黄鳝肠道细菌及产酶菌株的研究

从健康的黄鳝肠道中分离出细菌32株.革兰氏染色结果表明,8株为革兰氏阳性菌,24株为革兰氏阴性菌.研究了其产蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶的能力.结果表明,有53.13%的菌株能分泌蛋白酶,43.75%的菌株能分泌脂肪酶,34.38%的菌株能分泌淀粉酶,21.88%的菌株能分泌纤维素酶.其中产4种酶的有1株,产3种酶的有5株,产2种酶的有9株,产1种酶的有12株,不产酶的仅有5株.产酶菌株的比例高达84.38%.     

大闸蟹肠道中产酶菌株及其胞外酶的研究

从健康成年大闸蟹肠道中分离出细菌36株。革兰氏染色结果表明，11株为革兰氏阳性菌，25株为革兰氏阴性菌。52．8％的菌株能分泌蛋白酶，44．4％的菌株能分泌脂肪酶，58．3％的菌株能分泌淀粉酶，41．7％的菌株能分泌纤维素酶。36株菌均能产酶，其中产4种酶的有1株，产3种酶的有9株，产2种酶的有14株。由于这些产酶菌株的作用，使得大闸蟹的肠道菌群能够维持平衡，提高饲料的消化利用率，促进大闸蟹生长。     

近江牡蛎肠道厌氧菌及其产酶能力的研究

为了解近江牡蛎肠道厌氧菌在食饵消化过程中的作用，为微生态饲用添加剂的开发研究打下基础，从近江牡蛎肠道中分离出8株厌氧菌，其中有5株为革兰氏阳性菌。并研究了它们蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶的产酶能力，结果表明仅有3株菌具有产酶能力：2株菌能分泌脂肪酶，1株菌能分泌蛋白酶。由此可见．厌氧菌在分泌消化酶、消化食饵中所起的作用不大。     

福建大连1号杂交鲍肠道及养殖水体中细菌产酶能力的分析

从大连1号杂交鲍养殖水体及肠道中分离出18株弧菌和32株异养型细菌,对其进行革兰氏染色及产胞外酶能力的分析。结果表明,养殖水体中分离出的14株弧菌和22株异养细菌,共有22株(61.1%)具有分泌脂肪酶、卵磷脂酶、明胶酶、蛋白酶、淀粉酶或溶血毒素的能力;鲍肠道分离出的4株弧菌和10株异养细菌,共有9株(64.3%)具有此产酶能力。但总体上,从水体中分离出的菌株的产酶能力要强于从鲍肠道中分离出的菌株,且数量更多,尤其是水体中异养细菌。在所有的50株菌株中,有2株(4%)具有产3种酶(脂肪酶、卵磷脂酶和溶血素)的能力;有9(18%)株具有产2种酶的能力。产酶菌株大部分为革兰氏阴性。本次试验对鲍肠道及养殖水体中菌株产酶能力进行了分析,为大连1号杂交鲍在南方的健康养殖提供科学依据。     

尼罗罗非鱼肠道中产酶菌株的研究

从尼罗罗非鱼肠道中分离出41株好氧菌和6株厌氧菌。好氧菌中31株为革兰氏阴性菌，10株革兰氏阳性菌；厌氧菌中，革兰氏阳性菌5株，革兰氏阴性菌1株。41株好氧菌中有31．7％的菌株能分泌蛋白酶(13株菌)；有39．0％的菌株能分泌脂肪酶(16株菌)；有17．1％的菌株能产淀粉酶(7株菌)，有36．6％的菌株能产纤维素酶(15株菌)。其中，产3种酶的有7株菌，产2种酶的有9株菌，产1种酶的有12株菌，不产酶的有13株菌。好氧菌在尼罗罗非鱼消化食饵过程所起的作用大；6株厌氧菌中仅有1株菌能产脂肪酶和纤维素酶，对尼罗罗非鱼消化食饵所起作用相对不大。优化罗非鱼肠道中微生物菌群的结构很有必要。     

野生与养殖银鲳消化道菌群结构中产酶菌的对比分析

实验对野生和养殖银鲳胃、幽门盲囊、前肠、中肠、后肠菌群结构进行了定性对比分析,并对产蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶的菌株进行了鉴定。结果发现,野生和养殖种群的消化道菌群结构存在较大差异,且同一种群消化道各部分之间菌群结构也存在较大差异。尽管养殖和野生银鲳均在幽门盲囊中具有最多的可培养细菌菌株,但野生银鲳消化道内主要菌群为嗜冷菌属(Psychrobacter)和Pseudochrobactrum,养殖银鲳消化道主要菌群为不动杆菌属(Acinetobacter)和假单孢菌属(Pseudomonas),两种群共有细菌仅一株,即Psychrobacter piscatorii strain VSD503,但其分别存在于野生与养殖种群银鲳消化道的不同部位。在产酶菌株筛选中发现,野生银鲳消化道内分离到16株产酶菌,其中44%可培养菌能产蛋白酶,56%能产淀粉酶,11%能产脂肪酶,56%能产纤维素酶,部分菌株可产2株以上的消化酶,其中产3种以上酶的菌株有5株,且产酶量丰富。相对于野生银鲳,养殖银鲳消化道内分离到22株产酶菌,主要以产蛋白酶和淀粉酶为主,70%可培养菌可产蛋白酶,21%可产淀粉酶,仅Bacillus thuringiensis strain VITGS可产纤维素酶,无一株菌产脂肪酶,其中只有Bacillus thuringiensis strain VITGS产3种酶但产酶量相对较少。研究可为银鲳人工养殖中潜在益生菌的筛选提供理论依据。     

草鱼和银鲫肠道产消化酶细菌的研究

检测了分别从草鱼(Ctenopharyngodon idellus)和银鲫(Carassius auratus gibelio)肠道中分离的180株细菌的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶的产酶能力。结果显示,两种鱼肠道内可分泌胞外消化酶的细菌包括Aero-monas(气单胞菌属,Aer.)、Vibrio(弧菌属,Vib.)、Bacillus(芽孢杆菌属,Bac.)、Pseudomonas(假单胞菌属,Pse.)四个种属的细菌,Aer.在其中占主要优势,45.71%的Aer.可分泌胞外消化酶。草鱼可分泌上述四种胞外消化酶的菌株共有33株,占肠道菌总数的36.67%;银鲫43株,占47.78%。产酶菌的分布上,草鱼中肠内产消化酶细菌数量显著多于前肠和后肠(P<0.05),前、中、后肠分别是6株、20株和7株;银鲫中肠和后肠数量差异不显著,前肠分布最少。草鱼分泌蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶的菌株分别有21株(23.33%)、10株(11.11%)、30株(33.33%)和16株(17.78%)。银鲫肠道内未检测到可分泌纤维素酶的细菌,蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶菌株的数量分别是21株、37株和17株。可见鱼类肠道细菌对食饵消化有重要作用。     

工厂化循环水养殖条件下云纹石斑鱼消化道产酶菌的分离鉴定

采用16S r DNA-PCR菌群分离鉴定的方法,对循环水养殖条件下云纹石斑鱼(Epinehelus moara)幼鱼的胃、幽门盲囊、前肠、中肠和后肠的菌群结构进行了鉴定,用产酶菌筛选培养法对产消化酶的菌株进行了分离鉴定,并测试了各菌株消化酶的活力。研究发现,云纹石斑鱼幼鱼消化道内可培养的主要菌群为假单胞菌属(Pseudomonas)、微小杆菌属(Exiguobacterium)、不动杆菌属(Acinetobacter)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)和葡萄球菌属(Staphylococcus),其中产消化酶的菌株占可培养菌的55.6%。在产酶菌中,同一株菌产3种酶的有5株;产2种酶的有9株;中肠和后肠的菌株数最为丰富,胃次之,幽门盲囊和前肠菌群种类较少;产脂肪酶的菌株都集中在中肠。产消化酶的菌株主要以产蛋白酶和淀粉酶为主,且产酶量丰富,产蛋白酶活力最高达(87.732±1.134)U/m L;淀粉酶活力为(77.176±0.599)~(73.458±0.574)U/m L;产纤维素酶的菌仅一株,且酶活力较低。分析得知,消化道的菌群结构直接影响了外源性消化酶的种类与活性。本研究为工厂化循环水养殖条件下产酶有益菌的筛选提供了理论依据。     

野生银鲳消化道内潜在产酶益生菌产酶条件的初步研究

采用酶学分析法研究了单因子(温度、p H、发酵时间)变化对野生银鲳(Pampus argenteus)消化道内同时分泌蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶中两种以上的5株菌株产酶活力的影响,即通过测定酶活力的大小找到每株菌最适产酶条件范围。结果显示,在温度31~37℃、p H 7~8、发酵时间3 d的条件下,5株产酶菌的蛋白酶活力最大;在不同温度和p H条件下,5菌株分泌的淀粉酶活力各不相同,但都随发酵时间的延长而增大,3~5 d达最大值;4株分泌纤维素酶的菌株纤维素酶活力受环境影响总体变化不大,在温度31~37℃、酸性条件(p H 5)和发酵时间4 d的条件下为活力最大;2株分泌脂肪酶的菌株在28~31℃、中性(p H 7)、发酵时间1 d条件下其脂肪酶活力最大,最大可接近180 U·m L-1,但活力都随发酵时间而显著下降。结果表明,不同产酶菌所分泌的消化酶活力所需的最适条件有很大不同,了解和掌握银鲳肠道中菌群的产酶条件,对开发潜在产酶益生菌有着积极的作用。     

九孔鲍肠道及其养殖水体中弧菌产酶能力的分析

从汕尾健生鲍鱼场养殖水体和九孔鲍肠道中共分离筛选到25株弧菌,其中14株来自成鲍肠道,11株来自养殖水体,并对它们产多种胞外酶的能力进行了比较分析。试验结果表明:78.6%的肠道弧菌能分泌蛋白酶,21.4%能分泌脂肪酶,64.3%能分泌卵磷脂酶或淀粉酶,92.9%能分泌明胶酶;水体中的弧菌63.6%能分泌蛋白酶,54.5%能分泌脂肪酶或明胶酶,72.7%能分泌卵磷脂酶,100%能分泌淀粉酶。同时筛选出5株胞外酶分泌能力超强的菌株,除分泌蛋白酶能力最强的弧菌(Bh14)来自鲍鱼肠道外,其余分泌其它4种胞外酶能力最强者(Sh05、Sh03、Sh11、Sh08)均来自养殖水体。研究还发现来自水体的弧菌分泌多种胞外酶能力强于来自肠道的弧菌。由此提示,应用有益微生物以改善鲍鱼肠道中的菌群结构,可能会提高鲍鱼饲料利用率。     

Enzyme producing bacterial flora isolated from fish digestive tracts

Isolationand enumeration of aerobic bacterial flora in the gastrointestinal tract of nineculturable freshwater teleosts, namely catla, rohu, mrigal, silver carp, grasscarp, common carp, tilapia, walking catfish and murrel have been carried out.Amylolytic, cellulolytic, lipolytic and proteolytic microflora were identifiedfrom the culture plate using selective media. The isolates were qualitativelyscreened on the basis of their extracellular enzyme producing ability. Theselected strains were further quantitatively assayed for amylase, cellulase,lipase and protease activities. Protease activity was exhibited by almost allthe bacterial isolates, while strains isolated from tilapia, grass carp andcommon carp showed considerable amylolytic and cellulolytic activities. Maximumactivity of lipase was exhibited by a strain isolated from silver carp. Thestudy indicates that there is a distinct microbial source of the digestiveenzymes – amylase, cellulase, lipase and protease, apart from endogenoussources in fish gut. The information generated from the present investigationmight contribute towards better feed formulations for carp at low cost,incorporating the enzyme producing bacterial isolates as probiotics.     

Evaluation and characterization of a novel probiotic Lactobacillus pentosus PL11 isolated from Japanese eel (Anguilla japonica) for its use in aquaculture

In the present study, a potential Lactobacilli probiotics were isolated from Japanese eels (Anguilla japonica) and characterized and evaluated for their possible use in eel farming. Sixteen Lactobacilli were isolated from intestines of Japanese eels, using selective media. The lactobacilli strains (represented as PL1 to PL16) were screened by their ability to produce digestive enzyme. Among these, three strains (PL11, PL13 and PL16) producing four digestive enzymes (amylase, cellulase, protease and phytase) simultaneously were characterized further using API ZYM kit. From these, PL11 (Lactobacillu (L.) pentosus) was identified as potential probiotics candidate producing 15 enzymes among 20 tested. Further examination of biological activities of PL11 revealed tolerance against pH, artificial bile juice and antibacterial activity against several fish pathogenic bacteria. The in vitro competitive exclusion assay also revealed 88.4% reduction in adhesion of fish pathogen (Edwardsiella tarda) by PL11 to host intestinal mucus. In vitro incubation of Japanese eel foregut with Baclight‐labelled PL11 showed colonization of the enterocyte surface by confocal and scanning electron microscopy. In summary, PL11 isolated from eels could serve as a potential probiotics with acid and bile tolerance, production of digestive enzymes, antibacterial activity and inhibition of fish pathogen adhesion to intestinal mucus.     

温度和pH对马氏珠母贝肝胰脏消化酶活力的影响

2006年4月,从湛江市流沙港马氏珠母贝养殖群体中挑选黄壳色个体为亲本.繁殖黄壳色选系F1.2007年10月,在黄壳色选系F1随机取样,分析了温度和pH对马氏珠母贝肝胰脏消化酶活力的影响.试验结果表明,温度为15～50℃时,淀粉酶和纤维素酶的最适温度分别为25,40℃;温度为15～75℃时,蛋白酶的最适温度为55℃.不...     

海南西岛九孔鲍养殖水体中细菌胞外产物的分析

2004年11月,自海南西岛的鲍养殖水体中分离出90株菌株。TCBS和2116E培养基分别分离40株(弧菌)和50株(异养菌)。比较了不同分离方法所得到的2批菌株分泌胞外产物的能力。试验结果表明,鲍苗掉板死亡期间,养殖水体中TCBS培养基分离的菌株能分泌脂肪酶、淀粉酶、磷脂酶和明胶酶的比例总体上高于2116E培养基分离的菌株,2116E培养基分离的菌株中能分泌溶血素的比例要略高于TCBS培养基分离的菌株。总体上,后者具有较强分泌胞外产物的能力。因此,这部分具有较强分泌胞外产物能力的菌株应视为鲍苗的潜在致病菌。此外,在对鲍的细菌性病害研究中,除了具有较强分泌胞外产物的菌株外,养殖环境中的菌群结构也是不可忽视的因素。     

基于云空间的近江牡蛎养殖监控系统设计

针对近江牡蛎养殖中自动化程度低、成本高等问题,提出一种基于云空间设计近江牡蛎养殖监控系统。以STM32F103为底层控制核心,通过YS8166B、SIN-D0530和超声波模块实时采集海水的p H、溶氧(DO)、温度和深度,并通过nRF24L01以无线方式发送到上位机。上位机采用C#多线程通信程序与云空间进行交互。系统采用ASP动态技术云空间,通过轻量级数据交换格式JSON与上位机、用户进行快速通信,利用AJAX实现无刷新显示。用户通过智能手机可以随时随地访问云空间,掌握养殖现场的实时信息,并结合云空间嵌入的本地天气信息,对浮排电机、增氧机、投饲机进行远程控制。结果表明:系统具有成本低廉、稳定可靠、响应快速等优点。基于云空间的监控系统为近江牡蛎养殖智能化提供了一种新方法。