甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究

甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治。RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能。本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分离物CP基因序列,经过比对选取保守序列作为干扰序列。通过在序列两端添加酶切位点,合成并连接成双价甘蔗黄叶病和花叶病毒干扰序列,然后构建到中间载体p HANNIBAL上,形成双价RNAi干扰结构,最后插入到p ART27上形成干扰表达载体。利用基因枪轰击甘蔗品种福农15号愈伤组织进行转化,经G418筛选获得抗性再生植株。通过提取DNA和RNA分析,证实双价RNAi干扰结构不仅以不同拷贝整合到甘蔗基因组中,而且得到了转录表达。     

糖能兼用甘蔗新品系宿根季评价

对近年选育的12个参试品系进行了产量、品质及其主要工农艺性状研究,结果表明：FN02-3924、FN02-5707和FN02-20169表现早熟、高产、高糖,且工农艺综合性状优良,推荐进一步试验研究,可望选育成为糖能兼用甘蔗新品种;FN02-6427也具有早熟、高产、高糖和茎粗等优点,但较早开花,有一定的推广价值,宜较早收获。早期锤度研究表明,FN02-3924特早熟高糖,作能源甘蔗可提早2个多月开榨,具有广阔的应用前景。     

经济遗传值在甘蔗选育种的应用研究Ⅰ.经济遗传值及性状经济权重的确定

简述了澳大利亚协调工农利益关系的分糖制;甘蔗品种改良中,性状间的权衡,经济遗传值的概念,性状经济权重的估算原则。根据我国甘蔗产业的实际情况估算了我国甘蔗各主要经济性状的权重,以期为经济遗传值在我国甘蔗选育种中的应用研究起到抛砖引玉的作用。     

油菜叶片衰老相关基因的分离：细胞色素P450cDNA的克隆和序列 …

通过绿叶和衰老叶片ｃＤＮＡ的缩减杂交和差别筛选，富集并分离了缩减ｃＤＮＡ文库中与油菜叶片衰老有关的基因片段。以目的基因片段为探针，通过筛选油菜衰老叶片的ｃＤＮＡ文库，分离了油菜叶片衰老阶段表达增强的全长ｃＤＮＡＬＳＣ４６。     

二温式PCR在特异短核酸探针合成中的应用

经基因库序列比对确定花生白藜芦醇合酶基因(RS)中的特异序列(长度约108 bp).以此为模板设计分别含有Sal I和Sac I酶切位点的一对上、下游引物,并应用二温式PCR扩增得到该特异短片段.将该特异片段正向连接到pBIueskriptIIKs( )的多克隆位点上,利用T7 RNA聚合酶在体外转录合成地高辛标记的反义特异短核酸探针.该特异短核酸探针的合成为后续RS基因在花生组织器官中表达的RNA原位杂交研究打下了基础.     

甘蔗品种伸长期光合特性及冠层光合量的估算

本文在活体测量的基础上，分析了７个甘蔗示范品种和对照种闽糖７０－６１１在不同光合有效辐射（ＰＡＲ）下＋１叶的净光合速率（Ｐｎ）、光呼吸强度（ε）、水分利用效率（ＷＵＥ）的变化情况，并对冠层总的同化量进行估算。结果表明：甘蔗不同品种＋１叶的Ｐｎ随ＰＡＲ变化较大，但冠层总的同化量与单叶的Ｐｎ没有明显的相关性，各品种的光呼吸强度不大，变化在２．２×１０－２－２．５×１０－２μｍｍｏｌ·ｍ－２·ｓ－１之间；ＷＵＥ除福农８９－２０９、福蔗８７－１０与对照品种相当外，其余均比对照种高，且这种差异与Ｐｎ无正相关性。     

不同化学药剂在延缓原料蔗品质变劣上的效应

通过采前化学药剂叶面喷施法对采后原料蔗品质变劣的效应进行研究，结果表明，甘蔗采收前叶面喷施Ｎａ２ＳｉＯ３、ＣｏＣｌ２、ＭｇＣｌ２可控制原料蔗的蔗糖转化．在贮存期间蔗茎蔗糖分、纯度、蔗汁直接旋光度高于对照，而还原糖分、无机磷含量、酸性转化酶活性均低于对照，尤以抑制剂Ｎａ２ＳｉＯ３、ＭｇＣｌ２处理的效果最佳．本文还对化学药剂应用的可行性和局限性进行了讨论．     

转录因子NAC的研究进展

NAC转录因子是植物所特有的一类转录因子,并广泛存在于不同的植物中。从NAC发现至今经过十几年的时间,NAC转录因子的结构和功能得到了较深入的研究。本文介绍了NAC家族的分类,NAC结构域蛋白的特点,NAC的生物学功能及其与植物的生长发育、抗性之间的关系。     

CP基因遗传转化甘蔗品种Badila与福农91-4621的抗病性差异分析

利用含甘蔗花叶病病毒E株系外壳蛋白基因(CP)的质粒pUbi-SCMV-CP,用基因枪轰击法遗传转化不同甘蔗品种,所获得的转基因无性系经过3代的抗病性鉴定和H2O2代谢的分析.结果表明,Badila(TB1)转基因植株具有较强的抗花叶病能力,而福农91-4621在转基因无性系T1、T2中表现出较强的抗病性,但在T3中其抗病性开始退化,发病率高达68%;抗病生理分析表明,转基因无性系的抗病性与H2O2清除和积累有关.经RT-PCR克隆和测序分析,福农91-4621所感染的SrMV-H的CP基因氨基酸序列与转化的SCMV-E的同源性较低,仅为73.2%,福建Badila所感染的是SCMV-D,与SCMV-E同源性高达97.8%.说明CP基因对本身所来源的病毒或是与原病毒亲缘关系较近的病毒可能具有较强的抗性,而对同属于SCMV的其他病毒虽有抗性,但抗性较弱,且随着转基因世代数的增加而降低.