哈维氏弧菌RT-LAMP检测方法建立与应用

哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)是引起海南省后水湾深水网箱养殖卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)"烂身病"的主要病原菌。为了能够快速诊断该病原菌,急需建立一种耗时短、准确以及便捷的检测方法。本研究利用分离到的致病菌株QT520的ToxR基因序列设计特异性引物和加入SYTO-9特异荧光染料,建立了一种可以实时、快速检测哈维氏弧菌的LAMP法(RT-LAMP)。该方法对哈维氏弧菌的基因组DNA及菌液灵敏度分别为100 fg/μL和10~3 cfu/mL,与Real-time PCR法检测灵敏度相当,比普通PCR的检测灵敏度要分别高1000倍和10倍,能有效区分哈维氏弧菌与坎氏弧菌(Vibrio campbellii);可以实时观察检测结果,且检测时间只需要40 min;具有耗时短、特异性和灵敏度高、仪器便携、操作简单且能实时观察检测结果等优点,非常适合在生产现场进行哈维氏弧菌的检测。     

卵形鲳鲹海水网箱养殖技术

卵形鲳鲹属鲈形目、鲹科、鲳鲹属，又名金鲳、黄腊鲳等，因其肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富，深受东南亚市场的青睐。卵形鲳鲹具有生长速度快、适应环境能力强、成活率高等特点，一般当年养殖，当年即可达到上市商品规格，经济效益显著，因而深受养殖业者的欢迎。随着人工育苗与养殖技术的发展，卵形鲳鲹现已成为我国南方沿海地区广泛养殖的一种经济鱼类。卵形鲳鲹的养殖方式主要有网箱养殖、池塘养殖、鱼媪养殖等，近几年来在我国海南和广东等地沿海进行网箱养殖的规模不断扩大，因此，下面主要就卵形鲳鲹的网箱养殖技术做一个简单的总结和介绍。     

北方池塘卵形鲳鲹发生车轮虫病的诊治

卵形鲳鲹（Trachinotusovatus）属鲈形目、鲶科、鲳鲹亚科、鲳鲹属,分布于印度洋、太平洋和大西洋的热带和温带海域,为我国南方沿海常见的种类。近年来,卵形鲳鲹的人工养殖在海南等南方沿海地区迅速开展,已成为海南海水网箱养殖鱼类的主要品种之一,养殖产生了良好的经济效益和社会效益,但是,在我国北方地区进行卵形鲳鲹养殖尤其是池塘养殖尚处于试验阶段,养殖技术不成熟,对卵形鲳鲹的病害防治还处于摸索阶段。2008年,连云港市海洋与水产科学研究所等单位从海南引进卵形鲳鲹苗种,进行池塘养殖试验,在试验过程中,     

卵形鲳鲹深水网箱养殖技术研究

<正>卵形鲳鲹俗称金鲳,属鲈形目、鲹科、鲳鲹属,一般当年鱼苗在正常养殖条件下可达500克,具有较好的市场前景,现已成为广东、广西、海南海水网箱的主要养殖品种。为配合湛江港区清障行动,引导港区鱼排养殖户实现顺利转产,广东省海洋渔业局与湛江国联水产开发股份有限公司在湛江南三岛西南面海域组织实施广东省深水网箱项目,并进行卵形鲳鲹养殖试验,取得了良好的经济效益和社会效益。一、材料与方法1.养殖海域情况深水网箱项目实施海域位于湛江市南三岛西南     

噬菌28系列在海水养殖动物中危害严重的共性疾病防治中的使用（二）

3.弧菌病也称溃疡病、烂身病,在绝大部分海水养殖动物中均可发生。该病的病原主要由鳗弧菌、副溶血弧菌、溶藻胶弧菌、哈维氏弧菌、创伤弧菌等。弧菌为条件致病菌,在海水和底泥中都可发现,在健康鱼类的消化道中也是微生物区系的重要组成部分,但是一旦条件适宜时就成为致病菌。     

卵形鲳鲹网箱养殖技术

卵形鲳鲹(Trachinouts ovatus)属于鲈形目、鲈亚目、鲳鲹亚科、鲳鲹属,俗称红三、金鲳、短鳍鲳、黄腊鲳,是我国台湾省海水网箱养殖的主要品种之一。卵形鲳鲹具有生长速度快、适应环境能力强、养成成活率高等特点,其肉为白色,较细嫩,肉质鲜美可口,为名贵海产经济鱼类之一;一般当年放养体     

海水网箱养殖许氏平鲉细菌性疾病病原鉴定及致病性研究

2019年8月,大连市金州区大李家街道海域海水网箱养殖许氏平鲉(Sebastes schlegeli)暴发严重的皮肤溃疡性疾病。以其为研究对象,从体表病灶、肝脏和肾脏上进行细菌分离,得到1株优势菌株BN-1910。为了验证网箱养殖许氏平鲉死亡是否由该菌株引起,采取腹腔注射的方式进行该菌株回感,以确定该菌株的致病力。在对菌株进行生理生化检验和形态学观察后,可以初步判断菌株为哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)。基于16S rRNA基因序列构建的分子系统发生树表明,哈维氏弧菌(MT864681.1)和该菌株在系统发育树中聚为一支,99%置信水平。研究结果显示,菌株BN-1910为哈维氏弧菌(V.harveyi),对许氏平鲉10 d的LD50为7.98×10^3 CFU/mL;对14种药物的敏感试验证实,菌株BN-1910对氟哌酸、链霉素和左氧氟沙星敏感。     

2012年～2014年南海海水养殖鱼类病原菌哈维弧菌分离株的耐药性分析

哈维弧菌(Vibrio harveyi)是海水养殖鱼类主要的病原菌,给养殖业带来了巨大的损失.该研究采用K-B法对南海地区沿岸养殖鱼类90株哈维弧菌分离株进行抗生素耐药性分析,通过系统聚类法以平方Euclidean距离来分析菌株间的耐药性同类关系,探讨哈维弧菌耐药性的时空分布和耐药谱的多样性.结果显示,90株哈维弧菌共有耐药谱26种,谱型丰富度为28.9％.其中,多重耐药谱(耐3类及以上抗生素)21种,包含菌株共35株,占总菌株数的38.9％,谱型丰富度为80.8％.从时间分布上看,2012年、2013年和2014年分别具有10、18和8种耐药谱型;从地区分布上看,海南、广东和广西3个地区分别包含17、13和2种耐药谱型,时间与地区的耐药谱型差异明显.90株哈维弧菌样本聚类分析得到Group Ⅰ、GroupⅡ和其他组群,分别含有11、12和4种耐药谱,耐药谱型率分别为16.9％、57.1％和100％,而Group Ⅰ和GroupⅡ组群进而分为5个亚群i～v.结果表明,在广东、海南和广西地区养殖鱼类中所分离到的哈维弧菌耐药谱具有复杂多样性特征,随着时间年份的递增,哈维弧菌耐药谱种类也发生着更新变化,耐药谱不断扩大延伸.     

卵形鲳鲹深水网箱养殖密度试验

为了研究深水网箱养殖卵形鲳鲹适宜的放养密度,在一组4个深水网箱中分别按照40,50,60,80尾/m3的密度,放养规格12～14 g/尾的卵形鲳鲹苗种进行为期100～122 d的养殖试验.结果表明;40～50尾/m3放养密度的各项生长指标优于60～80尾/m3,40～50尾/m3的日均增重、饲料系数、成活率和利润分别为4.32～4.23 g/d、1.75～1.80、91.7%～90.3%、43.0～44.6元/m3,60～80尾/m3分别为3.83～3.12 g/d、1.92～2.10、89.6%～86.4%、23.4～-17.4元/m3.过高的放养密度不利于卵形鲳鲹生长,并且增大了饲料系数,增加了养殖成本.在深水网箱中放养规格为12～14 g/尾的卵形鲳鲹,养殖密度以40～50尾/m3为宜.     

深水网箱养殖卵形鲳鲹应注意的几点问题

近年,随着深水网箱在国内的快速发展,深水网箱养殖面临着建立一套可操作性强的集约化健康养殖技术体系问题,与之匹配的不同品种的个性化养殖技术研究更显重要。卵形鲳鲹是近年来新兴的一个名贵养殖品种,其生长速度快,养殖半年多,可达500g；它肉白色细嫩,     

卵形鲳鲹池塘养殖技术

卵形鲳鲹俗称金鲳、黄腊鲳，属脊椎动物门，硬骨鱼纲，鲈形目，鲹科，鲳鳕属。体呈鲳形，高而侧扁，为暖水性中上层洄游性鱼类，幼鱼在河口海湾栖息，群聚性较强，成鱼时向外海深水移动。杂食偏肉食性，在自然海区中，一般以小鱼、甲壳类、小鱿鱼等为食物。卵形鲳鲹的肉白色细嫩，含脂肪多，鲜美甜口，生长速度快，养殖半年多，     

2013-2014年浙江省海水养殖常见致病菌耐药性分析

<正>鱼类细菌性体表溃疡病、大黄鱼内脏白点病、三疣梭子蟹"红斑病"以及南美白对虾的急性肝胰腺坏死病,是近年影响浙江省海水养殖比较严重的细菌性疾病。细菌性因素引起的鱼类体表溃疡病流行速度快、范围广、危害程度比较严重,哈维氏弧菌是该病的常见病原。大黄鱼内脏白点病是发生在近年网箱养殖大黄鱼的严重病害,香鱼假单胞菌是该病的致病菌。梭子蟹"红斑病"是舟山围塘养殖三疣梭子蟹发生的一种暴发性疾病,其传播速度较快,一周内累积     

北方池塘半咸水养殖卵形鲳鲹试验

卵形鲳鲹（Trachinotu sovatus）属鲈形目，鲹科，鲳鲹亚科，鲳鲹属，俗称黄腊鲳、黄腊鲹、卵鲹、短鳍鲳鲹、金鲳、红三、红沙等。该鱼肉无刺，肉质细嫩，味鲜美，体色艳丽，具有鲹类的特殊香味，历来被列为名贵食用鱼类，经济效益显著，因而深受养殖者的欢迎，卵形鲳鲹对盐度适应范围广，甚至可以在淡水中生存，卵形鲳鲹养殖具有广泛的推广价值。     

利用深水网箱和膨化饲料养殖卵型鲳鲹的生长表现

美国大豆协会与海南陵水601号网箱养殖场、海南省水产技术推广站和全国水产技术推广总站合作进行卵型鲳鲹(Trachinotus ovatus)深水网箱养殖试验。本试验的目的是利用美国大豆协会OCAT(深水网箱养殖技术)标准网箱和海水鱼膨化饲料养殖卵型鲳鲹,对于鱼类养殖和网箱性能进行评估。1材料与方法1.1网箱结构本试验用的深水网箱为美国大豆协会设计,体积为100 m3的截顶四方锥形(塔形)网箱。网箱顶部的面积为2 m×2 m,网箱底部的面积为7m×7 m,网箱垂直高度约4.5 m。网箱的框架由HDPE(高密度聚乙烯)管件构成,网箱顶部及底部的框架以直径280 mm、…     

中草药在北方深水网箱无抗生素养鱼技术研究中的应用

深水网箱养鱼是现代鱼类养殖最高生产力的代表之一，是接近自然生态，产出鱼类品质优良的最佳养殖模式之一。但是随着网箱养殖蓬勃发展，高密度集约化养殖，出现养殖海区环境Et益恶化，养殖病害发生日趋频繁，各种细菌性病害、弧菌病、肠炎病、球菌病蔓延滋生等问题。为了应对细菌病害，人们盲目滥用抗生素，造成抗生素药残超标。     

蟹池内网箱套养布氏鲳鲹技术

布氏鲳鲹（Trachinotus blochii）俗称红衫、金鲳鱼，属鲈形目、鲈亚目、鲹科、鲳鲹属。该鱼具有肉质细嫩、肌细刺少、适应性强、生长速度快、抗病能力强等特点，是一种易于圈养、养殖经济效益较高的海水鱼类品种，我国台湾较早开展布氏鲳鲹的育苗与养殖开发。为丰富福州市海水养殖鱼类品种并提高池塘综合经济效益，2001～2004年我们在福建省连江县大官坂垦区开展蟹池内网箱套养布氏鲳鲹的试验与生产，现将其技术要点归纳如下。     

虾源哈维氏弧菌的致病性与生物学特性比较分析

哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)是导致养殖对虾暴发弧菌病的重要病原之一。从我国南方养殖凡纳滨对虾(Penaeus vannamei)分离、鉴定了10株哈维氏弧菌(Vh00947、Vh00949、Vh11011、Vh11014、Vh21217、Vh21218、Vh21220、Vh21229、Vh21231和Vh31487),分别肌注感染健康凡纳滨对虾后发现,菌株Vh21229致病性很弱,Vh00949其次,其它菌株毒力较强;对8种哈维氏弧菌常见毒力基因(Vh1、Vh2、Vh3、Vh4、tox S、hcp、zot和pap6)的检测显示,南方虾源哈维氏弧菌无论强弱毒株都很少携带zot、pap6、toxs和4种Vh基因(≤10%),表明这10个菌株的致病性与这7种常见毒力因子的相关度很低;hcp基因在所有菌株中均有检出,其中强毒株中检出率较高(50%),在较弱毒株(Vh00949)中也存在,表明hcp基因与这些菌株的致病性密切相关,但不是决定性因子。因此,这10株南方虾源哈维氏弧菌菌株的致病性差异应由这8种常见毒力因子以外的未知或未检测到的因子所决定。生化特征分析显示,所有菌株中只有弱毒株Vh21229不能利用D-甘露糖、蔗糖、D-海藻糖,而且只有其赖氨酸脱羧酶反应至阳性,而其它菌株均为阴性,推测导致哈维氏弧菌菌株生化特性改变的某种因子可能对菌株的致病性也产生了影响。药敏实验表明,10株哈维氏弧菌均对环丙沙星、氯霉素、恩诺沙星、美罗培南、头孢曲松、多西环素、头孢吡肟、诺氟沙星敏感,而对氨苄西林耐受性强,表明在虾类养殖过程中应当严格规范和控制抗菌药物尤其是青霉素类药物的使用。     

海水网箱区沉积物中硫酸盐还原菌（SRB）的分离纯化和鉴定

目前网箱养殖水域的硫酸盐还原菌（SRB）的危害表现日益严重,海水网箱沉积物中SRB分离鉴定尚属空白,针对不同属种的SRB开展生物修复具有一定的意义。在大亚湾大鹏澳网箱养殖沉积物中分离出25株硫酸盐还原菌纯菌株,通过对菌株的形态观察,生理生化特征和遗传特征的一系列研究,结果表明所有菌株均含有脱硫弧菌素,被鉴定为脱硫弧菌属（Desulfovibrio）其中CSRB2、CSRB4、ESRB2鉴定为脱硫脱硫弧菌（Desulfovibrio Desulfovibricans）,ASRB4、BSRB1菌株鉴定为脱硫脱硫弧菌河口亚种（Desulfovibrio Desulfovibricans subsp.aestuarii）,其余菌株鉴定为需盐脱硫弧菌种（Desulfovibrio salexigens）。此海区SRB种类数量特征是需盐脱硫弧菌〉脱硫脱硫弧菌〉脱硫脱硫弧菌河口亚种。     

红鱼寄生虫病并发感染细菌研究

2002年10月,在对大亚湾网箱养殖红鱼寄生虫病研究中,从病鱼和死鱼溃烂处共分离到7株细菌,经鉴定,为副溶血弧菌、溶藻弧菌、霍乱弧菌、创伤弧菌、紫色色杆菌和温和气单胞菌。药敏试验结果表明:复方新诺明、多黏霉素B、氯霉素、链霉素、呋喃妥因对分离菌株具有显著的抑制作用;分离菌株对四环素等12种药物有抗药性。     

花鲈弧菌病病原菌（哈维氏弧菌）的分离与鉴定

1999年4－5月，山东省青岛市胶南海区网箱养殖场花鲈（Lateolabrax japonicus)幼鱼发生暴发性传染病，死亡率达50％。从具有明显症状的病鱼的病灶组织分离到1株优势菌SF－1，经人工感染和从人工感染发病的花鲈再分离的SF－3菌株的再感染试验结果表明，所分离的菌株为此次花钙烂层病的致病菌，经形态、生理生化等64项特征指标鉴定，SF－1和SF－3均为哈维氏弧菌（Vibrio harveyi)。药敏试验结果表明，头孢噻肟，头孢三嗪，头孢孟多，呋喃妥因，氯霉素,氧哌嗪青霉素，磺胺类，复方磺胺、三甲氧苄氨嘧啶，多粘菌素E等10种药物对该菌株有明显的抑制作用。