三肽囊素对环磷酰胺诱导的鸡红细胞免疫功能低下的阻断作用

本文研究了三肽囊素对环磷酰胺诱导的墟岗黄鸡红细胞免疫功能的抑制模型的影响。180只一日龄墟岗黄母鸡随机分成对照组,三肽囊素组,三肽囊素 环磷酰胺组,环磷酰胺组四个组,三肽囊素组和环磷酰胺 三肽囊素组每只鸡肌注0.01mg/kg剂量的三肽囊素;环磷酰胺组和环磷酰胺 三肽囊素组每只鸡肌注40mg/kg剂量的环磷酰胺,对照组鸡注射等量的生理盐水。结果表明,14日龄和35日龄时各试验组鸡的红细胞总数没有显著差异,而在56日龄时,环磷酰胺组显著低于其它三组(P<0.05);从14日龄开始,环磷酰胺纽的RBC-C3bR花环率显著低于其它三组,而环磷酰胺组的RBC-IC花环率显著高于其它三组,并持续到实验结束。结果提示,三肽囊素可阻断由环磷酰胺诱导的鸡红细胞免疫功能低下。     

重组鸡IL-2的抗球虫作用

鸡白细胞介素2(Ch IL-2)是一种重要的细胞因子,对Ch IL-2的抗球虫作用做了初步研究,分别在14日龄和21日龄给实验雏鸡胸部肌肉注射不同剂量的重组Ch IL-2蛋白,28日龄口服接种1×105个活球虫卵囊,结果表明,重组Ch IL-2蛋白能降低相对卵囊产量、减少盲肠病变、提高相对增重。其中以注射250μg重组Ch IL-2蛋白的试验组抗球虫效果最好,相对卵囊产量为23.26%,盲肠病变记分分别为0.4,相对增重率为97.80%,综合抗球虫指数(AC I)达到192.8。抗球虫效果良好,明显的优于其他试验组。     

中药对围产期奶牛血浆IL-2、IL-6含量的影响

为探讨中药对围产期奶牛血浆IL-2、IL-6含量的影响,本试验选择90头年龄、胎次和预产期相近,经临床检查健康的围产期荷斯坦奶牛,随机分成A、B、C三组,每组30头。A组,于预产期15天饲喂时添加中药加味四君子散(400 g/头),每天1次,连用5 d,分娩后当天灌服益母生化散2剂(400 g/头);B组,产前不添加中药,分娩后当天灌服益母生化散2剂(400 g/头);C组为对照组,产前不添加中药,产后灌服常用水2次,每次400 mL/头。在预产期15 d、7 d,产后0 d(分娩当天灌服益母生化散前计为0 d)、7 d和15 d时,在各组随机抽取10头奶牛颈静脉采血,测定血浆IL-2、IL-6的含量。试验结果显示,A组奶牛血浆IL-2含量明显高于B组、C组(P0.05或P0.01);血浆IL-6含量A组在产前7 d时低于B组、C组,差异显著(P0.05),而产后0 d、7 d、15 d,A组高于B组、C组,差异显著(P0.05)。     

芪蓝四君子汤对雏鸡小肠IL-2和IFN-γ mRNA表达的影响

为了研究芪蓝四君子汤对雏鸡小肠IL-2和IFN-γ mRNA表达的影响,选用90只1日龄雏鸡,随机分成5组:Ⅰ-Ⅳ组用新城疫LaSota系冻干苗进行口腔免疫,Ⅰ-Ⅲ组在免疫的同时,分别按0.125 g/mL、0.25 g/mL、0.5 g/mL 3个浓度灌服芪蓝四君子汤1 mL,连续灌服10 d。Ⅳ组和Ⅴ组灌服等量生理盐水。各组分别于20、40、60日龄时各宰杀6只,取小肠(空肠段),用半定量RT-PCR方法检测空肠中IL-2和IFN-γ的mRNA表达变化。结果表明,芪蓝四君子汤能显著促进雏鸡空肠中IL-2和IFN-γ mRNA的表达,诱导机体产生Th1免疫反应,进而增强机体局部的细胞免疫水平。     

急性冷暴露对仔猪PBMC中HSP70和血浆抗炎性细胞因子IL-4、IL-10的影响

为了探讨急性冷应激对仔猪免疫系统的影响,将18头45日龄"约克夏"仔猪随机分成常温对照组、冷暴露组和冷暴露并糖皮质激素受体阻断组.常温组在18～20℃下、冷暴露各组在4～8℃环境下分栏饲养.冷暴露时间持续12 h,在冷暴露开始后分6个时间点采血并分离血浆和外周血单个核细胞(PBMC),分别使用Western-blotting法测定淋巴细胞中HSP70的表达量;双抗体夹心ELISA法检测血浆中IL-4和IL-10水平.结果显示:冷暴露组IL-4和IL-10水平在冷暴露6、9 h时比开始前有显著升高(P<0.01),且IL-4与IL-10呈强相关(r=0.990 1);糖皮质激素受体阻断组IL-4水平在冷暴露1h时显著升高(P<0.01),IL-10在6 h时有显著升高(P<0.01),IL-4与IL-10呈强相关(r=0.873 1);冷暴露各组HSP70在冷暴露1、3、6、9、12 h时均显著升高(P<0.01),HSP70与IL-4/IL-10呈弱相关.本试验显示,急性冷暴露能使IL-4、IL-10和HSP70的表达增强,且阻断糖皮质激素对它们之间的相关性有一定影响.     

三肽囊素对环磷酰胺诱导的免疫器官细胞凋亡的影响

研究了三肽囊素对环磷酰胺诱导的鸡免疫抑制模型中免疫器官细胞凋亡的影响。将180只1日龄粤黄鸡随机分成环磷酰胺组、正常对照组、三肽囊素组以及三肽囊素 环磷酰胺组。利用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dTUP缺口末端标记法(TUNEL)，对不同组鸡的免疫器官细胞凋亡进行计数。结果发现，环磷酰胺组细胞凋亡数比对照组明显增多(P＜0．05)，而三肽囊素 环磷酰胺组细胞凋亡数显著少于环磷酰胺组(P＜O．05)；三肽囊素组的细胞凋亡数比环磷酰胺组少，且差异显著(P＜0．05)。由此可知，三肽囊素对环磷酰胺所诱导的细胞凋亡具有抑制作用。     

紫锥菊对传染性法氏囊疫苗免疫效果的影响

为了探讨紫锥菊作为免疫增强剂的免疫效果和机理,本试验用1日龄的罗斯308肉鸡作为试验材料并用传染性法氏囊疫苗进行免疫。紫锥菊提取物分3种剂量组(A组0.1 mL/只、B组0.5 mL/只、C组1 mL/只)在6日龄开始连续给雏鸡口服7 d,在13,20,27,34,41日龄采血检测外周血中法氏囊病毒抗体,同时测定外周血中IL-2和TNF-α的含量,计算肉鸡的生产性能。结果表明,紫锥菊提取物能明显提高鸡外周血中法氏囊病毒抗体滴度,以及细胞因子IL-2和TNF-α含量,并能改善肉鸡的生产性能。所用3个剂量组中,以B组的0.5 mL/只为最佳的用药剂量。说明紫锥菊提取物具有明显的免疫促进作用。     

冬、夏季室内外饲养对鸡IL-1、TNF-α含量的影响

为探讨不同季节室内外饲养对鸡IL-1、TNF-α含量的影响,在夏、冬季对35日龄黑脚麻鸡进行室内平养和室外放养,49、63、77、91日龄时用ELISA法测定鸡血清中IL-1、TNF-α含量。结果:(1)夏季49、77、91日龄,室内平养组IL-1、TNF-α含量均低于室外放养组;冬季试验除49日龄外,室内平养组IL-1含量均显著高于室外放养组(P0.05)。(2)两季节比较,49、63、77日龄时冬季室外放养组IL-1含量高于夏季放养组(P0.05);冬季室内平养组除49日龄外,IL-1含量均显著高于夏季平养组(P0.05)。TNF-α含量上,冬季室外放养组除91日龄外,均显著高于夏季放养组(P0.05);冬季室内平养组TNF-α含量也均显著高于夏季平养组(P0.05)。结论:夏季室外放养可提高鸡IL-1、TNF-α含量;冬季室内平养可提高鸡IL-1、TNF-α的含量。贵州冬季产生的冷应激可提高鸡血清IL-1、TNF-α的含量。     

三肽囊素对猪瘟和猪蓝耳病疫苗免疫效果的影响

为提高猪瘟和猪蓝耳病疫苗的免疫效果,试验通过口服、注射两种方式,研究了三肽囊素对猪瘟和猪蓝耳病疫苗免疫效果的影响.结果表明:口服和注射一定剂量的三肽囊素均可提高猪瘟和猪蓝耳病疫苗抗体水平和阳性率,且效果与三肽囊素剂量有关.在提高猪瘟疫苗免疫效果方面,注射1μg/kg剂量的三肽囊素效果较好,口服30μg/kg剂量组效果最...     

PRRSV特异性肽N对PRRS免疫猪IL-12分泌的影响

选取体质量相同、雌雄各半、生长环境相同的乳猪26头,通过检测筛选出猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)、圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病毒(PRV)阴性仔猪15头。对这些猪正常免疫PRRSV疫苗,特定时间分离外周血淋巴细胞进行培养,用PRRSV特异性肽N进行刺激,采用ELISA方法测定不同时间点淋巴细胞分泌IL-12的水平。结果显示:PRRSV免疫确切(经ELISA抗体检测呈阳性)14d时淋巴细胞用PRRSV-N-1肽刺激前期能够抑制IL-12的分泌,PRRSV免疫确切(经ELISA抗体检测呈阳性)28d时淋巴细胞用PRRSV-N-1肽能刺激IL-12的分泌量增加。表明淋巴细胞经PRRSV-N-1肽刺激后其IL-12的分泌量会受PRRSV抗体水平的影响,在抗体水平较高时促进淋巴细胞对IL-12的分泌。猪只在PRRSV免疫确切时(经ELISA抗体检测呈阳性),淋巴细胞经PRRSV-N-2肽刺激的时间点越往后其IL-12的分泌量会降低,随着时间的推移受抑制。可以得出PRRSV特异性肽N可以调节外周血淋巴细胞对IL-12的分泌,临床上可以使用PRRSV特异性肽N来增强对PRRSV的抵抗力,但其影响机制还有待研究。     

葛根素对不同日龄小鼠血清激素含量的影响

为了阐明葛根素对小鼠血清中孕酮(P)、雌二醇(E2)含量的动态变化的影响,试验将240只21日龄小鼠分为对照组、葛根素低剂量组、葛根素中剂量组和葛根素高剂量组,每组60只,适应性饲养1周后隔1 d给药1次,其中对照组给予纯化水0.2 mL,葛根素低、中、高剂量组分别给予0.5,1.0,1.5 mg/mL葛根素溶液0.2 mL,在第40,46,52,58,64,70日龄时各组取10只小鼠眼静脉采血,运用放射免疫分析法检测血清中孕酮、雌二醇含量。结果表明:各剂量葛根素溶液对不同日龄小鼠血清中孕酮含量均无显著影响。低剂量葛根素在小鼠70日龄时能显著提高雌二醇含量;中剂量葛根素在52日龄开始显著提高小鼠血清中雌二醇含量,64日龄时有所下降,70日龄时再次显著提高;高剂量葛根素对各日龄小鼠血清中雌二醇含量均无显著影响。     

中药复合小肽对肉鸡免疫功能的影响

旨在探索中药复合小肽(CMCSP)对于肉鸡免疫功能的影响。选取1日龄爱拔益佳(AA)肉鸡450只,随机分为6,组C组(饲喂基础日粮)、D组(每1 t饲料添加250 g CMCSP)、Z组(每1 t饲料添加500 g CMCSP)、G组(每1 t饲料添加750 g CMCSP)、S组(每1 t饲料添加100 g微生态制剂)、M组(每1 t饲料添加100 g酶制剂),每组肉鸡分为5笼饲养,每笼15只。于1、7、14、21、28、35、42日龄检测血清中禽流感病毒、新城疫病毒抗体水平。于21、42日龄测定肉鸡的器官指数、血清中免疫球蛋白和细胞因子含量。结果显示,D组法氏囊指数、7、28日龄禽流感病毒抗体滴度、7、28、35日龄新城疫病毒抗体滴度、21日龄IgA、IFN-γ、IL-2含量显著升高(P0.05或P0.01);每1 t饲料添加500 g CMCSP能显著提高雏鸡法氏囊指数、28日龄禽流感病毒抗体滴度、42日龄新城疫病毒抗体滴度、21日龄IgA、IgM、IFN-γ、IL-2和42日龄IL-2含量(P0.05或P0.01);每1 t饲料添加750 g CMCSP能显著提高雏鸡法氏囊指数、7、21、28日龄禽流感病毒抗体滴度、14、21、28日龄新城疫病毒抗体滴度、21日龄IgA、IFN-γ和IL-2含量(P0.05或P0.01)。研究结果表明中药复合小肽能够增强肉鸡的体液免疫和细胞免疫功能,其中高剂量中药复合小肽上调肉鸡免疫器官指数和抗体水平的效果最好,中剂量中药复合小肽对免疫球蛋白的上调作用最佳,复合小肽低、中剂量组对于IL-2和IFN-γ的提升效果好。     

囊素对鸡传染性法氏囊病弱毒苗免疫的影响

为了研究囊素对鸡传染性法氏囊弱毒苗免疫效果的影响,将囊素按不同剂量与法氏囊弱毒苗混合滴鼻接种雏鸡。对接种后7,14,21和51日龄的鸡进行抗体琼扩效价检测、抗体转阳率检测和囊指数测定。结果显示：中等剂量（10μg／羽）囊素添加的鸡传染性法氏囊弱毒疫苗组抗体效价产生和持续时间高于其他剂量组和疫苗对照组（低毒力）,囊指数值也高于其他组;鸡传染性法氏囊弱毒疫苗（中等毒力）接种试验鸡,能长时间维持较高抗体,但对鸡的法氏囊损伤较大。试验证明,适当剂量的囊素对鸡传染性法氏囊弱毒疫苗具有免疫增强作用和减少法氏囊损伤作用。     

E.tenella河北株重组IL-2-EtMIC-2 DNA疫苗的构建及保护力分析

为了构建E.tenella河北株重组IL-2-EtMIC-2DNA疫苗,并确定其抗球虫效力。采用RT-PCR方法分别克隆出鸡IL-2和E.tenella河北株EtMIC-2基因,并连接到pMD18-T载体上进行测序;将目的基因克隆到pcDNA3.0载体,构建重组质粒pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2,并转染293T细胞,用Western blot方法验证表达。将构建的重组IL-2-EtMIC-2DNA疫苗以50,100,150μg/只的剂量分别在14,21日龄胸肌注射免疫试验鸡,除阴性对照组外,28日龄时经口灌服孢子化E.tenella卵囊4×10~4个,研究其对E.tenella感染后的免疫保护效果。结果表明:成功构建了重组质粒pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2,且能在293T细胞中表达出融合蛋白;3个免疫组的ACI比阳性对照组分别提高了97.63%,127.02%和129.81%,其中免疫剂量为100,150μg时,ACI均达160以上,具有良好的免疫保护效果。     

囊素对鸡传染性法氏囊病弱毒苗免疫的影响

为了研究囊素对鸡传染性法氏囊弱毒苗免疫效果的影响,将囊素按不同剂量与法氏囊弱毒苗混合滴鼻接种雏鸡。对接种后7,14,21和51日龄的鸡进行抗体琼扩效价检测、抗体转阳率检测和囊指数测定。结果显示:中等剂量(10μg/羽)囊素添加的鸡传染性法氏囊弱毒疫苗组抗体效价产生和持续时间高于其他剂量组和疫苗对照组(低毒力),囊指数值也高于其他组;鸡传染性法氏囊弱毒疫苗(中等毒力)接种试验鸡,能长时间维持较高抗体,但对鸡的法氏囊损伤较大。试验证明,适当剂量的囊素对鸡传染性法氏囊弱毒疫苗具有免疫增强作用和减少法氏囊损伤作用。     

太子参多糖对环磷酰胺所致肠道黏膜损伤小鼠SIgA、IL-2、IL-6含量的影响

试验将36只18~22 g雄性昆明小鼠随机分为空白对照组、太子参多糖对照组(400 mg/kg体重)、环磷酰胺(CY)模型组、太子参多糖低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg体重),上述各组分别灌喂蒸馏水和多糖,连续灌胃19 d,第20天,除空白对照组和太子参多糖对照组小鼠腹腔注射生理盐水外,其余4组均腹腔注射CY(100 mg/kg体重),24 h处死小鼠,取十二指肠和回肠,放免法测定分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)的含量,研究太子参多糖对CY所致肠道黏膜损伤小鼠中SIgA、IL-2、IL-6分泌的影响。结果显示,与CY模型组相比,太子参多糖高、中剂量组十二指肠SIgA含量显著升高(P<0.05),太子参多糖高剂量组回肠SIgA含量极显著升高(P<0.01);太子参多糖高剂量组中十二指肠和回肠IL-2含量显著升高(P<0.05),十二指肠IL-6含量极显著升高(P<0.01),回肠IL-6含量显著升高(P<0.05)。上述结果表明太子参多糖在一定程度上能颉颃CY所致的肠道黏膜免疫损伤。     

抗菌肽Cecropin AD抗肉鸡柔嫩艾美耳球虫效果的研究

180只16日龄粤黄公鸡,随机分为6组（无球虫组NO、无敌球素组ND、敌球素组D、低剂量抗菌肽组CAD900、中剂量抗茵肽组CAD4500和高剂量抗菌肽组CAD9000）,每组3个重复,每重复（栏）10只。D组饲喂含敌球素（Deccox）的饲粮,而其它5组饲喂不合敌球素的基础饲粮;CAD900、CAD4500和CAD9000等3组分别经饮水喂给抗茵肽Cecropin AD（每日摄入剂量分别为900、4500和9000u／kg体重）。在各组饲喂对应试验饲粮1天后,分别对ND、D、CAD900、CAD4500和CAD9000等5组鸡接种柔嫩艾美耳球虫（E．tenella）卵囊（5万／鸡）,并在接种球虫后的第5天观察各组血粪情况,第6天剖检观察盲肠病变情况,第7天计粪便卵囊数,第10天称体重。试验结果表明,Cecropin AD可降低接种柔嫩艾美耳球虫肉鸡的死亡率、盲肠病变值和粪便卵囊数,对肉鸡具有一定的保护作用。     

抗三肽囊素单克隆抗体的制备

为研制抗三肽囊素(bursin,KHG-NH₂)的单克隆抗体,本试验采用EDC法将三肽囊素分子赖氨酰(K)上的氨基与载体蛋白(BSA或OVA)定向偶联,分别制备三肽囊素免疫抗原(BSA-KHG-NH₂)和检测抗原(OVA-KHG-NH₂)。以BSA-KHG-NH₂免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术,筛选到18株能稳定分泌抗三肽囊素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。这18株单克隆抗体与三肽囊素人工抗原的结合均能被三肽囊素、GKHG-NH₂四肽阻断,但不能被KHGK四肽阻断,表明18株单抗与三肽囊素分子的结合具有高度特异性。以本研究制备的单抗2D2建立间接竞争ELISA方法,检测三肽囊素含量,检测下限为4 ng/mL,线性范围为4~500 ng/mL,加标检测回收率为85.0%~92.4%。     

11株巨型艾美耳球虫繁殖力的比较研究

用巨型艾美耳球虫扬州株、南通株、连云港株、苏州株、凤阳株、青岛株、福州株、龙岩株、广州株、上海株和美国株孢子化卵囊100个/只或10 000 个/只,经嗉囔接种7 日龄或21 日龄无球虫黄羽肉公雏,以麦克马斯特法对感染后第6 天至第14 天间每天24 h排出的卵囊计数并进行统计分析。结果表明,各虫株的排卵囊量有差异,100个/只卵囊感染7日龄雏鸡时,广州株和凤阳株排卵囊量最多,上海株和苏州株排卵囊量最少;100个/只卵囊感染21 日龄雏鸡时,扬州株排卵囊量最多,上海株排卵囊量最少;10 000 个/只卵囊感染21 日龄雏鸡时,苏州株排卵囊量最多,连云港株和扬州株的排卵囊量最少;排卵囊量随着感染剂量的增加或鸡日龄的增大而增多;在同一感染剂量时,福州株和连云港株增加最多,上海株和苏州株增加最少;在同一感染鸡日龄时,苏州株和上海株增加最多,南通株和扬州株增加最少;各虫株的排卵囊规律极相似,在感染后第7 天排卵囊量达峰值,第8 天、第9 天排出的卵囊量显著减少,第10天排出的卵囊量仅占总量的2%,第14天接近于0%;第6天至第8天排出的卵囊量占总量的87%~99%。     

热应激后猪血清中IL-2、IFN-γ及TNF-α水平的动态变化

检测热应激后猪血清中的IL-2、IFN-γ及TNF-α水平,观察其变化规律.将12头体重基本一致的3月龄中国试验用小型猪随机分成高温试验组和常温对照组两组.高温试验组在人工气候仓内饲养,模拟夏季炎热气候,气温从26～39℃24 h循环变温,39℃时维持4 h;常温对照组在22℃下饲养.试验持续10 d,在热应激的第1、3、5、7、9天,39℃高温持续期结束的时刻采血,分离血清.用ELISA法检测各血清样品中IL-2、IFN-γ及TNF-α水平.结果显示：IL-2水平有所上升,且在热应激的第1天和第3天与常温对照组差异显著（P＜0.05）;IFN-γ水平有所下降,且在热应激的第3天和第5天与常温对照组差异显著（P＜0.05）;TNF-α水平有所上升,但与常温组比较差异不显著（P＞0.05）;热应激试验进行的10 d中,IL-2、IFN-γ及TNF-α水平变化有其共同特点,即随着试验的进行各细胞因子浓度都向常温对照组的正常值发展.本研究从细胞因子的角度验证了前人热应激抑制机体免疫机能的结论.