微生物杀菌剂及其混配剂防治水稻纹枯病的田间药效试验

对微生物杀菌剂及其混配剂对水稻纹枯病进行田间防治试验,结果表明枯草芽孢杆菌10亿/g可湿性粉剂、井冈霉素·蜡质芽孢杆菌12.5%可湿性粉剂对水稻纹枯病有较好的防治效果。在发病初期施药,枯草芽孢杆菌10亿/g可湿性粉剂1500g/hm2防效为75.4%,产量增幅21.5%;井冈霉素·蜡质芽孢杆菌12.5%可湿性粉剂2880g/hm2防效为83.89%。可以作为井冈霉素的替代产品,进行推广应用。     

井冈霉素和生防菌Bs-916协同控病作用及增效机理

为了解决枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis生防菌株Bs-916在大面积推广应用中存在着田间防治效果不稳定、药效作用缓慢等问题，将井冈霉素和生防菌Bs-916对半混合使用。试验结果表明：井冈霉素和生防菌Bs-916协同作用防治水稻纹枯病有显著的增效作用。用Bs-916利福平抗药性标记回收法测定了井冈霉素和Bs-916复配后Bs-916在水稻根叶围的定殖状况，表明井冈霉素对Bs-916在水稻根叶围定殖有促进作用，能减缓Bs-916群体数量大幅度下降，并使Bs-916发挥生物防治作用。这是井冈霉素和枯草芽孢杆菌Bs-916协同作用的增效机理之一。     

10%井冈霉素·蜡质芽孢杆菌防治稻曲病试验

应用10%井冈霉素·蜡质芽孢杆菌防治水稻稻曲病、纹枯病试验,结果表明,10%井冈霉素·蜡质芽孢杆菌667m2 150 mL分别于破口前7d和破口期施2次药防治稻曲病、纹枯病效果最好,与对照区比较差异显著;与对照药剂30%苯醚甲环唑·丙环唑667m2 15 mL比较,稻曲病差异显著.     

假单孢菌20#-5菌株代谢产物对马铃薯晚疫病菌的抑制作用

为了深入研究抗生菌假单胞菌20#-5菌株的有关性状，采用固体平板抑菌法调查了其代谢产物的抗菌谱，用甲醇浸提和色谱分离法对其活性成分进行了分离纯化，并初步优化了其发酵条件。结果表明，该菌的代谢产物在固体培养基上对马铃薯晚疫病菌、苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌等有较强的抑制作用，抑菌直径大于20mm；对耶尔森氏菌有微弱的抑制作用，抑菌直径小于10mm；对小麦赤霉病菌、柑橘溃疡病菌、亚利桑那沙门氏菌、克雷伯氏菌等没有抑制作用。浓缩液经AcA202凝胶过滤和C-18反相色谱分离，结果显示该菌代谢产物中有多种抗菌活性成分。该菌株的最佳发酵条件是100ml的三角瓶中装10ml初始pH8．0的LB培养液，28℃摇床发酵4天。     

枯草芽孢杆菌对稻瘟病的防治效果评价及机制初探

稻瘟病（Magnaprothe grisea）严重危害水稻,是重点防治对象.目前,化学防治仍是必要手段,但会污染环境,严重危害人畜健康.因此,生物防治被认为是非常有发展潜力的防治植物病害的方法之一.枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）因其广谱抗菌活性及极强的抗逆能力等优势,而极具生防应用价值,目前已有多个产品在推广应用.将拮抗细菌用于稻瘟病的防治曾有一些报道.本文测定了枯草芽孢杆菌B-332菌株对稻瘟病菌及其孢子萌发的抑制作用,对其致畸作用进行了观察和测定.现将研究结果报道如下.     

10％井冈霉素·蜡质芽孢杆菌防治稻曲病试验

应用10％井冈霉素·蜡质芽孢杆菌防治水稻稻曲病、纹枯病试验,结果表明,10％井冈霉素·蜡质芽孢杆菌667m^2 150mL分别于破口前7d和破口期施2次药防治稻曲病、纹枯病效果最好,与对照区比较差异显著;与对照药剂30％苯醚甲环唑·丙环唑667m^2 15mL比较,稻曲病差异显著。     

侧柏内生真菌Chaetomium globosum ZH-32抗菌活性成分研究

采用生物活性追踪法,从侧柏内生真菌Chaetomium globosum ZH-32发酵液中分离得到1个具有抑菌活性的化合物——WH-01,经紫外光谱、核磁共振及质谱等鉴定为球毛壳菌素A。抑菌活性测定结果表明:WH-01对枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus和大肠埃希氏菌Escherichia coli有强烈的抑制作用,其最低抑制浓度(MIC)分别为3.13、3.13、1.56和3.13μg/mL;对番茄灰霉病菌Botrytis cinerea和油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum菌丝生长的抑制中浓度(EC50)分别为5.36和12.19μg/mL。     

因地制宜使用Bt杀虫剂

苏云金杆菌最早在1901年由日本学者石渡,从患病蚕虫体中分离到的一株细菌,就是现在的苏云金猝倒亚种(Bacillus thuringiensis subsp.Sot-to),1911年德国学者伯林纳(Berliner)从苏云金省采集的地中海粉螟虫尸中分离得到一种杆菌,于1915年正式定名为苏云金芽孢杆菌(Bacillus     

井冈霉素研究开发25年

井冈霉素研究开发２５年沈寅初（上海市农药研究所２０００３２）井冈霉素是一株在井冈山地区发现的微生物菌株所产生的农用抗生素。２５年来井冈霉素经久不衰，已成为我国农民家喻户晓的理想生物农药。对我国水稻高产稳产做出了重大贡献。近１０年来我国井冈霉素的年产量...     

对小地老虎具有杀虫毒力的苏云金芽孢杆菌菌株的分离及鉴定

从我国3种典型植被覆盖的6个地区的土壤样品分离得到了348株苏云金芽孢杆菌菌株,采用杀虫活性测定方法从中获得了32株对小地老虎具有高毒力的菌株。利用PCR-RFLP鉴定体系和SDS-PAGE蛋白分析法,研究了这32株苏云金芽孢杆菌的杀虫晶体蛋白基因类型和晶体蛋白表达情况,对小菜蛾、二化螟、棉铃虫的杀虫活性测定也证明了苏云金芽孢杆菌cry基因类型、表达蛋白及杀虫活性间的相关性。     

苏云金芽胞杆菌分离过程中无晶体芽胞杆菌的分析

本研究选择了在苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)分离过程中发现的与Bt芽胞相似、没有伴胞晶体的8株芽胞杆菌,对其种属、质粒等生物学特性和杀虫活性进行了初步研究.对分离菌株所产芽胞进行形态观察及质粒图谱分析,发现其与Bt相似;但肽指纹图谱分析和16S rDNA聚类研究表明所分离菌株与蜡样芽胞杆菌B.cereus(Bc)匹配最高;杀虫活性测定表明这8株菌对猿叶甲Colaphellus bowringi幼虫均无毒杀作用,而15-3、W23-1和W25-3 3个菌株及其培养上清液对小菜蛾Plutella xylostella幼虫有一定的杀虫活性,说明它们能产生活性物质.这些结果说明在Bt菌株的分离过程中要对无晶体菌株加以重视,其含有的活性物质具有潜在的研究和利用价值.     

母细胞产生内含物的芽胞杆菌分析

在苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)分离过程中发现有些芽胞杆菌产生与Bt相似的芽胞,但并不形成伴胞晶体,特别是发现它们在芽胞期的母细胞中含有丰富的内含物,对该类菌株的性质需要进一步明确.本研究选择6株该类型的菌株,对其种属、质粒、蛋白谱和杀虫活性等进行了初步分析.芽胞形态和质粒图谱分析结果显示,其与Bt菌株相似;肤指纹图谱分析发现选取的蛋白与蜡样芽胞杆菌(B.cereus)族细菌的蛋白匹配度最高;16S rDNA聚类研究表明,所分离的菌株的确与蜡样芽胞杆菌(B.cereus)族(包括Bc和Bt)同源性最高;从生物杀虫活性测定来看11-1菌株上清液对小菜蛾(Plutella xylostella)的校正死亡率达75.9％,而85-1和11-1菌株上清对亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)的校正死亡率分别能达到100％和87.9％.本研究结果表明在Bt菌株的分离过程中,对于没有形成晶体但在芽胞形成时期还有内含物的菌株也应加以重视,这些菌株属于B.cereus族,具有潜在利用价值.     

Biochemical and molecular characterization of Bacillus amyloliquefaciens, B. subtilis and B. pumilus isolates with distinct antagonistic potential against Xanthomonas campestris pv. campestris

Fifty-one Bacillus isolates were characterized by fatty acid methyl ester (FAME) analysis; universal primer polymerase chain reaction (UP-PCR) fingerprinting; production of secondary metabolites and antagonistic activity against Xanthomonas campestris pv. campestris (causal agent of black rot in cabbage) in vitro and in vivo . Based on FAME analysis and/or PCR fingerprinting, the isolates were clustered into three different groups, named as Bacillus amyloliquefaciens , B . subtilis and B . pumilus . Seed treatment with Bacillus spp. generally reduced germination of seeds and incidence of black rot, but no relationship was found between the results of in vitro and in vivo experiments. The B .  amyloliquefaciens group contained isolates that were generally the most effective at reducing attack of black rot in vivo . The metabolic profiles of these isolates suggested that they produced surfactin, iturin, bacillomycine and/or azalomycin F. Isolates belonging to the B . subtilis group were mostly able to synthesize surfactin and arthrobactin. Surfactin, amphomycin, arthrobactin and valinomycin were generally found in culture extracts of isolates belonging to the B . pumilus group. No effect on growth of the pathogen was detected when the activity of filtered culture extracts and selected metabolites produced by the three different Bacillus species was tested in vitro against X . c . pv. campestris . However, inhibition was seen when bacterial liquid cultures were used. When the ability to colonize cabbage endophytically was examined for seven selected isolates with different antagonistic potential against black rot, it was found that the ability was related to the species and not to the antagonistic activity of the isolates.     

水稻稻瘟病拮抗细菌的筛选与防治初探

从水稻作物根际分离筛选得到的 2 0 8个细菌菌株对稻瘟病病菌具有较强的抑制能力 ;抑菌圈直径在 2 0mm以上的有 65株。选用室内拮抗性较稳定的 8株细菌菌株经两年的田间防病试验 ,不同菌株间防效差异显著 ,其中两年防效较好的菌株是Ma 3 2 (蜡状芽孢杆菌 )和Xi 55(枯草芽孢杆菌 )。一些菌株处理种子对秧苗生长有促进作用。     

花生内生菌的种群及动态分析

１９９４－１９９７年,先后从山东省主要花生产区监沂、烟台等地采集约１０００株不同类型的花生无病 ,进行了植株内主要微生物类群分析。结果表明,不同品种花生的内生菌都表细菌和真菌,未分离到放线菌和酵母菌,细菌以芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐｐ．）黄单孢菌（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｓｐｐ．）和欧文氏菌（Ｅｒｗｉｎｉａｓｐｐ．）为优势种群。其中芽孢杆菌属以巨大芽孢杆菌（Ｂ．ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、蜡样芽孢杆     

利用芽孢杆菌在温室环境中控制番茄青枯病

 在离体条件下测试了81株芽孢杆菌分离物抑制番茄青枯病菌的能力,有4个菌株(B2、B5、B7和B8)显示了较好的抑菌效果,经细菌生物学性状、Biolog和16S rDNA序列分析,B2菌株鉴定为短短小芽孢杆菌(Brevibacillus brevis),B5、B7和B8鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。在温室环境中,4个菌株都能不同程度的促进灭菌土和自然土的番茄生长,并能减轻番茄青枯病的发生。B2菌株显示了显著的抑菌作用,在灭菌土和自然土中分别降低了80.0%和87.4%的番茄青枯病发生率。     

北京植物园苏云金芽胞杆菌菌株的分离鉴定

[目的]从北京植物园采集的土壤样品中分离高毒力的苏云金芽胞杆菌.[方法]采用温度法筛选Bt菌株,比对大质粒DNA图谱,区分不同类型的Bt菌株,PCR-RFLP方法对cry1～cry40类基因型进行鉴定,SDS-PAGE分析杀虫晶体蛋白,测定Bt分离株对大猿叶甲、小菜蛾幼虫的杀虫活性,筛选出高毒力的菌株.[结果]从149份土壤样品中分离出147株Bt,分为12种类型,含有菱形、方形、球形和不规则等晶体类型;6株菌中分别含有fry1Aa、cry1Ab、cry1Ac、cy1Ah、cry1Ba、cry1Be、cry1Ia、cry1La、cry2Ab和cry7Aa等基因类型,其余6株中不含有已知基因.有9株表达约130 ku蛋白,1株表达约70 ku蛋白,2株表达约150 ku蛋白,有3株既表达130 ku蛋白又表达60 ku蛋白;发现一株对大猿叶甲具有较高毒力的菌株ZWY-7,1株对小菜蛾有高毒力的菌株ZWY-9,2株菌都没有检测到已知基因型.[结论]北京植物园中Bt分布广泛,类型多样,其中发现两株高毒力的菌株,有望获得新的杀虫基因.     

芽孢杆菌对肠道菌群结构影响的研究进展

芽孢杆菌是肠道中正常菌群的重要组成成分,其主要为纳豆芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌等。芽孢杆菌通过对肠道的黏附和对致病菌的拮抗,维持肠道菌群平衡,保护肠道健康。从芽孢杆菌调节肠道菌群的方式和肠道菌群研究方法来系统地阐述芽孢杆菌对肠道菌群结构的影响。     

蜡样芽孢杆菌M22Fe-SOD基因克隆及其分析

 通过筛选蜡样芽孢杆菌M 22基因组文库, 得到约3.9 kb的基因组片段。BLAST结果显示:其中包含1条长度为915 bp、编码304个氨基酸的超氧化物歧化酶(SOD)基因, 其与Bacillus thuringiensis和Bacillus anthracis中的sodF基因同源性高达95%。此sodF基因能互补恢复大肠杆菌SOD缺陷型菌株QC871在10 μmol/L paraquat中的生长能力。对重组表达蛋白的抑制实验表明, 此SOD基因为Fe-SOD。利用pET-30b (+)构建表达载体pET-sodF并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中, 经IPTG诱导后, SOD融合蛋白表达量显著增加。构建自杀载体p299-8, 同源重组突变蜡样芽孢杆菌M22 sodF基因后, 突变体抗氧化能力未显著降低。