芽孢杆菌类生物杀菌剂的研发与应用

本文概述了芽孢杆菌防治植物病害的机理,包括营养和空间位点竞争、分泌抗菌物质、溶菌作用、诱导植物抗病性。简述了国内外芽孢杆菌类生物杀菌剂的研发现状,分析了生防芽孢杆菌在农业生产应用中存在的问题,并提出了相应的对策。最后展望生防芽孢杆菌类杀菌剂由于能够有效控制植物病害,同时具有对人畜安全、环境相容性好、植物病原菌不易产生抗性、生产成本相对比较低廉等优点,必将在现代农业中有广阔的应用前景,并产生巨大的经济、社会和生态效益。     

枯草芽孢杆菌在稻瘟病控害中的应用

枯草芽孢杆菌作为一种有益生物防治菌越来越引起人们的普遍关注,国内外对其研究日益增多。综述枯草芽孢杆菌在防治稻瘟病中的研究进展和控病作用机制,包括蛋白类抗菌物质和脂肽类抗生素两类物质对稻瘟病病菌的抑制作用。简要介绍枯草芽孢杆菌及其制剂在防治稻瘟病中的应用情况、存在问题和发展前景。     

三种生防芽孢杆菌对5种烟田常用化合物的敏感性

芽孢杆菌是植物病害生物防治中重要的生防细菌。采用浊度测定法研究了生防细菌——枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌及多粘芽孢杆菌对烤烟专用复合肥[m(N)∶m(P2O5)∶m(K2O)=10∶10∶25]、生石灰、甲霜灵、代森锰锌及硫酸链霉素5种烟草生产上常用化学品的敏感性。结果表明:甲霜灵对3种芽孢杆菌的生长无影响,而烤烟专用复合肥和生石灰对3种生防细菌均有一定的促生长作用;而代森锰锌和硫酸链霉素能显著抑制枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌和多粘芽孢杆菌的生长,其EC50值分别为14.15、11.88、11.30μg/mL和5.20、5.69和2.64μg/mL。     

紫茎泽兰对石榴枯萎病菌和枯草芽孢杆菌生长的影响

在室内条件下,利用20%的MS营养液（MS0.2）和灭菌蒸馏水培养的紫茎泽兰根系分泌物对石榴枯萎病和生防细菌枯草芽孢杆菌生长进行测定。结果表明,2种方式培养的紫茎泽兰根系分泌物均不能有效抑制枯萎病菌的生长,但对枯草芽孢杆菌的生长具有极强的促进作用。其中30%MS0.2对枯草芽孢杆菌的促进率达29.85%,而40%蒸馏水的促进率可达87.46%。恢复石榴园紫茎泽兰可能提高利用生防细菌枯草芽孢杆菌防治石榴枯萎病的效果。     

生防枯草芽孢杆菌L1特性的初步研究

通过对峙培养,测定出枯草芽孢杆菌L1的抑菌谱较宽,特别是对水稻纹枯病菌、大豆菌核病菌、禾谷镰孢菌、辣椒灰霉病菌、玉米小斑病菌抑菌效果明显;枯草芽孢杆菌L1不同发酵时间经湿热灭菌处理后,5 d发酵液中抑菌活性物质含量最高,对水稻纹枯病菌菌丝生长抑制率达83.23%,发酵液随时间延长抑菌效果不再增加;枯草芽孢杆菌L1抑菌活性物质对温度不敏感;枯草芽孢杆菌L1发酵液用硫酸铵梯度沉淀法提取粗蛋白在硫酸铵饱和度达60%～70%(不含60%)沉淀的活性物质抑菌效果最好,对水稻纹枯病菌平均抑菌半径达1.15;枯草芽孢杆菌L1对玉米、大豆、小麦、番茄、菜豆、黄瓜、水稻无致病性,而且还有保鲜和促生作用。     

微生物以菌克菌在葡萄上的应用

利用枯草芽孢杆菌(依天得)在室内对葡萄蔓枯病菌和葡萄灰霉病的病原菌进行了防效测定。结果表明,枯草芽孢杆菌对葡萄蔓枯病菌和葡萄灰霉病的病原菌均有较好的防效,分别为:93.37%和93.07%。同时还对枯草芽孢杆菌的抑菌机理进行了初步研究,结果表明该拮抗菌可以溶解致病菌菌丝。     

10亿活芽孢/g枯草芽孢杆菌可湿性粉剂防治黄瓜根腐病田间药效试验

为明确10亿活芽孢/g枯草芽孢杆菌可湿性粉剂对黄瓜根腐病的防治效果及使用剂量,以70%敌磺钠可溶粉剂作对照,采用田间试验研究10亿活芽孢/g枯草芽孢杆菌可湿性粉剂对黄瓜根腐病的防治效果。结果表明,10亿活芽孢/g枯草芽孢杆菌可湿性粉剂对黄瓜根腐病具有良好防效,最佳使用剂量为3. 0g/株,防效均优于70%敌磺钠可溶粉剂,且对黄瓜生长安全,是防治黄瓜根腐病较理想的药剂之一。     

枯草芽孢杆菌对稻瘟病的防治效果评价及机制初探

稻瘟病（Magnaprothe grisea）严重危害水稻,是重点防治对象.目前,化学防治仍是必要手段,但会污染环境,严重危害人畜健康.因此,生物防治被认为是非常有发展潜力的防治植物病害的方法之一.枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）因其广谱抗菌活性及极强的抗逆能力等优势,而极具生防应用价值,目前已有多个产品在推广应用.将拮抗细菌用于稻瘟病的防治曾有一些报道.本文测定了枯草芽孢杆菌B-332菌株对稻瘟病菌及其孢子萌发的抑制作用,对其致畸作用进行了观察和测定.现将研究结果报道如下.     

植物病害生防芽孢杆菌抗菌机制与遗传改良研究

 芽孢杆菌是土壤和植物微生态的优势微生物种群,具有很强的抗逆能力和抗菌防病作用,许多性状优良的天然分离株已成功地应用于植物病害生物防治。芽孢杆菌抗菌防病机制包括竞争作用、拮抗作用和诱导植物抗病性。其中,核糖体合成的细菌素、几丁质酶和葡聚糖酶等抗菌蛋白以及次生代谢产生的抗生素与挥发性抗菌物质产生的拮抗作用是生防细菌最主要的抗菌机制。通过现代生物技术提高抗菌基因的表达水平和实现外源杀虫或抗菌基因的高效稳定共表达是增强生防芽孢杆菌抗菌活性和扩大防治对象的重要途径。基因组和蛋白组研究的迅猛发展必将极大地促进芽孢杆菌抗菌分子机制和抗菌基因工程研究的深入发展和广泛应用。     

不同生物制剂对人参苗期主要病害的防治效果

为研究生物制剂哈茨木霉菌、枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌防治人参苗期病害的效果,对播种人参采取浸种+播后苗床浇施,对移栽人参采取蘸根的施药方式,药后调查各处理人参苗期病害发生率以及参苗生物量。结果表明,枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌对播种人参和移栽人参的苗期立枯病、根腐病有较明显的防效,连续两年用药后对播种人参苗期立枯病的防效达到50%以上,对根腐病的防效也接近50%;对移栽人参苗期立枯病防效达75%以上,对根腐病的防效达65%以上。连续2年施用哈茨木霉菌和枯草芽孢杆菌还在一定程度上增加了2年生参苗的生物量。     

新型生防微生物因子贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)的研究与应用

贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)是一种新型的生防因子,具有广谱抑菌活性和促进植物生长的作用,在农业生产中极具开发潜力。关于贝莱斯芽孢杆菌的研究近年来逐渐兴起,本文重点对贝莱斯芽孢杆菌的分类命名、研究进展、生物活性、开发应用等现状展开阐述,旨在为贝莱斯芽孢杆菌的进一步研究和应用提供参考。     

生防细菌BRF-1和BRF-2鉴定及生物学特征

BRF-1和BRF-2是从大豆根际土壤中筛选得到的两株革兰氏阳性生防细菌,平板对峙培养表明它们对7种植物病原真菌具有拮抗作用。BRF-1芽孢球型中生,无鞭毛;而BRF-2芽孢球型端生,周生鞭毛。部分生物学特征研究表明,两菌株之间存在较大的差异。采用Biolog微生物自动鉴定仪鉴定和对两菌株的16S rDNA基因序列分析表明,菌株BRF-1和BRF-2分别与多粘类芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌亲缘关系最近,故把菌株BRF-1和BRF-2分别定为多粘类芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌。     

生防菌与茄病镰刀菌在黄瓜根际动态变化

应用荧光定量PCR和稀释分离法检测了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis和木霉菌Trichoderma spp.与茄病镰刀菌Fusariumsolani f.sp.cucurbitae在黄瓜根际动态变化及其对黄瓜根腐病的防治效果。结果表明,施用500×木霉菌肥、100×枯草芽孢杆菌7d后对黄瓜根腐病的防效分别为100%和92.5%,14和28d的防效分别为96.71%、86.76%和85.35%、79.24%;100×枯草芽孢杆菌初始拷贝数为130787 copys/μL,7d内枯草芽孢杆菌拷贝数下降到51161 copys/μL,14和28d时数量开始上升到295139和680556 copys/μL。木霉菌肥的变化趋势与枯草芽孢杆菌相同;用枯草芽孢杆菌和木霉菌肥防治黄瓜根腐病后,茄病镰刀菌变化趋势一致,初始拷贝数分别为2.61和15.34 copys/μL,7d内茄病镰刀菌DNA拷贝数增加明显,100×枯草芽孢杆菌和木霉菌DNA拷贝数分别为11.22和20.9 8copys/μL,之后茄病镰刀菌数量保持平稳。经过稀释分离法分离2种生防菌和茄病镰刀菌的数量,变化趋势与荧光定量PCR检测趋势相似。因此使生防菌快速定殖是提高其对土传病害防治效果的重要因素之一。     

小麦纹枯病生防芽孢杆菌的筛选及鉴定

从河南、北京等地采集小麦植株,分离得到202株内生芽孢杆菌,平板拮抗测定获得27株对小麦纹枯病菌拮抗效果明显的菌株。温室盆栽测定了27个菌株对小麦纹枯病的生防效果,其中菌株M-1、W-2和W-3的防治效果分别为60.4%、59.4%和56.6%。对3株生防菌株进行了分类学鉴定,M-1为多粘类芽孢杆菌,W-2为地衣芽孢杆菌,W-3为枯草芽孢杆菌。     

枯草芽孢杆菌可湿性粉剂对大白菜根肿病防效的研究

研究枯草芽孢杆菌可湿性粉剂对大白菜根肿病的防治效果。连续2年开展枯草芽孢杆菌可湿性粉剂田间药效试验。枯草芽孢杆菌可湿性粉剂防治大白菜根肿病,用量0.125×10~8~0.2×10~8cfu/g枯草芽孢杆菌,移栽前蘸根,移栽后灌根4次,防效达53.1%~65.1%。枯草芽孢杆菌可湿性粉剂对大白菜根肿病具有良好防治效果,对作物安全,是防治大白菜根肿病较好的生物制剂。     

生防菌XC-1的筛选、鉴定及其对马铃薯黑痣病的防效研究

 从马铃薯根际土壤中分离筛选得到对立枯丝核菌有较强拮抗作用的菌株XC-1,对其进行鉴定及生防特性分析,并评价其对马铃薯黑痣病的生防效果。形态学、16S rDNA和gyrB基因序列分析以及生理生化检测结果表明,XC-1菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。XC-1菌株具有产纤维素酶、蛋白酶及嗜铁素和HCN能力。同时,具有产生脂肽类活性物质的能力。其发酵液能导致立枯丝核菌菌丝断裂、折叠、膨大等,进而抑制其生长。田间试验结果表明,XC-1在马铃薯苗期、花期以及收获期均有防效,在收获期生防效果达到54.51%。同时,经菌株XC-1菌悬液接种处理后的马铃薯产量与对照组相比增加了22.02%。XC-1是马铃薯黑痣病生防制剂的潜力菌株,具有良好的开发和应用价值。     

枯草芽孢杆菌防治甜瓜白粉病效果及对甜瓜生长的影响

为探讨枯草芽孢杆菌对甜瓜白粉病的田间防控效果,以50%嘧菌酯水分散粒剂为对照,在甜瓜白粉病初期喷施不同浓度的200亿个活芽孢/g枯草芽孢杆菌可湿性粉剂。调查应用效果发现,该枯草芽孢杆菌制剂与嘧菌酯防效相当。施药处理后14 d,200亿个活芽孢/g枯草芽孢杆菌可湿性粉剂100倍液和500倍液对甜瓜白粉病的防效分别达96.72%和81.40%;对甜瓜株高、叶面横径、叶面纵径、果实横径、果实纵径和果实糖度指标的促生作用分别达24.28%~31.78%、36.85%~50.08%、42.42%~52.21%、61.14%~69.14%、39.58%~49.12%、23.29%~29.86%。     

井冈霉素对3种生防芽孢杆菌的生长抑制活性

管碟法测定了井冈霉素对12株枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、6株苏云金芽孢杆菌（B．thuringiensis）及3株蜡质芽孢杆菌（Bacillus cereus）的离体抑制活性。结果表明,不同种以及同种不同菌株的芽孢杆菌对井冈霉素的敏感性存在差异,但从总体上看,井冈霉素A对大多数枯草芽孢杆菌的抑制作用较强．而对大多数蜡质芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌的抑制活性较低,在1．00×10^5mg／L浓度下仅有轻微的抑制作用。     

利用16S rDNA结合gyrA和gyrB基因对生防芽孢杆菌R31的快速鉴定

克隆16S rDNA、DNA促旋酶A亚基编码基因gyrA和B亚基编码基因gyrB对分离自石斛兰（Dendrobiumsp.）叶片的广谱抗真菌生防芽孢杆菌R31进行鉴定。首先通过生理生化测定和克隆16S rDNA序列,分析显示其属于芽孢杆菌属（Bacillus）,但不能准确鉴定到种;然后分别利用克隆的gyrA基因和gyrB基因以及其BLAST分析结果构建系统发育树,最终将该菌株确定为枯草芽孢杆菌（B.subtilis）。结果显示利用16S rDNA与gyrA基因组合可以快速鉴定枯草芽孢杆菌,利用16S rDNA与gyrB基因组合可以快速鉴定枯草芽孢杆菌及其近缘种。     

不同处理方法对草莓灰霉病的防治效果

鉴于草莓生产过程中真菌性病害发生严重的现状,进行了4种不同处理方法的草莓灰霉病防治效果比较试验。结果表明,4个处理都对草莓灰霉病有较好的防效(81.3%～94.1%),但枯草芽孢杆菌的防效明显高于未施组,常规化学农药短期防效显著,之后逐步减退,枯草芽孢杆菌完全替换常规化学农药的前期防效较差,后期防效逐步提升,3次施药后防效高于常规农药10.9%;枯草芽孢杆菌还具有明显的增产促生作用,且不影响环境,不造成残留,能提升果实品质。