中华鳖温和气单胞菌病的病原研究

中华鳖温和气单胞菌病是集约化温室养鳖的主要疾病之一。１９９４—１９９７年间先后从垂死病鳖的血液和肝脏分离到９４—１０—２８、９５—３—２０、９６—２—１、９６—３—Ａ和９７—６—１３五菌株。经细菌学鉴定均为温和气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｓｏｂｒｉａ）。任选其中二菌株进行人工感染，均使鳖１００％患病。发病鳖的症状与自然病鳖的症状一致，再分离菌株的各种特性与原分离菌株相同。采用二倍稀释法，测定比较了八种药物对上述二菌株的最低抑菌浓度（ＭＩＣ），５号药的抑菌效果最佳。     

中华鳖温和气高胞菌病的病原研究

中华鳖温和气单胞菌病是集约化温室养鳖的主要疾病之一.1994-1997年间先后从垂死病鳖的血液和肝脏分离到94-10-28、95-3-20、96-2-1、96-3-A和97-6-13五菌株.经细菌学鉴定均为温和气单胞菌(Aeromonas sobria).任选其中二菌株进行人工感染,均使鳖100%患病.发病鳖的症状与自然病鳖的症状一致,再分离菌株的各种特性与原分离菌株相同.采用二倍稀释法,测定比较了八种药物对上述二菌株的最低抑菌浓度(MIC),5号药的抑菌效果最佳.     

鳖池水体中优势菌的初步研究

对各种养鳖池中的水体进行细菌分离,共获得四种优势菌,经细菌学鉴定分别为嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)、温和气单胞菌(A.sobria)、豚鼠气单胞菌(A.caviae)和费氏枸椽酸杆菌(Citrobacterfreundii)。各水体中均存在此四种优势菌,且其对小鼠的毒力反应一致,24h内供试小鼠全部死亡。此四菌株亦可诱发中华鳖发病死亡,当感染菌数为5×107个/只,7d内幼鳖发病死亡率达100%。     

鳖白底板病、腐皮病并发症病原菌及药物治疗

中华鳖(Ｔｒｉｏｎｙｘｓｉｎｅｎｓｉｓ)的白底板、腐皮病是两种较严重的传染病,两者并发症的感染率可达80%～90%,死亡率100%。陈晓凤等[1995]研究认为白底板病的病原是嗜水气单胞菌(Ａ.ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ)、迟缓爱德华氏菌(Ｅ.ｔａｒｄａ)和变形杆菌(Ｐ.ｖｕｌｇａｒｉｓ)。而谢军[1996]认为该病的病原可能是病毒。腐皮病的病原也众说不一,孙佩芳等[1998]多次从患腐皮病的中华鳖血液和肝脏中分离到温和气单胞菌,而其他人也从患腐皮病鳖体内分离到气单胞菌、假单胞菌和无色杆菌等菌种,其中认为气单胞菌为主要致病菌[中国科学院水生生物…     

幼鳖出血性败血症的诊治

对患出血性败血症幼鳖内脏分离出的细菌，经生理生化鉴定，菌体凝集反应和被动免疫保护试验，表明温和气单胞菌（Aeromonas sobria)是该场幼鳖暴发性疾病的病原，根据药物敏感结果选择敏感药物，采用内服外消，结合水质改良，取得了较好的治疗效果。     

18种中草药煎液对温和气单胞菌的抑、杀菌效果

采用琼脂扩散法(打孔法)测定了五倍子等18种中草药对2株病原温和气单胞菌(Aerom onas sobria)的抑制作用,并采用试管2倍稀释法测定抑菌效果较强的中草药对这2株温和气单胞菌的抑菌和杀菌浓度。结果显示:五倍子、苏木、地锦草、石榴皮、黄芩、虎杖和山楂对病原温和气单胞菌的抑菌效果较强;苏木、五倍子、地锦草和石榴皮4种中药对2株温和气单胞菌的最小抑菌浓度(M IC)为1.56～6.25 mg/mL之间,最小杀菌浓度(MBC)为3.12～12.5 mg/mL之间,其中五倍子的抑菌和杀菌浓度最低,分别为1.56 mg/mL和3.12 mg/mL;而金银花等11种中草药抑菌作用较小。结果表明,所选取的18种中草药中五倍子对防治由温和气单胞菌感染引起的水产动物疾病最为有效。     

水产动物气单胞菌鉴定方法研究进展

<正>气单胞菌属于γ-变形菌纲、气单胞菌目、气单胞菌科、气单胞菌属(Aeromonas),该属包括嗜水气单胞菌(A.hydrophila)、温和气单胞菌(A.sobria)、豚鼠气单胞菌(A.caviae)、维氏气单胞菌(A.veronii)和杀鲑气单胞菌(A.salmonicida)等20个种,其中嗜水气单胞菌和杀鲑气单胞菌又分别包括5个亚种[1]。气单胞菌广泛分布于自然生态系统     

中华鳖“拟白斑病”病原菌分离鉴定及药敏实验

本对中山市养殖中华鳖暴发的以体表产生白膜病症的一种疫病病原体进行分离鉴定及药敏实验。从自然感染症状明显的中华鳖内脏器官中分离所得的菌株，经生理生化特性测定，并参考实验菌菌落、菌体特征，初步鉴定为气单胞菌科维隆气单胞菌温和生物型种(简称为温和气单胞菌Aeromonas sobria)。并且，用多种常用鱼病防治药物对分离菌进行了药敏实验，以期筛选出对该病原菌较敏感的药物用于指导生产上防治疫病。     

运动性气单胞菌分离、鉴定方法的研究与应用

通过碱性蛋白胨水（APW）的增菌效果与气单胞菌培养基（RYAN）的选择性效果试验，以及对运动性气单胞菌（Motil aeromonads）的培养特性、鉴定特征的比较观察，建立了运动性气单胞菌细菌学分离和鉴定的实验室检测程序。对8个模拟阳性样品进行检测，结果感染菌包括4株嗜水气单胞菌（A.hydrophila）、2株温和气单胞菌（A.sobia）和2株豚鼠气单胞菌（A.cavias）全部被分离到。对鱼粉、肉骨粉、牛肉粉、蛤蚧等60个动物产品样品，5个饲养牛蛙、鲫鱼和泥鳅的水样；6个牛蛙、鲫鱼、金鱼的病料进行检测，结果分离到20株运动性气单胞菌，其中8株嗜水气单胞菌，8株温和气单胞菌和4株豚鼠气单胞菌，实验表明，所建立的分离和鉴定方法是一种简便、快速和敏感的方法，其检测程序不仅运用于进出境动物产品和环境样品的检测，也可用于动物以及淡水养殖动物气单胞菌病的诊断和监测。     

中华鳖常见细菌病的病原鉴定及药物体外拮抗比较

对中华鳖疖疮穿孔病、腐皮病、出血性肠道坏死症、细菌性肝水肿病与白点病等5种常见鳖病的16株病原菌进行鉴定与抑菌效果测定,其中温和气单胞菌6株,类志贺邻单胞菌1株,嗜水气单胞菌6株,豚鼠气单胞菌3株。各分离株对中华鳖与实验小鼠均具强毒力。对16株病菌的体外拮抗结果统计表明,不同鳖病致病菌的药物拮抗作用存在明显差异,而病症一致采集地各异的中华鳖病菌其体外药物敏感性亦有所不同,以丁胺卡那、氟嗪酸、环丙沙星、新霉素、庆大霉素、红霉素、卡那霉素、呋喃妥因等抗生素的抑菌效用最为显著,中高敏频次≥10。     

Dominant pathogenic species of mesophilic aeromonads isolated from diseased and healthy fish cultured in Poland

Aeromonas isolates were collected from cultured fish, characterized phenotypically and identified to species using 16S rDNA. The pathogenicity of all isolates was assayed on the basis of haemolytic and proteolytic activity and challenge tests were performed for isolates from healthy fish. A total of 131 Aeromonas isolates were obtained and identified as follows: A. hydrophila (13), A. bestiarum (23), A. salmonicida (motile biogroup) (19), A. caviae (2), A. sobria (18), A. veronii bt. sobria (42), A. jandaei (1), A. encheleia (11) and A. allosaccharophila (2). All isolates of A. hydrophila and A. bestiarum and most isolates of A. salmonicida and A. veronii were classified as pathogenic. Aeromonas hydrophila was isolated only from diseased trout except for one isolate obtained from carp fry. The other potentially pathogenic Aeromonas species were present in diseased as well as healthy fish. The pathogenicity of isolates from healthy fish was correlated with their enzymatic activity and was also tested by challenge experiments. The dominant pathogenic species were A. veronii bt. sobria, A. bestiarum and A. salmonicida in common carp and A. hydrophila in rainbow trout.     

中华鳖气单胞菌菌细胞苗和菌化学成份疫苗研制

利用分离自中华鳖的嗜水气单胞菌Ａｈ９６１００４、Ａｈ９６０９１６和Ａｈ９７０５１６与温和气单胞菌Ａｓ９７０５１０菌体及其上清制备灭活苗细胞苗和化学成份疫苗。肌肉注射中华鳖进行免疫，加强免疫１５ｄ后，用菌株Ａｈ９６１００４腹腔注射进行攻击，观察２０ｄ。结果表明，温和气单胞菌Ａｓ９７０５１０株的菌苗及其胞外分泌物（ＥＣＰ）苗组和嗜水气单胞菌Ａｈ９６１００４株的外膜成份组对嗜水气单胞菌的攻击的保护率最高     

金鱼致病菌的分离鉴定与药敏特性

采用常规方法对患病金鱼(Carassius auratus)内脏组织(肝脏、肾脏、性腺)中致病菌进行了分离鉴定与药敏特性研究。结果显示:实验共分离了8株优势菌,经人工回归感染实验证实其中3株细菌(菌株LK-T、PL-R和PK-T)具有致病性。ATB细菌鉴定仪鉴定结果显示,菌株LK-T和菌株PL-R为温和气单胞菌(Aeromonas so-bria),菌株PK-T为豚鼠气单胞菌(Aeromonas punctata subsp.caviae)。这3株致病菌的主要特征为:革兰氏染色阴性,杆状,对奈替米星、头孢呋肟、头孢拉啶、庆大霉素、环丙沙星、新霉素、先锋必等药物均高度敏感。其中庆大霉素、环丙沙星、新霉素等常规渔药可作为防治用药的依据。     

温和气单胞菌PCR快速诊断方法的建立

根据NCBI公布的温和气单胞菌(Aeromonas sobria)丝氨酸蛋白酶的基因序列,设计并选取一对能够快速而准确地检测温和气单胞菌的PCR引物,建立PCR快速检测体系,并对患病的鱼组织进行检测。研究结果表明,使用设计的引物能够扩增出与预计大小相符合的131 bp的特异性片段,具有较好的检测特异性,对靶标DNA的检测灵敏度为1.0 pg/20μL,对温和气单胞菌的检测灵敏度为50 cfu/20μL。样品的检测结果与实际发病情况一致,表明本研究成功建立了温和气单胞菌常规PCR检测体系,该体系可以用于温和气单胞菌的诊断和样品的检测。     

斑点叉尾暴发性败血症病原的分离与鉴定

从3尾表现出血症状的患病斑点叉尾鱼回(Ictalurus Punctatus)体内各分离出一株病菌,测定结果显示致其急性死亡的致病菌为温和气单胞菌(Aerom onas sobria),慢性死亡的致病菌分别为嗜水气单胞菌(A.hydrophila)和温和气单胞菌(A.sobria)。药敏试验结果表明:3株菌对广谱抗生素如氨苄青霉素、青霉素、先锋霉素Ⅵ和红霉素等已产生耐药性,而对菌必治、头孢肤肟和复达欣等高度敏感;菌株Jh-1和菌株Yh-3对复方新诺明、四环素、氟哌酸和丁胺卡那霉素高度敏感,而菌株Jh-2却低度敏感;环丙沙星和诺氟沙星对3株致病菌均具较好的抑菌、杀菌作用。     

Aeromonas sobria, a causative agent of disease in farmed perch, Perca fluviatilis L

Significant numbers of perch, Perca fluviatilis, raised on a pilot fish farm in Switzerland presented focal skin lesions on the lateral sides and fin rot. Mortality rates reached levels of up to 1% of the total fish on the farm per day. Virtually pure cultures of Aeromonas sobria were isolated from the liver, kidney, spleen and skin lesions of affected fish. Aeromonas sobria isolated from the farmed perch had a haemolytic effect on sheep and trout erythrocytes, autoaggregated, was cytotoxic for cultured fish cells and possessed genes involved in type III protein secretion. Experimental infection of naive perch with a single colony isolate of A. sobria from an affected farm fish resulted in the development of clinical signs identical to those seen on the farm. The results indicate that A. sobria can act as a primary pathogen of perch.     

黄金鲫温和气单胞菌鉴定及溶血素基因检测

采用常规的培养特征、理化特性及分子生物学的方法,从患病的黄金鲫体内分离到的优势菌YD-1进行了回感试验、表观生物学、药敏试验及毒力因子检测等系统性研究。结果表明,该菌在盐度1-3%、PH4-9,温度10-30℃的营养肉汤培养基中均能生长。该菌株16S rRNA基因序列（GenBank收录号: KC561935, 长度1446bp）和gyrB基因序列（GenBank收录号: KC561934, 长度1169bp）分别与其他气单胞菌属细菌的基因同源性相思似在97%-99%之间,构建系统发育树确定该菌株为温和气单胞菌(Aeromonas sobria)。人工回感试验可引起健康银鲫死亡。对该菌毒力因子进行检测,可扩增出溶血素基因片段。药敏试验显示：该菌对多粘菌素、头孢呋辛、米诺环素、复达新、菌必治、新霉素等6种药物敏感。     

Production of the lethal acetylcholinesterase toxin by different Aeromonas hydrophila strains

Abstract. Seven fish pathogenic isolates of Aeromonas hydrophila , one A. sobria and one A. caviae were investigated for production of the fish lethal acetylcholinesterase toxin (AcChE-toxin). Western blotting was used for screening the ECP of these strains with a rabbit antiserum prepared against the purified toxin of strain B₃₂ and all the isolates (except A. sobria ) gave positive results with different patterns of bands. The AcChE-toxin appears to be secreted as a protein of high molecular weight which is stable at −20°C, and in 90% of the strains tested, it appears to be split into lower molecular weight fragments by the action of other components present in the ECP. The smallest, stable and highly active fragment has a MW of 15kDa.     

被动转移免疫在鲫感染温和气单胞菌中的作用

实验用鲫平均体重100g，采用免疫物质被动转移试验，探讨体液免疫在鲫感染温和气单胞菌（Aeromonas sobria)中的保护作用。结果表明，无论免疫物质是来自异源还是自源，是由相关的嗜水气单胞菌（A.hydrophia)诱导产生还是由攻毒的温和气单胞直接刺激，均具有良好的免疫保护作用。实验还发现，再次攻毒时，在所有抗体组的鲫存活率为100%时，全血被动转移组的死亡率高达55.6%；免疫前后免疫复合物发生明显变化。说明抗体在保护鲫免疫受温和气单胞菌的致死性感染中发挥决定性的作用。