NDVLaSota、V4疫苗免疫鸡及免疫攻毒鸡的主要特异性血清抗体动态变化规律比较

本研究应用间接ELISA方法对新城疫LaSota和V4疫苗免疫SPF鸡及免疫后攻毒SPF鸡的血清中新城疫病毒（NDV）特异性HI抗体、IgM和IgG抗体水平的动态变化进行了检测。结果表明，V4较LaSota疫苗免疫鸡HI抗体提前3天左右出现，但除高峰期（1周左右）外，其HI抗体水平均低于LaSota免疫鸡。LaSota免疫鸡。LaSota疫羁免疫鸡血清中NDV特异性IgM和IgGr抗体高峰较V4免疫鸡提前约2周出现，攻毒后，LaSota免疫鸡血清中特异性IgG和IgG回忆应答显著，而V4免疫鸡IgM和IgG回忆应答不明显。     

鸡新城疫、禽流感（H9亚型）二联灭活疫苗的安全性和免疫效力试验

将鸡新城疫、禽流感(H9亚型,SY株)二联灭活疫苗分别以肌肉注射和皮下注射的方式单剂量、单剂量重复、超剂量分别接种28日龄SPF鸡和6月龄产蛋鸡进行安全性试验.同时,将不同剂量疫苗分别接种30日龄SPF鸡,接种后定期采血,分离血清测定HI抗体水平,并于免疫后1、2周从每组试验鸡中抽取10只攻击AIV SY株病毒.结果显示,疫苗以不同剂量接种试验鸡后未见任何不良反应,对产蛋鸡的生产性能基本无影响;试验鸡在免疫后2周即可产生较高水平的HI抗体,其中ND HI抗体几何平均值不低于1∶128,AI HI抗体几何平均值不低于1∶74,攻击AIV SY株病毒后病毒分离率为0,在免疫后20周其HI抗体仍在保护水平以上.表明鸡新城疫、禽流感(H9亚型,SY株)二联灭活疫苗安全性良好,免疫效果确实.     

新城疫CHR株与La Sota株2种疫苗近期免疫效力比较试验

鸡新城疫CHR 株冻干疫苗中试产品3 批以及La Sota 株冻干疫苗( 符合质量要求) , 以5 种免疫途径: 肌注、滴鼻、喷雾、饮水、拌料分别接种11 日龄雏鸡。每批疫苗每种途径接种1 组, 20 只/ 组, 共20 组。雏鸡群免疫前血凝抑制抗体(HI) 效价为1∶2-13 , 于14 d 、28 d 后再测HI抗体水平, 并分别用10 000 鸡胚半数致死量(ELD50) 新城疫标准强毒北京株攻击。从而检测2 种疫苗用5 种免疫途径免疫后在不同时间的近期免疫效力。结果表明, 近期内CHR 株疫苗HI抗体呈上升趋势, 而La Sota 株疫苗HI抗体先升高后下降; CHR 株疫苗以饮水和拌料途径效果较好, 其它3 种途径效果相似。接种后14 d 攻毒, 2 种疫苗均能较好保护强毒攻击; 28 d 后, CHR 株保护率高于La Sota 株。     

在田间条件下接种抗鸡新城病的年青肉鸡的免疫应答的实验室评价

用四个实验观察四种不同的新城疫田间接种程序的效能。全部试验用的年青肉鸡是从常规接种抗新城疫疫苗的种鸡群获得的。进行了下列的接种方案试验:1、在一天龄接种。2、在1天和20天龄接种。3、在七天龄接种及。4、在12天龄接种。在整个试验中,从六个鸡场的每个场随机挑选经商品苗接种的10只加10只未接种的对照鸡,这些鸡在接种前当天采血,并根据鸡的新城疫病毒(NDV)血凝抑制平均滴度分为二群,在接种的鸡的血清后。用鸡新城疫强毒攻击,以确定对本病的抵抗力,血清学和攻毒的资料表明,四种接种疫苗方案中的任何一个方案的大多数鸡产生中等水平的HI滴度,并能抵抗强毒攻击。然而最强的血清学应答以及对新城度强毒攻击的坚强抵抗见于初次接种时母源抗体水平低的鸡,和在20天龄时接受加强接种的鸡。     

鸡新城疫和产蛋下降综合征二联灭活氢氧化铝胶疫苗免疫研究

使用鸡新城疫病毒LaSota株和产蛋下降综合征病毒分离株HE03株制备鸡新城疫和产蛋下降综合征二联灭活氢氧化铝胶疫苗。把40只16周龄SPF蛋鸡分成A、B 组,分别是30只、10只。A组接种0.5 mL鸡新城疫和产蛋下降综合征二联灭活氢氧化铝胶疫苗,B组作为对照组,每隔14 d采集血清样本直到接种后第6周。至22周龄时,A组再次分成A1和A2两组。A2组与B组的鸡接受强致病性的产蛋下降综合征病毒攻击。结果表明,A组在不同时间采集的血清抗鸡产蛋下降综合征病毒的最高的抗体出现在接种后的第4周,抗鸡产蛋下降综合征病毒的HI抗体滴度从1∶128到1∶512不等,几何平均滴度（GMT）为1∶111;第4周时,抗鸡新城疫病毒的HI抗体滴度GMT为1∶134。该疫苗能保护鸡抵抗强致病性的产蛋下降综合征病毒和鸡新城疫病毒的感染,B组在攻毒感染后产蛋率显著下降,出现畸形蛋、软壳蛋和无壳蛋。     

悬浮培养和鸡胚尿囊液抗原制备的H9亚型禽流感疫苗免疫效力比较试验

为了探讨悬浮培养和鸡胚尿囊液培养得到的H9亚型禽流感病毒(AIV)抗原制备的疫苗的免疫效力,试验用3株H9亚型AIV株分别接种微载体悬浮培养的MDCK细胞制备3种悬浮培养的细胞疫苗抗原,以3株H9亚型AIV株接种10日龄SPF鸡胚制备3种鸡胚尿囊液抗原,测定6种抗原液HA效价和鸡胚半数感染量(EID50);分别使用6种抗原液制备灭活疫苗,免疫21日龄SPF鸡,并在免疫后第21天采血测定HI抗体水平,采血后进行攻毒并在攻毒后第5天进行病毒分离试验。结果表明:两种方式制备的AIV抗原HA效价为7~9 lb,鸡胚半数感染量为1×106.9~7.9EID50,疫苗免疫后第21天用同源毒株作为工作抗原测定的免疫鸡HI效价差异不大,用异源毒株测定时有一定差异;两种方法得到的抗原制备的疫苗均能获得很好攻毒保护。     

新城疫克隆—83疫苗对雏鸡的安全和免疫试验

新城疫克隆-83疫苗对3日龄易感雏鸡是安全的;对一周龄雏鸡的免疫效力明显地优于La Sota和B_1疫苗;免疫后七个半月的鸡,HI抗体效价仍持续在2~4以上,用强毒攻击可获100％保护;对不同日龄、品种和HI抗体水平的鸡群,用气雾、注射和滴鼻的方法进行小区域见疫试验证明该疫苗安全有效,同时也表明,克隆-83疫苗的毒力弱于La Sota疫苗,是一株较为理想的新城疫弱毒疫苗株。     

N_(79)型疫苗和法氏囊疫苗对雏鸡联合饮水免疫试验

本实验是用克隆化N_(70)型Lasota系新城疫弱毒疫苗简称N_(70)型疫苗)和法氏囊弱毒疫苗(简称IBD细胞苗),按一定配比对雏鸡联合饮水免疫。试验分4组:1组是N_(70)型疫苗和IBD细胞苗对14日龄雏鸡1次联合饮水免疫,间隔21天再用IBD细胞苗单独饮水1次,免疫后66天,免疫鸡HI抗体为2.2～3.8(Log_2),IBD琼扩试验4/5出现阳性;2组为N_(70)型疫苗和IBD细胞苗经二次联合饮水免疫,第一次在4日龄,然后间隔3周进行第二次联合免疫,免疫后61天HI抗体为2.2～6(Log_2),IBD琼扩9/10出现阳性;3组是N_(70)型疫苗和马立克疫苗对1日龄雏鸡联合免疫(皮下接种),间隔21天用N_(70)型疫苗和IBD细胞苗联合饮水免疫;4组为对照组仅于1日龄鸡注射马立克疫苗。试验进行二批,这二批试验鸡分别在80日龄和75日龄时,每组抽取10～12羽免疫鸡用新城疫强毒株攻击,结果保护均为100％;二周后再用法氏囊强毒株攻击,结果全部保护。试验表明,这两种疫苗同时免疫对新城疫免疫力没有明显影响,说明这两种疫苗联合饮水免疫是可行的。     

几种常用的家禽疫苗

1.鸡新城疫疫苗目前世界各国生产的鸡新城疫疫苗可分为如下五类:(1)鸡胚培养的缓发性活毒疫苗:这是最常用的新城疫疫苗类型。它是把缓发性的新城疫疫苗病毒(种毒)接种于鸡胚,经一定时间培养后制成的活毒疫苗。目前已广泛用于生产的这个类型的新城疫疫苗的毒株(也称品系)有 B_1、F 及 LaSota(我国分     

鸡新城疫病毒基因Ⅶ型和LaSota株灭活疫苗免疫保护效力观察

新城疫是危害我国养禽业的重要疫病之一,新城疫病毒(NDV)流行毒株有多种基因型,其中基因Ⅶ型毒株流行较为普遍。本研究利用流行病学调查中筛选出的NDV LY1分离株(基因Ⅶ型)和传统的LaSota株(基因Ⅱ型)与油佐剂按1∶3比例混合乳化,分别制成油包水型LY1、LY1+LaSota和LaSota油乳剂灭活苗。免疫试验结果显示,LY1灭活疫苗组HI抗体效价较低,LY1+LaSota疫苗组HI抗体水平稍高于商品化LaSota疫苗组(P>0.05),抗体产生规律相似;利用LY1分离株攻击,LY1+LaSota株组免疫保护率达100%,明显高于LY1分离株灭活疫苗组及商品化灭活疫苗组。本试验为新城疫新的疫苗研究开发奠定了基础。     

H9N2亚型禽流感灭活疫苗的免疫效果评价

为充分了解10多年来在生产中普遍使用的H9N2亚型禽流感(AI)灭活疫苗(F株)对鸡群的免疫保护效果,本研究以F株灭活疫苗分别接种SPF鸡和罗曼鸡,通过检测其抗体水平,分析比较抗体消长规律;同时以2009～2010年间从免疫鸡群中分离到的9株H9N2亚型AIV为素材,通过F株灭活苗免疫攻击试验,来评价该疫苗对上述9株分离株体内感染的免疫保护效果。结果显示:F株灭活疫苗免疫SPF鸡和罗曼鸡3周后,产生的HI抗体效价均在7log2以上,且持续时间长,SPF鸡达15周,罗曼鸡在11周以上。SPF鸡免疫群用F9株、L9株、S9株和D9株和F株攻击7d后,对鸡的咽喉和泄殖腔排毒有100%的抑制作用,用其它5株(F119、W9、YD、M和D119)攻击后的抑制作用为90%;罗曼鸡免疫群用L9株、F9株、S9株、D9株、W9株和F株攻击7d后,对鸡咽喉和泄殖腔排毒有100%的抑制作用,用其它4株(F119株、YD株、M株和D119株)攻击后的抑制作用为90%;未接种疫苗的对照组鸡攻击7d后排毒率均为10/10。     

ND—EDS76二联油乳剂灭活疫苗的研制

以鸡新城疫LaSota株、EDS76京911株为抗原研制了鸡新城疫减蛋综合征二联油乳剂灭活疫苗。并对其物理性状、安全性、免疫效力、保存期及抗体消长规律进行了检测。结果表明，试验鸡疫苗在免疫后6个月内对新城疫和减蛋综合征两种病毒攻击均获全部保护。疫苗4℃保存15个月，其免疫效力没有下降。     

不同禽源的禽Ⅰ型副黏病毒株毒力、免疫原性及抗原相关性研究

从病死的鸡、鹅、鸽中分离到3株禽I型副黏病毒(CPMV、GPMV、PPMV)。毒力测定结果显示,CPMV、GPMV的毒力与鸡新城疫病毒(NDV)F48E9株的毒力相似,为强毒型;PPMV的毒力与鸡NDVLaSota株的毒力相似,为自然弱毒株。对该分离株F基因裂解位点的序列分析结果表明,CPMV、GPMVF裂解位点氨基酸序列为112K-R-Q-K-R-F117,符合强毒株的序列特征;PPMV F裂解位点氨基酸序列为112G-R-Q-G-R-L117,属于弱毒株的特征性序列。将该3株病毒制成灭活疫苗,分别免疫鸡,结果都能诱导鸡体产生较高水平的HI抗体;再分别以CPMV、GPMV攻击免疫鸡群,结果显示免疫鸡群可得到保护,而非免疫鸡群被攻击后全部致死。用HI方法检测3株病毒与Lasota株之间的交叉血凝抑制试验,结果表明LaSota与GPMV两毒株间的抗原性无明显差异,LaSota与CPMV、PPMV两毒株间的抗原性有较小的差异。本研究将有助于进一步开展禽Ⅰ型副黏病毒的致病机制和新型疫苗等方面的研究。     

B亚群禽白血病病毒对鸡新城疫疫苗免疫效力的影响

为研究B亚群禽白血病病毒(ALV-B)对新城疫疫苗免疫效力的影响,将50只SPF鸡随机分为2组,试验组鸡接种ALV-B,对照组鸡注射等量生理盐水,7 d后2组全部滴鼻免疫新城疫病毒(NDV)LaSota疫苗,试验期8周。结果显示,与对照组相比,当试验组的鸡感染ALV-B后,再免疫LaSota疫苗时,NDV抗体水平、IFN-γ和IL-2浓度以及外周血CD4⁺和CD8⁺的T淋巴细胞百分比均显著降低(P<0.05)。试验组鸡的肝脏、脾脏、法氏囊均发生肿瘤性组织学病变,其中肝脏超微组织学病变中可同时见到ALV-B和LaSota病毒。综合上述研究证明ALV-B可显著降低LaSota疫苗的免疫应答效果,两种病毒有共感染的现象。     

两种禽流感H5N1亚型Re-5株灭活疫苗免疫效果的比较

为了解湖南省招标的两种禽流感H5N1亚型Re-5株疫苗免疫家禽后抗体消长规律,研究探讨禽流感疫苗合理使用的免疫程序,以期为今后有效指导禽流感防控实践提供科学依据,对鸡和鸭分别做了免疫试验.试验结果显示,两种禽流感灭活疫苗均能诱导机体产生良好的免疫应答,但在一次免疫的情况下,鸡产生的HI抗体滴度要比鸭的高,鸡的HI抗体滴...     

新城疫疫苗对SPF鸡和商业肉鸡的免疫学效力分析

将不同新城疫病毒疫苗免疫SPF鸡和商业用肉鸡,对免疫后抗体水平变化和对野毒株攻击的保护率进行了监测。利用Clone30、F48E8和NXF3单联苗和联苗免疫过的SPF和商业肉鸡,对105EID50两次攻毒保护率均为100%;而只用LaSota疫苗免疫的SPF鸡保护率为40%。试验数据表明,分离株NXF3具有较好的免疫原性和对强毒攻击的保护,可以作为候选疫苗用于商业肉鸡。     

禽脑脊髓炎油佐剂灭活疫苗免疫效果观察

将感染了ＡＥＶ－ＶａｎＲｏｃｋｅｌ株的ＳＰＦ全胚磨制的乳剂离心分离,取上清液制成抗原含量不同的两种灭活疫苗。将两种疫苗各接种３月龄的ＳＰＦ鸡,未见接种鸡出现症状。４周后以强毒ＡＥＶ攻击,所有疫苗接种鸡皆被保护,组织学检查进一步证明了疫苗的效力。抗原含量较高的疫苗引起的保护力更好,作者认为攻击时经过脑内接种更适合于临床评价疫苗效力。     

鸡传染性法氏囊病病毒的免疫原性

研究了传染性法氏囊病病毒(IBDV)的交叉保护特性。这些病毒代表血清1型的不同亚型,包括最近分离到的毒株(变异株),和血清2型病毒。用含有10~5、10~6、10~7或10~8TCID_(50)的已知病毒的灭活苗接种3周龄鸡,2周后以10~2或10~(3·5)EID_(50)的标准毒株或血清1型变异株攻击。攻毒后5天和10天根据眼观和组织学损伤、体重及法氏囊/体重比估价保护作用。血清2型病毒不能保护鸡抵抗血清1型病毒的攻击。低剂量的变异株疫苗能保护鸡抵抗高剂量或低剂量标准毒株或变异毒株的攻击。低剂量标准毒株或变异株疫苗能保护鸡抵抗高剂量或低剂量标准毒株的攻击。高剂量的任何一种标准毒株疫苗均可保护鸡抵抗低剂量(10~2EID_(50))变异株的攻击,但不能抵抗高剂量(10~(3·5)EID_(50))变异株的攻击。标准株疫苗赋予抗变异株保护力的最低剂量依毒株不同而异。结果表明,保护作用依赖于疫苗和攻毒的毒株和剂量,而且变异株和标准株拥有共同的保护性抗原。     

H5N1亚型禽流感变异株灭活疫苗种毒Re-4株的生物学特性及免疫原性研究

本实验对经反向遗传方法构建的重组禽流感H5N1亚型变异株灭活疫苗种毒Re-4株的生物学特性及免疫效力进行研究.将Re-4株接种SPF鸡胚后37℃培养72 h,鸡胚存活,无病变,HA滴度达29;以0.1 mL(106.0EID50/0.1 mE)的剂量鼻腔感染4周龄SPF鸡7 d后血清HI抗体转阳,无任何症状,也不排毒;SPF鸡静脉致病指数(IVPI)为0;以Re-4重组株为种毒制备灭活疫苗,免疫SPF鸡后,3周后平均HI抗体效价达8.75 log2:免疫鸡对亲本强毒株CKSX/06,以及变异株CKNX/06和流行株GSGD/96攻击提供完全保护.以上结果表明变异株灭活疫苗种毒Re-4株对SPF鸡胚和SPF鸡无致病性、适合鸡胚增殖、抗原针对性强,并且以该毒株制备的灭活疫苗具有良好的免疫效力,是研制预防H5N1亚型禽流感病毒山西变异株的理想疫苗种毒株.     

鸡胚母源抗体对鸡新城疫病毒增殖影响的研究

试验用SPF鸡胚和普通鸡胚分别测定鸡新城疫LaSota两种不同毒株的EID50:LaSota株Ⅰ在SPF鸡胚的EID50为10-7.75,普通鸡胚的EID50为10-7.25;LaSota株Ⅱ在SPF鸡胚的EID50为10-4.75,普通鸡胚的EID50为10-4.25。两种不同LaSota毒株在SPF鸡胚中的毒力普遍比在普通鸡胚中的毒力强,说明鸡胚母源抗体能影响鸡新城疫病毒的增殖,进而指导疫苗的生产。试验用SPF鸡胚和普通鸡胚分别测定鸡新城疫LaSota两种不同毒株的EID50:LaSota株Ⅰ在SPF鸡胚的EID50为10-7.75,普通鸡胚的EID50为10-7.25;LaSota株Ⅱ在SPF鸡胚的EID50为10-4.75,普通鸡胚的EID50为10-4.25。两种不同LaSota毒株在SPF鸡胚中的毒力普遍比在普通鸡胚中的毒力强,说明鸡胚母源抗体能影响鸡新城疫病毒的增殖,进而指导疫苗的生产。