三株不同形状伴孢晶体的苏芸金杆菌对几种害虫的毒力测定

我们从落叶松毛虫(Dendrolimus sibiricus)、印度谷斑螟(Pyralis farinali)幼虫和森林土壤中分离到产生不同形状伴孢晶体的苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis),对三株菌进行了形态特征的电子显微镜观察、生理生化特性的测定及营养细胞的酯酶型分析,并对几种昆虫进行了室内生物测定,表现出不同的毒力。     

我国四个自然保护区森林土壤中苏云金芽孢杆菌的分布

从我国四个不同立地带——长白山、百花山、鼎湖山、尖峰岭自然保护区,采集到林下0～5cm土层土壤样品75个,分离到苏云金芽孢杆菌39株。其中芽孢杆菌的总数量和苏云金芽孢杆菌的出土率和分离率有所差异,pH偏中性和含水量稍高的土壤,菌数较高;而与所测的各种土壤养分无明显相关。对39株苏云金芽孢杆菌的鉴定:17株属库尔斯塔亚种,6株属松蠋亚种,16株未定名。毒力测定表明:对杨扇舟蛾和马尾松毛虫幼虫的致死率在50％以上的菌株约占70％;对榆蓝叶甲和黄粉甲幼虫均无明显杀虫活性。     

兰花致病真菌拮抗细菌的筛选与鉴定

[目的]为获得高效拮抗3种兰花病原真菌胶孢炭疽菌、尖孢镰孢菌和腐皮镰孢菌的菌株。[方法]使用平板对峙法筛选拮抗菌株,结合形态特征观察、生理生化试验和16S rRNA基因序列分析的方法对目的菌株进行鉴定。[结果]筛选获得5株同时拮抗三种病原菌的菌株,其中菌株GT312拮抗效果明显。16S rRNA基因序列分析显示,该菌株与Bacillus amyloliquefaciens(模式菌株FZB42T)相似性最高,为99.93%。菌株形态特征观察、生理生化试验结果与B.amyloliquefaciens描述一致。[结论]菌株GT312可同时拮抗3种兰花病原真菌,鉴定为解淀粉芽孢杆菌,为兰花病害的生物防治提供了菌株资源。     

我国四个自然保护区森林土壤中苏云金芽孢杆菌的分布*

从我国四个不同立地带－长白山，百花山，鼎湖山，尖峰岭自然保护区，采集到林下０－５ｃｍ土层土壤样品７５个，分离到苏云金芽孢杆菌３９株。其中芽孢杆菌的总数量和苏云金芽杆菌的出土率和分离率所有差异，ｐＨ偏中性和含水量稍高的土壤，菌数较高；而与所测的各种土壤养分无明显相关。对３９株苏云金芽孢杆菌的鉴定：１７株属库尔斯塔亚种，６株属松Ｚｈｕ亚种，１６株未定名。毒力测定表明：对杨扇舟蛾和马尾松毛虫幼虫的致死率     

蓝莓根腐病生防细菌的筛选与鉴定

为了利用生物防治技术控制蓝莓根腐病的发生与流行,采用平板对峙法测定从蓝莓根围土壤中分离的纯化菌株对蓝莓根腐病原菌尖孢镰刀菌Fusariun oxysporun的抑菌活性。筛选出10株有拮抗作用的细菌;B6,B7,B9菌株对尖孢镰刀菌的抑制率依次为83.89%,82.44%,79.39%;选择抑菌率较高的B6,B7,B10菌株在温室内盆栽蓝莓幼苗上测定其抑菌作用,B6菌株抑菌效果最好,发病率仅为13.3%;结合形态特征和16S r DNA序列分析进行拮抗细菌的鉴定,10株拮抗细菌均属于芽孢杆菌属Bacillus。B2、B10为解淀粉芽孢杆菌B.amyloliquefaciens,B3为解淀粉芽孢杆菌亚种B.amyloliquefaciens subsp.,B4为枯草芽孢杆菌B.subtilis,B5、B6为暹罗芽孢杆菌B.siamensis,B7为贝莱斯芽孢杆菌B.velezensis,B8为特基拉芽孢杆菌B.tequilensis,B9为枯草芽孢杆菌亚种B.subtilis subsp.。     

苏云金芽孢杆菌菌种保藏

采用砂土管和滤纸片两种保藏方法，对分属３１个亚种的６１株有代表性的苏云金芽孢杆菌经过１－２３年保存后的菌体存活情况，形态特征及对林业主要害虫舞毒蛾幼虫的杀虫活性进行了试验，并对苏云金芽孢杆菌５个亚种的标准菌株和保存不同年限后的１１项生理生化特性及酯酶型进行了测定。     

苏芸金杆菌HD—263菌的质粒特征及其转移

用改进了的苏芸金杆菌质粒分析方法,对苏芸金杆菌戈尔斯德变种HD—263菌株的质粒特征进行分析,发现其电泳图谱上有十三种分子量不同的质粒。用质粒转移技术,将其部分质粒转移到无质粒的蜡状芽孢杆菌中,结果表明:分子量为115MDa和5.4MDa的质粒,总与苏芸金杆菌晶体的产生相关,而分子量为60MDa和7.5MDa的两种质粒,不能使受体茵产生晶体,这一实验结果,支持了以往报道的苏芸金杆菌晶体的产生,与特定的质粒相关的论断。本文所运用的方法,是研究苏芸金杆茵质粒的一套较完整的方法。     

杨树根腐病生防菌的筛选及鉴定

【目的】杨树作为我国最重要的工业用材林树种之一,对其长期的生产力维护和人工林的健康管理是林业和生态建设的重中之重。近年来,杨树根腐病的防治措施作为林学界亟待解决的重要问题,目前以化学防治方法为主,但其存在许多环境危害,所以具有诸多优点的生物防治成为了现在国内外的研究焦点,找到生防菌是研究的重中之重。以一系列实验分离筛选到用于防治根腐病的低温适生菌为创新点,旨在找到对杨树根腐病菌具有拮抗作用的生防菌,并明确其分类地位,令其在杨树根腐病的生物防治生防菌种类方面作为参考,也为进一步研究其定殖特性、林间防效及生物安全性等问题提供前期基础。【方法】为了筛选出新的低温适生生防菌菌种资源,采用稀释涂布平板法从杨树土壤中分离得到20株芽孢杆菌,经过初步筛选得到了拮抗效果最好的一株芽孢杆菌B42,并对其进行分离纯化,采用平板对峙法对该芽孢杆菌的抑菌活性进行测定,然后鉴定明确其分类地位。【结果】该芽孢杆菌对杨树根腐病菌具有显著的拮抗作用,同时对茄病镰刀菌、红松根腐病镰刀菌、山核桃干腐病菌、链格孢、油茶炭疽病菌、白腐菌均具有广谱抗性。【结论】根据菌体的形态特征、生理生化指标以及16S rDNA序列分析的结果,鉴定该菌B42为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis。     

影响苏云金杆菌(Bacilluss thuringiensis var.thuringiensis)件孢晶体质与量因素的研究

苏云金杆菌(以下简称苏菌)作为一种细菌杀虫剂,已日益引起人们的注意。此菌能引起多种农林牧害虫致病死亡。苏菌菌系的件孢晶体有四种不同类型:(Ⅰ)型不清晰的,圆形的;(Ⅱ)型清晰的,菱形的;(Ⅲ)型伸长的,菱形的,常常很大;(Ⅳ)型不定形的(常为四角形和小菱形)。这些伴孢晶体的形状、大小以及对昆虫罹病的范围和抗原特性等方面都有区刖,以(Ⅰ)型件孢晶体占多数的芽孢杆菌对昆虫致病力最强。因此选择毒性最强的菌系具有特殊     

外源添加微生物对连栽木麻黄幼苗生长的影响

为缓解木麻黄连栽障碍问题,以木麻黄幼苗为研究对象,种植于木麻黄不同连栽代数盆栽土壤中,外源添加解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、伯克氏菌(Burkholderia)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),测定木麻黄幼苗株高、叶绿素含量、植物酶活变化等生长指标。结果表明:解淀粉芽孢杆菌处理后,盆栽木麻黄生长量三个代次分别提高46.51%、19.10%、1.73%,叶绿素含量、植物酶活变化不明显;施加伯克氏菌后,盆栽木麻黄株高月增量三个代次分别提高42.63%、22.47%、3.90%;施加尖孢镰刀菌后,盆栽木麻黄株高月增量三个代次分别提高45.73%、8.99%和降低22.51%,叶绿素含量三个代次的变化分别为增加81.96%、增加66.50%、降低2.36%。研究表明,解淀粉芽孢杆菌和伯克氏菌处理能促进盆栽木麻黄幼苗的生长,但随着连栽代次的增加,促进作用减小。     

对美国白蛾高毒Bt的筛选和杀虫蛋白基因鉴定

通过生物测定,从山东省不同地区分离和本实验室保存的122株苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis(简称Bt)中筛选到16株对美国白蛾Hyphantria cunea具有高毒力的菌株,用SDSPAGE和PCR-RFLP方法对16株Bt的杀虫蛋白和杀虫基因类型进行鉴定.结果表明,有11株Bt菌株中同时含有130 kDa和60或70 kDa的蛋白,1株同时舍有130和140 kDa的蛋白,3株只含有130 kDa的蛋白,1株含有30 kDa的蛋白;有14株Bt同时舍有cryl和cry2类杀虫蛋白基因,其中4株还包括cry9类基因,2株Bt中没有鉴定到已知基因类型,可能含有新的杀虫基因.16株Bt菌株均不舍cry3、cry4、cry8和cry10类基因.     

我国西北干旱地区森林土壤中苏云金芽孢杆菌生态分布

对地处我国西北干旱地区新疆、甘肃、宁夏三省（区）内的１１个自然保护区－－哈纳斯、小叶白蜡、天山云杉、野核桃、塔里木、东大山 山、六盘山、崆洞山、兴隆山、莲花山等自然保护区采集的２６０个森林土壤样品,进行了生态因子调查：分析了土壤ＰＨ、含水量、水解Ｎ、有效、速效Ｋ、全Ｎ、有机质;研究了芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌数量和种类生态分布。共分离苏云金芽孢杆菌４２株,其出土率和分离率分别为１１．５３％和２．１８     

中国八个自然保护区森林土壤中苏云金芽孢杆菌的分布

从大兴安岭根河潮查、带岭、千佛山、崂山、黄山、紫金山、武夷山和西双版纳八个自然保护区采集到０—５ｃｍ土层林下土壤样品１２９个，从中分离出大量的苏云金芽孢杆菌。研究表明：不同立地带森林土壤中芽孢杆菌的总数量、苏云金芽孢杆菌的出土率及占所分离芽孢杆菌的分离率间具有一定的差异，但它们与土壤含水量、ｐＨ、单一养分间无明显的相关性。我们还对所分离的苏云金芽孢杆菌所属亚种进行了初步鉴定，对六种有害昆虫进行了毒力测定。     

药用蕨皱边石杉的形态解剖学研究

对药用蕨皱边石杉茎、叶进行了外部形态、内部结构的解剖学研究，对孢子囊及孢子进行了扫描电镜观察。维管柱逐渐发展成为介于星状中柱和编织中柱之间的一种过渡类型中柱，木质部为外始式；叶为等面叶，外韧维管束。同时对石杉不同组织器官的组培繁殖存在的问题进行了分析和探讨。     

抗光肩星天牛苏云金芽胞杆菌Bt886菌株的分离及对毒蛋白编码基因的初步鉴定

从拟谷盗虫尸中分离到一株对鞘翅目害虫光肩星天牛幼虫毒杀作用明显的Bt菌株Bt886。幼虫死亡率高达 6 0 % ,存活者生长明显受到抑制。经过晶体形态特征和杀虫谱分析 ,初步确认该菌株属于cry3类。比较cry3类基因的保守序列 ,利用一对cry3特异引物成功地从Bt886菌株中克隆到了一段基因片段并克隆至pGEM -T载体上。测序分析发现该片段与cry3Aa1基因具有很高的同源性 ,确定来自毒蛋白编码基因。Southern杂交分析表明该基因位于该菌株的质粒上。     

苏云金杆菌对松墨天牛幼虫的致死作用及其生物学特性

苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis),简称Bt,其在形成芽孢的同时会在菌体的1端或2端形成蛋白晶体,这种蛋白晶体被称为杀虫晶体蛋白(insecticidal crystalproteins,ICPs)或δ-内毒素(delta-endotoxin)。因ICPs具有杀虫高效、广谱、对     

杨树烂皮病菌颉颃菌株的初步筛选与分子鉴定

对杨树烂皮病菌的平板对峙试验结果表明,6种颉颃真菌中木霉的抑菌率最高为51%,而颉颃细菌4个菌株的抑菌率均在60%左右,说明颉颃细菌的抑菌效果明显高于颉颃真菌;对B137等4株颉颃细菌的分子鉴定认为,1株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),2株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),还有1株为苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt);解淀粉芽孢杆菌和苏云金杆菌对杨树烂皮病菌有较好的颉颃效果。