Phylogenetic and Molecular Characterization of the Equine Influenza Virus A (H3N8) Causing the 1997 and 2004 Outbreaks in Morocco

Reported here are the results of antigenic and genetic characterization of equine influenza strains causing local outbreaks reported in Morocco, respectively, in 1997 and 2004. The antigenic and genetic characterizations of the equine influenza virus H3N8 are reported here. The highest similarity between the HA1 nucleotide sequences of A/equine/Nador/1/1997 and those of A/equine/Rome/5/1991 and A/equine/Italy/1199/1992 demonstrate that A/equine/Nador/1/1997 belongs to the European lineage. On the other hand, A/equine/Essaouira/2/2004 and A/equine/Essaouira/3/2004 were classified in the predivergent lineage. The present work emphasizes the importance of a national influenza survey program, which requires a collaborative laboratory network to promote the collection and characterization (antigenic and genetic) of equine influenza viruses in real time.     

陈年意蜂巢脾中抗生素残留的初步分析

以使用多年的陈年意蜂巢脾为研究对象,采用LC/MS/MS对蜂产品中常见的抗生素类型—氯霉素、链霉素、4种硝基呋喃代谢物、15种磺胺类、6种氟喹诺酮类和3种硝基咪唑类进行残留量检测。结果有9种抗生素被检测到,巢脾水提液中的环丙沙星含量超出蜂王浆的最大残留允许量(巢脾无相应标准)。巢脾的抗生素残留问题应引起高度重视。     

首乌蜜精和蜂蜜对家蚕茧质的影响研究

用５％首乌蜜精溶液和天然纯蜂蜜给３～５龄家蚕（ＢｏｍｂｙｘｍｏｒｉＬ．）幼虫添食。结果表明，首乌蜜精提高了家蚕幼虫的茧质，千克茧粒数、全茧量、茧层量、茧层率高于蜂蜜组，蜂蜜组高于对照组。由此证实，首乌蜜精具有加速生长发育、调节物质代谢的作用。     

不同萃取头固相微萃取提取分析饲料香味剂致香成分

采用CAR/PDMS和PDMS/DVB两种萃取头的固相微萃取(SPME)提取乳香饲料香味剂挥发性成分,经气相色谱-质谱联用(GC-MS)对挥发性成分进行鉴定,分析比较两种萃取头提取的挥发性成分差别,确定适宜的萃取头。结果表明:两种萃取头的固相微萃取共检测出27种挥发性成分,CAR/PDMS提取数量为24种,PDMS/DVB为18种。采用CAR-PDMS萃取头获得的苯甲醇、丙位辛内酯、茴香脑、洋茉莉醛、丁酸苄酯的峰面积要高于PDMS/DVB萃取头,而前者丙位壬内酯、乙基香兰素峰面积分别稍低于后者。CAR/PDMS萃取头获得的挥发性物质的总峰面积均高于PDMS/DVB萃取头(即557.30×107vs426.72×107)。因此,根据获得挥发性物质数量和总峰面积,CAR/PDMS萃取头比PDMS/DVB萃取头更适于提取分析乳香型饲料香味剂致香成分。     

牛Fas基因的组织表达分析及其功能预测

采用RT-PCR技术从中国西门塔尔牛睾丸组织总RNA中反转录FascDNA,将其克隆于pMD19-Tvector后进行测序分析,并对其表达的蛋白结构功能进行预测、分析。结果表明:牛的FascDNA序列为1109bp,编码323个氨基酸残基,在氨基酸序列上与羊、猪、人、小鼠的相似性分别为90.5%、65.3%、56.7%和48.6%。Fas蛋白的胞外区有2个糖基化位点和3个富含半胱氨酸残基的结构亚域,对Fas蛋白的定位及凋亡信号识别有重要作用。牛与羊、猪、人、小鼠Fas的死亡结构域(Death domain,DD)氨基酸序列的相似性分别为94.3%、68.5%、59.6%和70.8%,体现了该结构在各物种间较强的保守性及接受凋亡信号诱导靶细胞凋亡的重要性。组织表达谱发现,Fas不仅表达于牛的淋巴、脾等淋巴系统,而且高表达于牛生殖系统的睾丸中,这对于进一步阐明Fas在公牛精子发生过程中的调控作用奠定基础。     

饲料和鸡肉中利巴韦林的测定--超高效液相色谱-串联质谱法

本研究建立了饲料和鸡肉中利巴韦林的UPLC-MS/MS分析方法。样品经三氯乙酸-乙腈溶液提取,离心后提取液经PBA固相萃取小柱净化,0.1 mol/L甲酸水溶液溶解,进行UPLC-MS/MS分析。结果显示,利巴韦林在10.0～500.0 g/L浓度范围内线性关系良好,r2=0.9991。以浓缩饲料、配合饲料、预混料和鸡肉等为添加基质,其回收率在90.0%～114.5%,检出限为25.0 g/kg,定量限为50.0 g/kg。表明本方法灵敏度高、专属性好、操作简单、结果可靠,可满足饲料和鸡肉中利巴韦林的分析检测。     

中国H5N1亚型高致病性禽流感病毒抗原变异株的鉴定分析

对引起中国2006年山西、宁夏2省(区)H5N1亚型禽流感疫情的代表毒株——A/chicken/Shanxi/2/2006(H5N1)(CK/SX/06)进行了全面研究。结果表明该病毒具有高致病性禽流感病毒(HPAIV)特征,基因组序列分析发现其8个基因片段与中国传统H5N1亚型禽流感病毒GS/GD/1/96(H5N1)存在较大差异,属于新的基因型——山西鸡型;抗原性分析结果表明其在抗原性方面与GS/GD/1/96同样存在较大变异,将其命名为"山西鸡型"抗原变异株;以106EID50.0.1 mL-1剂量将该病毒经鼻腔接种4周龄SPF鸭以评价其对水禽的感染能力,结果表明其不感染鸭;常规方法接种BALB/c小鼠以评价其对哺乳动物的感染和致病能力,结果表明其能感染小鼠,但不引起死亡,呈低致病力。说明该类型高致病性H5N1 HPAIV目前仅危害鸡,不具备感染水禽的能力,感染哺乳动物但不致死。该类型病毒的出现与流行为中国禽流感的免疫与防制提出新的课题。     

基于16S/18S rRNA/rDNA的分子技术在定量瘤胃微生物中的研究进展

瘤胃微生物是反刍动物与日粮间的纽带。用传统或经典的亨氏滚管法和最大似然法测定瘤胃内微生物总数的结果可能偏低。采用培养方法培养的已知菌种可能不完全适合或进入了未培养状态。由于缺少可行的方法,未知菌种从未培养过。由于任何一个细胞都含核糖体,rRNA/rDNA有进化守恒的特性,建立在16S/18S rRNA/rDNA的现代分子技术在不需要培养微生物的条件下,不仅能用于描述分子特性,而且能检测数量和提供用于预测自然进化关系的分类方法。基于不同的16S/18S rRNA/rDNA的守恒区能设计出通用、属、种甚至株特异性探针或引物,通过分子杂交能检测、量化细胞含量和测定细胞活性。杂交可得到某个序列或微生物的相对或绝对量。然而,杂交的灵敏度较低,它仅能检测出超过106个细菌/m l瘤胃液。竞争PCR和实时PCR已开发并用于检测瘤胃微生物,其灵敏度达到检测单个细菌。16S/18S rRNA/rDNA方法已成功用于瘤胃环境研究而且很快获得认可。但是基于16S/18S rRNA/rDNA的现代分子技术不能排斥经典传统微生物方法,但它将成为一项便利技术用于瘤胃微生物研究。     

蜜蜂蛹病病毒实验分析报告

应用差速离心和蔗糖密度梯度离心，从死亡的工蜂蛹中提取病毒，经电镜形态鉴定为大约２０ｎｍ直径的球形病毒。病毒核酸型为双链ＲＮＡ，ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测定病毒核酸为６组分，分子量别为０．９４４ｘ１０６、０．８６３ｘ１０６、０．８２５ｘ１０６、０．７５４ｘ１０６、０．７１３ｘ１０６、０．６７５ｘ１０６道尔顿，病毒蛋白外壳为１个组分，分子量为２５．８ｘ１０３道尔顿，沉降系数为５０．８Ｓ。研究结果确定，蜜蜂蛹病病毒（ＢＰＶ）为中国首次发现的一种蜜蜂病毒。     

麦饭石对意蜂王浆腺超微结构的影响

麦饭石是一种天然矿物质营养源。本试验研究了给意蜂饲喂麦饭石矿化水对王浆腺超微结构的影响，结果表明：实验组１８日龄工蜂王浆腺细胞粗面内质网、核糖体、核仁、储存泡及分泌颗粒都较发达，而对照组１８日龄工蜂王浆腺则已退化。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡饲料中地克珠利的含量

本试验建立了鸡饲料中地克珠利(DIC)含量检测的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。采用乙腈提取饲料中的药物,经硅胶固相萃取小柱净化后,超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)分析。整个色谱总时间为3.5 min。结果表明,在5、50、500μg/kg(仅配合饲料)和2000μg/kg(仅预混合饲料)的浓度添加水平下,饲料中地克珠利的回收率范围为90.28%～97.16%;日内变异系数范围为9.24%～14.10%,日间变异系数范围为9.73%～14.87%。以3倍信噪比为检测限,10倍信噪比为定量限,得出该方法的检测限为2.0μg/kg,定量限为5.0μg/kg。该方法操作简单,灵敏度、准确度和精密度均符合饲料中药物添加剂分析的技术要求,能够满足饲料中地克珠利的含量测定需求。     

mTOR对信号通路调控的研究进展

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路是最近新出现的细胞内重要信号途径,该途径在进化上高度保守,主要通过PI3K/Akt/mTOR信号通路磷酸化激活来调控细胞分裂、促进转录、信号翻译等,从而控制蛋白合成来调节细胞生长。mTOR作为一种重要的调节基因通过调节细胞周期、蛋白质合成、细胞能量代谢等多种途径发挥重要的生理功能,在细胞增殖、生长、分化过程中起着中心调控点的作用。     

Effects of dietary calcium to available phosphorus ratios on bone metabolism and osteoclast activity of the OPG /RANK/RANKL signalling pathway in piglets

Hydroxyapatite, a mineral form of calcium (Ca) and phosphorus (P) that gives bones their rigidity, is the major and essential component of bones and teeth in the human and animal body. A suitable ratio of Ca and P is vital for bone growth. The aim of this study was to explore the effects of dietary calcium to available phosphorus ratios (Ca/AP) on bone metabolism and osteoclast activity of the osteoprotegerin (OPG)/receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL) signalling pathway in piglets. At days 15 and 29, the piglets were assessed for growth performance, blood indicators, cytokines and the OPG/RANK/RANKL signalling pathway. Our results showed that piglets fed a dietary Ca/AP ratio of 2:1 increases growth performance and regulates blood indicators and cytokines (parathyroid hormone (PTH), calcitonin (CT), vitamin D₃ (VD₃)_, insulin‐like growth factor‐1 (IGF‐1), transforming growth factor‐β (TGF‐β), interleukin‐1 (IL‐1), interleukin‐6 (IL‐6), carboxyterminal propeptide of type I procollagen (PICP), tartrate‐resistant acid phosphatase (TRACP), alkaline phosphatase (ALP) and osteocalcin (OCN) content). We also demonstrated that this ratio affects hormone secretion and further bone metabolism through the OPG/RANK/RANKL signalling pathway of osteoclasts. These results indicate that a suitable dietary Ca/AP ratio is vital for bone growth and reduce the incidence of bone diseases such as osteoporosis, providing a practical basis for the raising of piglets.     

H9N2亚型禽流感病毒聚合酶基因的克隆及序列分析

采用RT—PCR方法对1株H9N2亚型禽流感病毒Ck／GS／2／99株RNA聚合酶基因PB2、PB1和PA分别进行了扩增，将其克隆到pGEM—Teasy载体后进行序列测定与分析。结果表明，该株病毒的PB2、PB1和PA基因开放阅读框（ORF）分别由2280、2274和2151个碱基组成，分别编码759、757和716个氨基酸。经同源性与系统发生树分析，该毒株RNA聚合酶基因PB2、PB1和PA与Ck／NX／4／99株的核苷酸和氨基酸同源性均在98％以上，另外这3个基因与Dk／HK／Y280／97、Sw／HK／9／98和Qu／HK／NT／28／99株的关系密切。     

液相色谱-串联质谱法检测乳及乳制品中双氰胺的研究进展

2013年1月,新西兰牛乳及乳制品中双氰胺的检出,引起了全世界广泛的关注.因此,乳制品中双氰胺的检测方法成为了关注的热点问题.本文主要综述了乳及乳制品中双氰胺的高效液相色谱-串联质谱(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)、超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)及超快速液相色谱-串联质谱(ultra fast liquid chromatography tandem mass spectrometry,UFLC-MS/MS)的检测方法,包括样品的提取和净化、色谱柱的选择、液相条件的优化、质谱检测方式以及基质效应.     

牛奶中四环素类药物残留的确证方法--液质联用法

为了确证牛奶中土霉素、四环素、金霉素的残留，建立了电喷雾高效液相色谱／串联质谱法，采用正离子检测，选择离子方式扫描。牛奶样品经Mcllvaine-EDTA缓冲溶液提取离心后，上清液过C18小柱净化后甲醇洗脱，然后氮气吹干，甲醇-水（30：70）溶解（以去甲金霉素为内标）后进行分析。结果表明，牛奶中土霉素、四环素和金霉素的检测限（LODs）为0．01mg／L，定量限（LOQs）为0．025mg／L。3种药物在0．05～0．5mg／L范围内均呈良好线性关系，并且3个添加浓度的平均回收率范围为70．0％～87．6％，批内变异系数不大于10％，以最大残留限量浓度添加后所测得回收率的批间变异系数小于15％。本方法特异性强、灵敏度高、准确可靠，可作为牛奶及其他动物组织中四环素类药物残留的确证方法。     

LwIP在嵌入式系统中的应用

本文以μC/OS–II为操作系统内核,利用开源TCP/IP协议栈LwIP,使其具有TCP/IP通信功能,并通过测试,实际应用效果良好。     

宁夏野生饲料植物资源信息库简介

本文简介了宁夏野生饲料植物资源信息库的建库目标、系统结构和功能。本库对宁夏野生饲料植物资源信息设计了方便的检索查询和编辑系统 ,并且利用Internet/Intranet技术实现资源信息的共享     

A/H1N1不同动物模型研究的比较

A/H1N1自2009年3月暴发以来,严重危害人类健康和生命。为探明其机制及研发防治措施,建立良好的动物模型是研究的重要基础。本文报道了A/H1N1流感动物模型研究进展,对流感动物模型的选择原则、疾病特征、造模方法、模型的临床特征、病理变化、病毒复制等方面进行归纳,比较了鸡模型、小鼠模型、猪模型和雪貂模型特点。A/H1N1流感动物模型有各自的优点和缺点,应根据不同的实验目的和实验条件选择合适的造模方法和和实验动物进行造模。