异育银鲫对嗜水气单胞菌灭活菌苗的免疫应答

采用神尔马林灭活的嗜水气单胞菌（Aeromondas hydrophila)菌苗免疫接种异育银鲫，通过测定受免鱼血清中凝集抗体效价，溶菌酶活性，血液中吞噬细胞的吞噬活性，杀菌活性并通过鱼体攻毒试验，探讨了异育银鲫对福尔马林灭活的嗜水气单胞菌菌苗的免疫应答状况，结果表明，接种28d后，受免鱼血清中凝集抗体效价和溶菌酶活性均值分别为1：18.89和156.36U/dml，相应的对照组则为1：0.83和138.68dU/ml；受免鱼血中白细胞吞噬百分比和吞噬指数分别为63.38%和6.02，而对照组的分别库存47.95%和5.08；免疫组和对照组白细胞的杀菌指数分别为1.59和1.15，受免鱼的免疫保护力达到73.7%。     

壳聚糖对受免尼罗罗非鱼生长和免疫功能的影响

以初始体重(99.98±2.79) g的尼罗罗非鱼(Oreoehromis niloticus)为研究对象,探讨饲料中添加壳聚糖对其生长和免疫功能的影响。在饲料中添加剂量为0.2%,0.4%,0.6%,0.8%,1.0%的壳聚糖,连续投喂经注射接种嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的尼罗罗非鱼30d后,测定血清中抗体效价,60d后测量其相对增重率、特定生长率、饲料效率、蛋白质效率、酸性磷酸酶活性、溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活性以及活菌攻毒后的免疫保护率。结果表明,用添加量为0.6%壳聚糖的饲料投喂受免罗非鱼,不仅可以提高生长速度,还能提高受免罗非鱼对嗜水气单胞菌的免疫应答水平,增强其非特异性免疫力和抵抗嗜水气单胞菌人工感染能力。     

酵母β-葡聚糖对受免异育银鲫免疫应答的增强作用

在饲料中添加定量的酵母 β -葡聚糖 ,投喂经注射接种福尔马林灭活的嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)菌苗的异育银鲫 (Carassiusauratusgibelio) 2 8d后 ,通过测定供试鱼的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性 (SGPT)、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率 (RPS) ,探讨了酵母 β -葡聚糖对受免异育银鲫免疫应答的增强作用。结果表明 ,投喂添加 2 0 0 .0mg/ (kg·d)酵母 β -葡聚糖的饲料 ,不仅可以提高受免异育银鲫对灭活嗜水气单胞菌的免疫应答水平 ,增强抵抗嗜水气单胞菌人工感染的能力 ,而且还具有一定的促进生长和改善肝功能的作用。     

鲤细菌性败血症的免疫研究

选取分离于鲤细菌性败血症病例的嗜水气单胞菌强毒力菌株进行复壮,于菌悬液中加入0.2%甲醛于28℃灭活12h制成灭活疫苗,对鲤进行免疫接种后,通过检测抗体,以确定鱼体对疫苗的应答强度。分别取注射免疫后第21,28,35,42天的血清做凝集试验,并于首免6周后做人工感染保护试验。结果抗体最高效价达到212,而对照组为0。受免组攻毒免疫保护率达90%,表明鱼体对嗜水气单胞菌灭活疫苗可以产生免疫应答,对鲤有一定的免疫保护作用。     

团头鲂对嗜水气单胞菌的免疫应答

从患有细菌性出血病的团头鲂内脏分离到嗜水气单胞菌,采用0.2%福尔马林25℃灭活24 h和0.5%福尔马林4℃灭活24 h两种不同方法制备疫苗作为抗原,于胸鳍基部注射免疫团头鲂.通过测定受免团头鲂血清中抗体凝集效价、血液中NBT阳性细胞数量、吞噬细胞活性以评估免疫效果.结果表明.两种方法制备的灭活菌苗均可刺激鱼体产生较强的免疫应答,而采用0.2%福尔马林灭活的免疫效果优于0.5%福尔马林灭活,但二者无显著差异.活菌攻毒的结果表明团头鲂对嗜水气单胞菌产生了较强的免疫能力.     

团头鲂对嗜水气单胞菌的免疫应答水产

从患有细菌性出血病的团头鲂内脏分离到嗜水气单胞菌,采用0．2％福尔马林25℃灭活24h和0．5％福尔马林4℃灭活24h两种不同方法制备疫苗作为抗原．于胸鳍基部注射免疫团头鲂,通过测定受免团头鲂血清中抗体凝集效价、血液中NBT阳性细胞数量、吞噬细胞活性以评估免疫效果。结果表明,两种方法制备的灭活菌苗均可刺激鱼体产生较强的免疫应答．而采用0．2％福尔马林灭活的免疫效果优于0．5％福尔马林灭活．但二者无显著差异。活菌攻毒的结果表明团头鲂对嗜水气单胞菌产生了较强的免疫能力．     

嗜水气单胞菌对黄鳝血清中四种抗病相关酶活性的影响

为了研究嗜水气单胞菌感染对黄鳝非特异性免疫和抗氧化功能的影响,将60尾黄鳝平均分成4组(对照组,处理组Ⅰ、处理组Ⅱ、处理组Ⅲ),处理组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别腹腔注射浓度为1×108cfu/ml、2×108cfu/ml、4×108cfu/ml的嗜水气单胞菌菌液,对照组注射等浓度生理盐水,测定各组在感染菌后12 h、24 h、48 h血清中溶菌酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、总超氧化物歧化酶等四种酶活性。结果显示,在感染初期,与对照组相比,各处理组四种酶活力有不同程度的升高;处理组Ⅱ和处理组Ⅲ的溶菌酶有先升高后降低的趋势;酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活力在48 h内总体上持续升高,但在后期升高不明显,酸性磷酸酶活力有下降的趋势;总超氧化物歧化酶处理组Ⅲ则呈现先升高后降低的趋势。结果表明,在感染嗜水气单胞菌初期,黄鳝非特异性免疫相关酶活力随菌液浓度升高而升高;而在感染后期酶活力下降。     

溶藻弧菌疫苗对黑鲷的免疫效果研究

用溶藻弧菌1.1587制备全细胞、全细胞 弗氏完全佐剂(FCA)、脂多糖(LPS)3种疫苗,疫苗经腹腔对黑鲷进行免疫注射,分别在第7、14、28、56 d采鱼血,检测抗体效价、白细胞吞噬活力、溶菌酶活力、SOD活力和抗菌活力;第28 d用5.5×108 cfu/mL的溶藻弧菌悬液进行攻毒试验来比较疫苗的免疫效果. 结果表明:抗体凝集效价在28 d达到最高值,免疫组2显著高于免疫组1和免疫组3(P《0.05);白细胞吞噬百分数和吞噬指数28 d达到最高值,3个免疫组都显著高于对照组(P《0.05);免疫组1和免疫组2溶菌酶活力在28 d达到最高值,显著高于对照组(P《0.05);SOD活力在28 d达到最高值,免疫组1和免疫组2显著高于对照组(P《0.05). 3种疫苗对黑鲷攻毒后20 d的免疫保护率分别为71.4%、85.7%、71.4%. 全细胞-FCA疫苗对黑鲷的免疫效果最好.     

尼罗罗非鱼对嗜水气单胞菌的免疫反应

将嗜水气单胞菌用福尔马林灭活后,接种尼罗罗非鱼,测定其血清凝集抗体效价及攻毒后的免疫保护力。结果表明,灭活菌苗对尼罗罗非鱼有较强的免疫原性,免疫鱼具有很强的免疫保护力。小个体鱼的浸浴接种效果强于大个体。     

杜仲叶粉对鲤鱼免疫力的影响

为了开发理想的鱼用中草药饲料添加剂，在鲤鱼饲料中添加2%，4%，6%的杜仲叶粉，饲养30d后，测定鲤鱼的体重及嗜水气单胞菌活菌攻毒后的免疫保护力，接种经福尔马林灭活的嗜水气单胞菌（F-AH），21d后测定各试验组与对照组血清的凝集抗体效价和血液中白细胞的吞噬活性，研究杜仲叶粉对鲤鱼免疫力的影响。结果表明：饲料中添加杜仲粉能明显提高鲤鱼的免疫应答水平，增强的抗细菌感染能力，促进鲤鱼的生长，尤以添加4%，6%的效果显著。     

黄鳝出血病三联微胶囊口服疫苗制备及免疫效果研究

【目的】制备出能有效防御黄鳝出血病的三联微胶囊口服疫苗,促进黄鳝养殖业健康发展。【方法】以嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌及温和气单胞菌为抗原,海藻酸钠为壁材,利用乳化法制备三联微胶囊口服疫苗,然后直接拌入饵料对健康黄鳝进行口服免疫,7 d后进行加强免疫,测定各项血清免疫指标。加强免疫结束15 d后,经腹腔注射3种活菌(1.0×109 CFU/mL)进行攻毒试验,检验三联微胶囊口服疫苗对黄鳝的免疫保护率。【结果】制备获得的三联微胶囊口服疫苗的平均粒径为44.5μm,平均含菌量为4.56×109 CFU/mg。按0.4和0.6 g/kg的剂量口服免疫黄鳝,其血清补体C3含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性均显著高于对照组(P<0.05),血清平均抗体效价分别为7.5949和11.0651,对应的免疫保护率为60%和65%,且0.6 g/kg剂量组的各项指标均高于0.4 g/kg剂量组。【结论】制备获得的三联微胶囊口服疫苗能显著提高黄鳝血清SOD、ACP活性及刺激血清补体C3产生,有效抵御由嗜水气单胞菌、温和气单胞菌和弗氏柠檬酸杆菌引起的出血病,生产使用时须进行加强免疫,并适当加大免疫剂量。     

翘嘴鳜细菌性败血症的免疫预防研究

从患细菌性败血症的翘嘴鳜分离嗜水气单胞菌ＢＳ－１菌株，制成福尔马林灭活疫苗（Ｆ－ＡＨ）、酚灭活疫苗（Ｐ－ＡＨ）和提取菌体脂多糖（ＬＰＳ）作为免疫原。注射接种体重为３５．５±５．６ｇ的翘嘴鳜后，通过检测血清中的凝集抗体效价、血液和头肾中吞噬细胞的吞噬活性以及应用活菌攻毒等方法，比较了３种不同免疫原的免疫效果。结果表明，ＬＰＳ的免疫效果最好，Ｐ－ＡＨ次之，Ｆ－ＡＨ较差。用活菌攻毒后，３种受免鱼体的免疫保护力分别为９２．２％，８４．７％和８０．７％。     

嗜水气单胞菌、爱德华氏菌灭活菌苗免疫保护及药物治疗试验

嗜水气单胞菌、爱德华氏菌培养物经甲醛灭活后,制成灭活油乳剂苗、灭活菌苗、饵料吸附型疫苗,免疫罗非鱼2周后,分别以嗜水气单胞菌、爱德华氏菌活菌液攻毒,结果显示,注射型疫苗均优于口服型,其中嗜水气单胞菌以腹腔注射0．1mL嗜水气单胞菌灭活菌苗＋0．3mL生理盐水的效果最佳,免疫保护率为85．0％;而爱德华氏菌以腹腔注射0．4mL灭活油乳剂苗效果最佳,免疫保护率为90．0％。两者的药物治疗试验结果显示,以氟苯尼考、恩诺沙星、环丙沙星、氟哌酸治疗罗非鱼嗜水气单胞菌病、爱德华氏菌病均有一定效果,对减少发病率及死亡率、控制病情具有较好作用,其中以氟苯尼考的疗效最佳,其用量为20mg／kgH2O。     

嗜水气单胞菌J—1株培养特性和免疫原性的研究

将嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ,Ａｈ）Ｊ－１菌株第５代「Ｊ－１（５）」在产毒素培养基上连续传代至第３５代「Ｊ－１（３５）」,并分别检测Ｊ－１（６）和Ｊ－１（３５）的生化特性。另取Ｊ－１（６）,Ｊ－１（１５）,Ｊ－１（２５）和Ｊ－１（３５）分别制备嗜消气了单胞菌灭活疫苗,用其分别免疫鲫鱼,之后用Ａｈ强毒攻击,同时用Ｊ－１（６）经腹腔注射或浸泡各免疫组鲫鱼,测其最低免疫剂一。     

酵母复合物对斑点叉尾的免疫调节作用

在饲料中添加定量的酵母复合物,连续投喂斑点叉尾28d后,通过测定供试鱼的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性(SGPT)、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率(RPS),探讨了酵母复合物对斑点叉尾鮰的免疫调节作用。结果表明,在饲料中添加适量的酵母复合物投喂斑点叉尾,可以使供试斑点叉尾的生长速度较投喂未添加酵母复合物饲料的空白对照组稍快,但是与投喂添加酵母多糖的药物对照组之间没有明显差异;对血清中凝集抗体效价的测定结果表明,试验组与空白对照组、药物对照组之间均未出现差异;试验组和药物对照组鱼体溶菌酶活性和白细胞的吞噬活性较空白对照组鱼体有所上升;对谷丙转氨酶活性(SGPT)的检测结果表明,试验组和药物对照组鱼体的肝功能有所改善;与空白对照组相比,试验组和药物对照组鱼体对嗜水气单胞菌人工感染的抵抗能力有所增强。试验结果证明了酵母复合物对斑点叉尾的免疫系统有刺激作用。     

饲料中添加溶菌酶对草鱼生长性能和抗感染能力的影响

在基础饲料中分别添加溶菌酶制品0(对照)、100、200、300、400和500mg/kg,每组设置5个重复,饲喂草鱼(6.93±0.27g)60d,旨在根据草鱼的生长性能和抗感染能力评价溶菌酶的添加效果,并确定其适宜用量。结果表明,饲料中添加溶菌酶对草鱼生长性能和抗感染能力有显著影响。试验前45d,试验组的草鱼特定生长率显著低于对照组;60d时,100～300mg/kg组的草鱼特定生长率与对照组差异不显著,400mg/kg组和500mg/kg组显著低于对照组。各试验组草鱼的饲料系数随饲料中溶菌酶含量的增加呈现先降低再升高的趋势,200mg/kg组饲料系数最低。通过腹腔注射的方法对草鱼进行嗜水气单胞菌攻毒,结果表明,200～500mg/kg组的草鱼死亡率显著低于对照组和100mg/kg组。饲用溶菌酶对草鱼内源免疫酶活性和内源消化酶活性有一定的刺激作用。抑菌试验结果表明,该溶菌酶制品对常见革兰氏阴性菌有明显的抑菌作用。综合草鱼的生长性能和抗感染能力,认为该试验条件下溶菌酶制品在草鱼饲料中的适宜添加量为200～300mg/kg。     

黄芪多糖对草鱼非特异免疫功能的影响

旨在探讨饲料中添加不同水平的黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)非特异性免疫指标的影响。将600尾健康草鱼随机分成Ⅰ-Ⅳ组,在基础饲料中分别添加黄芪多糖0、10.0、30.0、50.0 mg/(kg·d),于D0、D8、D15、D22、D29测定草鱼白细胞的吞噬百分比(PP)、吞噬指数(PI)及血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)与溶菌酶(LSZ)活力等指标,D29时对4组草鱼进行嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)攻毒实验。结果表明:与对照组相比,饲料中添加实验剂量的黄芪多糖可不同程度提高供试草鱼血液白细胞的吞噬百分比和吞噬指数,各实验组草鱼血清中T-SOD、CAT、LSZ活性均呈增加趋势,投喂实验剂量的黄芪多糖均可显著降低嗜水气单胞菌攻毒后草鱼的死亡率(P0.05)。研究表明,在饲料中添加适宜水平的黄芪多糖可提高草鱼的非特异性免疫功能和对嗜水气单胞菌感染的抵抗力,每千克鱼体质量的推荐剂量为10~30 mg/d。     

鲫鱼的细胞免疫应答研究

以嗜水气单胞菌灭活疫苗腹腔注射免疫鲫鱼,加强免疫后取血分离出淋巴细胞,进行巨噬细胞移动抑制试验,结果显示致敏淋巴细胞于体外培养时,在特异性抗原刺激下,产生了巨噬细胞移动抑制因子,抑制巨噬细胞移动,移动抑制指数约为０．６７,初步说明细胞免疫应答在鲫鱼的免疫应答中具有一定的地位。     

腹腔注射鸡血藤醇提物对黄颡鱼免疫相关指标及抗病力的影响

为探究鸡血藤醇提物对黄颡鱼免疫相关指标和抗病力的影响,选取720尾全雄黄颡鱼,初始体质量为(34.23±1.43) g,初始体长为(14.12±0.28) cm,随机分为6组,腹腔注射不同水平的鸡血藤醇提物溶液(0、60、120、240、480、960 mg/L)1 mL/尾,依次标记为Z1～Z6组,其中Z1组为对照组。养殖7 d后,测定黄颡鱼各组织及血清的免疫相关指标;养殖7 d后进一步以嗜水气单胞菌攻毒,计算累计死亡率和免疫保护率。结果显示,注射鸡血藤醇提物提高了黄颡鱼各组织SOD和CAT活性,提高了GSH和GSH-Px含量,降低了MDA含量,且提升或降低比例随鸡血藤质量浓度增加而上升。腹腔注射鸡血藤醇提物可降低各组织中NO含量,而提高血清中NO含量,鸡血藤醇提物提高了黄颡鱼血清补体C3和白蛋白含量,当鸡血藤醇提物质量浓度为960 mg/L时,增加幅度最大。鸡血藤醇提物不影响黄颡鱼血浆中球蛋白(IgM)的含量。鸡血藤醇提物可有效降低嗜水气单胞菌攻毒的死亡率,提高免疫保护率。以最高浓度960 mg/L鸡血藤处理的黄颡鱼,累计死亡率较对照组降低34.6%,免疫保护率提高了2.50倍。鸡血藤醇提物增加了肝胰脏中GOT、GPT含量,降低了血清中GOT、GPT含量。综合免疫相关指标和抗病力,腹腔注射鸡血藤醇提物最佳浓度为960 mg/L。     

酵母复合物对斑点叉尾鮰的免疫调节作用

在饲料中添加定量的酵母复合物,连续投喂斑点叉尾鮰28d后,通过测定供试鱼的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性（SGPT）、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率（RPS）,探讨了酵母复合物对斑点叉尾鮰的免疫调节作用。结果表明,在饲料中添加适量的酵母复合物投喂斑点叉尾鮰,可以使供试斑点叉尾鮰的生长速度较投喂未添加酵母复合物饲料的空白对照组稍快,但是与投喂添加酵母多糖的药物对照组之间没有明显差异;对血清中凝集抗体效价的测定结果表明．试验组与空白对照组、药物对照组之间均未出现差异;试验组和药物对照组鱼体溶菌酶活性和白细胞的吞噬活性较空白对照组鱼体有所上升;对谷丙转氨酶活性（SGPT）的检测结果表明,试验组和药物对照组鱼体的肝功能有所改善;与空白对照组相比,试验组和药物对照组鱼体对嗜水气单胞菌人工感染的抵抗能力有所增强。试验结果证明了酵母复合物对斑点叉尾鮰的免疫系统有刺激作用。