萝卜过氧化物酶基因RsPrx1在毕赤酵母中的表达及其抗性

从成熟心里美萝卜肉质根的皮中提取总RNA,采用RT-PCR方法获得过氧化物酶基因RsPrx1的cDNA,将其克隆到pGEM-T载体中,并构建毕赤酵母重组表达载体pPIC9KH-RsPrx1。用L iC l法转化野生型毕赤酵母GS115获得重组转化子。用不同浓度的NaC l和H2O2处理重组毕赤酵母转化子,结果表明该转化子具有一定的抗盐和抗氧化能力。建立了RsPrx1重组毕赤酵母表达体系,能够有效表达具有生物活性的外源过氧化物酶。     

不同油豆角品种过氧化物酶活性及其同工酶酶谱分析

应用过氧化物酶同工酶技术,通过相似系数比较和聚类分析,比较7个油豆角品种不同器官过氧化物酶(POD)的活性,并对其亲缘关系进行探讨。结果表明:不同品种POD活性不同,同一品种不同器官的POD活性也不同,根部的POD活性高于叶的,而叶片的高于茎的;不同器官POD酶谱不同,同一器官不同品种的酶带数也不尽相同;‘油豆子’、‘俏春大荚油豆王’和‘齐研五号架油豆’亲缘关系比较近;‘俏春3号地油’与‘油豆子’的亲缘关系最远。     

硝酸钙处理对菊花扦插生根及抗氧化酶活性的影响

以切花菊品种‘万盛’为材料,研究了不同浓度Ca(NO₃)₂处理对菊花扦插生根及其过程中插穗叶片超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）和抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性以及膜质过氧化产物丙二醛（MDA）含量的影响。结果表明,60 mg·L^-1 Ca²⁺处理的生根数最多,而且插穗鲜样质量和干样质量也比对照明显增加,而80 mg·L^-1Ca²⁺处理的生根数、插穗鲜样质量和干样质量以及生根率比对照减少。60 mg·L^-1 Ca²⁺处理的SOD、POD、CAT和APX活性与其它处理相比显著增加,MDA含量明显减少。以上结果表明,在菊花扦插过程中,采用适当浓度的Ca2+处理可以提高插穗叶片SOD、POD、CAT和APX等保护酶的活性和降低MDA含量,从而促进菊花扦插生根,并提高扦插苗品质。     

不同镉水平对白菜生长及抗氧化酶活性的影响

 不同镉(cd)水平对白菜[Brassica campestris L．ssp．chinensis (L．)Makino]两个品种生长及抗氧化酶活性研究结果表明：cd 1 mg·L^-1 对两品种生长(除‘杭州油冬儿’地上部干质量)及叶绿素 含量无显著影响，cd 10 mg·L^-1显著抑制植株生长(除‘沪青1号’根干质量)，减少叶绿素含量。cd可诱导叶片中活性氧0₂^-. 、H₂O₂的产生，引起膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)的累积。Cd 1 mg’L 显著增加‘沪青1号’过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)及‘杭州油冬儿’抗坏血酸过氧化物酶(APx) 活性。cd 10 mg·L 显著降低两品种叶片超氧化物歧化酶( SOD ) 、CAT、APX及‘沪青1号’POD活性， 显著增加脱氢抗坏血酸还原酶(DR)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性。     

金钗石斛花芽cDNA表达文库的构建及鉴定

 cDNA文库是分离、筛选基因的重要平台。利用SMARTTM cDNA library construction技术, 成功构建了金钗石斛花芽cDNA表达文库。结果表明该文库的克隆数为3.02 ×10⁵ pfu, 插入片段的大小在0.5～2.5 kb范围, 插入片段的重组率接近100% , 说明所构建的cDNA文库质量较好。该文库的构建为克隆与金钗石斛花芽分化相关功能基因奠定了基础。     

结球白菜同核异质雄性不育系同工酶研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法，研究了具有甘蓝型油菜胞质、萝卜胞质的结球白菜同核异质雄性不育系－Ｐｏｌｃｍｓ３４１１－７，Ｏｇｕｃｍｓ３４１１－７及其保持系３４１１－７不同发育时期，不同器官过氧化物酶同工酶谱的差异。结果表明，不育系与保持系过化物酶同工酶谱的差异主要在花蕾中，表现为不育系酶带多而且活性强，其它器官差异较小；Ｐｏｌｃｍｓ３４１１－７与Ｏｇｕｃｍｓ３４１１－７的区别在苗期、蕾期、花期及叶片、     

基于EST库的枳APETALA2基因cDNA克隆及其表达分析

 根据物种间同源基因相对保守的特点，利用生物信息学方法以拟南芥APETALA2 cDNA序列作为模板，对柑橘EST数据库进行同源检索筛选，克隆了柑橘APETALA2基因的cDNA序列，并以枳[Poncirus trifoliata (L.) Raf.]花cDNA为模板，根据以上cDNA序列设计特异引物，利用RACE技术分别获得该基因的5'和3'末端，序列拼接后获得枳的APETALA2 cDNA全长。该cDNA全长为1 980 bp，命名为Pt-AP2。Pt-AP2核苷酸序列有一个1 539 bp完整的开放读码框(ORF)，5'末端起始密码子ATG其始于290 bp，3'末端非翻译区为152 bp，其中含有27 bp的Ploy⁺(A)。该基因已在GenBank基因数据库注册，注册号为EU883665。推导该cDNA编码512个氨基酸，与苹果、矮牵牛和拟南芥中相应序列同源性分别为59.1%，59.7%和63.8%。序列分析表明, Pt-AP2除了具备完全保守的核定位信号序列（KKSR）外，还具有两个高度保守的重复序列即AP2结构域。分别采用半定量RT-PCR和SYBR Green I实时定量RT-PCR方法分析Pt-AP2在枳叶、茎、根、花和果等不同器官中的表达水平，结果一致表明Pt-AP2在各个器官中的表达水平不同, 花中的表达量最高，果实中的表达量最低。     

文心兰开花相关OnAP1-like基因的克隆及表达分析

以南茜文心兰（Gower Ramsey）盛花期花葶提取的总RNA为模板,通过RT-PCR与RACE扩增,获得一个958 bp的AP1（APETALA1）-like基因的cDNA全长序列,其基因编码区690 bp,共编码氨基酸229个,命名为OnAP1-like（登录号：KC426946）。蛋白质二级结构分析表明,该蛋白质48.91%为α螺旋,10.92%为β折叠,40.17%为无规则卷曲,为亲水性蛋白质。蛋白序列比对和进化树分析表明,OnAP1-like 蛋白与蕙兰AP1-like蛋白一致性最高,进化距离最近。利用RT-qPCR对从文心兰不同时期不同器官中的OnAP1-like基因表达量进行分析,结果表明,同一器官不同发育时期比较,在叶中,花蕾期的表达量最高;在根中,随发育时间推移,表达量逐渐升高,至花后期达到最高;在花葶中的表达量的趋势与根相同。同一时期不同器官比较,抽葶前,根中表达量高于叶片;花蕾期,花瓣中的表达量最高;盛花期和花后期,花葶中的表达量最高。推测该基因在花的发育及形成中发挥作用。     

小菜蛾γ- 氨基丁酸受体基因片段的克隆、表达及特征分析

 利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR) 对小菜蛾( Plutella xylostella ) 的γ - 氨基丁酸a(GABAa) 受体基因cDNA片段进行了克隆和序列分析。通过简并性上游引物和下游引物扩增出小菜蛾GABAa受体基因248 bp的cDNA片段。该cDNA基因片段的氨基酸与已报道的烟芽夜蛾(Heliothis viresce)的GABAa受体基因氨基酸序列同源性为100%。以GABAa受体基因片段为基础, 构建了优化的半定量RT-PCR法, 以18S rRNA为内标, 研究小菜蛾不同组织以及不同发育阶段GABAa受体基因表达的差异。结果表明, GABAa受体基因在头部表达量最高, 胸部次之, 腹部最低; 在不同发育阶段的表达量差异不大。     

EDTA对铅胁迫下萝卜芽苗菜生长的影响

以萝卜芽苗菜为材料,在其生长期外施不同浓度EDTA,初步探讨了EDTA对铅胁迫下萝卜芽苗菜部分生理生化特性的影响.结果表明:在300 mg/L铅胁迫浓度下萝卜芽苗菜的膜透性明显增大,过氧化物酶(POD)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、可溶性蛋白含量明显下降.随着外施EDTA浓度的增加,萝卜芽苗菜的膜透性先下降后升高,过氧化物酶(POD)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、可溶性蛋白含量先升后降.就供试材料而言,在一定浓度范围内的EDTA对铅胁迫萝卜芽苗菜的伤害效应有缓解作用,其中以0.75 μmol/L EDTA处理效果最为明显.     

Transcriptome profiling reveals differentially expressed genes associated with wizened flower bud formation in Chinese pear (Pyrus bretschneideri Rehd.)

Flower buds are very important for pear yield; non-germinated flower buds become wizened and drop from the branch, reducing pear production. However, little research has focused on the study of wizened flower bud (WB) formation in spring. In order to elucidate the mechanism of WB formation in pear, physiological indices relating to plant hormones and antioxidases were measured. We found that activities of peroxidase (POD) and superoxide dismutase (SOD) were higher and lower, respectively, in WBs than in normal flower buds (NBs). The contents of indole acetic acid (IAA), gibberellin (GA), and cytokinin (CTK) were lower in WBs, while the level of addition of abscisic acid (ABA) was higher in WBs than in NBs. Differentially expressed genes (DEGs) were surveyed between WBs and NBs. In total, 23 DEGs relating to POD and SOD were detected from GO (Gene Ontology) enrichment, and 29 DEGs associated with plant hormone biosynthesis were found from the KEGG (Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes) pathway. Notably, the expression patterns of these 52 genes were consistent with variations of antioxidase activities or hormone contents. Because POD and SOD are stress-response enzymes, the differences in POD and SOD activities between NBs and WBs indicated that WB formation in pear could result from ambient environmental stresses that influence expression levels of hormone biosynthesis genes.     

红菜薹细胞质雄性不育系的农艺性状调查及POD同工酶分析

通过对新型甘蓝型油菜雄性不育材料（EruCMS）细胞质雄性不育系、红菜薹保持系俞优以及二者杂交获得的红菜薹早代异源细胞质雄性不育系材料进行农艺性状调查和POD同工酶分析得出：三者在植株形态上没有显著差异,但在花器官性状方面存在极显著差异|三者的POD同工酶分析存在谱带增减、活性强弱变化和器官特异表达差异,花和花蕾则是不育系和保持系间生化差异最大的器官,叶片和薹次之、叶柄差异不明显。     

‘新高’梨雄性不育与IAA和ABA含量变化的关系

 以雄性不育的‘新高’梨和可育的‘丰水’梨为试材, 研究花粉发育过程中IAA和ABA含量及其与IAA代谢相关酶和微量元素的变化。结果表明: 丰水花蕾中IAA含量从四分体后极显著地高于新高, 在新高花粉败育期(单核花粉早期到单核花粉晚期) 是新高的3.70～4.47倍, 新高IAA含量的亏缺可能是导致败育的原因之一; 新高在花粉发育前期IAA氧化酶活性显著高于丰水, 而两个品种POD活性变化一致, 差异不显著, 说明POD不是导致新高IAA含量的亏缺的关键酶; 新高Zn含量低于丰水, 而Mn含量从单核花粉期以后却高于丰水; 新高ABA含量从四分体到二核花粉期显著高于丰水, 而丰水在成熟的花药中积累了大量的ABA。     

PEG浸种对低温弱光下辣椒幼苗叶片部分生理指标的影响

以湘研1号辣椒为试验材料，用25%聚乙二醇（PEG）溶液处理种子，研究了在低温弱光胁迫下PEG处理对辣椒幼苗与抗冷性有关的部分生理指标的影响。结果表明：在15℃/5℃（昼/夜）低温，100μmol·m^-2·s^-1弱光下，辣椒幼苗地上部干质量、地下部干质量、株高、茎粗均降低；辣椒幼苗叶片细胞膜透性、丙二醛(MDA)和脯氨酸(Pro)含量升高，并随低温弱光处理时间的延长而增加；超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶(POD)活性呈现先升高后降低的趋势；可溶性蛋白含量呈逐渐下降趋势。PEG浸种处理可使辣椒幼苗地上部干质量、地下部干质量、株高、茎粗和叶片的SOD、POD活性、可溶性蛋白含量的下降幅度均较低温弱光对照显著减小，细胞膜透性、MDA与Pro含量的增加幅度均较对照显著降低，表明PEG浸种处理能够提高辣椒幼苗对低温弱光的适应能力。     

华光油桃解除休眠过程中几项生理指标的变化

研究了低温累积对华光油桃萌芽的影响以及花芽在自然休眠过程中几项生理指标的变化。结果显示,在低温诱导休眠解除的过程中,花芽内可溶性糖和淀粉含量在12月13日分别上升和下降,可溶性蛋白含量在此时出现谷值,游离脯氨酸含量休眠解除前由下降转为急剧上升,POD和SOD活性在12月13日分别出现高峰和低谷。表明这些参数可能与休眠解除有关。     

萝卜花芽分化过程中茎尖和叶片碳水化合物含量的变化

 以萝卜冬性品种‘一点红’和春性品种‘短叶13’为材料，研究花芽分化过程中茎尖和叶片以及萌动种子碳水化合物含量的变化。萌动种子在5℃下处理20 d，然后在温暖(>15℃)、长日照(16h)下生长，于不同花芽分化时期测定可溶性总糖、蔗糖和淀粉含量。结果表明：在花芽分化期间，无论是茎尖或是叶片，可溶性总糖、蔗糖和淀粉含量的变化趋势在两个品种之间较为接近。随着花芽分化的继续，可溶性总糖含量呈先上升后下降的趋势；蔗糖和淀粉含量则一直呈现上升趋势，在花芽分化完成后再下降。叶片中可溶性总糖、蔗糖和淀粉含量始终低于茎尖。冬性品种的蔗糖和淀粉含量在整个花芽分化期间始终较低，但在花芽分化初期的可溶性总糖含量则高于春性品种。     

外源过氧化物酶对辣椒果实抗氧化酶活性与品质的影响

为了探讨外源萝卜过氧化物酶(RsPOD)对果蔬类作物影响的普遍性,将RsPOD定期喷洒辣椒植株,并测定辣椒果实的抗氧化酶(过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶)活性、可溶性蛋白含量、维生素C含量和叶绿素含量等生化指标以及POD同工酶谱。结果表明:Rs-POD不同程度地提高了这些生化指标在辣椒中的活性和含量,增强甚至提前了一些POD同工酶的表达。由此进一步证明外源RsPOD可以促进果蔬类作物的抗氧化能力和营养价值,具有一定的经济价值。     

嫁接提高菊花耐高温与抗氧化能力的研究

 比较了高温胁迫过程中以黄蒿和白蒿为砧木的菊花嫁接苗和扦插苗叶片膜透性、超氧阴离子自由基O₂^-·产生速率、超氧化物歧化酶( SOD) 和过氧化氢酶(CAT) 、抗坏血酸过氧化物酶(APX) 活性及可溶性蛋白质含量等的变化。结果表明:与扦插苗比较, 嫁接苗叶片膜透性和O₂^-· 产生速率较低, SOD、CAT与APX活性较高, 可溶性蛋白质的含量也相对较高, 而两种不同砧木的嫁接苗活性氧及抗氧酶活性等无显著差异。高温下嫁接苗叶片卷缩、萎蔫和黄化等症状均不同程度好于扦插苗。嫁接有利于菊花耐热能力的提高。     

外源水杨酸对黄瓜叶片几种酶活性和抗氧化物质含量的影响

 采用不同浓度的水杨酸(SA) 对营养液培养的黄瓜( Cucumis sativus L. ) 进行处理, 结果表明, 不同浓度的SA 均明显提高了黄瓜叶片中过氧化物酶、多酚氧化酶、苯丙氨酸解氨酶的活性, 其中以SA 200μmol·L^-1处理的效果最为显著。SA 100μmol·L^-1的处理显著抑制了IAA 氧化酶和抗坏血酸氧化酶的活性, 而SA 200 和400μmol·L^-1的处理则有促进作用。SA 100μmol·L^-1的处理显著增加了黄瓜叶片中还原型抗坏血酸、还原型谷胱甘肽和氧化型谷胱甘肽的含量。