堆肥过程逸散抗生素耐药菌气溶胶的浓度及粒径分布特征

利用FA-I撞击式采样器采集5家堆肥厂内外生物气溶胶样本,对具有抗生素耐药性的细菌气溶胶浓度和粒径分布进行检测,并对其随传播距离的变化规律加以分析。结果表明:堆肥生产区细菌气溶胶浓度高达2.65×10~4CFU·m~(-3)。具有四环素和红霉素耐药性的气溶胶分别达到9.54×10~3CFU·m~(-3)和7.39×10~3CFU·m~(-3),占总细菌的36.44%和40.20%。以上3种生物气溶胶在细颗粒物中的相对丰度为13.04%～37.23%,且该丰度随逸散距离的增加而呈现下降趋势。红霉素和四环素耐药菌动力学粒径研究结果显示,两种耐药菌可能主要沉降在人体的咽喉部。     

冬季不同类型猪舍内颗粒物与微生物气溶胶浓度分布规律研究

本研究旨在探究冬季不同类型猪舍内颗粒物与微生物气溶胶的污染特征,为改善规模化猪舍内空气质量提供基础数据。采用TSI粉尘监测仪和ZYK-6型六级筛孔撞击式微生物采样器,对妊娠舍、分娩舍和保育舍三种类型猪舍内的不同粒径颗粒物(TSP、PM_(10)、PM_4、PM_(2.5)和PM_1)浓度以及微生物气溶胶进行监测和采样。监测和采样高度均设为距离地面0.8 m处,每日监测7次(3:00、7:00、9:00、11:00、15:00、17:00和22:00),连续监测3 d。结果显示:妊娠舍内TSP、PM_(10)、PM_4、PM_(2.5)和PM_1平均质量浓度分别为1.734、0.760、0.313、0.270 mg·m~(-3)和0.249 mg·m~(-3),细菌气溶胶浓度范围6800～25 600 cfu·m~(-3),真菌气溶胶浓度范围为170～870 cfu·m~(-3);分娩舍内TSP、PM_(10)、PM_4、PM_(2.5)和PM_1平均质量浓度分别为3.102、1.385、0.492、0.408 mg·m~(-3)和0.369 mg·m~(-3),细菌气溶胶浓度范围为4100～22 100 cfu·m~(-3),真菌气溶胶浓度范围为440～2480 cfu·m~(-3);保育舍内TSP、PM_(10)、PM_4、PM_(2.5)和PM_1平均质量浓度分别为1.284、0.572、0.271、0.245 mg·m~(-3)和0.230 mg·m~(-3),细菌气溶胶浓度范围为2120～6850 cfu·m~(-3),真菌气溶胶浓度范围为160～1110 cfu·m~(-3)。三种猪舍内细菌气溶胶浓度比较发现,妊娠舍最高,其次是分娩舍,保育舍最低;真菌气溶胶主要分布在粒径小于3.3μm的范围内。颗粒物与微生物气溶胶的相关性关系分析发现,真菌气溶胶和粒径小于1.1μm的细菌气溶胶可能是以孢子或者菌丝的形式独立漂浮于空气中。     

集约化养鸡场舍内细菌气溶胶群落结构研究

为了给评价禽舍内生物气溶胶的危害提供基础数据,对笼养和网上养殖两种方式下,集约化养殖鸡舍内细菌气溶胶的浓度进行检测,并利用变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)对空气中全部细菌的群落结构进行对比分析.结果显示:笼养舍内细菌气溶胶浓度和生物多样性均高于网上养殖,相同养殖方式下,生物多样性随着鸡龄的增加而呈现减小趋势;鸡舍空气环境中优势细菌主要为拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes),其中笼养和网上养殖舍内细菌气溶胶的优势菌属分别为Enterobacter和Escherichia.     

不同结构鸡舍气载镰孢菌浓度的定量分析

采用Andersen生物采样器和曝皿法同步采集6座不同结构鸡舍的空气镰孢菌Fusarium样本,定量分析封闭式和半封闭式鸡舍中可吸入和可沉降气载镰孢菌浓度。对108份Anderson和曝皿样本分析结果表明,青年鸡舍、雏鸡舍和蛋鸡舍的可吸入镰孢菌浓度分别为(2.24±0.09)×103CFU/m3、(3.34±0.02)×103CFU/m3和(3.43±0.04)×103CFU/m3,而曝皿法测定的可沉降镰孢菌浓度结果依次为(1.32±0.09)×104CFU/m3、(1.34±0.12)×104CFU/m3和(1.32±0.19)×104CFU/m3。封闭式鸡舍可吸入镰孢菌的分布高峰在Andersen生物采样器的D级(3.0~6.0μm),而半封闭式鸡舍的峰值分布高峰在C级(2.0~3.5μm)。半封闭和封闭式鸡舍的可吸入镰孢菌浓度差异显著(P0.05)。首次报道了不同结构鸡舍环境气载镰孢菌的发生特点,为建立禽类真菌病的预警体系提供了参考。     

鸡粪堆肥过程中四环素类抗生素及抗性细菌的消减研究

通过实验研究了堆肥生产过程中,菌剂添加对鸡粪高温堆肥中四环素类抗生素(四环素和土霉素)降解、四环素抗性细菌和致病菌(大肠菌群和沙门氏菌)的影响。结果表明,菌剂添加可以提高鸡粪堆肥的高温期温度,促进肥料腐熟,并且能够提高土霉素的降解速率。实验组原料中76μg·kg-1的土霉素经过高温堆肥得到有效去除,而不接种菌剂的对照组中土霉素没有明显去除;原料中沙门氏菌在堆肥起始阶段(8 d)就能够杀灭,而大肠菌群一直持续检出,直到堆肥末期(47 d)才小于2 lg CFU·g-1。抗四环素细菌在堆肥过程中的数量总体呈下降趋势,堆肥成品分别比原料减少1.41 lg CFU·g-1(实验组)和1.60 lg CFU·g-1(对照组),抗性细菌占总菌数的比例呈现先上升再下降的趋势,最终比例分别为4.00%(实验组)和1.17%(对照组),均高于原料的抗性菌比例(0.40%和0.39%)。     

鸡场空气及粪便中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分布特征与影响因素

为明确耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)在鸡场的污染现状,提供其在人禽间传播的基础数据,采用FA-Ⅰ撞击式采样器采集鸡舍内空气中总细菌、金黄色葡萄球菌和MRSA,并采集同日龄鸡粪样本。分别考察空气和粪便中相应细菌浓度,分析其浓度随日龄变化趋势及其可能的影响因素。结果表明:空气和粪便中MRSA浓度平均值分别为(4.31×10~2±4.56×10~2)CFU·m~(-3)和(3.37×10~4±4.83×10~4)CFU·m~(-3),占金黄色葡萄球菌比例分别为41.99%±26.99%和22.11%±20.06%。随日龄增加,鸡舍内空气和粪便中总细菌浓度呈线性增加;金黄色葡萄球菌及MRSA浓度整体上随日龄增加而升高,同时受到温度和舍内颗粒物浓度变化影响。PM_(2.5)负载MRSA浓度的变化规律与空气中总MRSA相似,均值为(1.51×10~2±1.7×10~2)CFU·m~(-3),占总MRSA的38.13%±20.17%。     

石家庄汪洋沟地区抗生素、抗性细菌和抗性基因污染特征

以石家庄汪洋沟地区为研究对象,采用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)、平板计数、实时荧光定量(qPCR)法分别对地表水、地下水及沉积物样品中的抗生素、抗性细菌和抗性基因进行定量分析。结果表明,汪洋沟地区四环素类抗生素总体含量高于磺胺类抗生素,水体中ρ(∑四环素)为5.81×101~3.87×105ng·L-1,ρ(∑磺胺)为1.02×101~5.37×103ng·L-1;沉积物中w(∑四环素)为4.28×101~1.63×105ng·g-1,w(∑磺胺)为1.18×101~1.68×104ng·g-1;水体中四环素的抗性细菌数量为4.00×101~2.13×104CFU·mL-1,磺胺抗性细菌数量为6.67×101~7.34×105CFU·mL-1;水体中抗性细菌含量比沉积物中低3~4个数量级。样品中检出的5种四环素类抗性基因(tetA、tetB、tetE、tetW和tetZ)、2种磺胺类抗性基因(sul1,sul2)及2种整合子基因(int1,int2)的相对表达量较高,其中tetA及sul1为汪洋沟地区的优势抗性基因,相对表达量均高于1.58×10-2。主成分分析结果表明ARGs的含量分布受不同污染源和复杂的水质特征的影响。从tet(B)基因的系统发育分析结果可以看出,水质的变化会导致抗性菌种存在差异。与国内外河流相比,汪洋沟抗生素含量处于较高污染水平,抗性基因污染也较为严重。     

春秋季节奶牛舍内外气载微生物的时空变化

【目的】旨在研究春秋两季奶牛舍内外气载细菌和真菌的时空分布规律,为奶牛舍环境改善提供参考。【方法】选择3种建筑类型的奶牛舍,采用定点采样和培养计数法,对春秋两季奶牛场内采样区(舍内、运动场、净道和凉棚)以及牛场外采样区(牛场围墙上风向和下风向5和50m处)的气载细菌和真菌含量进行检测,并进行比较与分析。【结果】春秋两季奶牛舍内细菌含量分别为1.16×103~1.30×104和2.71×103~4.89×103 CFU/m3,真菌含量分别为163~972和517~1 065CFU/m3;春季舍内细菌和真菌含量均表现出晚上高、上午低的变化规律,秋季上午、中午和晚上舍内细菌含量无显著性差异(P0.05),而秋季真菌含量则表现为上午显著低于中午和晚上的规律(P0.05);从奶牛舍内和场内净道微生物的空间分布上,春秋两季舍内细菌含量分别是净道的1.9~5.5和1.2~2.8倍;牛场外采样区的细菌和真菌含量均未表现出一致的空间分布规律,春秋两季大部分的场外采样区真菌含量与牛场内采样区未表现出显著差异(P0.05)。【结论】奶牛舍的气载微生物含量与检测时间、建筑类型密切相关,部分奶牛场外的气载微生物含量高于场内。     

猪舍微生物气溶胶污染特性研究

[目的]研究不同类型猪舍内微生物气溶胶污染特性,为微生物气溶胶对人畜健康影响的风险评价提供理论依据。[方法]以北京某养猪场妊娠母猪舍、保育舍和生长育肥舍为对象,对不同类型猪舍内空气微生物浓度、粒径分布和组成特性进行检测。[结果]受通风、清粪和养殖数量的影响,不同类型猪舍中微生物污染浓度不同,尤以保育舍最高,有26%～27%的异养细菌和39%～43%的真菌粒子的粒径为0.65～2.10μm,可进入人、畜的肺泡,对人畜呼吸道构成感染威胁。芽胞杆菌（Bacillus）和假单孢菌（Pseudomonas）为优势异养细菌,曲霉（Aspergillus）和毛霉（Mucor）为优势真菌。[结论]不同类型猪舍中微生物气溶胶污染浓度明显不同,而微生物组成与猪舍类型之间无显著相关性。     

小白菜表面粪大肠菌群的污染及其耐药性研究

为明确粪大肠菌群对蔬菜的污染及其耐药性,对厦门市集美区主要菜市场及超市的小白菜进行抽样调查。采用平板计数和MPN法对小白菜表面的粪大肠菌群进行计数,并通过对分离的细菌进行药敏试验,揭示粪大肠菌群对常用抗生素的耐药性。结果显示平板计数粪大肠菌群数量平均为631.3 CFU·g-1,合格率达90.9%;MPN计数平均为48.2 MPN·g-1,合格率达87.9%。清洗处理后粪大肠菌群数量从564.7 CFU·g-1降到92.5 CFU·g-1;流水浸泡10 min后,粪大肠菌群数量从564.7 CFU·g-1降到99.2 CFU·g-1。药敏试验结果表明,粪大肠菌对青霉素和四环素的耐药率达到100%,对红霉素的耐药率达到85.0%,但对庆大霉素、阿米卡星和环丙沙星没有耐药性。研究表明清洗处理显著降低粪大肠菌群的数量,粪大肠菌群对常用抗生素具有一定程度的耐药性,其耐药谱较广。     

潍坊滨海盐碱土几点基础性状的研究初探

通过对山东潍坊滨海盐碱土基础性状的初步研究,确定了主要的地被植物种类为白茅草、砂引草、白蒿,土壤的pH值为7.96,可溶性盐的含量为0.332%。同时测定出潍坊滨海盐碱土细菌数量为3.1×10_⁵ cfu/g,放线菌数量为1.03×10_⁴ cfu/g,真菌数量为1×10_³ cfu/g。     

草鱼源致病性维氏气单胞菌的分离鉴定及药物敏感性分析

从贵州兴义某水库网箱养殖的患病草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝脏中分离出菌落大小、形态一致的细菌,编号为GZ09007。经革兰氏染色、生理生化反应等表型鉴定为气单胞菌(Aeromonas)。通过扩增16S rRNA和gyrB基因序列并构建系统发育树,进一步鉴定该菌为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)。该菌株具有act、aer、lip、exu、fla、ser等毒力相关基因,不具有alt、ast、gca T和ahy B等毒力相关基因。人工感染试验表明该菌对草鱼、鲫、团头鲂和鳙均具有强致病性,半数致死量LD_(50)分别为7.45×10~5、1.27×10~5、1.76×10~5和5.36×10~4 CFU·(g·B·W)~(-1)。药物敏感性试验表明该菌对萘啶酸、恩诺沙星和左旋氧氟沙星等12种药物敏感,对新霉素、呋喃唑酮中度敏感,对氨苄西林耐受。研究结果表明维氏气单胞菌GZ09007是引起此次草鱼发病的致病菌。     

发酵牛粪作为奶牛卧床垫料的微生物消长规律研究

为了研究发酵牛粪作为奶牛卧床垫料的微生物消长规律,本试验选择舍饲散栏泌乳牛舍,检测1个自然年度牛粪垫料不同深度的微生物(细菌和真菌)数量。每2月检测1次,每次连续7d。结果表明,不同月份牛粪垫料的表、中、深层细菌数量随填铺卧床时间的增长表现出上升趋势,刚填铺的牛粪垫料细菌数量为2.0×10~6~3.8×10~7 cfu/g,填铺7d时细菌数量达4.7×10~7~3.6×10~8 cfu/g,4、6、8和10月份牛粪垫料的细菌数量均表现为表层偏高、中层偏低的趋势;牛粪垫料中真菌数量没有表现出明显的消长规律,且填铺7d时真菌数量增长幅度较小,刚填铺时牛粪的真菌数量介于4.3×10~2~1.5×10~3 cfu/g,填铺7d时真菌数量为9.5×10~2~4.8×10~3 cfu/g。此外,牛粪垫料的细菌和真菌数量与环境温度间均不存在显著相关性(P0.05)。该研究可为奶牛卧床消毒制度的完善提供可靠数据,以提高奶牛的生产性能和健康水平。     

浙江近岸海域细菌学分析

调查分别于1998年5～6月和9～10月进行2个航次,对浙江近岸海域30个站位的表层和底层海水样品进行了细菌学检测.结果表明,第一航次以浙中海域的粪大肠菌群和异氧菌总数最高,第二航次以宁波海域粪大肠菌群最高,而异氧菌总数以三门湾最高.两个航次表层和底层海水粪大肠菌群超标率最高为16.7%,异氧菌总数超标率均达89.3%以上.第一、二航次表层海水粪大肠杆菌单项污染指数平均值分别为0.229±0.452和0.375±0.630,异氧菌总数单项污染指数平均值分别为8.6±11.178和12.8±18.796.底层海水中粪大肠杆菌单项污染指数仅在第一航次宁波近岸的JN-1108站位超标;异氧菌总数单项污染指数第一、二航次最大值分别为37.0和18.0, 也出现在宁波近岸的JN-1108站.分析显示,粪大肠菌群与异氧细菌总数存在一定的正相关关系,其相关系数r2=0.34.结果表明,浙江近岸海域已明显受到异氧菌的污染, 宁波近岸海域已遭到粪大肠杆菌和异氧菌的污染.     

有机磷农药广谱降解菌A1A18菌株(Brevundimonas sp.)的筛选、鉴定与降解特性分析

从宁夏有机磷农药污染土壤中筛选对毒死蜱、氧化乐果和水胺硫磷等3种常用有机磷农药残留具有降解能力的菌株,确定其降解能力的代际稳定性及其对土壤中有机磷农药的降解特性。采用选择培养法和牛津杯法筛选目标菌株,依据细菌形态学特征、生理生化反应及分子测序结果进行分类鉴定,气相色谱法检测液体培养环境和土壤中有机磷农药的残留量。结果表明:分离、筛选获得1株有机磷农药广谱降解菌A1A18菌株,鉴定为短波单胞菌属(Brevundimonas sp.);在液体培养环境中,A1A18菌株对毒死蜱、氧化乐果和水胺硫磷3种有机磷农药的降解率分别为45.82%、9.52%和13.96%;经10代培养,确定该菌株对3种有机磷农药的降解能力具有很好的遗传稳定性。在有机磷原药质量分数为1.0 mg·kg~(-1)干土的土壤中施用A1A18菌株,降解菌初始数量密度为0.2×10~8 CFU·g~(-1)干土,施药后第21天,土壤中毒死蜱和水胺硫磷的降解率分别达到88.81%和87.75%,较对照提高16.24%和24.62%;施药后第7天,土壤中氧化乐果降解率达86.19%,较对照提高12.69%。短波单胞菌A1A18菌株能促进土壤中毒死蜱、氧化乐果和水胺硫磷的降解,具有较好的田间应用潜力。     

滨海台地土壤微生物数量及影响因子

根据定位观测数据,对海南文昌滨海台地3种典型森林(椰子林、相思林和木麻黄林)土壤微生物的数量特征及其与土壤因子的相互关系进行研究。结果表明,滨海台地3种森林类型中,微生物总量表现为椰子林相思林木麻黄林;细菌数量以椰子林土壤最高(3 144.67×10~4 CFU·g~(-1)),分别为相思林、木麻黄林的1.99倍和2.56倍;真菌数量以相思林最高(46.12×10~4 CFU·g~(-1)),分别为椰子林、木麻黄林的2.61和1.37倍;放线菌数量以椰子林最高(413.84×10~4 CFU·g~(-1)),分别为相思林、木麻黄林的3.32和1.42倍。不同森林类型土壤微生物三大类群数量,以细菌所占比例最大,放线菌次之,真菌最小。除椰子林真菌数量外,3种森林类型土壤微生物总数、细菌、真菌及放线菌数量均随土层深度的增加而减少,与土层深度呈线性负相关。土壤微生物数量与土壤养分含量之间存在着不同程度的相关关系,椰子林中,土壤全氮和有机碳是影响微生物数量的主要土壤因子;相思林中,全氮和pH值是影响微生物数量的主要因子;木麻黄林中,全氮和全磷是影响微生物数量的主要因子。     

制霉菌素对肉鸡的生长效果及抗饲料霉变性能的研究

１６００羽红宝肉鸡分分为４组，饲喂４种含不同制霉素预混剂饲料，活性分别为（０．７０×１０８，１．４×１０８，２．１×１０８μ·ｔ－１）．进行了为期５４ｄ（１～５４ｄ日龄）的饲养试验，对各组鸡群成活率，日增重、料重比进行测定，并观察鸡群发病情况，并对制菌素饲料防霉变效果进行试验。结果表明：与对照组相比２８日龄成活率（０．７×ｌ０８μ·ｔ－１）差异显著（Ｐ＜０．０５）；高剂量组（１．４×１０８，２．１×１０８μ·ｔ－１）差异极显著（Ｐ＜０．０１）．日增重随日粮中制每菌素的增加呈提高趋势（Ｐ＞０．０５）；料重比随制霉菌素的增加呈下降趋势（Ｐ＞０．０５）．５４日龄成活率对照组与添加制霉菌素组差异极显著（Ｐ＜０．０１）；日增重对照与添加组间差异极显著（Ｐ＜０．０１）；料重比随制霉菌素增加而下降（Ｐ＜０．０５）．制霉茵素能提高日粮中Ｇｌｕ，Ｌｙｓ和Ｖａｉ三种氢基酸的代谢率，饲料中添加１．４×１０８μ·ｔ－１以上剂量制霉菌素具有良好的抑制细菌和生长作用，并且具有良好的预防雏鸡曲霉病的效果。     

禽畜养殖粪便中多重抗生素抗性细菌研究

通过对新乡地区8家养猪场和11家养鸡场饲喂抗生素情况的调研,发现头孢氨苄、阿莫西林、卡那霉素、庆大霉素等4种抗生素是该地区被普遍使用的兽药抗生素。通过多点取样法和微生物培养技术对3家养鸡场和3家养猪场不同养殖时期的粪便进行单一抗生素和多重抗生素抗性细菌的检测,结果表明养鸡场堆置1周的粪便中抗头孢氨苄的细菌比例最高,达到65.90%,对所研究的3种和4种抗生素同时抗性的比例高达8.60%-12.51%和9.73%,明显高于饲喂中药的对照养鸡场样本检测结果(0.02%-2.73%和0.12%)。养猪场堆置1周的粪便中检测到抗头孢氨苄的细菌比例也是最高,达到49.12%上,但养猪场粪便中多重抗生素抗性细菌的比例明显低于养鸡场。同时研究发现,在两种养殖场中,幼龄期粪便中检测到的多重抗性细菌比例明显高于成熟期粪便,这可能与养殖过程中鸡、猪在幼龄期由于防病和促生长等因素而同时大剂量使用多种抗生素有关。