穿刺巴斯德芽菌PPh01菌株鉴定及其对根结线虫的寄生性测定

从海南定安胡椒根部根结线虫体上分离到一株细菌PPh01,其形态特征与穿刺巴斯德芽菌相似。16S rDNA序列分析结果表明：该菌株与穿刺巴斯德芽菌的同源性达到99.3％,在发育树上聚为同一分支,亲缘关系最近,鉴定该菌株为穿刺巴斯德芽菌（Pasteuria penetrans）。寄生性试验结果表明：该菌株对南方根结线虫、爪哇根结线虫、花生根结线虫的2龄幼虫均具有寄生性和侵染能力。     

侵入巴斯德氏芽菌对海南瓜菜根结线虫病害的生物防治效果

2002年春季,利用化学农药丁硫克百威、氯唑磷、侵入巴斯德氏芽菌(Pasteuria penetrans)制剂,在海南省进行辣椒和苦瓜根结线虫病害的防治试验。结果表明,药剂处理35 d后,在盆栽环境下,侵入巴斯德氏芽菌处理组的根结指数明显低于化学农药处理组,但在田间,各处理组之间效果差异不明显。另外,田间试验中,对照和侵入巴斯德氏芽菌剂处理组的植株均受到疫病的严重危害。说明侵入巴斯德氏芽菌制剂对抑制根结线虫病害具有一定的效果,而且在盆栽条件下,其效果优于供试的2种化学农药,但对其它病害的发生没有影响。     

南方根结线虫被穿刺巴斯德芽菌侵染后寿命和生殖相关基因的表达变化

为了探讨南方根结线虫在植物体外被穿刺巴斯德芽菌感染后存活率的变化及感染初期线虫寿命和生殖相关基因的表达情况。首先利用单卵块孵化法对从野外采集的根结线虫进行纯化和分子鉴定。以穿刺巴斯德芽菌孢子体外吸附的南方根结线虫为材料,在显微镜下观察供试线虫的存活情况,每24 h计数一次死亡线虫的条数,总共观察12 d。在被穿刺巴斯德芽菌吸附的第3天收集根结线虫,提取线虫总RNA,采用实时荧光定量PCR检测线虫寿命相关基因cyp-33和生殖相关基因lin-45/mek-2的表达情况。结果表明：通过分子鉴定确认纯化的根结线虫为南方根结线虫;感染了穿刺巴斯德芽菌的南方根结线虫死亡率显著升高;同时在穿刺巴斯德芽菌吸附南方根结线虫的初期,线虫寿命相关基因cyp-33和生殖相关基因lin-45/mek-2的表达水平与对照组相比均下调（p<0.05）。这说明穿刺巴斯德芽菌在吸附南方根结线虫的初期能够促使线虫的存活率降低,并抑制其生殖能力,这可能与基因cyp-33、lin-45和mek-2的调控有关。     

穿刺巴斯德芽菌Ppgh-3对番茄根结线虫病防效研究

为了探讨穿刺巴斯德芽菌Ppgh-3对番茄根结线虫病的防效,对种植在含有根结线虫土壤中的番茄根系周围接种不同量的穿刺巴斯德芽菌Ppgh-3,在接种后的30、45、60 d分别测定番茄的株高、茎粗、根重、地上部重、根冠比、根系活力、病情指数,并在结果期测定单果重和3穗果的单株产量。结果表明：根结线虫侵染会造成番茄株高、产量、地上重显著降低,茎粗明显变细,根重、根冠比显著增加,根重、根系活力先升高后降低。接种穿刺巴斯德芽菌后,各处理的株高、产量、地上部重、茎粗均较只施线虫对照增加,而根重、根冠比则降低,接种穿刺巴斯德芽菌量最多的处理,株高比只接种根结线虫的处理增加6.55％,茎粗增加了16.99％,地上重增加了34.26％,根重减少了13.98％,病情指数降低了64％,果实产量增加了61.56％,与接种根结线虫的处理存在显著差异。这说明穿刺巴斯德芽菌Ppgh-3对根结线虫具有防治效果,而高接种量的穿刺巴斯德芽菌对番茄根结线虫病的防治效果最好。     

拮抗线虫的花生根瘤内生细菌筛选及鉴定

用拮抗内生细菌控制根结线虫具有重要意义。于全国范围内选择不同生境的地块采集土样,室内诱集花生根瘤,获得了丰富的根瘤内生细菌种群。利用半根瘤法从花生根瘤中分离内生细菌,以北方根结线虫为靶标,筛选其中对根结线虫二龄幼虫具有高毒力的内生细菌菌株。在诱集获得的637个根瘤样本中,有19个处理二龄幼虫致死率达80%以上的高效根瘤样本,其中2个根瘤样本处理24h时致死率可达94%。通过对19个根瘤样本的内生菌进行分离纯化,获得123株内生菌,通过对其发酵液杀线虫活性进行研究获得活性较高的9个菌株,其中Sneb1706处理二龄幼虫24h致死率达到91.4%,Sneb1872对卵的孵化抑制率可达到59.4%,Sneb1773对植物表现出明显的促生作用。经16S RNA序列分析和生理生化鉴定,这9个高杀线虫活性的根瘤内生菌菌株属于假单胞菌属(Pseudomonas)、寡氧单胞属(Stenotrophomonas)和根瘤菌属(Rhizobium)。     

拟禾本科根结线虫对水稻根系的侵染特性及其生活史

在人工接种情况下,利用次氯酸钠-酸性品红染色方法,研究拟禾本科根结线虫对汕优63杂交稻幼苗根系的侵染特性及其生活史。结果表明:在26℃大量群体接种情况下,2龄线虫在接种后4～6 h内侵入根系,主要侵入时间为接种后24～48 h;2龄幼虫侵入部位为根尖分生区或伸长区,侵入后虫体迁移方向与根纵中轴平行,在皮层薄壁细胞间迁移,最终聚集于根冠最内侧的分生区,直待分生区原形成层发育成维管束后,2龄幼虫才侵入维管束内取食;根冠内侧分生区至伸长区的2龄幼虫呈侵染态线状至长颈瓶状逐渐发育膨大过程,其发育快慢可能与2龄幼虫开始定殖并侵入维管来取食时间先后有紧密关系;2龄幼虫可直接在根内孵化,并迁移至发育中的侧根,或迁移到新根根冠内侧分生区处,待分生区原形成层发育成维管束后进行再侵染;拟禾科根结线虫最短生活史在26℃下为22 d,在26～37℃环境温度下为18 d,其侵染具有群体优势特性。     

阿扎霉素F5a抗南方根结线虫和香蕉枯萎病菌活性研究

为寻找抗线虫和香蕉枯萎病菌的天然产物。从链霉菌211726的发酵液中分离纯化出阿扎霉素F5a，以南方根结线虫(Meloidogyne incognita)为供试线虫，采用击倒实验，测定阿扎霉素F5a高(1.0%)、中(0.1%)、低(0.01%)3个浓度的抗线虫活性；同时以尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f. sp. cubense)为供试菌株，采用牛津杯琼脂平板法，对阿扎霉素F5a的抗香蕉枯萎病活性进行研究。结果表明：1.0%的阿扎霉素F5a溶液在24 h内对供试线虫2龄幼虫的平均校正     

栀子根结线虫病的病原鉴定

为明确广西贺州市栀子根结线虫病病原种类,采集根部有明显根结的栀子根系进行根结线虫分离鉴定,通过观察根结线虫2龄幼虫、雌成虫、会阴花纹特征对其进行形态学鉴定,并利用核糖体ITS区和28S rDNA D2D3区序列比对和系统发育树分析方法对其进行分子生物学鉴定。结果表明,该病原线虫2龄幼虫和雌成虫形态特征及形态测量值与象耳豆根结线虫（Meloidogyne enterolobii Yang & Eisenback, 1983）相似;该病原线虫核糖体ITS区与NCBI数据库中象耳豆根结线虫相应序列的相似度为100%,28S rDNA D2D3区与NCBI数据库中象耳豆根结线虫相应序列的相似度为99%以上;该病原线虫核糖体ITS序列以99%的支持率与象耳豆根结线虫聚为同一分支。综合形态学和分子生物学鉴定结果将广西贺州市栀子根结线虫病病原种类鉴定为象耳豆根结线虫,栀子（Gardenia jasminoides Eills）是该线虫的新寄主纪录。     

水稻二化螟病原线虫N-Yz1的分离鉴定及其感染特性

【目的】二化螟是危害水稻的重要害虫，其钻蛀为害，防治困难，严重威胁水稻生产。本研究对感染二化螟昆虫病原线虫的分离筛选和感染特性进行研究，期望为水稻钻蛀害虫危害的防治提供新的途径和方法。【方法】自越冬代二化螟幼虫体内通过组织分离筛选，获得野外感染二化螟的昆虫病原线虫，室内接种实验分析分离昆虫病原线虫对二化螟的感染活性和作用特性。【结果】自然罹死二化螟幼虫体内分离获得野外感染的昆虫病原线虫N-Yz1，接种4龄二化螟幼虫导致感染并死亡，后期虫体内产生大量形态一致的侵染期线虫(IJ)。形态学观察结合rDNA-ITS序列分析，鉴定分离昆虫病原线虫隶属于斯氏线虫属，与已鉴定种小卷蛾斯氏线虫同源性达99.87%。昆虫病原线虫N-Yz1对不同龄期二化螟幼虫都有较高感染致死作用，40头(IJ)的线虫接种剂量，对低龄(2~3龄)二化螟致死速度快、致死率高， 接种2 4 h 就出现感染致死个体，48 h后幼虫全部死亡。高龄幼虫(4~6龄)感染致死速度较慢，死亡高峰发生在接种线虫后的48 h。N-Yz1接种剂量与二化螟死亡率呈显著正相关，剂量超过30 IJs/头时，4龄二化螟感染死亡率达90%以上。N-Yz1对二化螟幼虫具有明显搜索能力，在距离寄主害虫0-30 cm的范围内，通过迁移扩散，感染二化螟并导致其死亡。【结论】分离昆虫病原线虫N-Yz1具有较强的感染致死能力，表现出防治水稻钻蛀害虫二化螟的潜在应用价值。     

一株抗根结线虫芽孢杆菌的分离筛选及鉴定

从海南省尖峰岭热带雨林土壤中分离获得143株芽孢杆菌。经松材线虫初筛,获得8株拮抗活性在80%以上的菌株;经南方根结线虫二龄幼虫(J2)复筛,获得4株拮抗活性在50%以上的菌株,其中菌株DB13184的发酵上清液稀释10倍后,校正死亡率仍有56.7%。基于16S rDNA系统发育分析,显示菌株DB13184属于芽孢杆菌属,与菌株Bacillus toyonensis BCT-7112T的序列相似度达100%,二者在系统发育树上亦处于同一分支;结合该菌的培养特征、形态特征及生理生化特征,将其鉴定为Bacillus toyonensis。     

一种野生苦瓜的部分形态特征、营养成分和染色体核型

研究了一种野生苦瓜的形态特征、营养成分及染色体核型.结果表明：与栽培品种相比,这种野生苦瓜的叶片、瓜果、种子均为小型,田间表现抗病、抗虫性强;经测定,其果肉的蛋白质、粗脂肪含量接近或低于栽培品种,维生素C含量为1 187.6 mg/kg,高于栽培品种“早丰3号”（816.0 mg/kg）.染色体数目为2n=2x=22,同于栽培品种.田间调查还发现,野生苦瓜能够与栽培苦瓜自然杂交结果,自然杂种的特征形态居于两亲本之间,耐寒性,抗病、抗虫性则与野生苦瓜亲本相同.这种野生苦瓜有望成为有利用价值的苦瓜亲本资源.     

不同氮、钾用量对嫁接苦瓜养分吸收、分配及产量的影响

为解决目前冬季北运苦瓜生产上肥料过量施用问题,探讨氮、钾不同施用量对嫁接苦瓜养分吸收分配及产量的影响,以苦瓜嫁接苗为试材,以6个不同的N、K施肥量为处理,对嫁接苦瓜产量和各生育期不同器官干物质累积量及氮、磷、钾养分累积吸收量进行测定。结果表明：不同处理嫁接苦瓜各器官干物质积累量均随生育期的延伸有不同程度增加,在幼苗期和初瓜期同等施钾条件下,茎、叶、果干物质积累量与供氮水平呈显著正相关;在盛果期,在同等施氮条件下,茎、叶、果干物质积累量随供钾水平提高而显著增加;其中T₂处理在不同生育期各器官的干物质积累量均显著高于其他处理,且在盛果期干物质积累总量和果实干物质分配率均达到最大,分别为590.76 g/株、43%。不同处理嫁接苦瓜各器官氮、磷、钾养分累积量变化随生育期的延伸呈上升趋势,嫁接苦瓜对钾需求量较高,其次是氮,磷最少;T₂处理在各生育期氮、磷、钾累积量持续呈较高水平,成熟期累积量达到最高分别为每株20.9、3.5、27.3 g,较其他处理分别平均增加52.7%、43.2%、38.5%;与其他处理相比,T₂处理明显增强叶片（源）向 果实（库）的养分供应能力,氮、磷、钾果实干物质分配率在成熟期分别为59%、48%、48%,显著高于其他处理。不同处理对嫁接苦瓜产量均有差异,同等施钾条件嫁接苦瓜产量与供氮水平呈显著正相关,其中T₂处理嫁接苦瓜单瓜重、产量均显著较其他处理分别平均增加37.1%、46.4%。综合研究嫁接苦瓜生长量及氮、磷、钾养分的有效利用性,T₂处理（N 260 kg/hm²、K₂O 430 kg/hm²）对嫁接苦瓜增产的促进作用最显著,可根据具体情况在生产上推广应用,实现农业绿色“加减法”。     

锌钼营养对苦瓜产量、品质及叶片氮素代谢的影响

采用田间试验、植株生理生化测定方法,研究了锌钼营养对苦瓜（品种株洲长白）产量、品质及叶片氮素代谢的影响。结果表明:在土壤缺锌、钼的条件下,叶面喷施一定范围质量浓度配比的硫酸锌和钼酸钠均可显著提高苦瓜产量,并可提高苦瓜蛋白质、可溶性糖、维生素C（Vc）和17种氨基酸,尤其是人体必需氨基酸含量,降低NO3-含量,改善苦瓜品质;锌钼营养还可提高叶片蛋白质、核酸含量以及硝酸还原酶（NR）活性,并降低游离氨基酸、NO3-含量和核糖核酸酶（RNase）活性。在对叶片氮素代谢的影响程度上,锌和钼的作用存在一定的差异,且锌和钼呈现相互促进作用。苦瓜产量与叶片NR活性,叶片蛋白质与硝酸还原酶活性、核酸含量呈极显著正相关,而苦瓜产量与叶片RNase活性、叶片蛋白质与游离氨基酸、叶片核酸与RNase活性、叶片NO3-含量与硝酸还原酶活性等两两相互间则呈极显著负相关。讨论了锌钼对苦瓜品质和氮代谢的影响机理。      

孟加拉国番石榴产业简况

丽绿刺蛾在海南胡椒种植区每年发生2～3代，以老熟幼虫在主蔓上结茧越冬。该虫1年有2次发生高峰期，分别在5月下旬至6月中下旬和7月下旬至9月中旬。第1代幼虫发生量大，危害严重，是防治的关键时期。根据其发生规律提出相应的防治策略。     

Manufacture and characterization of gluten-free spaghetti enriched with vegetable flour

The manufacture and characterization of gluten-free spaghetti based on maize flour and different vegetable flours (artichoke, asparagus, pumpkin, zucchini, tomato, yellow pepper, red pepper, green pepper, carrot, broccoli, spinach, eggplant and fennel) were addressed in this study. The screening of the vegetable flours showed that homogeneity, color, fibrous, taste and odor were the parameters that have most influenced the overall quality of the dry spaghetti. The spaghetti added with yellow pepper flour was chosen for further analysis because of its highest sensory quality; in contrast, it recorded low carotenoids content due to the high temperature of the drying process (cycle named as HTDC). Therefore, an optimization of the drying cycle was performed (lower temperature) on the yellow pepper flour (cycle named as LTDC) that resulted in an increase of the carotenoids content. Although the spaghetti with low temperature yellow pepper flour had a higher cooking loss and lower instrumental hardness when compared to the spaghetti made with only maize flour (CTRL) it however had a significantly higher protein and dietary fiber content. Moreover there was no significant difference in the amount of glucose released during in vitro digestion for this spaghetti sample with respect to the CTRL sample.     

嗜菌异小杆线虫H06品系对红棕象甲幼虫的室内致死能力测定

为探讨利用昆虫病原线虫嗜菌异小杆线虫H06品系防治红棕象甲的可行性,在室内研究了该线虫对红棕象甲幼虫的致死效果和毒力水平。采用微量点滴法测试线虫不同施药剂量和施药时间对红棕象甲3龄幼虫的致病效果,并观察处理后红棕象甲幼虫的形态学特征变化。嗜菌异小杆线虫H06品系对红棕象甲具有一定的致死作用,随着线虫接种剂量的增加,红棕象甲死亡率增加;毒力测定结果显示,随着处理时间的延长,红棕象甲幼虫的LD₅₀呈现降低的趋势,同时随线虫接种剂量的提高,LT₅₀逐渐缩短;形态学观察结果显示,红棕象甲幼虫被嗜菌异小杆线虫H06品系感染后,虫体呈现出僵硬皱缩、体色变褐、身体肿胀直至最后虫体腐烂、线虫游离而出的现象。实验结果表明,嗜菌异小杆线虫H06品系对红棕象甲低龄幼虫具有一定的防控潜力。     

苦槛蓝叶浸提物对几种害虫的生物活性的初步研究

苦槛蓝叶甲醇和石油醚浸提物对菜粉蝶幼虫、斜纹夜蛾幼虫、亚洲玉米螟幼虫和萝卜蚜的拒食和毒杀活性试验结果表明,１％的苦槛蓝叶甲醇和石油醚浸提物对菜粉蝶４龄幼虫的非选择性拒食率分别为８６．６５％和８５．１２％,对斜纹夜蛾４龄幼虫的非选择性拒食率分别为７６．８０％和９４．９０％。Ｐｏｔｔｅｒ喷雾处理７２ｈ后,２％的苦槛蓝叶石油醚浸提物对亚洲玉米螟３龄幼虫的校正死亡率达９２．３％,而１％的苦槛蓝叶石油醚浸提物对斜纹夜蛾４龄幼虫和萝卜蚜的校正死亡率分别为７４．４％和９１．７％．盆栽试验结果表明,施用２％的苦槛蓝叶甲醇浸提物防治菜粉蝶幼虫,第７天的保叶率为８３．３％,第１１天的虫口减退率为８９．７４％,与０．００５％虫霸的防治效果相比差异均不显著。