魔芋多糖复合物体系凝胶化性能的影响因素研究

以魔芋多糖(魔芋精粉)为基料,将其与κ-卡拉胶和大豆分离蛋白以物理共混方式复合,研究了魔芋多糖复合物体系的凝胶化性能。结果表明:通过对复合物体系的凝胶化性能分析,得到魔芋多糖复合物中多糖和大豆分离蛋白的最佳比例为6∶4,当体系的pH值为7时,复合物体系的凝胶强度达到最大;最佳共混溶胀温度为85℃;随着体系中多糖、蛋白浓度的递增,分子之间相互碰撞、结合的机会显著增多,复合物的凝胶强度也呈现快速上升趋势,线性回归方程为:Y=254.8X-94.2(R2=0.9883);在相同浓度下,K+对复合物体系凝胶强度增强的效果远远大于Na+。     

黄芪多糖铁(Ⅲ)复合物的制备及其抗氧化性

以黄芪多糖和氯化铁为原料,合成黄芪多糖铁(Ⅲ)复合物,所得产率为28. 44%。通过邻菲罗啉紫外分光光度法测定复合物中铁含量为57. 36 mg/g,通过ICP等离子体发射法测定铁含量为53. 95 mg/g。通过紫外-可见光谱和红外光谱证实了黄芪多糖铁(Ⅲ)复合物的合成,利用ABTS清除能力、DPPH清除能力、OH清除能力和还原力评价黄芪多糖铁(Ⅲ)复合物的抗氧化活性。结果表明,在试验设定的浓度范围内,黄芪多糖铁(Ⅲ)的抗氧化能力随着浓度的增加而增加。黄芪多糖铁(Ⅲ)复合物有望开发成为一种具有多重保健功能的生物多糖型补铁剂。     

超滤法和醇提法在苜蓿多糖提取中的研究

本文对超滤法和醇提法提取苜蓿多糖以及蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法对苜蓿多糖测定进行了对比。实验发现,在进行粗多糖的提取时,利用超滤法提取粗多糖可显著提高多糖得率。用蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法两种不同的测定方法来测定多糖含量,在未脱蛋白质前,两种测定方法皆具有良好的稳定性、精密性以及重现性,但都受到样品中蛋白质干扰;而在脱蛋白后,苯酚-硫酸法在检测样品不同稀释度的重现性稍劣于蒽酮-硫酸法。     

多糖对大豆分离蛋白乳液及乳液凝胶性质的影响

文章通过研究不同添加量(0、0.05%、0.1%、0.2%和0.3%)两种带电荷多糖(卡拉胶、瓜尔豆胶)与5%大豆分离蛋白(SPI)复合形成乳液及乳液凝胶性质,揭示复合物结构变化与乳化体系稳定性关系及复合物形成对乳液凝胶特性的影响。采用动态激光散射及红外光谱研究SPI与可溶性卡拉胶、瓜尔豆胶复合物形成乳液流体动力学半径及蛋白二级结构变化;通过测定乳液凝胶质构表征乳液凝胶硬度、黏弹性及持水性等物化性质。结果表明,多糖添加量为0.1%时所形成乳液粒径较小,乳滴形状规则、分布均匀,表面负电荷增加,添加卡拉胶所形成乳液稳定性高于瓜尔豆胶,多糖添加提高乳液凝胶硬度、黏弹性及持水能力,当添加量为0.1%时物化性质最佳。此外,多糖种类及添加量均可改变SPI二级结构,影响SPI与多糖结合,影响所形成乳液及乳液凝胶性质。     

苜蓿多糖提取及测定方法的比较

本文对水煮法和醇提法两种不同提取苜蓿多糖方法以及蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法两种不同的苜蓿多糖测定方法进行了比较。结果发现，在进行苜蓿粗多糖的提取时，利用水煮法提取粗多糖可显著提高多糖得率。用蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法两种不同的测定方法来测定多糖含量，在未脱蛋白质前，两种测定方法皆具有良好的稳定性、精密性以及重现性，但都受到样品中蛋白质干扰严重；而在脱蛋白后，蒽酮-硫酸法在检测样品不同稀释度的重现性稍优于苯酚-硫酸法。     

小菜蛾性信息素与性信息素结合蛋白、受体蛋白结合机理研究

【目的】研究小菜蛾性信息素与性信息素结合蛋白、受体蛋白之间作用的关键氨基酸残基和作用力类型,揭示小菜蛾识别性信息素的分子机制,为开发新型性诱剂和小菜蛾的无害化防治提供新思路。【方法】运用Discovery Studio 2.5对小菜蛾性信息素结合蛋白PxylPBP2和受体蛋白PxylOR4进行同源建模,运用程序包中LibDock模块进行分子对接,运用Calculate Energy模块计算复合物结合自由能,分析性信息素Z9-14∶AC与PxylPBP2和PxylOR4的结合模式及相互作用力。【结果】Thr9是PxylPBP2与Z9-14∶AC形成氢键的关键氨基酸残基,Z9-14∶AC易与PxylOR4中的Leu残基产生疏水作用力;PxylPBP2与Z9-14∶AC结合的主要驱动力是静电力,PxylOR4与Z9-14∶AC结合的主要驱动力是范德华力,溶剂化能均抑制Z9-14∶AC与PxylPBP2和Z9-14∶AC与PxylOR4的结合。【结论】小菜蛾性信息素受体蛋白和性信息素结合蛋白在识别和结合性信息素分子方面存在明显差异,性信息素受体蛋白与性信息素反应更灵敏、形成的复合物更稳定。     

香菇多糖硫酸酯化修饰的研究

为探讨香菇多糖的最佳硫酸酯化工艺,研究了三氧化硫-吡啶复合物与从香菇中提取的香菇多糖的物料比、反应温度、反应时间等因素对香菇多糖硫酸酯化的影响。通过正交试验,以多糖取代度作为考察指标,优选出最佳硫酸酯化工艺:物料比为1∶2,温度为95℃,时间为2 h。     

脱脂和脱蛋白处理对虫草多糖测定的影响

以虫草发酵菌粉为材料,比较多糖提取过程脱脂、脱蛋白操作对硫酸-苯酚法和硫酸-蒽酮法测定多糖值的影响。研究结果表明,同一样品提取多糖时不脱脂和蛋白(A)、只脱脂(B)、只脱蛋白(C)、脱脂脱蛋白(D)对硫酸-蒽酮法与硫酸-苯酚法测定结果差异显著,2种比色法测得多糖含量值均呈现ABCD,其中脱蛋白的操作比脱脂操作对2种比色法测定结果影响更大。同时还显示,硫酸-苯酚法测得的多糖含量较硫酸-蒽酮法测得值大。并通过精密度、回收率、稳定性比较发现,硫酸-苯酚法优于硫酸-蒽酮法。     

资木瓜多糖中蛋白质含量的测定

[目的]研究快速、简单、准确地检测资木瓜多糖中蛋白质含量,为资木瓜多糖的纯化和药理活性的研究提供参考。[方法]水提醇沉提取资木瓜多糖,Sevag法去蛋白,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量,并分别进行稳定性、精密度、重现性和回收率测定。[结果]蛋白含量测定结果表明,资木瓜多糖中游离蛋白和结合蛋白的含量分别为3.82%和3.47%,稳定性、精密度和重现性测定RSD分别为1.55%、0.66%、2.89%,回收率为100.44%,RSD为2.20%。[结论]该法操作简单、灵敏度高、重现性好,是测定资木瓜多糖中蛋白质含量的有效方法。     

厚朴叶多糖铁复合物中铁的含量测定

[目的]测定厚朴叶多糖铁复合物中铁的含量。[方法]从厚朴叶中提取多糖,在碱性条件下,厚朴叶多糖与氧化铁反应合成厚朴叶多糖铁(Ⅲ)复合物(LPC)。其中的铁(Ⅲ)含量用邻菲啰啉紫外分光光度法进行测定。[结果]在铁(Ⅲ)浓度为0～0.196 7 mg/ml时,浓度与吸光度呈现良好的线性关系(r=0.999 8);平均回收率为98.83%,RSD为1.60%;厚朴叶多糖铁(Ⅲ)复合物中铁(Ⅲ)含量为31.42%。[结论]该方法简便迅捷、可靠,可用于厚朴叶多糖铁复合物中铁的含量测定。     

加纳链霉菌接合转移体系的建立与优化

加纳链霉菌(Streptomyces ghanaensis)是动物饲料添加剂黄霉素的主要生产菌。建立高效稳定的遗传操作系统是对该菌进行分子生物学研究和构建高产黄霉素基因工程菌的基础。以含有基因整合型重组质粒pIJ8630-nsdA的Escherichia coli ET12567/pUZ8002为供体、加纳链霉菌ATCC 14672为受体进行接合转移,通过单因素试验与正交试验对接合转移过程中的关键影响因素进行优化。结果表明,WL50培养基为接合转移最适培养基,当受体加纳链霉菌ATCC 14672孢子在50 ℃条件下热激10 min、37 ℃预培养3 h后,与供体按细胞数比例1∶15混合后涂布于接合转移平板上,30 ℃培养14 h后覆盖50 μg·mL^-1安普霉素和500 μg·mL^-1萘啶酸时,接合频率最高,比优化前提高20.3倍。     

The ins and outs of DNA transfer in bacteria

Transformation and conjugation permit the passage of DNA through the bacterial membranes and represent dominant modes for the transfer of genetic information between bacterial cells or between bacterial and eukaryotic cells. As such, they are responsible for the spread of fitness-enhancing traits, including antibiotic resistance. Both processes usually involve the recognition of double-stranded DNA, followed by the transfer of single strands. Elaborate molecular machines are responsible for negotiating the passage of macromolecular DNA through the layers of the cell surface. All or nearly all the machine components involved in transformation and conjugation have been identified, and here we present models for their roles in DNA transport.     

Definition of a bacterial type IV secretion pathway for a DNA substrate

Bacteria use conjugation systems, a subfamily of the type IV secretion systems, to transfer DNA to recipient cells. Despite 50 years of research, the architecture and mechanism of action of the channel mediating DNA transfer across the bacterial cell envelope remains obscure. By use of a sensitive, quantifiable assay termed transfer DNA immunoprecipitation (TrIP), we identify contacts between a DNA substrate (T-DNA) and 6 of 12 components of the VirB/D4 conjugation system of the phytopathogen Agrobacterium tumefaciens. Our results define the translocation pathway for a DNA substrate through a bacterial conjugation machine, specifying the contributions of each subunit of the secretory apparatus to substrate passage.     

PLRV 56KD蛋白基因植物转化载体的构建

为培育转基因抗马铃薯卷叶病毒的新材料 ,采用二次连接法将存在于克隆载体 p L R5 6中的马铃薯卷叶病毒 5 6 KD蛋白基因及 3 端非编码区构建到双元载体系统的中间表达载体质粒p ROK 中 ,采用三亲融合法和直接导入法转化根癌农杆菌 LBA4 40 4 ,PCR法检测。实验表明 ,二次连接法效果优于一次连接法 ,两种连接法对比 ,二次连接法更适用于大分子质粒的重组。直接导入法比三亲融合法更简便 ,二者转化效率没有显著差异。实验构建完成马铃薯卷叶病毒 5 6 KD蛋白基因及 3 端非编码植物转化载体 ,建立了高效、简便的植物转化载体的构建方法     

生物素化DNA与链霉亲和素绑定初步研究

将生物素标记的DNA与链霉亲和素(streptavidin,STV)按4∶1摩尔比连接,用原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)对混合物表征,观察到所有可能的几种DNA-STV复合物。并按照不同摩尔浓度比和孵育时间配制DNA与STV混合液,探讨了影响结合效率的因素,初步得到用生物素-链霉亲和素系统批量制备1STV-1DNA单分子复合物的最佳制备条件,为未来单分子DNA的大规模快速制备奠定了基础。     

小泛素相关修饰物SUMO的研究进展

综述了SUMO的家族概况、主要功能及SUMO化与泛素化的区别。     

Epinephrine metabolism in mammalian brain after intravenous and intraventricular administration

Epinephrine given intravenously or intraventricularly has a half-life in the brain of the rat of 2 to 2.5 hours. After intravenous administration of the drug the principal route of metabolism is O-methylation, whereas after intraventricular administration the principal route is conjugation.     

华山新麦草属间杂种细胞间遗传物质的转移及其在物种演化中的意义

本文描述了华山新麦草同纤毛鹅观草、鹅观草、普通小麦和节节麦属间杂种小孢子发生过程中，细胞间通过接合管或接合孔转移遗传物质的现象。遗传物质的转移引起多核细胞的出现和染色体数目的变化。这些变化为生物进化提供了重要的物质基础。初步证明细胞间遗传物质的转称是受基因系统控制的，华山新麦草的Ｎｂ染色体组上可能存在控制细胞间遗传物质转移的基因系统。并讨论了细胞间遗传物质转移后，在物种演化过程中的意义和作用。     

电转化法及其在苏云金杆菌中的应用

苏云金杆菌（ Ｂｔ）工程菌的构建,可以采用原生质体融合、接合转移和转化等方法,其中电转化法被公认为是最有效的手段之一,此技术已广泛地应用于 Ｂｔ的遗传改良．本文阐述了电转化基本原理及基本操作步骤．此外,还就存在的问题和应用前景进行探讨     

Conjugative Transfer by the Virulence System of Agrobacterium tumefaciens

Agrobacterium tumefaciens transfers part of its Ti plasmid, the transferred DNA (T-DNA), to plant cells during tumor induction. Expression of this T-DNA in plant cells results in their transformation into tumor cells. There are similarities between the process of T-DNA transfer to plants and the process of bacterial conjugation. Here, the T-DNA transfer machinery mediated conjugation between bacteria. Thus, products of the Vir region of the Ti plasmid of Agrobacterium tumefaciens, normally involved in transfer of DNA from bacteria to plants, can direct the conjugative transfer of an IncQ plasmid between agrobacteria.