的综述。     

鸡败血霉形体病的诊治

鸡败血霉形体病又称鸡慢性呼吸道病,在临床上常造成鸡体质减弱,继发大肠杆菌感染,增重减慢,产蛋率下降,死亡率升高.我们采用喘痢清、链霉素等综合防治措施,对遵义县茅栗镇某鸡场的567只发病鸡进行治疗,取得良好的效果,现报道如下.     

用探针杂交法检测鸡毒支原体和滑液囊支原体

根据鸡毒支原体(MG)和滑液囊支原体(MS)的16SrRNA基因序列，设计并合成了探针MG和MS共同目的基因，跨幅为580bP的一对引物。用这对引物对2个标准的MG和1个标准的Ms菌株DNA模板进行聚合酶锭反应(PcR)，结果得到了预期大小约580bP的PcR产物。回收纯化琼脂糖电泳凝肢中的MG扩增产物克隆至T载体中，DIG随机引物法合成核酸探针，斑点杂交试验对MG和MS均呈阳性，检测灵敏度分别为2ng和3ng，其它对照菌(毒)株为阴性。     

鸡毒霉形体病(MG)免疫防治对策

目前针对鸡毒霉形体的防治措施主要包括鸡群净化，药物防治和疫苗免疫。这三种方法各有优劣。鸡毒霉形体净化措施可以从鸡场中彻底清除疾病，因此效果最好。但由于执行过程中的成本高昂，而且受到目前国内饲养规模、饲养管理水平和环境控制等多方面限制，因此净化措施难以实施，而且取得的成果也很难保持。药物防治措施虽然对霉形体病有较好的防治效果，但主要缺点是不能阻止鸡毒霉形体的垂直感染，     

再利用鸡毒支原体培养基的研究

液体培养基中的鸡毒支原体收获后，重新调节其ｐＨ，使之恢复到培养前的状态，并继续培养鸡毒支原体。结果表明，这不但能提高单位培养基中的鸡毒支原体产量，而且收获的支原体还能保持较好的抗原性。     

鸡毒支原体平板凝集诊断抗原的研制

鸡毒支原体(mycoplasma gaujseptium，MG)主要引起鸡的慢性呼吸道疾病，是养禽业相当棘手的疾病问题之一。目前常用的抗体水平监测方法有：利用鸡毒支原体能凝集鸡或火鸡红细胞的特性，发展了血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验，但此方法不够灵敏。酶联免疫吸附法(ELISA)灵敏度     

鸡毒支原体F株的毒力回归试验

将鸡毒支原体Ｆ株经培养基连续传３６代后的菌株培养物以鼻内和胸腔内感染接种的方式在ＳＰＦ鸡体内连续回传５代,然后分别取各回传代次的Ｆ株接种无鸡毒支原体和滑液支原体感染的小雏和ＳＰＦ鸡胚,同时以没经回的原始代次作为对照,比较各代次Ｆ株的毒力变化情况。试验结果表明,经回传ＳＰＦ鸡５代的各代次Ｆ株培养物接种小雏对鸡不致病,所有接种鸡气囊 未出现病变,和未经回传ＳＰＦ鸡的Ｆ株结果完全一致;经过回传的各代次Ｆ     

鸡毒支原体敏感药物的筛选

用泰乐菌素、强力霉素、罗红霉素、红霉素、丁胺卡那霉素、庆大霉素、环丙沙星、双氟沙星、呋喃唑酮、呋喃他酮、泰妙菌素等药物对3株鸡毒支原体进行体外抑菌试验。结果证明，它们对鸡毒支原体均有抑菌作用，但以泰乐菌素、泰妙菌素、环丙沙星和双氟沙星抑菌效果最好，达到10^-8g／L。     

In Vitro Sensitivity to Antibiotics of Swedish Strains of Mycoplasma Gallisepticum

The in-vitro sensitivity of 9 different strains of Mycoplasma gallisepticum has been tested using 12 different antibiotics including tetracyclines, erythromycin and tylosin. The latter antibiotic showed the highest effect followed by achromycin and terramycin. Two antibiotics with a high in-vitro effect against Mycoplasma were found in kanamycin and syntodecin.     

鸡毒支原体免疫研究进展

鸡毒支原体感染(Mycoplasma GallisepticumInfection,MGI),通常被称为鸡慢性呼吸道病和火鸡传染性窦炎,是由鸡毒支原(MycoplasmaGallisepticum,MG)引起的鸡的一种慢性传染性呼吸道疾病,对养禽业危害十分严重。本病常与其他病毒性或细菌性疾病并发或继发,使损失更加严重。采用疫苗免疫接种进行防制,经济、方便、实用。