栉孔扇贝生理能量学研究

在室内实验条件和现场模拟条件下对栉孔扇贝的耗氧率、排泄率、摄食率、同化率和能量收支进行了较为系统的研究。结果显示 ,在适宜的温度范围内 ,栉孔扇贝的耗氧率、排氨率和摄食率均与温度成正比 ,与体重成幂函数关系 ,体重与耗氧率、排氨率和摄食率的关系均可用幂函数关系式Y=aWb表示。在 8～ 2 8℃温度范围内栉孔扇贝的耗氧率、排氨率和摄食率均随温度的升高而增大 ,2 3℃时耗氧率和摄食率达到最高值 ,2 8℃时下降 ,而排氨率则呈持续升高的趋势 ,其变化幅度分别为 0 4 8～ 9 0 9mg/ g·h、0 0 5～ 1 0 1mg/ g·h和 1 0 7～ 11 6 6mg/ g·h。栉孔扇贝的摄食率随藻类密度的增加而增加 ,符合关系式 :IR =4 78C0 36 6 (R2 =0 97,P <0 0 5 )。栉孔扇贝的同化率与饵料密度呈负相关关系 ,而与饵料质量呈正相关关系 ,其相关关系分别为 :AE =4 7 6 5C- 0 30 9(R2 =0 96 )和AE =5 1 6 8lnX - 112 38(R2 =0 97)。栉孔扇贝的个体大小是影响能量收支各组分比例的主要因素 ,随个体增大呼吸能增大 ,生长能减小。在能量收支方程中 ,呼吸能占总摄食能的 4 4 2 %～5 1 7% ,排粪能为 31 4 %～ 36 8% ,生长能为 12 7%～ 2 1 7% ,排泄能小于 2 %。     

栉孔扇贝对单细胞藻类生长间接作用的研究

采用室内实验生态学方法研究了栉孔扇贝对藻类生长的间接促进作用，结果显示，栉孔扇贝对浮游植物有明显的促长作用，并且浮游植物的增长与栉孔扇贝的密度呈正相关，符合如下模式：Y＝40．85lnX 44.87(r^2=0.979,p=0.05,n=15)。栉孔扇贝对浮游植物的促长作用随藻类种类的不同具有较大的差别，主要取决于藻类对营养盐的需求量。     

海洋酸化对栉孔扇贝钙化、呼吸以及能量代谢的影响

通过Alkalinity anomaly technique测定了栉孔扇贝Chlamys farreri在不同酸度条件下的钙化率和呼吸率,发现栉孔扇贝的钙化和呼吸活动受酸化影响显著,均随着酸化的加剧出现了明显下降。当pH降低到7.9时,栉孔扇贝的钙化率将会下降33%左右;当pH降到7.3左右时,栉孔扇贝的钙化率将趋近于0,栉孔扇贝无法产生贝壳,而此时栉孔扇贝碳呼吸率(RC)与耗氧率(RO)也分别下降了14%和11%。随着酸化的加剧,栉孔扇贝的能量代谢方式也会发生改变。这些变化都可能影响到栉孔扇贝的生存。     

菲律宾蛤仔和栉孔扇贝的呼吸与排泄研究

对菲律之后人蛤仔和栉孔扇贝的呼吸与排泄进行了实验研究。结果表明：温度和贝体重对两种贝类的耗氧率的氨排泄率都有明显的影响，且两者间存在着交互作用。菲律宾蛤仔的耗氧率（Ｑｏ，ｍｇ／ｇ／ｈ）和氨排泄率（ＱＮ，μｇ／ｇ／ｈ）与温度（Ｔ，℃）（Ｗ，ｇ）存在下列关系：Ｑｏ＝０．３０７Ｗ＾－０．７３８ １．００４＾Ｔ，ＱＮ＝７．８４１Ｗ＾－０．９１９ ０．９９０＾Ｔ；栉孔扇贝的耗氧率和氨排泄率与温度、湿重存在下     

栉孔扇贝对环境变化适应性研究一盐度、pH对存活呼吸、摄食及消化的影响

取体长分别为3和5 cm的栉孔扇贝(Chlamys farreri)置室内水泥池流水暂养1周后,进行盐度和pH变化对其存活、呼吸、摄食及消化影响的实验.结果表明, 栉孔扇贝96 h的半致死盐度为25.在不同盐度的海水中暴露24 h的实验结果为,栉孔扇贝随盐度的降低,出现耗氧率升高,随后逐渐下降,到盐度15时不再耗氧而死亡;滤水率和淀粉酶活性随盐度降低而降低,盐度为15时完全不滤水,淀粉酶完全失去活性.小个体栉孔扇贝耐低盐能力较大个体的略大些.pH降至7.8以下时开始对栉孔扇贝的存活产生影响,降至7.6时,48 h后死亡率为35%左右;7.2时达50%;降至7.0时扇贝不能存活.大个体栉孔扇贝对海水pH变化略敏感于小个体.     

普安鲫鱼鱼苗耗氧率的初步研究

利用简易密闭的流水装置,对普安鲫(Carassius auratus)鱼苗的耗氧率进行了初步研究;选择体重为1.40～2.50 g的小规格及21.20～33.31 g大规格普安鲫鱼苗,研究其昼夜耗氧率的变化规律以及水温、体重对其耗氧率的影响。结果表明,温度对普安鲫鱼苗耗氧率有显著影响,耗氧率随温度的增加而升高,随体重的增加而降低。2种规格普安鲫鱼苗的昼夜耗氧率变化曲线基本一致,日均(7∶00～17∶00)耗氧率0.1700 mg/(g.h)与夜均(19∶00～5∶00)耗氧率0.1721 mg/(g.h)相似;其中,小规格普安鲫在23∶00出现耗氧率低峰0.1253 mg/(g.h),5∶00出现耗氧率高峰0.2647 mg/(g.h);大规格普安鲫在21∶00出现耗氧率低峰0.0909 mg/(g.h),7∶00出现耗氧率高峰0.2375 mg/(g.h)。     

栉孔扇贝对环境变化适应性研究一温度对存活,呼吸,摄食及消化？…

取体长分别为３和５ｃｍ栉孔扇贝（Ｃｈｌｙｍｙｓ ｆａｒｒｅｒｉ）置室内水泥池流水暂养１周后进行实验。结果表明，栉孔扇贝９６ｈ的半致死温度为２７～２８℃，导致其耗氧率突然升高和滤水率急剧下降的温度为２６℃，体内淀粉酶活性下和的温度为２７℃。因此确定，栉孔扇贝的适宜极限高温为２７℃。在水温２７℃持续９６ｈ后，扇贝呼吸量迅速增大，随后减弱，摄食和消化能力逐渐降低；在２７℃持续５ｄ，死亡率为５０％，７ｄ时     

温度变化对虾夷扇贝耗氧率和排氨率的影响

为探索虾夷扇贝(Datinopecten yessoensis)夏季大量死亡的生理原因,模拟虾夷扇贝筏式养殖区夏季水温变化情况,采用室内控温实验,研究了温度剧烈和缓慢变化对虾夷扇贝耗氧率和排氨率的影响及其影响的差异性。实验设置10℃、15℃、20℃、25℃4个温度梯度,设计温度骤变(每小时升温5℃)和温度缓变(每天升温1℃)2种温度处理方式,测定升温前后耗氧率和排氨率。结果显示,温度变化对虾夷扇贝耗氧率和排氨率影响显著(P0.05)。温度缓变组耗氧率变化范围为1.910～2.722mg(/g·h),排氨率变化范围为1.499～5.003μm/(g·h),耗氧率(OR)和排氨率(NR)与温度(T)之间的相关方程为OR=2.303+0.425T-0.133T(2R2=0.941)和NR=-1.536+4.384T-0.893T(2R2=0.435)。温度骤变组耗氧率和排氨率大于温度缓变组,且温度骤变组耗氧率在15℃、20℃和25℃,排氨率在20℃和25℃与温度缓变组差异显著(P0.05)。     

低温对栉孔扇贝能量收支的影响

研究低温下栉孔扇贝 (Chlamysfarreri)摄食、呼吸代谢、排泄及能量分配情况 ,为栉孔扇贝的反季节养殖提供生物学依据。在实验室条件下采用静水法 ,测定 3、5和 8℃时栉孔扇贝的能量收支。结果显示 ,在 3～ 8℃时 ,栉孔扇贝的耗氧率、排氨率、摄食率及生长率 (净生长率、毛生长率 )随温度的升高而增大 ;3℃时 ,栉孔扇贝虽然能摄食 ,但是生长率却很低 ;温度对能量分配影响较大 ,生长、排泄分配率随温度的升高而增大 ,呼吸、排粪的分配率与温度呈负相关。在能量收支方程中 ,生长能所占比例变化较大 ,为 17.61%～ 5 3 .2 7% ,代谢能为 2 1.4 8%～3 5 .91% ,排粪能为 2 2 .5 2 %～ 4 5 .99% ,排泄能所占的比例最小 ,低于 3 %。     

栉孔扇贝三倍体与二倍体的排泄研究

从温度变化、个体大小和昼夜变化等３个角度研究栉孔扇贝（Ｓｃｈｌａｍｙｓ ｆａｒｒｅｉ）三倍体与二倍体的排泄率。结果表明，栉孔扇贝三倍体与二倍体的排泄率均随温度升高而增大；不同壳宽排泄率（Ｎ）与温度（ｔ）的关系为：Ｎ＝７．２０３３ｅ＾０．１２１５ｔ，Ｒ＾２＝０．８４４１（三倍体ｓ组，壳宽约３．２ｃｍ）；Ｎ＝８．８１５３ｅ＾０．１０３１ｔ，Ｒ＾２＝０．９８６３（三倍体ｂ组，壳宽约４．３ｃｍ）；Ｎ＝６．     

盐度变化对栉孔扇贝钙化与呼吸的影响

通过碱度异常技术( Alkalinity anomaly technique)方法测定了栉孔扇贝(Chlamys farreri)在不同盐度条件下的钙化率和呼吸率,发现栉孔扇贝的钙化和呼吸活动受盐度影响显著(P＜0.5).在海水盐度为15～25时,钙化率随盐度提高呈上升趋势,后随盐度降低而下降.在盐度为15 ～ 25,呼吸率随盐度提高而增大,盐度为25 ～ 35,呼吸率下降.钙化率与呼吸率均在盐度25时达到最高值,分别为0.33±0.02 μmol/( FW g·h)(钙化率)、(2.32±0.10) μmol/(FW g·h)(碳呼吸)、2.87±0.14 μmol/(FW g·h)(氧呼吸),此时钙化和呼吸活动向环境释放CO2也最强烈.     

三种扇贝种间血液生理指标比较及热胁迫对栉孔扇贝血液生理指标的影响

为了比较3种扇贝血液中的K⁺、Na⁺、Ca²⁺和Cl^-浓度，血氧(pO₂)和血二氧化碳(pCO₂)气体分压及血液酸碱度(pH)的差异情况，实验利用血气分析仪对栉孔扇贝、虾夷扇贝和海湾扇贝的血液生理指标进行测定。结果显示，扇贝的血液生理指标呈现显著的物种差异，其中栉孔扇贝血液的K+浓度[(15.74±1.47) mmol/L]、Na+浓度[(388.07±11.38)mmol/L]、Cl-浓度[(462.43±6.88) mmol/L]和p O2[(140.13±15.35) mmHg]最高。此外，栉孔扇贝和虾夷扇贝的Ca²⁺浓度和pCO₂含量较高，而海湾扇贝的pH最高。对相同月龄不同大小栉孔扇贝血液指标进行比较，发现栉孔扇贝的血液pH值与其壳高呈正相关(r=0.611)，而生理指标与壳高呈负相关。随着温度的升高，栉孔扇贝血液的Ca²⁺浓度显著增加，而pO₂显著下降，K<...     

栉孔扇贝类立克次体自然感染调查及人工感染试验

从 1999年 10月至 2 0 0 1年 3月对导致栉孔扇贝 (Chlamysfarreri)大规模死亡的可疑病原进行了系统调查 ,在栉孔扇贝体内发现 1种细胞内寄生原核生物。根据该原核生物超微形态结构及所形成的包涵体形态特征及染色性质分析 ,初步确定为类立克次体 (Rickettsia likeorganisms ,RLO)。该RLO大小为 (3.6 2 3± 1.4 35 ) μm× (1.343± 0 .32 6 ) μm (n =4 5 ) ,主要寄生在栉孔扇贝的鳃、消化腺的上皮组织中。其感染率和感染强度与水温及栉孔扇贝死亡率呈负相关关系。人工感染试验证明 ,RLO可引起栉孔扇贝感染 ,但不形成大面积明显的组织病理变化。本研究表明 ,RLO对栉孔扇贝不具明显的致病性 ,不是导致栉孔扇贝大规模死亡的主要原因。     

栉孔扇贝对环境变化适应性研究－温度对存活、呼吸、摄食及消化的影响

取体长分别为 ３和 ５ ｃｍ 栉孔扇贝（Ｃｈｌｙｍｙｓ ｆａｒｒｅｒｉ）置室内水泥池流水暂养 １周后进行实验。结果表明，栉孔扇贝 ９６ ｈ的半致死温度为 ２７～２８℃，导致其耗氧率突然升高和滤水率急剧下降的温度为 ２６℃，体内淀粉酶活性下降的温度为２７℃。因此确定，栉孔扇贝的适宜极限高温为２７℃。在水温２７℃持续９６ ｈ后，扇贝呼吸量迅速增大，随后减弱，摄食和消化能力逐渐降低；在 ２７℃持续 ５ ｄ，死亡率为 ５０％， ７ ｄ时全部死亡；在相同温度下，个体小的较个体大的耐高温程度要强一些。     

扇贝异源三倍体诱导

荧光显微观察表明,20℃水温下,栉孔扇贝(Chlamysfarreri)的卵与海湾扇贝(Argopecten irradians)的精子可以正常受精和发育,具备人工诱导三倍体的可行性.亲贝充分促熟后,分开催产,以20:1的精卵比授精;在50%的受精卵排出第1极体时,以60mg/L 6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)处理受精卵10～25 min,可诱导75.23%～92.14%的三倍体;6-DMAP处理15 min综合诱导效果最好,三倍体诱导率可达88.56%,孵化率可达53.52%.得到的三倍体幼虫经基因组原位杂交(Genomicin situ hybridization,GISH)验证,为含有2套栉孔扇贝染色体组和1套海湾扇贝染色体组的异源三倍体.孵化后诱导组与杂交对照组(未经6-DMAP处理)幼虫生长越来越缓慢,受精后14 d其幼虫存活率分别下降到0.000 67%和0.002 24%,没有幼虫度过附着变态期.GISH分析显示,栉孔扇贝与海湾扇贝不同倍性的杂种后代早在担轮幼虫阶段就出现母本偏向性染色体转变.     

6-二甲基氨基嘌呤诱导扇贝异源三倍体

用 6 二甲基氨基嘌呤处理栉孔扇贝♀×虾夷扇贝♂受精卵 ,抑制第二极体释放诱导异源三倍体。水温 17℃下 ,分别进行了不同起始处理时间 (受精后 2 0～ 4 0min)、不同药物处理浓度 (4 0～ 80mg/L)和不同持续处理时间 (5～ 2 0min)的实验。起始处理时间实验以受精后 35min开始处理效果最好 ,三倍体率为 5 1 8% ,D形幼虫成活率可达 78% ;药物处理浓度和持续处理时间最佳组合为 6 0～ 70mg/L 6 DMAP处理 2 0min ,三倍体率可达 5 9 6 5 % ,D形幼虫成活率为 2 2 0 5 %。综合考虑 ,诱导扇贝异源三倍体的适宜参数为 :当 5 0 %受精卵排出第一极体时 ,以 6 0～ 70mg/L 6 DMAP处理 2 0min。     

扇贝血细胞胞内酶活性的细胞学观察

分别对海湾扇贝、虾夷扇贝、栉孔扇贝的3种血细胞胞内酶：碱性磷酸酶(ALP)、过氧化物酶(POD)、酚氧化酶(PO)进行了免疫细胞化学研究，并对血细胞酶反应阳性率作了统计。结果表明，3种扇贝血细胞ALP阳性率相差不大，海湾扇贝为46．6％，虾夷扇贝为42．4％，栉孔扇贝为36．8％；3种扇贝血细胞POD阳性率相差较大，栉孔扇贝阳性率高达50．2％，海湾扇贝为44．2％，虾夷扇贝仅为17．2％。3种扇贝血细胞PO孵育反应后，由于海湾扇贝、虾夷扇贝PO反应活性很低，瑞氏染液复染后，无法区分阴性、阳性细胞。实验中仅对栉孔扇贝PO阳性率进行了统计，栉孔扇贝血细胞PO阳性率为39．3％。     

6-DMAP诱导栉孔扇贝异源雌核发育二倍体

采用紫外线遗传灭活的长牡蛎精子激活栉孔扇贝卵子，运用L9（3^4）设计不同6-DMAP的处理条件来诱导染色体加倍，获得第二极体抑制型栉孔扇贝雌核发育二倍体早期胚胎。以雌核发育担轮幼虫为材料，滴片法制备染色体并采用计数法统计倍性，分析不同6-DMAP浓度、诱导时机和诱导持续时间对雌核发育二倍体诱导率的影响，并统计早期胚胎畸形率。结果表明，不同6-DMAP浓度、诱导时机和诱导持续时间对异源精子诱导栉孔扇贝雌核发育二倍体的诱导率均有显著影响；早期胚胎畸形率与二倍体的诱导率呈负相关，y=46.632-0.891x（r=-0.813，P〈0.01）。6-DMAP诱导栉孔扇贝雌核发育二倍体的最佳处理条件为：20%～25%受精卵排放出第1极体时，60μg/ml的6-DMAP持续处理25min可得到最高的诱导率为29.5±5.36%。研究结果为6-DMAP诱导栉孔扇贝雌核发育染色体加倍提供了一定的细胞学依据和技术参数。     

匙吻鲟幼鱼耗氧率和窒息点的初步研究

在水温19.0～20.0℃,测定了匙吻鲟(体重156.42g±23.46g)的耗氧率和窒息点.结果表明:匙吻鲟幼鱼耗氧率具有昼夜节律性,耗氧率从1:00-17:00呈上升趋势,17:00至次日1:00呈下降趋势.匙吻鲟的昼夜平均耗氧率为0.23mg/g·h),耗氧率高峰值出现在15:00-19:00,低峰值出现在23:00-3:00.平均耗氧率7:00-19:00明显高于21:00-5:00(P<0.01).匙吻鲟幼鱼的窒患点为2.81 mg/L(以O2计).     

温度对虾夷扇贝普通养殖群体和选育新品种海大金贝呼吸代谢的影响

2012年5月和9月,2013年3月和6月,在自然水温条件下,采用呼吸瓶法比较了不同温度(5.6℃、10.5℃、14.4℃、21.2℃)下普通养殖虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)和虾夷扇贝选育新品种海大金贝(Haida golden scallop)耗氧率和排氨率的影响。结果表明,在实验设置水温范围内(5.6~21.2℃),普通虾夷扇贝和海大金贝的耗氧率表现出相似的变化趋势。在温度达到14.4℃之前,实验贝耗氧率随温度的升高而增大,而在14.4℃后,则随温度的升高而减小。两种贝最大耗氧率分别为1.67 mg/(g·h)和1.27 mg/(g·h),其中在5.6℃和14.4℃海大金贝耗氧率显著小于普通虾夷扇贝(P0.05);10.5℃和21.2℃时,两组贝类的耗氧率差异不显著(P0.05)。普通虾夷扇贝和海大金贝排氨率随温度变化呈现出不同的趋势。前者从5.6℃开始,随温度的升高,排氨率缓慢升高,水温为14.4℃时达到最大值,为0.063 mg/(g·h),然后逐渐降低,14.4℃水温的排氨率显著大于10.5℃和21.2℃(P0.05);而从5.6℃到10.5℃,后者的排氨率逐渐降低,10.5℃时达到最低值,为0.029 mg/(g·h),然后随温度升高缓慢升高,到21.2℃达到最高值。海大金贝组在温度条件为5.6℃和21.2℃时排氨率高于普通虾夷扇贝组(P0.05);而水温为14.4℃时,普通虾夷扇贝组排氨率显著高于海大金贝组(P0.05);10.5℃时两者排氨率差异不显著(P0.05)。两实验组耗氧率Q_10系数均随温度的升高而降低。O/N结果表明,普通虾夷扇贝在本次研究的设定温度区间内以消耗脂肪和碳水化合物为主;海大金贝以消耗蛋白质为主,当温度逐渐升高,转化为以消耗脂肪和碳水化合物为主,当水温达到较高的水平,又转换为以消耗蛋白质为主。