美国白蛾核型多角体病毒室内大量增殖的研究

研究了饲毒时美国白蛾幼虫虫龄和饲毒剂量对美国白蛾核型多角体病毒(HcNPV)青岛分离株产量的影响,从而探寻HcNPV室内大量增殖的最佳条件。结果表明,虫龄、剂量以及虫龄和剂量的组合对单头幼虫的HcNPV产量、幼虫死亡率以及病毒总产量均具有极显著的影响,在室内大量增殖HcNPV时,以1.48×106 OBs/头的饲毒剂量饲喂5龄和6龄幼虫均可以获得最高的病毒产量,百头幼虫的病毒总产量分别达到1.55×1011 OBs和1.50×1011 OBs。     

AcMNPV chiA基因表达产物对棉铃虫围食膜的破坏及对Bt和NPV的增效作用

采用PCR方法扩增出苜蓿银纹夜蛾(Autographa californica)核型多角体病毒(AcMNPV)几丁质酶基因(chiA)编码区1.6kb全长片段,并将该片段分别克隆至原核表达载体pET30a和杆状病毒BactoBac表达系统转移载体pFastBac中,分别在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)和草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞系Sf-9中进行了表达。SDS-PAGE分析表明,在大肠杆菌和昆虫细胞中均有效表达了60kD的蛋白。将表达产物饲喂5龄棉铃虫(Helicoverpa armigera)幼虫后取其围食膜,扫描电镜结果显示,围食膜结构遭到破坏形成大量孔洞。生物测定结果表明,以上两种表达产物对苏云金芽孢杆菌(Bt)和核型多角体病毒(NPV)均具有增效作用。以AcMNPVChiA在大肠杆菌和细胞系Sf-9中的表达产物分别与BtCry2Ac蛋白混合饲喂棉铃虫初孵幼虫,增效率分别为33.4%和54.5%,其LT50较对照处理分别缩短了17.8和20.6h;当AcMNPVChiA在大肠杆菌和细胞系Sf-9中的表达产物分别与甘蓝夜蛾(Mamestra brassica)核型多角体病毒(MbNPV)混合处理棉铃虫初孵幼虫时,其LT50与对照比较分别缩短了16.6和22.4h。     

建立有效机制 防范经营风险

随着电力市场逐步完善，电力销售垄断局面被打破，电力营销工作将面临营销风险加大这一紧迫、严峻的问题。营销管理方法、管理手段、管理思想的落后使电力营销无法适应买方市场条件下的信用经济要求，造成营销风险加大而导致企业经营困难，浪费了大量的人力物力。拖欠电费现象在一定程度上影响和制约了供电企业的正常经营活动。     

八字地老虎核型多角体病毒对原始寄主及交互寄主甘蓝夜蛾幼虫的毒力测定

分别用５种浓度的八字地老虎核型多角体病毒（Ｘｃ－ｎＮＰＶ）悬液接种２龄八字地老虎幼虫和２龄甘蓝夜蛾幼虫。结果表示,两者的ＬＧ_（５０）和 ＬＴ_（５０）相差不大,可见Ｘｃ－ｎＮＰＶ对两者的毒力和潜伏期相当。用感染Ｘｃ－ｎＮＰＶ后致死的甘蓝夜蛾幼虫体内分离的病毒回接２龄八字地老虎幼虫,发现这一病毒对八字地老虎幼虫的毒力不高。     

粘虫产卵底物的研究

试验分别以报纸条、聚丙烯绳和谷草把作为产卵底物来研究粘虫的产卵情况，试验结果表明，粘虫在谷草把和聚丙烯绳上的产卵量均显著高于在报纸条上的产卵量，聚丙烯绳与谷草把上的产卵量相当，聚丙烯绳可以作为一种新的产卵底物用于粘虫的室内饲养。     

八字地老虎核型多角体病毒的寄主范围和室内增殖以及寄主 …

八字地老虎核型多角体病毒对６种夜蛾科害虫有侵染性,根据害虫感受性的高低顺序为：甘蓝夜蛾,警纹夜蛾〉黑三条夜蛾〉朽木夜蛾〉粘虫〉三角夜蛾。Ｘｃ－ｎＮＰＶ能够感染八字地老虎幼虫的体壁,脂肪体,气管基质,血细胞的睾丸被膜,而在马氏管,丝腺,消化管,腹神经索和肌肉组织中未发现有多角体的增殖;虫龄影响病毒产量,虫龄高平均每头幼虫的病毒产量越高,以３龄幼虫的病毒总产量最高。     

八字地老虎核型多角体病毒的寄主范围和室内增殖以及寄主组织病理的研究

八字地老虎核型多角体病毒（Ｘｃ－ｎＮＰＶ）对６种夜蛾科害虫有侵染性,根据害虫感受性的高低顺序为：甘蓝夜蛾、警纹夜蛾＞黑三条夜蛾＞朽木夜蛾＞粘虫＞三角夜蛾。Ｘｃ－ｎＮＰＶ能够感染八字地老虎幼虫的体壁、脂肪体、气管基质、血细胞和睾丸被膜,而在马氏管、丝腺、消化管、腹神经索和肌肉组织中未发现有多角体的增殖;虫龄影响病毒产量,虫龄越高平均每头幼虫的病毒产量越高,以３龄幼虫的病毒总产量最高。     

杀虫蛋白基因cry8Fa2的克隆及在Bt无晶体突变株中的表达

以本实验室分离的Bt菌株B-DLL质粒DNA为模板,利用cry8类基因特异性引物JJX5和JJX3扩增出3.5kb的片段,将该片段插入克隆载体pMD 18-T中,筛选获得一个含新基因的克隆pMD-cry8new.序列测定表明,该基因编码区为3 525 bp,编码的蛋白质由1 174个氨基酸残基组成,理论分子量为133....     

降低线损的常用措施

线损是考核供电企业生产经营的一项重要技术经济指标，线损率的高低，是衡量我们供电部门管理水平的一项重要内容，对农网来说降低线损也是降低农村综合电价的技术保证。     

表面展示棉铃虫钙粘蛋白基因细胞系的建立

为研究苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis杀虫晶体蛋白与其受体钙粘蛋白的相互作用,本研究利用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)囊膜蛋白GP64细胞膜锚定的特点,将172 bp的N端信号肽(GP64 signal peptide,gp64sp)和135 bp的C端膜锚定区域(GP64 C-terminal transmembrane domain,gp64ctd)连接,并在中间添加了一段含有6个酶切位点的序列,再连接到表达载体pIZ/V5-His,成功构建了一个使外源基因在细胞膜上表达的重组载体pIZ/V5-gp64.将扩增的3 882 bp的棉铃虫钙粘蛋白(Helicoverpa armigera cadherin,HaCAD)基因重复区和近膜区片段与重组载体pIZ/V5-gp64进行酶切和连接,构建重组载体pIZ/V 5-gp64-HaCAD,将其转染棉铃虫细胞系Ha-E-1,通过筛选、细胞克隆和PCR验证,获得了重组钙粘蛋白基因的转基因细胞系Ha-T-CAD.免疫荧光法检测证实,钙粘蛋白在转基因细胞系Ha-T-CAD中成功表达.Western blot检测发现,在Ha-T-CAD细胞的膜蛋白中有140 kD大小的钙粘蛋白.转基因细胞系Ha-T-CAD的构建将为Bt杀虫晶体蛋白作用机理以及昆虫对Bt毒素的抗性机制研究提供基础资料.