湖北省湿地松猝倒病病原的分离及鉴定

从湖北沙洋、松滋、红安三地常年培育湿地松的苗圃中取土于室内种植湿地松,待其发病后按照柯赫氏法则对其进行病原物的分离、纯化、致病性测定及菌株鉴定。结果表明：发病部位分离到的菌株以镰孢菌（Fusarium spp．）占优势,分离到的68个菌株中65个为镰孢菌;立枯丝核菌（Rhizoctonia solani Kühn．）致病性最强,7天后发病率达到92％;链格孢（Alternaria alternate（Fr．）Keissl．）致病性最弱。研究证明,湖北省湿地松猝倒病是以镰刀菌为主要病原,立枯丝核菌和链格孢菌为次要病原的土壤习居真菌侵染引起的一种苗期病害。     

木霉拮抗立枯丝核菌株的筛选

木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）是一种有利用价值的拮抗性真菌,对多种植物土传病原菌具有拮抗作用。为挑选优良菌株用于林业苗木立枯丝核菌的生物防治,１９９５～１９９６年在黑龙江省内广泛采集土样,对分离到的３４８个菌株反复测定其拮抗作用,严格筛选。同时,为了扩大使用范围和获得较好的商业前景,还进一步测定了菌株对多种植物病原菌的寄生作用。１　材料和方法１－１　土样采集和分离于春秋两季在黑龙江省内具有代表性的地点采集不同类型和不同植物根际的土壤。采土深度５～１５ｃｍ,用诱捕法分离。１－２　筛选方法分粗筛和复筛两步。对初筛表现较好的菌株进行复筛。１－２－１　粗筛在９０ｍｍ直径的ＰＤＡ平板上用对峙法接种木霉和立枯丝核菌（均为３日龄,菌块直径８ｍｍ）,使其分布在同一直径上各距培养皿边缘５ｍｍ处,置２６℃培养箱内,测试项目及记载标准如下。竞争和寄生能力　分别在接种后第４日和第１０日测量木霉的菌丝直线生长距离Ｔ１和Ｔ２,以及第４日立枯丝核菌的菌丝直线生长距离Ｓ０,Ｔ１代表竞争能力,Ｔ２－Ｔ１代表寄生能力。抗生作用　观察木霉和立枯丝核菌两菌落间色带的有无、颜色的深浅和宽窄,按０～５级划分。０级两菌落交界处无色带;５级两菌落间棕色带宽...     

抗立枯丝核菌的假单胞杆菌属分离物筛选

从杉木根际的６０个假单胞杆菌属Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ分离物中选出１０个抗立枯丝核菌Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉ的分离物，经试管法测定它们在杉木和云杉根上定殖情况，以及对杉木和云杉生长的影响。     

抗立枯丝核菌的假单胞杆菌属分离物筛选

从杉木根际的６０个假单胞杆菌属Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ分离物中选出１０个抗立枯丝核菌Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉ的分离物，经试管法测定它们在杉木和杉根上定殖情况，以及对杉木和云杉生长的影响。     

洋葱伯克霍尔德菌C23抗真菌活性多肽的分离纯化

为了深入研究洋葱伯克霍尔德菌C23(Burkholderia cepacia C23)菌株产生的抗真菌活性物质,以立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)为指示菌进行生物活性跟踪,采用有机沉淀法、超滤法、Sephadex G25分子凝胶过滤法对活性物质进行分离纯化。结果表明,洋葱伯克霍尔德菌C23菌株产生的抗真菌活性物质为分子量5 000～10 000 Da的多肽类物质;建立了用超滤、分子凝胶过滤快速有效分离纯化伯克霍尔德菌C23菌株活性多肽的技术方法,为进一步制备单一的活性多肽成分奠定了基础。     

木霉菌株T88对7种病原真菌的拮抗作用

将木霉菌株Ｔ８８与７种常见的林果病原真菌进行平板对峙培养及显微观察,结果表明木霉菌株Ｔ８８对立枯丝核菌Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉ等供试的７种病原真菌都有明显的拮抗作用,可观察到Ｔ８８对病原菌菌丝的缠绕、使细胞质变稀薄、菌丝消解或穿透等现象,以及对齐整小核菌Ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍｒｏｌｆｓｉ的菌核的重寄生作用,使其发生腐烂,并抑制了白绢病菌菌核的萌发。     

盘龙参内生真菌分布特征的研究

从盘龙参[Spiranthes sinensis(Pers)Ames]的根、茎、叶中共分离得到49株内生真菌,经形态观察,鉴定为3目、4科、9属。其中曲霉属、镰刀孢属、丝核菌属为优势种群,分别占已分离菌株数的16.3%、14.3%和14.3%。不同组织部位所分离得到的内生真菌在种群及数量上都存在差异:根中的优势属为镰刀孢属,占到了根中分离菌种数的23.5%;叶中的优势属是链格孢属,占到叶中分离菌种数的26.3%;茎中的优势属为长蠕孢属,占到叶中分离菌种数的23.1%。表明盘龙参内生真菌的分布具有一定的组织专一性。     

马兰茎腐病的病原鉴定

对马兰茎腐病病害症状观察表明,受害株基部病斑淡褐色,椭圆形至长圆形,长1～2 mm,病斑绕茎一周,整个茎基部变褐色腐烂,并向上蔓延,该病在浙江丽水地区每年10月下旬至翌年4月发病严重,且易发生在植株茂盛、湿度大的地方;通过对其病原菌的分离鉴定,结果表明,马兰茎腐病病原为丝核菌属立枯丝核菌。     

北方杨树上冰核活性细菌的研究

从辽宁省、黑龙江省及北京市的杨树不同部位及干部溃疡类病害的病斑上分离到大量细菌。约有６０％左右的菌株在－３．５～６℃具有冰核活性。其中，从树干冻伤部位分离的细菌数量最多，冰核活性细菌的比例也最高；由Ｄｏｔｈｅｏｒｅｌｌａ ｇｒｅｇａｒｉａＳａｃｃ，引起的大型溃疡病病斑上也分离到较多的冰核活性细菌。用干部大型溃疡斑上分离到的１个冰核活性较强菌株和叶部分离１个冰核活性强的菌株，在人工霜箱中测定，可使     

剌槐根腐病的研究

根腐病在全国各地针叶树苗圃都普遍发生,近年来,在檫木、香椿、榆树、枫杨、楠木、桉树等阔叶树中也陆续发现.其主要症状是感病刺槐苗根部腐烂.严重的茎叶也出现腐烂.病原菌可以从土面沿着植株向上蔓延,亦可随雨滴反溅到高处,在土壤中的植物残体上越冬的菌丝和菌核是发病的初次侵染源,本病经分离和接种试验证实,由丝核菌(Rhizoctoni sp·)     

安宁思茅松毛虫6龄幼虫肠道可培养细菌的多样性研究

为给思茅松毛虫的综合防治提供参考措施,以安宁地区思茅松毛虫(Dendrolimu kikuchii)6龄幼虫为对象,采用纯培养法对其肠道细菌进行分离纯化,并进行形态特征观察及生理生化指标测定,对菌株进行初步鉴定,再结合16S rDNA分子鉴定技术进行分析,初步判定细菌的分类学地位,研究其肠道细菌的多样性。结果显示:从6龄思茅松毛虫幼虫肠道中共分离到104株细菌,初步鉴定隶属于10个属14个类群,分别为55株芽孢杆菌属(5个类群)、9株类芽孢杆菌属(1个类群)、2株苍白杆菌属(1个类群)、5株短芽孢杆菌属(1个类群)、4株微球菌属(1个类群)、6株莫拉菌属(1个类群)、8株栖水菌属(1个类群)、2株土壤芽孢杆菌属(1个类群)、7株葡萄球菌属(1个类群)、6株普罗威登斯菌属(1个类群)。其中芽孢杆菌属具有最高的相对分离率,为53.00%。6龄幼虫肠道细菌的Shannon多样性指数、Simpson优势度指数、Margalef丰富度指数分别为2.5217、0.9129、2.7991。思茅松毛虫6龄幼虫肠道细菌的多样性丰富,芽孢杆菌属为优势菌属,这些菌种为研究思茅松毛虫综合防治奠定了基础。     

杨梅弗兰克氏菌生物学特性研究

用根瘤切片法从浙江省多个产地的荸荠种、东魁种和深红种杨梅根瘤中分离得到5个杨梅弗兰克氏菌株,对其进行形态培养、生理类型和营养源利用等生物学特性的研究.结果表明,菌株在QMOD和BAP培养基中生长良好;生理类型试验参试的五株菌株中有2株菌株为生理B型,2株为生理A型,1株为生理AB型;菌株在营养源试验中,表现出以丙酮酸钠为唯一碳源或分别以酪蛋白、蛋白胨为唯一氮源的BAP培养基中生长良好.     

韩国、美国和中国栗疫病菌的遗传变异分析

用RAPD方法,对来自韩国、美国和中国的26个栗疫病菌菌株进行了遗传变异分析.使用筛选的12个随机引物,共扩增了115个0.19～3.1 kb大小的扩增片段,其中多态性片段占61.7%.聚类分析结果,相似系数为0.92时,26个菌株分为两大组,一组由21个菌株组成,包括大部分韩国菌株和美国菌株;另一组包括部分韩国菌株和中国菌株.表明美国菌株和大部分韩国菌株的遗传相似性很高,部分韩国菌株有较大的变异,而中国菌株则表现出了遗传上的远缘关系.     

12种夹竹桃科植物的RAPD分析

从80个随机扩增多态性DNA(RAPD)随机引物中筛选出22个谱带清晰且重复性好的引物用于PCR扩增,探讨夹竹桃科(Apocynaceae)10属12种植物的遗传关系。获得162个位点用于计算Nei’s遗传相似性系数,并应用NTSYS程序UPGMA法构建了系统发育树。黄蝉(Allamanda schottiiPohl.)与软枝黄蝉(A.catharticaL.)、红鸡蛋花(Plumeria rubraL.)与鸡蛋花(P.rubraL.‘Acutifolia’)之间的遗传相似性最高;在遗传相似性系数0.73处将12种植物划分为10个属,并在0.58处分为3支,但并不完全支持3个独立的亚科。RAPD分析结果与形态学的分析结果基本一致,可为夹竹桃科系统分类学提供分子生物学的证据。     

树木枝干溃疡病菌致病力分化研究

应用人工接种的方法,对不同地理区域、不同寄主上的24个Botryosphaeria dothidea菌株、6个B.berengeriana菌株在不同抗性杨树上接种后的致病力分化进行了研究.结果显示:接种后是否形成愈伤组织是树木抗性的表现,也是真菌致病力大小的表现;B.dothidea菌株存在致病力分化现象,表现为强、中、弱3种类型,中等致病力的菌株是优势类群;以杨树为接种材料,24个B.dothidea菌株的致病力呈现一定的地理分化现象,致病力从强到弱依次为:华东(华南)>西北>华北(华中)>东北,即菌株致病力从我国南方向北方有逐渐变小的趋势;苹果轮纹病菌和干腐病菌的致病力也呈现出南方菌株大于北方菌株的特点.从溃疡病菌株的致病力出发分析了5种杨树的抗病性,其结果与以往的观察结果相一致.     

Spread of Cryphonectria hypovirus1 into 45 vegetative compatibility types of Cryphonectria parasitica on grafted American chestnut trees

A mixture of hypovirulent strains of Cryphonectria parasitica, including four white (European) strains infected with Cryphonectria hypovirus1 (CHV1), was used in 1982 and 1983 to inoculate natural blight cankers located within a zone ranging from the ground to 183 cm on grafted American chestnut trees. These four white strains belonged to three vegetative compatibility (vc) types. Using pigmented, single‐spore colonies from white isolates, 48 vc types were identified among 110 white isolates recovered in 1996, 1998, and 1999 from cankers located outside the inoculated zone. Twenty‐five of the 48 white vc types consisted of two or more isolates. The 25 major white vc types were vegetatively incompatible with all four of the original white hypovirulent strains, providing evidence for spread of CHV1 but not for spread of the original inoculated strains. Forty‐five vc types represent the minimum number of `new' vc types into which CHV1 had spread. The ratio of white vc types to white isolates tested (S/N) and Shannon diversity index were 0.436 and 3.64, respectively. The spatial pattern of white vc types on the grafts was found to be non‐random (p=0.019). White single‐spore colonies of white isolates were placed into four cultural morphology (CM) groups. The two largest groups contained 37 (CM group 3) and 33 (CM group 1) isolates. Single‐spore colonies from the original, white inoculated strain, Ep 49, were classified into CM groups 3 and 1, and colonies of Ep 51 W were classified into CM group 1.     

Screening Rhizobium spp. strains associated with Gliricidia sepium along an altitudinal transect in Veracruz, Mexico

In order to characterize Rhizobium strains naturally associated with Gliricidia sepium (Jacq.) Walp. and to determine their effectiveness for seedling inoculation, morphologic traits of G. sepium nodules and Rhizobium strains isolated from them, collected along on altitudinal transect (10—970 m above sea level) in northern Veracruz were studied. The Rhizobium strains isolated (three from each of eight sampling sites) were evaluated in terms of dry matter production, total nitrogen and nodulation capability on six month-old G. sepium seedlings inoculated under greenhouse conditions. Even though all isolated strains belong to the Hup⁺ group, differences in both morphological and physiological traits of nodules and Rhizobium strains were observed, associated to site elevation. Nodules from low elevation sites (< 100 m) were spherical and smooth, with Rhizobium strains tolerant to salinity (5% NaCl), and those from high elevation sites (> 500 m) were branched, with strains sensitive to salt. Thirteen strains (two from sites below 100 m and 11 from sites above 100 m) significantly increased seedling biomass, and nine of them also increased nitrogen content without negatively affecting the physiological nitrogen use efficiency (PEI) as compared to control seedlings. The relative effectiveness index (REI) of these Rhizobium strains varied between 2.0 and 2.4. However, no significant trend (r = 0.25) was found between PEI values of strains and site elevation. Nodular mass (NM) varied from 1.1 up to 1.7 mg dry weight with significant differences among strains, even though no significant elevational trend was found in this trait. This revised version was published online in June 2006 with corrections to the Cover Date.     

Frankia菌遗传多样性的rDNAIGS RFLP研究

Frankia是一类能与非豆科树木共生结瘤固氮的放线菌。关于其属的分类目前比较确认 ,对于种水平的划分 ,虽然从可溶性蛋白类型 (张道海等 ,1 991 ;Bensonetal.,1 983;Gardesetal.,1 987a)、同功酶类型(Gardesetal.,1 987b ;张道海等 ,1 989)、脂肪酸 (Weeleretal.,1 986)、血清 (Bakeretal.,1 981 ;孙慧君等 ,1 991 )、宿主特异性 (Baker,1 987;Torreyetal.,1 989)、DNA同源性 (Fermamdexetal.,1 989;Akimovetal.,1 992 )、基因组 (Dobritsa ,1 985 )和质粒的限制酶切图谱 (Simonetetal.,1 985 )等诸多方面进行了分析 ,但由于研究的菌株数量有限 ,且培养过程中菌株的生物学特性易发生变异 ,因而迄今为止仍没有一种有效的种的分类方法。近年来 ,1 6SrDNA及其 1 6S～ 2 3SrDNA间隔序列作为一个分子标记 ,广泛应用于各种微生物的分子遗传差异和分类鉴定研究 (韦革宏等 ,1 999;冯瑞华 ,2...     

杨梅根瘤内生菌的生物学特性

以5株细枝木麻黄、短枝木麻黄、粗枝木麻黄和四川桤木的共生Frankia菌株为对照,研究12株杨梅根瘤内生菌的形态培养特征、生理类群、细胞壁类型、营养源利用、固氮酶、宿主特异性等生物学特性.结果表明:供试菌株具有分枝状菌丝、多腔孢囊、泡囊等典型的Frankia结构,杨梅菌株FMrl6、FMr43和木麻黄菌株FCe64、FCe33还具有串珠状生殖菌丝.多数杨梅菌株在有氮培养基中能形成泡囊,固氮活性差异显著.细胞壁类型多为Ⅲ型,菌株FMrl6为Ⅱ型.生理类群有A、B和AB 3种,同一株杨梅根瘤内有B和AB 2种生理类群的菌株共存.菌株能良好利用丙酸钠、丙酮酸钠、乙酸钠、吐温和酪蛋白,部分菌株利用硝态氮、铵态氮和牛肉膏,利用糖类差,不利用蛋白胨和尿素,不使明胶液化,不分解纤维素,不产生硫化氢,不利用苯丙氨酸.杨梅根瘤内生菌可使原宿主结瘤,能感染沙枣和四川桤木,但不侵染木麻黄结瘤,这为菌株的选择应用提供基础.     

日本紫色甘薯品系的形态标记聚类分析

根据通用的甘薯鉴定性状及其生长期记载标准,选择26项指标作为形态鉴定参数对14个日本紫色甘薯品种(系)进行聚类分析.结果表明,所有供试品系或品种分成6类."山川紫"和新引进的13个日本紫色甘薯品系之间的亲缘关系相对较远;在新引进的日本紫色甘薯中,A组中A1、A2、A7等3个品系之间以及A3、A4、A6等3个品系之间的亲缘关系很近;B组中B1～B3与B7～B8的亲缘关系很近.