饲料中用混合植物蛋白并添加氨基酸替代鱼粉对斑节对虾生长及免疫力的影响

以不同比例大豆浓缩蛋白和花生麸为混合植物蛋白源替代不同水平鱼粉,并添加包膜赖氨酸和蛋氨酸,饲喂斑节对虾（Penaeus morlodoll）[（1．27±0．02）g]56d,研究不同鱼粉含量饲料对斑节对虾生长及非特异性免疫力的影响。结果表明：1）斑节对虾增重率（245．02％）、特定生长率（2．58％·d^-1）均在对照组获得最大值,显著高于除F1和F2组外的其他各组（P〈0．05）。当对虾摄食F1组饲料时饲料系数最小,显著小于F3～F5组（P〈0．05）。成活率在F4组最低,显著低于F0～F2组（P〈0．05）,但与其他各组无显著性差异（P〉0．05）;2）混合植物蛋白替代不同水平鱼粉的饲料对虾体成分无显著性影响（P〉0．05）;3）肝脏中超氧化物歧化酶（SOD）活性在F2组最高,显著高于对照组（P〈0．05）,与其他各组差异不显著（P〉0．05）。肌肉中S01）活性在F5组最高,显著高于其他各组（P〈0．05）,酸性磷酸酶（ACP）活性在F1组最高,显著高于F2～F4组（P〈0．05）,溶菌酶（LSZ）活性在F4和F5组最高,显著高于F1D～F3组（P〈0．05）。根据斑节对虾的增电率和特定生长率得出用混合植物蛋白并添加包膜氨基酸可替代饲料中20％的鱼粉,且随着饲料中植物蛋向含量的增加,对虾非特异性免疫力增强。     

切除单侧眼柄对不同体质量养殖斑节对虾卵巢发育及产卵的影响

在盐度31、水温28~29℃下,进行了4次卵巢诱导试验,研究了切除单侧眼柄对体质量56.4~105.4g的养殖斑节对虾卵巢发育和产卵的影响及卵巢发育、产卵与体质量之间的关系。结果显示,切除单侧眼柄诱导养殖斑节对虾卵巢发育成熟,成功率(y)与雌虾体质量(x)显著相关(P0.05),雌虾体质量越小,诱导成功率越低,回归方程为:y=133.92lnx-535.63(r2=0.9297)。养殖斑节对虾眼柄手术后,最快10d产卵,部分雌虾能重复产卵。产卵量(y)与雌虾体质量(x)显著正相关(P0.05),雌虾体质量越小,产卵量越小,回归方程为:y=122.22lnx-472.2(r2=0.9738)。雌虾累积死亡率、卵子直径和卵子孵化率与雌虾体质量无显著相关性(P0.05)。建议用体质量80g以上的养殖斑节对虾雌虾作为亲虾。     

斑节对虾的饥饿试验和补偿生长

研究了（25．0±1．5）℃下斑节对虾（Pertaeus mondon）[初始体质量（1．60±0．01）g]饥饿0d、2d、4d、6d和8d后再饱食投喂18d、16d、14d和12d的补偿生长和体组成变化。结果显示,饥饿2d的斑节对虾体质量上升,脂肪质量分数下降,而水分、灰分质量分数增加,但蛋白质质量分数没有明显改变。随着饥饿时间的延长,斑节对虾的体质量及蛋白质、脂肪等质量分数持续下降,水分和灰分质量分数持续上升。试验结束时饥饿2d和饥饿4d试验组斑节对虾的体质量略小于对照组,虾体的营养组成也均接近或达到对照组水平,而饥饿6d和饥饿8d试验组的斑节对虾的体质量则远低于对照组,且虾的身体营养组成与对照组具有显著性差异（P〈0．05）。在恢复生长过程中所有饥饿处理组的食物转化率（FCE）均高于对照组,各饥饿处理组的饲料系数（FCR）均低于对照组。研究结果表明,饥饿2d和4d的斑节对虾在恢复正常投喂之后具有部分补偿生长效应,这主要是由于恢复摄食后食物转化率提高的结果。     

斑节对虾含硒谷胱甘肽过氧化物酶基因全长克隆及表达分析

为了研究含硒谷胱甘肽过氧化物酶(selenium-dependent glutathione peroxidase,SeGPx)在斑节对虾应激反应和卵巢发育中的作用,实验以斑节对虾肝胰腺转录组数据中筛选获得的Se-GPx基因(Pm Se-GPx)片段为基础,利用RACE技术获得Pm Se-GPx基因的c DNA全长,并对其进行了生物信息学分析;利用荧光定量PCR技术研究了Pm Se-GPx在斑节对虾不同组织、卵巢发育各期、肝胰腺组织在pH9、硫酸铜(Cu~(2+))应激下的相对表达量和变化趋势。结果显示,Pm Se-GPx基因c DNA全长为959 bp,5'非编码区(UTR)长10bp,开放阅读框(ORF)长639 bp,编码212个氨基酸,310 bp的3'UTR包含一个硒代半胱氨酸插入序列(SECIS),ORF中的密码子209TGA211编码硒代半胱氨酸(selenocysteine,U67)。实时定量PCR实验结果表明,Pm Se-GPx在斑节对虾的肝胰腺、卵巢、精巢、心脏等组织中均有表达,其中肝胰腺中表达量显著高于其他组织,卵巢次之;卵巢发育阶段表达结果则显示Pm Se-GPx在卵巢发育各期均有表达,在卵巢Ⅲ期表达量最高,其次是V期;在Cu~(2+)胁迫下,其表达量总体呈现先下降后上升然后又下降的趋势;在环境pH为9胁迫下,表达趋势呈现先下降,后回升,然后又下降,再大幅上升的趋势。研究表明,SeGPx在斑节对虾卵巢发育过程中具有重要作用,且Se-GPx参与斑节对虾对环境理化因子应激的免疫调控。     

斑节对虾4个不同群体建立家系的生长及成活

以泰国（T）、非洲（A）和三亚（S）野生斑节对虾（Penaeusmonodon）群体,以及人工养殖斑节对虾群体（F）为父、母本建立家系。选择9个发育时间相近和较有代表性的家系,对其生长和饲料利用进行了为期30d的养殖试验。结果发现,大体上母本含三亚斑节对虾基因的家系成活率较高,其余较低,差异显著（P〈0．05）;母本含三亚斑节对虾基因的家系生长较差,其余较好（除T×T外）且差异极显著（P〈0．01）,A×A家系增重率是S×S的2倍;饵料系数没有显示明显的规律性。     

杂交鳜与鳜鱼、斑鳜肌肉营养成分和氨基酸含量比较

通过测定鳜鱼、斑鳜和杂交鳜的肌肉营养成分和18种氨基酸含量，结果表明：杂交鳜、斑鳜和鳜鱼的肌肉水分、脂肪、灰分的含量无显著差异（P〉0．05），杂交鳜与斑鳜的肌肉蛋白质含量无显著差异（P〉0．05），但均显著高于鳜鱼肌肉的蛋白质含量（P〈0．05）；鳜鱼、斑鳜和杂交鳜的18种氨基酸含量及其组成、18种氨基酸总量（TAA）、人体所需8种必须氨基酸总量（HEAA）及4种呈味氨基酸（天门冬氨孽、谷氨酸、甘氨酸和丙氨酸）的总量（FAA）均无显著差异（（P〉0．05）。     

斑节对虾GLUT1基因cDNA的克隆与表达分析

该研究利用RACE技术克隆获得了斑节对虾(Penaeus monodon) GLUT1 (glucose transporter type 1)的cDNA全长序列;采用实时荧光定量的方法研究了PmGLUT1在斑节对虾幼体发育过程中、各个组织中及低盐胁迫下的差异表达情况。该基因cDNA开放阅读框(ORF)全长1 476 bp,可编码491个氨基酸。检测PmGLUT1基因从受精卵至仔虾期发育过程的表达情况,结果显示,PmGLUT1在幼体发育各期的表达量有所波动,但总体呈现上升趋势。组织表达分析发现,PmGLUT1在鳃组织中的表达量最高,肝胰腺次之,在卵巢中的表达量最低。急性低盐胁迫后,PmGLUT1在肝胰腺中的表达水平显著高于对照组(P<0.05),但在鳃中的表达水平显著低于对照组(P<0.05)。研究结果表明,Pm GLUT1可能在斑节对虾幼体发育及机体应对低盐胁迫过程中具有重要作用,这为进一步研究葡萄糖转运蛋白基因在斑节对虾幼体发育调控和耐低盐胁迫应答中的分子机制提供了理论依据。     

深水网箱和池塘养殖凡纳滨对虾肌肉营养成分的比较分析

对深水网箱和池塘养殖凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肌肉常规营养成分、氨基酸和脂肪酸质量分数进行了比较分析。结果显示:1)网箱养殖对虾肌肉粗蛋白质量分数显著高于池塘养殖(P0.05),而水分、粗脂肪和粗灰分质量分数无显著差异(P0.05);2)肌肉中检测到18种常见氨基酸,网箱养殖对虾肌肉氨基酸总量(TAA)、天门冬氨酸(Asp)、异亮氨酸(Ile)、精氨酸(Arg)和脯氨酸(Pro)质量分数显著高于池塘养殖(P0.05),而必需氨基酸(EAA)、半必需氨基酸(HEAA)、鲜味氨基酸(DAA)和虾味氨基酸(PFAA)两者无显著差异(P0.05);3)肌肉中检测到30种常见脂肪酸,两者的饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)、多不饱和脂肪酸(PUFA)、n-3多不饱和脂肪酸(EPA和DHA)质量分数差异显著(P0.05),以网箱养殖对虾较高;两者的棕榈酸(C16∶0)质量分数最高,且网箱养殖对虾EPA+DHA质量分数是池塘养殖的1.90倍。结果表明,网箱养殖对虾营养成分要优于池塘养殖,具有较高的营养价值。     

斑节对虾泛素融合蛋白UbS27基因克隆与表达分析

从构建的斑节对虾(Penaeus monodon)肝胰腺转录组数据中筛选出泛素核糖体融合蛋白Ub S27基因(ubiquitin/ribosomal S27 fusion protein,Pm Ub S27)片段,利用SMART-RACE技术克隆出Pm Ub S27基因c DNA全长,并利用软件对其结构进行分析;利用实时荧光定量技术检测Pm Ub S27基因在斑节对虾不同组织及卵巢不同发育期的表达情况。结果显示,Pm Ub S27基因c DNA全长为514 bp,开放阅读框465 bp,编码154个氨基酸,含有泛素(1~72 aa)和核糖体蛋白(101~147 aa)2个结构域。以DNA为模板克隆得到的基因序列由3个内含子和4个外显子组成。实时荧光定量结果显示,Pm Ub S27基因在斑节对虾各组织中均有表达,但是在卵巢中表达量最高,其次为肝胰腺、血淋巴和精巢。Pm Ub S27在卵巢发育前期(Ⅱ期)和成熟期(Ⅴ期)的表达量显著高于其他各期(P0.05)。结果表明,Pm Ub S27参与斑节对虾卵巢发育的过程并可能在卵巢发育进程中起到重要的调控作用。     

克氏原螯虾卵黄蛋白原受体cDNA部分序列的克隆及mRNA表达量的相对定量

从成熟的克氏原螯虾卵巢中提取总RNA,通过同源克隆得到了卵黄蛋白原受体c DNA部分序列,长度为506 bp,在NCBI网站上进行比对后发现,其与斑节对虾、短沟对虾、罗氏沼虾的卵黄蛋白原受体(Vg R)c DNA序列有较高的相似性。采用实时荧光定量PCR方法,测定了卵巢不同发育时期卵巢和肝胰腺两个组织中卵黄蛋白原受体m RNA的相对表达水平。结果显示,卵巢是卵黄蛋白原受体基因表达的主要部位,而肝胰腺只能检测到少量表达,卵黄蛋白原受体基因在卵巢的卵原细胞增殖期相对表达量最高,随后下降,成熟期达到最低值,恢复期开始回升。结合卵巢不同发育阶段卵巢质量的变化计算表达总量,结果发现,卵黄蛋白原受体基因的表达总量在卵原细胞增殖期为最低,随后持续升高并至成熟期达到峰值,恢复期急剧下降,但仍略高于卵原细胞增殖期的表达量。此外,运用所构建的系统进化树比较了克氏原螯虾Vg R m RNA与其他物种间的遗传距离。     

育肥时间对三疣梭子蟹卵巢发育和营养品质的影响

采用育肥养殖实验和生化分析技术,研究了育肥时间对三疣梭子蟹雌体卵巢发育和营养品质的影响。结果发现,(1)经90 d育肥的雌体卵巢指数显著上升,出肉率和总可食率呈先上升后下降趋势,育肥30~60 d的总可食率达42%以上。(2)育肥时间对肌肉中常规营养成分含量无显著影响,育肥60 d卵巢和肝胰腺中的蛋白质、脂肪和碳水化合物含量最高,水分含量最低;育肥使肝胰腺和卵巢中胆固醇百分含量呈显著下降趋势,育肥后期卵巢和肝胰腺中的磷脂含量显著上升;就不同组织而言,肝胰腺中的甘油三酯含量最高。(3)育肥使卵巢和肝胰腺中的单不饱和脂肪酸呈上升趋势,而多不饱和脂肪酸呈先下降后上升趋势,肌肉中脂肪酸组成无显著变化;整体上,肌肉的脂肪酸营养价值优于肝胰腺和卵巢。(4)育肥早期卵巢中氨基酸含量显著上升,整个育肥过程中肌肉中的甜味氨基酸含量呈显著上升趋势,育肥60 d后卵巢和肌肉中所有必需氨基酸分值均大于100,无限制性氨基酸。研究表明,生殖蜕壳后的三疣梭子蟹雌体适宜育肥时间为60 d,育肥不仅提高了总可食率,且优化了其营养价值。     

饥饿对卵形鲳鲹幼鱼不同组织抗氧化能力、Na＋／K＋-ATP酶活力和鱼体生化组成的影响

卵形鲳鲹（Trachinotusovatus）幼鱼经短期饥饿处理后测定其鳃、肝脏和肌肉中的总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）质量摩尔浓度、Na＋／K＋-ATP酶活力和全鱼生化组成。结果显示,饥饿7d后鳃丝和肌肉的T-AOC显著升高,肝脏的T-AOC显著下降（P〈0．01）;鳃丝和肌肉SOD活力均显著升高（P〈0．01）,肝脏的SOD活力变化不显著（P〉0．05）;鳃丝、肝脏和肌肉的b（MDA）在饥饿后上升,鳃丝b（MDA）与对照组差异极显著（P〈0．01）,肝脏b（MDA）与对照组相比差异显著（P〈0．05）,肌肉b（MDA）差异不显著（P〉0．05）。饥饿8d后鳃丝Na＋／K＋-ATP酶活力显著升高（P〈0．01）,肝脏Na＋／K＋-ATP酶活力显著下降（P〈0．01）,肌肉Na＋／K＋-ATP酶活力也有所升高（P〉0．05）;饥饿后鱼体水分质量分数上升,粗蛋白质量分数、粗脂肪质量分数和能值下降,而且相对损失率是粗脂肪〉粗蛋白,表明卵形鲳鲹幼鱼在饥饿早期主要消耗脂肪向机体提供能量,随着饥饿时间的延长,蛋白质将被消耗。     

逆流运动及葵花籽油替代鱼油对吉富罗非鱼生长和体成分的影响

选取初始体质量（73．81±9．02）g的雄性吉富罗非鱼（GIFFOreochromisniloticus）,分别投喂含100％鱼油（A）、50％葵花籽油＋50％鱼油（B）和100％葵花籽油（C）的饲料,每种饲料设置2个流速运动水平（0BL·s-1、1．5BL·s-1）（BL,体长）,共6个试验组合（0A、1．5A、0B、1．5B、0C、1．5C）,饲养42d后测定试验鱼生长和体成分变化。结果显示各组合吉富罗非鱼的成活率没有显著性差异（P〉0．05）。1．5B组合的特定生长率（4．96±0．02）％·d-1显著高于其他各组合（P〈0．05）。逆流运动后红肌和白肌蛋白质含量分别最高增加10．25％和7．74％（P〈0．05）。逆流运动对全鱼和肌肉多不饱和脂肪酸（PUFA）含量没有显著影响（P〉0．05）,但饲料B组和c组鱼体红肌PUFA含量显著高于A组（P〈0．05）,而B组和c组之间则没有显著差异（P〉0．05）。研究结果表明,葵花籽油替代鱼油对吉富罗非鱼的生长和体成分没有显著影响,而逆流运动能够显著提高肌肉蛋白质含量。     

野生与养殖刺参营养成分的比较分析

分别对野生和养殖的刺参（Apostichopus japonicus）体壁中营养成分,包括灰分、盐分、蛋白质、粘多糖、胶原蛋白、皂苷、氨基酸组成及11种无机元素进行了比较分析。结果显示,野生和养殖刺参的胶原蛋白质量分数（以干基计）为39.43%和40.37%,差异不显著（P〉0.05）;盐分、粘多糖及皂苷质量分数分别为18.47%、15.40%,10.19%、9.27%和0.81%、0.62%,差异显著（P〈0.05）;灰分、粗蛋白质质量分数分别为25.73%、20.74%和58.80%、62.21%,差异极显著（P〈0.01）。氨基酸组成中必需氨基酸总量分别为21.16%和20.28%,差异显著（P〈0.05）;鲜味氨基酸、药效氨基酸总量分别为30.86%、28.00%和33.66%、30.39%,差异均极显著（P〈0.01）。矿物元素含量丰富,野生刺参的微量元素比例要略优于养殖刺参,铅（Pb）、汞（Hg）和镉（Cd）等重金属含量均符合相关食品卫生标准限量。综合分析认为,野生和养殖刺参均有较高的营养价值,富含胶原蛋白、粘多糖等生物活性物质及人体所需的矿物元素,鲜味氨基酸和药效氨基酸含量丰富。     

肌醇对卵形鲳鲹生长、饲料利用和血液指标的影响

配制w（肌醇）为350mg·kg^-1、458mg·kg^-1、507mg·kg^-1、720mg·kg^-1和1050mg·kg^-1的5种饲料，投喂初始质量为（8．30±0．11）g的卵形鲳鲹（Traehinotus ovatus）56d，评估肌醇对卵形鲳鲹生长、饲料利用和血液指标的影响。摄食w（肌醇）为720mg·kg^-1的饲料组的鱼增重率和特定生长率显著高于其他组（P〈0．05），脏体比不受肌醇的影响；458mg·kg^-1、507mg·kg^-1和720mg·kg^-1 3个饲料组的成活率显著高于350mg·kg^-1和1050mg·kg^-1 2个饲料组（P〈0．05）；507mg·kg^-1 饲料组全鱼的水分显著高于720mg·kg^-1 饲料组以外的其他组（P〈0．05），脂肪显著低于720mg·kg^-1饲料组以外的其他组（P〈0．05），粗蛋白无显著差异（P〉0．05）。随着肌醇质量分数的增加，血糖浓度先升高后下降，720mg·kg^-1饲料组血糖浓度最高，显著高于350mg·kg^-1和458mg·kg^-1饲料组（P〈0．05）；507mg·kg^-1饲料组的低密度脂蛋白胆固醇浓度显著低于1050mg·kg^-1饲料组以外的其他组（P〈0．05）；添加肌醇能显著降低血液甘油三酯浓度，但对血液总蛋白、尿素氮、总胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇没有影响。     

添加光合细菌对糙海参幼苗培育阶段的影响研究

以受精后24h孵化出的糙海参（Holothuria scabra）耳状幼体为研究对象,探讨养殖水体不同量光合细菌对糙海参苗期生长、成活、消化道消化酶活性和养殖水体水质变化的影响。试验设4个处理,光合细菌（浓度为1×10^11cfu·mL^-1）添加量分别是0m L（组1,对照组）、50m L（组2）、100m L（组3）和150m L（组4）,每个处理设3个重复,每个重复放养4×10^4尾幼体于室内水泥池（5m×3 m×1.5m）中,试验周期为41 d。结果表明,添加光合细菌组的糙海参出苗体质量和成活率均显著高于对照组（P〈0.05）,而组3和组4的体质量和成活率又明显优于组2（P〈0.05）,组3和组4之间的差异不显著（P〉0.05）。添加光合细菌还能不同程度地影响糙海参苗体消化道蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶的活性,试验组3种酶的活性均显著高于对照组（P〈0.05）,而组3和组4的蛋白酶活性和纤维素酶活性显著高于组2（P〈0.05）,淀粉酶活性在3个试验组之间无显著差异（P〉0.05）。在试验第10天后,各试验组氨氮（NH3-N）和亚硝酸盐含量显著低于对照组（P〈0.05）,在试验第20天后,各试验组化学需氧量（COD）的值显著低于对照组（P〈0.05）,而总磷（TP）的差异不大（P〉0.05）。表明光合细菌可以促进糙海参幼体的生长,提高消化酶活性和成活率,并改良育苗水体水质。     

克氏原螯虾不同发育时期5-HT与DA在卵巢和肝胰腺中的分布

为了研究5-HT与DA阳性物质在克氏原螯虾(Procambrus clarkii)不同发育时期的卵巢细胞和肝胰腺细胞中的分布特征,运用免疫组化法对卵巢发育4个不同时期的卵巢与肝胰腺进行观察。结果表明,各期卵巢卵细胞和肝胰腺细胞中均存在5-HT与DA阳性物质。Ⅰ期卵巢5-HT阳性物质分布于卵母细胞胞核,胞质未出现阳性;Ⅱ期～Ⅳ期5-HT阳性物质主要集中在卵母细胞胞质以及胞核。在发育各期的肝胰腺中5-HT的免疫物质均呈阳性。Ⅰ～Ⅳ期卵巢中,DA阳性物质主要分布于卵母细胞的胞核以及肝胰腺细胞,其强度呈递减趋势。结果提示5-HT具有促进卵巢发育作用,而DA则抑制卵巢发育。     

不同生长发育阶段方格星虫氨基酸组成的研究

以方格星虫（Sipunculus nudus）幼虫、稚虫和成虫为试验材料,比较分析了不同生长发育阶段方格星虫的主要营养成分及氨基酸组成的变化。结果显示,幼虫、稚虫和成虫的粗蛋白含量分别为56.46%、66.40%和74.84%,粗脂肪含量分别为2.51%、2.65%和2.95%,粗灰分含量分别为30.89%、18.88%和7.86%,总糖含量分别为8.35%、5.81%和5.62%,水分分别为93.54%、89.04%和85.95%。随着方格星虫的生长发育,粗蛋白和粗脂肪含量逐渐升高,粗灰分、总糖和水分含量逐渐降低。大部分氨基酸的百分含量在一定的阶段内随着个体的生长发育呈显著升高的趋势（P〈0.05）;3个生长阶段甘氨酸（Gly）和组氨酸（His）分别为2.90%、6.94%、5.57%和1.15%、1.51%、1.48%,在幼虫到稚虫阶段均显著增加（P〈0.05）,成虫阶段Gly显著降低（P〈0.05）,His则保持相对恒定。3个生长阶段必需氨基酸（EAA）/总氨基酸（TAA）分别为31.98%、27.56%和32.61%,差异显著（P〈0.05）,成虫最高;稚虫呈味氨基酸（DAA）/TAA最高,为58.76%,幼虫和成虫无明显差异（P〉0.05）。