三种呼吸系统兽药制剂中非法添加盐酸溴己新、吲哚美辛的HPLC-PDA检测方法的建立

为检测麻杏石甘散、氟苯尼考注射液中非法添加的盐酸溴己新,甘草颗粒中非法添加的吲哚美辛,以十八烷基键合硅胶为填充剂,磷酸盐缓冲液-乙腈(20∶80)为流动相检测盐酸溴己新,以乙腈-0.1mol/L冰醋酸溶液(50∶50)为流动相检测吲哚美辛,流速为1.0 m L/min,波长扫描范围为200~400 nm,建立了相应的HPLC-PAD检测方法,并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。结果显示,麻杏石甘散和氟苯尼考注射液中盐酸溴己新的回收率分别为94.8%和98.5%,甘草颗粒中吲哚美辛回收率为95.2%;盐酸溴己新线性方程为y=14780200x-16476,R=0.9999,吲哚美辛线性方程为y=10995430x+13033,R=0.9999;麻杏石甘散中盐酸溴己新检测限为83 mg/kg,氟苯尼考注射液中盐酸溴己新检测限为1.6 g/L,甘草颗粒中吲哚美辛检测限为1 g/kg。     

UPLC-PDA法测定麻杏石甘口服液中非法添加物盐酸溴己新

目的:建立超高效液相色谱-二极管阵列检测法(UPLC-PDA法)测定麻杏石甘口服液中非法添加物盐酸溴己新的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,用带有二极管阵列检测器的高效液相色谱仪(HPLC-PAD)对盐酸溴己新进行色谱分离和快速筛查。以ACQUITY UPLC C18色谱柱为分离柱,柱温:35℃;流动相体系:流动相A为5%冰醋酸,流动相B为甲醇,进行梯度洗脱;流速:0.3 m L/min;进样量:10μL;检测波长为248 nm。通过保留时间、光谱图、峰纯度等参数对盐酸溴己新进行定性定量检测。结果:盐酸溴己新在1.0～100.0μg/mL的范围内线性关系良好(R2=0.999);麻杏石甘口服液中添加盐酸溴己新1.5 mg/mL,信噪比(S/N)3,确定为方法的检测限;添加5 mg/mL,信噪比(S/N)10,确定为方法的定量限;麻杏石甘口服液在5 mg/mL、10 mg/mL、20 mg/mL盐酸溴己新添加水平的回收率为95%～105%,批内批间变异系数均小于10%,准确度和精密度良好,完全满足检测需求,而且峰纯度角与阈值符合要求。结论:该方法色谱分离较好,分析速度较快,前处理简单,适用于麻杏石甘口服液中非法添加盐酸溴己新的定性定量检测。     

清热解毒类中兽药中非法添加吲哚美辛的HPLC-PDA检测方法的建立

建立了HPLC-PDA法测定清热解毒类中兽药中吲哚美辛的检测方法。采用ODSC_(18)色谱柱(柱长150 mm,内径4.6 mm,粒径5μm),流动相为乙腈:0.1 mol/L冰醋酸(50∶50,V_1∶V_2)为流动相,采集波长范围为200～400 nm,定量波长为317 nm,进样量为10μL。试验结果表明,吲哚美辛在5～200μg/mL范围内线性良好(r=0.9999),各基质中吲哚美辛的检测限均为1.0 g/kg,峰纯度检查和光谱相似度检查均符合要求。其中,板二黄片中吲哚美辛的平均回收率为96.5%,相对标准偏差(RSD)为0.9%(n=6);三黄散中吲哚美辛的平均回收率为99.3%,RSD为1.3%(n=6);扶正解毒散中吲哚美辛的平均回收率为100.6%,RSD为0.8%(n=6)。本法应用清热解毒类中兽药中非法添加吲哚美辛的检测,结果准确可靠。     

HPLC-PDA方法同时检测黄连解毒散中非法添加的对乙酰氨基酚和盐酸溴己新

为同时检测黄连解毒散中非法添加的对乙酰氨基酚和盐酸溴己新,以十八烷基键合硅胶为填充剂,1%冰醋酸溶液(用三乙胺调剂p H值至4.0)为流动相A,甲醇为流动相B,进行梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,波长扫描范围为210~400 nm,柱温25℃,建立了HPLC-PAD检测方法,并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。结果显示,对乙酰氨基酚和盐酸溴己新的回收率分别为98.6%和99.4%,RSD分别为0.6%和0.2%;线性方程分别为y=43408x-401.96,R2=1和y=14331x-1682.4,R2=1;检测限分别为1和5 mg/g;定量限分别为2和10 mg/g。本方法简洁、灵敏、可靠,可同时对黄连解毒散中非法添加的对乙酰氨基酚和盐酸溴己新违禁药物进行定性和定量检测。     

鱼腥草注射液中非法添加甲氧氯普胺的HPLC-PDA检测方法的建立

为检测鱼腥草注射液中非法添加的甲氧氯普胺,以十八烷基键合硅胶为填充剂,0.02 mol/L磷酸溶液(用三乙胺调剂p H值至4.0)-乙腈(81:19)为流动相,流速为1.0 m L/min,波长扫描范围为200~400 nm,柱温25℃,建立了HPLC-PAD检测方法,并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。结果显示,甲氧氯普胺回收率为98.8%,RSD为0.3%;线性方程为y=43542070x+36695,R2=1;检测限为6μg/m L;定量限为9μg/m L。本方法快速、灵敏、可靠,可对鱼腥草注射液中非法添加的甲氧氯普胺违禁药物进行定性和定量检测。     

高效液相色谱法测定麻杏石甘颗粒中盐酸麻黄碱含量

为完善麻杏石甘颗粒质量标准,采用高液相色谱法对麻杏石甘颗粒中盐酸麻黄碱的含量测定进行研究。采用Thermo scientific BDS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(含0.1%三乙胺)(3∶97),检测波长207 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃,进样量10μL。结果表明,盐酸麻黄碱进样浓度在5~60μg/mL范围内,峰面积与盐酸麻黄碱含量呈良好线性关系(R^2=0.9999)。样品平均回收率为96.62%(n=6),RSD为1.30%。本方法简便、准确度高、重复性好、耐用性强,为进一步提高该制剂的质量标准,保证临床效果,提供了检测依据。     

止痢散、杨树花口服液中非法添加盐酸小檗碱检测方法的建立

建立止痢散、杨树花口服液中非法添加盐酸小檗碱的HPLC-PDA检测方法,采用十八烷基键合硅胶为填充剂,乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH值至3.0)(25∶75)为流动相,等度洗脱,流速为1.0 mL/min,二极管阵列检测器,提取波长为345 nm。采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。按外标法以峰面积计算,盐酸小檗碱在止痢散和杨树花口服液中的平均回收率分别为99.8%和99.7%,RSD分别为0.3%和0.4%;线性方程为Y=41435X-15904,R²=0.9999;检测限分别为0.2 g/kg, 0.2 g/L。该检测方法专属型强,灵敏度高,操作简便,准确可靠,可用于测定止痢散、杨树花口服液中非法添加的盐酸小檗碱。     

恩诺沙星注射液中非法添加磺胺嘧啶HPLC-PDA检查法的建立

对恩诺沙星注射液中非法添加磺胺嘧啶的检测方法进行了研究.通过比较受试样品中未知峰与对照品色谱图保留时间的一致性和光谱指数图的匹配,建立了HPLC-PDA测定法,并进行相应的方法学研究.结果显示,磺胺嘧啶回收率为99.5％,RSD=0.4％;线性方程为y=873577x＋98154,R2 =1;检测限为5μg/mL,表明该检测方法准确可靠,可用于恩诺沙星注射液中非法添加磺胺嘧啶的检测.     

氟苯尼考注射液中非法添加多西环素检查方法的建立

为建立氟苯尼考注射液中非法添加多西环素高效液相检查方法,研究使用C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以醋酸盐缓冲液[0.25 mol/L醋酸铵溶液-0.1 mol/L乙二胺四醋酸二钠-三乙胺(100∶10∶1),调节p H值至8.8]-乙腈(85∶15)为流动相,采用二极管阵列检测器,波长采集范围为200~400 nm,记录色谱图波长为269 nm,流速为1 m L/min,进样量为10μL。结果表明,多西环素进样浓度在0.015~0.96 mg/m L范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=1.0000);平均回收率为99.4%(n=9),RSD为0.3%。本方法简便、准确、可行,适用于氟苯尼考注射液中非法添加多西环素的检测。     

HPLC-ELSD法联合UPLC-MS/MS法检测鱼腥草注射液中非法添加的庆大霉素

为检测鱼腥草注射液中非法添加的庆大霉素,建立了以HPLC-ELSD进行初筛,UPLCMS/MS进行确证并定量的系统方法。十八烷基键合硅胶为填充剂,0.2mol/L三氟醋酸-甲醇(92∶8)流动相作为HPLC-ELSD初筛条件。以0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸水溶液(10∶90)为流动相,流速0.3mL/min,在电喷雾离子化电离源上以多反应监测方式进行正离子检测,建立UPLC-MS/MS检测方法,用于定量分析的离子对为m/z478.6→157.1(庆大霉素C_1)。结果表明,庆大霉素C_1在0.15~1.35μg/mL浓度范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,线性方程为y=5519.3x+879.24,R=0.9965。庆大霉素C_1在鱼腥草注射液中检测限为0.15g/L。     

加味麻杏石甘散配合加米霉素治疗犊牛支气管肺炎的效果观察

为切实加强犊牛支气管肺炎的治疗,提高肉牛养殖经济效益。本文在应用加味麻杏石甘散的基础上,配合应用加米霉素对犊牛支气管肺炎的效果进行观察,结果发现,应用麻杏石甘散配合加米霉素能有效的提高犊牛支气管肺炎的治疗效果,达到了95%,并就强化犊牛支气管肺炎的预防措施进行探讨,提出了相应的预防措施,从根本上提高犊牛饲养效益提供一定的基础参考。     

麻杏石甘制剂药理作用及其在兽医临床中的应用

对麻杏石甘制剂的药理作用以及其在兽医临床中的应用进行了综述,以期为该组方进一步开发应用提供依据和参考。麻杏石甘制剂是由麻黄、杏仁、石膏、甘草四味药物组成的传统方剂。现代药理学研究表明,麻杏石甘制剂具有解热抗炎、镇咳平喘、抗菌、抗病毒、调节免疫作用。兽医临床中麻杏石甘制剂主要有散剂、汤剂、颗粒剂、注射剂等,主要应用于治疗由细菌、病毒、支原体引起的畜禽呼吸道疾病。     

雏鸡白痢和大肠杆菌病的药物治疗试验

采用药敏试验测得的药物硫酸丁胺卡那霉素、氟苯尼考、硫酸安普霉素、盐酸环丙沙星、硫酸新霉素、盐酸多西环素对试验动物进行分组用药。试验鸡700只,每组100只。试验结果表明,应用药物治疗雏鸡白痢和大肠杆菌病的效果与药敏试验结果基本一致。     

HPLC-PDA法测定3种兽药中非法添加非泼罗尼

建立了3种兽药中非法添加非泼罗尼的HPLC-PDA检查方法。采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以水-乙腈为流动相,梯度洗脱;二极管阵列检测器,提取波长为220 nm。通过液相色谱保留时间、峰纯度检查和光谱相似度检查对非法添加物进行确证。结果表明,该色谱条件下非泼罗尼与其他物质分离良好。非泼罗尼在阿维菌素粉、甲基吡啶磷可湿性粉、环丙氨嗪预混剂中的平均回收率分别为100.0%(RSD=1.6%)、108.7%(RSD=1.1%)、109.3%(RSD=1.2%)。本方法简便、准确、可靠,可用于检查以上3种兽药中非法添加的非泼罗尼。     

HPLC-PDA法测定兽药中非法添加的喹乙醇、乙酰甲喹检查方法

建立兽药中非法添加喹乙醇、乙酰甲喹的通用检查方法。以十八烷基键合硅胶为填充剂,0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,波长扫描范围为200~400 nm,柱温30℃,采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。结果显示,喹乙醇、乙酰甲喹与其他物质峰分离良好;喹乙醇和乙酰甲喹在12种兽药中的平均回收率分别为96.6%~101.4%和98.0%~101.3%,RSD均小于1.4%;喹乙醇和乙酰甲喹的检测限均为1.0 g/kg(L)。该检查方法简便、准确、可靠,可用于检查兽药中非法添加的喹乙醇和乙酰甲喹。     

氟苯尼考与盐酸土霉素体外联合抑菌效果研究

为研究氟苯尼考和盐酸土霉素的临床配伍应用效果,本试验采用肉汤稀释棋盘法,对大肠杆菌、沙门氏菌等6株细菌进行了体外联合药敏试验。结果表明,单药对大肠杆菌和沙门氏菌标准株的MIC为1~8 μg/mL,对大肠杆菌和沙门氏菌临床株的MIC为64~128 μg/mL;联合用药的FIC指数分别为0.5、0.75、1.5、0.5、0.75、1.0,4株菌表现为相加作用,其余2株菌为协调作用和无关作用。     

高效液相色谱法同时测定液态乳中的2种紫外吸收剂和2种抗氧化剂

建立液态乳中2种紫外吸收剂(UV-326和UV-1577)和2种抗氧化剂(AO-1010、AO-2246)的高效液相色谱测定方法.前处理采用乙腈提取液态乳中目标化合物,样品用正己烷提取;检测经Agilent HC-C8反相色谱柱,以乙腈-水作为流动相,梯度洗脱程序进行分离,280 nm波长下检测.结果表明:分析物在0.05～50 μg/mL质量浓度范围内线性关系良好,线性相关系数＞0.999 5,方法检出限为0.02～0.5 mg/kg.方法在3个水平的加标回收率为69.08％～115.87％,相对标准偏差为0.43％～9.94％.该方法操作简单、灵敏度高、重现性好,适用于液态乳中紫外吸收剂和抗氧化剂的同时测定.     

氟苯尼考双混悬型乳剂对猪沙门氏菌病的疗效试验

为了研究氟苯尼考双混悬型乳剂的临床治疗效果,确定该新制剂的治疗剂量及使用间隔时间,建立体重为12±1.5kg的大约克小肥猪沙门氏菌人工感染病理模型,以氟苯尼考注射液为对照组,肌肉注射氟苯尼考双混悬型乳剂高(30mg/kg·bw)、中(20mg/kg·bw)和低(10mg/kg·bw)剂量组开展临床治疗与观察。结果所有试验组治疗率均在70%以上,高剂量组显著高于低剂量组和药物对照组(p<0.05),中剂量组显著高于药物对照组(p<0.05)。因此,氟苯尼考双混悬型乳剂中剂量组(20mg/kg·bw)3d给药1次,连续2次可以达到良好的治疗效果。     

高效液相色谱法测定伊维菌素脂质体药物的含量及包封率

本试验旨在建立伊维菌素脂质体载体药物含量及包封率测定的高效液相色谱法。Waters surfire C18柱(150 mm×2.1 mm,5 μm),流动相为乙腈—甲醇—水(62∶30∶8),流速1 mL/min,检测波长245 nm,进样量10 μL,柱温30 ℃。采用凝胶过滤法、透析法、冷冻超速离心法、超滤离心法4种方法对脂质体与药物进行分离。结果表明,在优化色谱条件下伊维菌素与辅料及溶剂峰均得到良好分离,伊维菌素在1～50 μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.9998,n=5),最终采用超速冷冻离心法可将脂质体与药物很好的分离,伊维菌素脂质载体的包封率可达98.54%±1.6%。该方法准确可靠、简单快速,可用于伊维菌素脂质体载体药物含量及包封率的测定。