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高通量RNAi(high-throughput screens HTSs)技术是近年来基因功能研究的高效工具。现已在多个物种的细胞内进行了大量基因组范围RNAi高通量筛选,用于研究多种不同的生物学过程,为生物医学研究提供了技术基础。就高通量RNAi技术原理、实验操作及其在研究与细胞生物特性相关基因中的主要应用进展进行了综述。 相似文献
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RNA干涉(RNA interference,RNAi)作为研究基因治疗、基因功能、生物品种改良等方面的一种有效方法已经被研究者广泛接受。作为基因抑制的一种有力工具,与其他的方法相比,RNAi的操作过程更简单,成功率更高。通过RNAi可以实现对特定的mRNA的选择性降解,进而抑制其翻译过程。对RNAi技术的应用及发展前景进行了探讨。 相似文献
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RNAi及其在植物遗传改良中的应用 总被引:9,自引:0,他引:9
RNAi(RNA interfering)是由与靶基因同源的双链RNA引发的、在动植物中普遍存在的序列特异的转录后基因沉默。这种现象在动物、植物和真菌中广泛存在并被证实,因此可能是生物的发育调控及抗外源或内源侵染的一种普遍的生理机制。对RNAi的研究是目前生物学领域研究的热点之一,近几年来该技术已经在功能基因组学、遗传学和医学等诸学科得到大量应用。本文将就RNAi的机制研究及其在植物遗传改良中的应用进行综述。 相似文献
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RNAi作为广泛存在于生物中的一种古老现象,是生物抵抗异常DNA的一种保护机制,在植物体内充当免疫系统的角色。就RNAi的作用机制及其在植物抗病毒方面的应用进行了综述。 相似文献
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水稻高效RNA干涉体系的建立及其在受体激酶基因功能研究中的应用 总被引:8,自引:0,他引:8
利用RNA干涉(RNAi)技术,可以特异性的抑制真核生物体中目标基因的表达。本研究构建了适合水稻转化的RNAi诱导载体pCADS1341。为检测其有效性,使用它构建了针对GUS基因的RNAi载体,并利用基因枪转化法导入GUS基因稳定表达的转基因水稻愈伤组织。GUS染色分析结果表明该载体中RNAi诱导元件的瞬时表达可显著抑制GUS基因的表达。为探讨影响水稻中转基因诱导的RNAi效率的因素,对针对某个目标水稻基因的水稻RNAi植株进行了详细的分析。通过Southern和Northern杂交检测了T0代RNAi植株中T-DNA插入的拷贝数和目标基因的表达量,筛选出T-DNA为单拷贝插入,且目标基因的表达被高效抑制的株系。对来源于该株系的T1代植株进行了半定量RT-PCR检测,结果表明RNAi效应可以遗传给后代转基因水稻植株,但是不同个体中的RNAi效率存在差异。RNAi系统的表达量可能是决定RNAi效率的最关键因素。我们建立的高效RNAi技术体系对于水稻功能基因组学研究具有重要意义,利用这个系统我们已经构建了60多个水稻受体激酶基因的RNAi载体,系统的研究正在进行中。 相似文献
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植物中RNA干扰技术的研究与应用 总被引:4,自引:0,他引:4
RNA干扰(RNAi)是与靶基因同源的双链RNA引发的,在真菌、植物和动物中普遍存在的序列特异的转录后基因沉默(PTGS)现象。该方法的研究是目前分子生物学和基因工程领域研究的热点之一。作为反向遗传学研究的新工具,RNAi在基因功能研究、基因治疗以及病毒防治等方面发挥着巨大的作用,文章将RNAi的发现、作用机理、特点、导入思路和方法及其在植物中的广泛应用进行了综述。 相似文献
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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA分子在mRNA水平关闭相应序列基因表达或使其沉默的过程。RNA干扰技术作为新兴的基因阻断技术具有明显优势,已经广泛地被应用于基因功能研究、抗肿瘤和抗病毒等热门领域。 相似文献
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随着水稻全基因组测序的完成,探究水稻中许多未知基因的功能成了当前的研究重点之一。RNA干扰技术(RNAi)作为新发展起来的基因功能研究方法正在被广泛采用。以农杆菌介导转化水稻技术也逐渐成熟。简要综述了RNAi作用机制及其在水稻基因功能研究中的应用的最新进展。 相似文献
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RNA interference in Colorado potato beetle(Leptinotarsa decemlineata): A potential strategy for pest control 下载免费PDF全文
Colorado potato beetle(CPB), Leptinotarsa decemlineata, is a notorious destructive pest that mainly feeds on the leaves of potato and several other solanaceous plants. CPB is widely recognized for its adaptation to a remarkable variety of host plants and diverse climates, and its high resistance to insecticides and Bacillus thuringiensis toxins. RNA interference(RNAi) is a sequence-specific, endogenous gene silencing mechanism evoked by small RNA molecules that is used as a robust tool for virus and pest control. RNAi has been extensively tested for CPB management by employing various target genes and delivery methods. This article reviews the screening of RNAi target genes, efficient RNAi delivery systems, and factors affecting RNAi efficiency in CPB, which may help understand the mechanisms of RNAi and its application in CPB control strategy. 相似文献
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RNA干扰(RNAi)是由特定双链RNA(dsRNA)引发的转录后基因沉默,广泛存在于真菌、植物和动物中,它是近年来迅速发展起来的高效、特异、易操作的基因阻断技术,在功能基因组的研究中有着广阔的应用前景。研究表明,断裂dsRNA产生的小干扰RNA(siRNA)可抑制哺乳动物基因表达。从哺乳动物整体水平应用研究的角度,对RNAi的分子机制、生物学功能和特点,siRNA导入体内的方法以及应用等方面的研究作一综述。 相似文献
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巴西橡胶树胶胞炭疽病菌CgE6基因RNAi突变体的构建 总被引:1,自引:1,他引:0
为了研究橡胶树胶孢炭疽病菌效应蛋白基因CgE6的功能,笔者利用RNAi技术原理,构建了可用于转化丝状真菌的RNAi双元重组载体p Silent-CgE6-FR,通过PEG介导法遗传转化橡胶树胶孢炭疽病菌原生质体,在抗性培养基上获得了CgE6的RNAi转化子并任意选取抗性转化子进行分子鉴定。结果表明,所检测的转化子基因组中都有抗性标记的整合;与野生型菌株相比,所检测的转化子中目标基因CgE6的表达均出现不同程度的降低,其中1,2,7号转化子的表达水平最低;本实验成功构建了有效的CgE6效应蛋白基因的RNAi突变体,为进一步研究该效应蛋白的功能奠定了基础。 相似文献