黄瓜组织培养研究

对黄瓜组织培养的条件作了探讨.结果表明,苗龄1～2 d的子叶,在附加1.0 mg/L BA,2.0 mg/L AgNO3和1.0 mg/L ABA的MS固体培养基上,最适于不定芽分化,1个月内的再生率达50%左右,其中苗龄和ABA的影响最为显著,加入适量的AgNO3可改善黄瓜愈伤组织的质地、促进芽的形成.     

黄瓜组织培养与组培苗嫁接研究

本研究的外植体为黄瓜自交系2～3 d的子叶,培养基为MS,讨论了AgNO3和6-BA的浓度组合对芽的诱导和增殖的影响,并以白籽南瓜为砧木,黄瓜子叶组织培养再生芽为接穗,进行嫁接,比较了不同砧木苗龄、培养方式和接穗大小对嫁接成活率的影响。研究表明,黄瓜子叶再生苗诱导率较高的培养基为MS＋BA 1.0 mg/L＋AgNO3 1.0 mg/L,增殖芽数较多的培养基为MS＋BA2.0 mg/L＋AgNO3 1.0 mg/L;组培苗的嫁接接穗长度为2.5＋0.5 cm,砧木苗龄以3叶1心时嫁接成活率最高,可达100%。     

黄瓜高频再生体系的建立

【目的】建立黄瓜的高频再生体系,为黄瓜种质的遗传转化奠定基础。【方法】分别以华北型黄瓜种质26号、欧洲型黄瓜种质14-1为材料,研究不同激素组合、AgNO3质量浓度、苗龄、子叶切割方式及外植体接种方式对黄瓜子叶节不定芽诱导的影响。【结果】华北型黄瓜种质26号再生的最适激素组合为4.0mg/L 6-BA+0.3mg/L IAA+1.0mg/L AgNO3,再生率与再生系数分别可达85.00%和2.51;欧洲型黄瓜种质14-1再生的最适激素组合为3.0mg/L 6-BA+2.0mg/L ABA+1.0mg/L AgNO3,再生率与再生系数分别可达86.70%和2.77;5d苗龄的黄瓜子叶作为外植体时诱导不定芽的状态最佳;切除子叶端部2/3且基部附带有1mm子叶柄、以叶背向下子叶柄微插入的方式进行接种再生效率最高。【结论】建立了黄瓜种质14-1和26号材料的高频再生体系,再生率均可达85%以上。     

陆地棉子叶离体培养诱导不定芽植株再生

以陆地棉种子无菌苗的子叶为外植体材料,研究不同苗龄的子叶、激素组合、硝酸银等对子叶诱导不定芽的影响.试验结果:15 h苗龄的子叶,在附加BAP 3.0 mg/L、IAA 1.0 mg/L、2ip 1.0 mg/L和AgNO3 5.0 mg/L的不定芽诱导培养基上,珂字棉312和泗棉3号的不定芽诱导频率分别为70%和60%左右.     

南盐油1号油菜的组织培养及植株再生研究

以南盐油1号油菜的下胚轴为外植体,利用组织培养的方法,研究苗龄、预培养时间、预培养基的激素配比、分化培养基的激素配比及AgNO3浓度等对芽再生的影响.结果表明,6 d苗龄的下胚轴在MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA培养基预培养4 d后,转入分化培养基MS+2.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+8 mg/L AgNO3培养,可以获得较高的芽再生频率.     

不同基因型黄瓜离体再生及其影响因素的研究

以6个黄瓜(Cucumissativus L.)自交系为试验材料,研究不同的基因型、外植体类型和激素组合等因素对黄瓜离体植株再生的影响。结果表明,不同基因型黄瓜材料的再生能力差别较大;带柄子叶比下胚轴和不带柄子叶的再生率高,是比较理想的外植体材料;较低的6-BA/IAA配比促进黄瓜不定芽的分化;6-BA/IAA配比较高则适合再生芽的伸长;添加0.5mg/LAgNO3可以促进不定芽发生,5～6d苗龄的外植体分化再生频率较高;在供试的6个试验材料中,M8,M10的再生频率较强,分别达到96%和90%。高频率不定芽诱导分化培养基为:MS+IAA0.6mg/L+6-BA0.5mg/L+AgNO30.5mg/L;不定芽伸长的培养基为MS+IAA1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+GA31.0mg/L+AgNO30.5mg/L;高效生根诱导培养基为MS+IAA0.2mg/L+NAA0.1mg/L。     

辣椒子叶和下胚轴的离体培养及高效再生体系的建立

采用 9 个辣椒品种(Capsicum annuum L.)的子叶和下胚轴,分别离体培养在附加不同激素及化合物的MB5培养基上,对苗龄、基因型、不同外植体、激素组合和 AgNO3等对外植体不定芽诱导分化和芽伸长的影响进行研究。结果表明,苗龄对外植体不定芽分化的方式有直接影响;AgNO3的加入可使芽分化率平均提高 20 %～30 %,并缩短外植体再生时间;子叶的不定芽分化率高于下胚轴;B5维生素有利于芽的生长和芽伸长率的提高。通过结果比较,筛选出了辣椒子叶和下胚轴离体再生的较好芽分化培养基为 MB5+5 mg/L、6-BA+0.5 mg/L、IAA+4 mg/L、AgNO3+30 g/L、蔗糖+5 g/L 琼脂;芽伸长培养基为 MB5+3 mg/L、6-BA+1 mg/L、IAA+2 mg/L、GA3+4 mg/L、AgNO3+30 g/L、蔗糖+5 g/L 琼脂;生根培养基为 1/2 MS+0.2 mg/L、IAA+0.1 mg/L NAA。     

2种基因型大白菜高效子叶离体不定芽再生研究

以2个优质大白菜材料德高早熟长江5号(DG)和双耐(SN)的子叶为外植体,研究了不同激素配比、苗龄和AgNO3浓度对子叶不定芽再生的影响,建立了2种大白菜的子叶不定芽高效再生体系,为进一步有效的利用基因工程技术改良大白菜品种奠定了基础.结果表明:与6-BA相比,TDZ对诱导子叶不定芽再生更有效.在单独附加细胞分裂素(6-BA或TDZ)的MS培养基上,不能诱导子叶不定芽的分化.DG在MS+ 1.5 mg/L TDZ+0.2 mg/LNAA+6 mg/L AgNO3分化培养基上再生频率最高,为73.80％,最适苗龄为6d,平均再生系数为4.27.SN在MS+1 mg/L TDZ +0.4 mg/L NAA+6 mg/L AgNO3分化培养基上再生频率最高,为59.09％,最适苗龄为6d,再生系数为4.03.     

菜心子叶离体高频芽诱导的研究

菜心具柄子叶在不定芽诱导培养基中添加浓度为4mg/L的BA时,有5%的外植体产生芽,同浓度BA继代培养后有20%的愈伤组织分化出芽。BA和KT组合仅使愈伤组织分化频率提高,对芽再生频率没有影响。菜心芽分化频率在苗龄为4d时,AgNO3浓度为1～6mg/L时芽分化频率均达70%以上,最高达85%(AgNO3浓度为4mg/L);苗龄为5d和6d时,芽最高分化频率为55%和10%。     

榨菜子叶和带柄子叶再生植株的研究

以榨菜子叶及带柄子叶等为外植体,在添加不同激素的MS培养基上,经不定芽诱导,不定芽伸长,生根等步骤,获得了完整的再生植株.结果表明:4 d苗龄的子叶再生能力最强,带柄子叶的最佳苗龄为5～6 d.子叶和带柄子叶分别在MS BA 2 mg/L NAA 0.4 mg/L AgNO3 5 mg/L和MS BA 2 mg/L NAA 0.2 mg/L AgNO3 5 mg/L的培养基中不定芽分化的效果较好.不同基因型间对子叶外植体的再生影响不大,但对带柄子叶的再生影响较明显.     

影响马铃薯叶圆片植株再生因素的研究

以山东省广泛栽培的马铃薯品种为材料 ,对影响马铃薯叶圆片植株再生的各种因素进行了探讨。研究发现 :在诱导分化培养基中附加 4mg/LAgNO3 可使鲁马一号叶圆片再生率由对照的 40 %提高到 81 % ,培养基中加入 0 2mg/L的ABA也能提高植株再生频率 ,但影响幅度不大 ,且高浓度ABA (>1mg/L)抑制再生。不同品种 (基因型 )、不同苗龄以及外植体类型都会不同程度地影响马铃薯叶圆片外植体的再生     

花生幼叶丛生芽高效诱导的制约因素研究

以花生品种豫花14号4 d苗龄的幼叶为外植体,对花生幼叶高频不定芽诱导进行研究。在MS培养基的基础上,添加了芽诱导常用的细胞分裂素6-BA、生长素NAA及两种不太常用的脱落酸(ABA)、噻重氮苯基脲(TDZ),结果表明,单独使用6-BA,NAA或TDZ,不定芽诱导率较低;采用较高浓度的6-BA(8 mg/L)、较低浓度的NAA(1 mg/L),添加低浓度的ABA(1 mg/L),不定芽诱导率可达80%以上。最佳诱导培养基为MS+6-BA 8 mg/L+NAA 1 mg/L+ABA 1 mg/L+AgNO32 mg/L,从整体上观察,最佳继代培养基为MS+6-BA 5 mg/L+NAA 2 mg/L+AgNO32 mg/L。同时研究发现,花生幼叶近叶柄基部切口处不定芽诱导率较高,是较理想的不定芽诱导部位。     

黄瓜(Cucumis sativus L.)离体再生和转化体系的优化

以黄瓜4d苗龄子叶节和农杆菌GV3101为实验材料,对再生体系和转化体系条件进行优化。再生部分,将培养基中的6-BA和ABA设立浓度梯度,并添加适量的AgNO3,进行再生情况对比,得最佳配方MS+1.5mg/L 6-BA+1.0mg/L ABA+2.0mg/L AgNO3,可直接诱导出芽,最短45d获得完整植株。转化部分,根据敏感性试验确定选择培养卡那霉素(kan)筛选压,并运用gus瞬时表达法对预培养时间、侵染时间、共培养时间和抗氧化剂的添加等影响转化效率的因素进行优化。结果表明,50mg/L kan筛选压即可筛选出阳性株;预培养时间1～2d,侵染时间20～30min,共培养3d时转化效率较高;抗氧化剂的加入可显著提高转化效率。对该转化体系进行验证,PCR结果初步表明外源基因成功整合入黄瓜基因组中。     

小白菜高效子叶离体植株再生体系的建立

以丰顺小白菜带柄子叶为外植体,研究了苗龄、不同激素配比、A gNO3浓度和抗生素、共培养时间对不定芽再生的影响。结果显示,子叶不定芽再生的最佳苗龄为5~9d;经过2d的预培养,在M S 1.0m g/L TDZ 0.1m g/L NAA 7.5m g/L A gNO3 0.5m g/L ABA培养基中,带柄子叶不定芽再生率最高,为82.53%;在含有2.0m g/LIBA的1/2M S0培养基中诱导生根,不定根形成率为100%。抗生素敏感性试验表明,可选择浓度为20m g/L Hyg(潮霉素)作为最适合选择压,抑制农杆菌生长的抗生素选用500m g/L Cb(羧卞青霉素)。不同浓度农杆菌菌液对子叶再生不定芽的影响不大,但共培养时间的长短却明显地影响不定芽的分化。     

影响大白菜离体再生及基因转化的因素研究

以耐热大白菜42 号自交不亲和系的子叶为外植体,研究了几种因素对大白菜植株再生的影响和农杆菌介导法转CpTI基因的条件。含0.1 m g/LNAA, 1.0～2.0 m g/LCPPU, 5.0～10.0 m g/LAgNO3 的MS培养基较适合于大白菜42 号自交不亲和系的子叶离体培养再生植株。测定了在含不同激素组合的培养基上离体培养7 d 后的子叶的内源激素含量,在不定芽诱导培养基上子叶内源IAA、ABA 含量分别比培养在不含激素的培养基上下降42.6% 、10.5% , 比培养在生根培养基上下降52.4% 、19.0% ; iPAs 含量、GA1 3 含量分别比培养在不含激素的培养基上上升510.9% 、143.9% ,比培养在生根培养基上上升860.5% 、558.3% 。头孢霉素抑制子叶再生不定芽,而羧苄青霉素则有促进作用。筛选转化体的适宜卡那霉素浓度为5～10 m g/L。     

野生梭梭的离体培养和植株再生

以野生梭梭带腋芽茎段为外植体进行离体再生研究,探讨不同植物生长调节剂、硝酸银和蔗糖的质量浓度对其愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,野生梭梭带腋芽茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.0 g/L,诱导率为100%;不定芽分化的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+AgNO33.5 mg/L+蔗糖26 g/L+琼脂6.5 g/L,不定芽分化率为97.8%;影响野生梭梭再生的最主要因素是NAA,其次是TDZ和AgNO3,蔗糖影响最小。     

辣椒胞质雄性不育系（CMS）子叶培养植株再生

笔者以细胞分裂素、生长素、赤霉素、硝酸银为培养基的附加成分,利用辣椒CMS9704A和8214A子叶作为外植体,研究辣椒CMS子叶再生体系,为辣椒CMS的遗传改良奠定基础。     

夏威夷菠萝高效再生体系研究

采用菠萝试管苗的叶片、叶鞘、茎段和茎薄片作外植体,以MS或1/2 MS为基本培养基,应用正交试验设计方法研究了不同浓度的2,4-D、6-BA、NAA和AgNO3对夏威夷菠萝不定芽的诱导效果,并在添加不同激素组合的培养基中进行芽的增殖和生根培养研究.结果表明,茎段为诱导不定芽的最佳外植体,6-BA是影响不定芽产生的最主要因素.其中MS 6-BA 5.0 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L NAA 0.3 mg/L AgNO3 2.0 mg/L为不定丛芽诱导的最佳培养基,诱导率为83.3%;MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.05 mg/L为芽增殖的最佳培养基,可分化成绿色小苗;1/2 MS IBA 1.0 mg/L NAA 0.5 mg/L为小苗生根的最佳培养基,生根粗壮,生根率达100%.     

辣椒子叶再生体系及其卡那霉素筛选体系的建立

以中椒2号辣椒为材料,建立了高效的辣椒子叶再生体系和卡那霉素筛选体系。结果表明,最佳的不定芽诱导培养基为MS+BA5.0 mg/L+IAA0.5 mg/L+AgNO36.0 mg/L,最佳的不定芽伸长培养基为MS+BA5.0 mg/L+IAA0.5 mg/L+GA32.0 mg/L+AgNO36.0mg/L,最佳的生根培养基为MS+IAA1.0 mg/L,卡那霉素最终筛选浓度为50 mg/L。