骨髓间充质干细胞移植大鼠缺血心肌后GATA-4 mRNA的表达

目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)移植于大鼠缺血心肌后,心脏早发育基因DATA-4 mRNA的表 达、方法设模型组、假手术组和空白对照组,其中模型组采用“冠脉结扎法”建立大鼠急性心肌梗死(AMI)模型、收 集从SD雄性大鼠胫骨和股骨骨髓中分离、培养、鉴定后的MSCs,密度调至3x10`/100 },L悬液,移植于缺血心肌边 缘组织的3个位点直接注入共100 },L的MSCs细胞悬液,假手术组和空白对照组均在与模型组相同注射部位的3 个位点直接注入共100 },L的MSCs细胞悬液,28 d后处死大鼠进行相关实验样木处理〔采用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)技术检测心肌组织中DATA-4 mRNA的表达、结果MSCs移植模型组和假手术组的大鼠心肌中存在 DATA-4 mRNA的表达;而空白组的心肌中未检出DATA-4 mRNA的表达,对其IOD值半定量分析,模型组高于假 手术组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05或<0.01)、结论MSCs在进入缺血心肌环境后,细胞内的心肌特异转录 过程被再次激活.确立了MSCs向心肌细胞分化的方向、     

缺血预处理降低脑缺血再灌注损伤及TLR4、TNF-α mRNA的表达

目的观察Toll样受体4(TLR4)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化,探讨缺血预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 36只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为缺血预处理组(CIP组)、缺血再灌注组(I/R组)和假手术组(Sham组)各12只;I/R组采用线栓法阻断大脑中动脉(MCAO)2h建立模型,CIP组先给予MCAO阻断10min,再灌注72h后给予与I/R组相同的处理,假手术组仅分离血管。均于术后1d取材,TTC染色法检测脑梗死体积,Zea Longa评分标准对神经功能评分,荧光实时定量PCR(Real-time Quantitative polymerase chain reaction)法测定TLR4和TNF-α mRNA 表达水平。结果缺血再灌注1d后,CIP组大鼠脑梗死体积、神经功能缺损评分明显低于I/R组,差异有显著统计学意义(P0.05);TLR4、TNF-α mRNA CIP组与I/R组表达水平明显高于Sham组,差异有显著统计学意义(P0.05,P0.01),CIP组表达水平明显低于I/R组(P0.05)。结论缺血预处理能改善由再灌注损伤引起的脑损伤与功能障碍,可能与下调促炎因子的表达、减轻炎症反应有关。     

柴胡皂苷d联合黄芩苷对脑缺血再灌注损伤大鼠抗氧化酶的影响

目的探讨柴胡皂苷d联合黄芩苷对脑缺血/再灌注损伤大鼠抗氧化酶的作用。方法雄性SD大鼠60只,采用线栓法制备脑缺血再灌注模型,按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、模型组、柴胡皂苷d组(70 mg·kg~(-1))、黄芩苷组(30 mg·kg~(-1))、柴胡皂苷d(70 mg·kg~(-1))+黄芩苷组(30 mg·kg~(-1)),缺血/再灌注后,每天腹腔注射一次,连续给药7d后,检测大鼠神经功能损伤评分,检测脑组织、血清中丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX))的活性。结果与假手术组比,模型组大鼠神经功能损伤评分显著升高,差异有统计学意义(P0.01);药物组神经功能损伤评分显著降低,差异有统计学意义(P0.01)。与假手术组相比,模型组脑组织、血清中MDA含量增加,差异有统计学意义(P0.01),CAT、SOD、GSH-PX活性降低,差异有统计学意义(P0.01);药物组脑组织、血清中MDA含量降低,差异有统计学意义(P0.05),CAT、SOD、GSH-PX活性增强,差异有统计学意义(P0.05)。柴胡皂苷d(70 mg·kg~(-1))+黄芩苷组(30 mg·kg~(-1))抗氧化酶作用显著。结论柴胡皂苷d联合黄芩苷对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用可能通过抗氧化作用实现。     

缺血预处理联合血府逐瘀胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的观察缺血预处理联合血府逐瘀胶囊预处理对SD大鼠脑缺血再灌注细胞凋亡及胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响及其对脑缺血再灌注保护作用的可能机制。方法采用栓线法复制SD大鼠大脑中动脉梗塞模型(MCAO)。将138只大鼠随机分为6组(各23只):正常组,假手术组,模型(缺血再灌注)组,缺血预处理组,血府逐瘀胶囊预处理组,缺血预处理联合血府逐瘀胶囊预处理组。观察缺血预处理联合血府逐瘀胶囊预处理对大鼠脑缺血再灌注神经功能、脑梗死面积和病理形态学的影响。采用TUNEL法检测缺血半暗带和灶中心区凋亡细胞,采用免疫组化法检测缺血半暗带和灶中心区GFAP表达的变化。结果模型组与假手术组相比,缺血半暗带凋亡细胞及GFAP阳性细胞数目增多。缺血预处理联合血府逐瘀胶囊预处理在不同程度上可降低实验性脑缺血大鼠的神经功能评分、减小梗死面积和减轻脑组织病理形态改变(P<0.05);缺血预处理联合血府逐瘀胶囊预处理组大鼠脑组织缺血半暗带凋亡细胞和GFAP表达减少,而梗死灶中心凋亡细胞和GFAP表达增多(P<0.05)。结论缺血预处理联合血府逐瘀胶囊预处理可能通过调节脑缺血再灌注细胞凋亡和GFAP表达而促进脑重塑。     

移植骨髓间充质干细胞对雌性大鼠生长及生殖器官发育水平的影响

[目的]探讨不同生长发育阶段移植BMSCs对雌性大鼠生长及生殖器官发育水平的影响.[方法]选择80只SD雌性大鼠随机分为试验组和对照组,每组40只,体重组间差异不显著(P＞0.05):试验组用50 μL生理盐水稀释BMSCs(1×106个),进行尾静脉移植,对照组同样方法同样部位注射生理盐水.试验鼠分别第V20 d、V60 d和P18 d时试验组移植BMSCs,对照组注射等量生理盐水;试验鼠分别第V30 d、P18 d和L15 d时每组随机取8只大鼠,屠宰前(空腹12 h后)称活重,屠宰后取子宫,卵巢称重;同时宰前心脏采血制备血清,检测血清中E2、P4、GH和IGF-l水平.[结果]雌性大鼠不同生理发育阶段移植BMSCs后,P18 d时试验组大鼠血清中IGF-1、E2和P4水平显著高于对照组(P＜0.05),同时大鼠体重和子宫重显著高于对照组(P＜0.05),V30 d和L15 d时组间差异均不显著(P＞0.05);在整个试验期血清中GH水平和卵巢重组间差异均不显著(P＞0.05).[结论]移植BMSCs后能显著增加妊娠母鼠子宫,胎盘,胎儿的重量;而对其它组织的重量影响不显著.移植BMSCs后能显著增加妊娠母鼠的血清中P4、E2和IGF-l水平,而GH的变化不显著.在生长阶段和分娩后,母鼠移植BMSCs对血清中的P4、E2、GH和IGF-1水平均不显著.     

针刺对大鼠局灶性脑缺血后神经功能缺损及 梗死面积的影响

〔摘要〕目的探讨针刺大椎、百会、人中穴对脑缺血大鼠神经功能缺损评分、脑梗死面积比的影响、方法参照 ZeaLonga线拴法复制大脑中动脉缺血模型(MCAO), 40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺穴位组(即穴位 组,穴取大椎、百会、人中)、针刺对照点组(即对照点组,穴取大椎、百会、人中左侧旁开0.3 cm处),6次针刺后,观 察神经功能缺损评分及1`TC染色检测梗死面积比评价、结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分、梗 死面积比明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),而对穴位组、对照点组能不同程度地降低神经功能缺损评分,减少 梗死面积,差异有统计学意义(P<0.05 , P<0.01),且穴位组优于对照点组,差异有统计学意义(P<0.05 )〔结论针刺大 椎、百会、人中穴可通过改善神经功能的缺损,减少脑梗死面积从而对脑具有保护作用、     

氯吡格雷及前列地尔治疗急性脑梗死55例临床分析

目的探讨氯吡格雷及前列地尔治疗急性脑梗死前后凝血指标变化及其对患者神经功能和生活能力恢复的影响。方法 110例急性脑梗死患者依据数字表法随机分为对照组和研究组各55例,对照组采用常规阿司匹林治疗,研究组采用氯吡格雷及前列地尔治疗。对比观察2组患者治疗前后凝血酶原时间(PT)、部分活化凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(Fib)与血浆凝血酶时间(TT)指标的变化以及对神经功能和生活能力恢复的影响。结果治疗前2组患者凝血指标差异无统计学意义(P0.05),治疗后研究组患者凝血指标改善情况明显优于对照组,差异有统计学意义(P0.05);治疗前2组患者日常生活能力评分(ADL)、神经功能评分(NIHSS)差异无统计学意义,治疗后研究组NIHSS评分明显低于对照组(P0.05),ADL评分明显高于对照组(P0.05)。结论氯吡格雷及前列地尔治疗急性脑梗死可明显改善患者凝血指标,促进神经功能和生活能力的恢复。     

三七总皂苷对大鼠大脑缺血再灌注VEGF表达的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对预处理大鼠大脑缺血再灌注后血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法:将48只SD大鼠随机平均分为假手术组、模型组、PNS组和尼莫地平对照组。预给大鼠PNS 7d后,制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。观察各组大鼠神经功能评分及大脑TTC染色,从VEGF的角度检测免疫组化和mRNA水平表达情况。结果:PNS可以显著改善大鼠神经功能评分和降低脑梗死体积,并可增加VEGF蛋白表达和上调VEGF mRNA表达水平。结论:PNS能有效上调脑缺血再灌注损伤后VEGF mRNA浓度的表达,促进缺血区血管新生。     

补阳还五汤超微饮片对局灶性脑缺血大鼠神经干细胞移植后Bcl-2、Bax表达的影响

目的 探讨补阳还五汤超微饮片对局灶性脑缺血大鼠神经干细胞移植后凋亡相关基因Bcl-2、Bax的影响。方法 将SD大鼠80只,雌雄各半,复制局灶性脑缺血大鼠模型,造模后按神经功能缺损评分进行分层,随机分为5组,每组15只,分别于移植后7 d、14 d、28 d进行神经功能评分,采用补阳还五汤超微饮片与传统饮片予以干预,于相应时间点处死大鼠后采用免疫组化法检测凋亡基因Bcl-2、Bax。结果 补阳还五汤能显著减轻神经功能缺损,Bcl-2、Bax在各时间点（7 d、14 d、28 d）表达与模型组比较差异有统计学意义（P<0.05）,模型加移植加补阳还五汤超微饮片组上调Bcl-2、拮抗Bax表达的作用优于模型加移植加补阳还五汤传统饮片组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 补阳还五汤可调节脑缺血后Bcl-2、Bax的表达,是其促进神经功能恢复的可能机制之一,且超微饮片组的作用较传统饮片组更加显著。     

葛根素对脑缺血再灌注大鼠海马组织P-STAT3、P53表达的影响

目的 探讨葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤后海马组织磷酸化的转录激活蛋白3（STAT3）、凋亡因子P53表达的影响及其保护机制。方法 采用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型,利用葛根素干预,分别于缺血2 h再灌注6 h、24 h、72 h 3个不同时间点采用Longa评分法进行神经功能缺损评分、TUNEL法检测凋亡细胞数,免疫组织化学法检测海马组织磷酸化的STAT3（P-STAT3）及细胞凋亡因子P53的表达。结果 与假手术组比较,葛根素组与缺血再灌注组的神经功能缺损加重,凋亡细胞数增多,P-STAT3和P53表达增高,差异均具有统计学意义（P<0.05）;与缺血再灌注组比较,葛根素组神经功能缺损评分明显下降,凋亡阳性细胞数均见明显减少,P-STAT3和P53表达显著降低,差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 脑缺血再灌注损伤后STAT3被异常激活,其磷酸化水平显著增高;葛根素可能是通过抑制STAT3的磷酸化水平,降低P53的表达起到抗神经细胞凋亡作用,从而改善大鼠脑组织的缺血性损伤。     

骨髓间充质干细胞对放射性胸腺损伤的修复作用

目的观察骨髓间充质干细胞（MSCs）对放射性胸腺损伤的修复作用.方法 C57BL/6小鼠行1.75 Gy X线全身照射,每周1次,连续4周.实验设正常对照组、照射组及照射＋MSCs组,于末次照射后30、60、90 d称量各组小鼠体质量.取胸腺组织,计算胸腺质量指数,并通过组织学观察MSCs对胸腺组织损伤的修复作用.结果辐射组和MSCs组在照射期间体质量下降,在观察期间内,小鼠体质量随时间逐渐增加,并且MSCs组小鼠体质量略高于辐射组.对照组小鼠胸腺指数随周龄增大而逐渐减小,辐射组和MSCs组小鼠随照射后时间的延长胸腺指数逐渐增加,MSCs组90 d时胸腺指数与对照组小鼠接近.通过观察病理结果可知,正常对照组小鼠胸腺组织皮、髓质结构清楚.辐射组小鼠30 d时胸腺组织淋巴细胞可见变性、坏死,细胞数量减少;60 d时辐射组可见胸腺淋巴细胞出现修复性再生与增生;90 d时辐射组可见胸腺瘤癌前病变.MSCs移植30 d时胸腺组织皮质高度增生,髓质缩小,皮髓质内可见新生的淋巴组织;60 d时胸腺结构趋于正常.结论 MSCs可促进损伤胸腺再生与修复.     

八肽胆囊收缩素对骨髓间充质干细胞诱导分化后神经元样细胞生长状态的影响

为探讨八肽胆囊收缩素(CCK8)对骨髓间充质干细胞(MSCs)诱导分化后神经元样细胞生长状态的影响,在β-巯基乙醇诱导MSCs分化的基础上加入CCK8,观察诱导期间细胞形态变化及分化细胞的存活时间,免疫细胞化学法鉴定神经元特异性巢蛋白(Nestin)的表达,唑盐比色实验(MTT)法检测细胞活性。结果表明,加入CCK8的部分实验组与基础诱导组相比,可延长神经元样细胞的生存时间;诱导后5 h,Nestin阳性表达率变化不明显(P>0.05),诱导后10 h,神经元样细胞的活性可明显增强(P<0.05)。该结果说明,CCK8在β-巯基乙醇体外诱导大鼠MSCs分化为神经元样细胞后的过程中,可一定程度延长细胞的存活时间,具有抗细胞凋亡作用。     

羚牛骨髓间充质干细胞的分离培养与鉴定

分离鉴定羚牛骨髓间充质干细胞,为开展羚牛细胞治疗与体细胞核移植的深入研究提供有效载体。分离培养来源于羚牛骨髓的间充质干细胞;通过染色体G显带技术进行核型分析;利用流式细胞技术检测细胞表面标记物;通过定向诱导培养探究细胞的分化潜能。结果表明,羚牛骨髓间充质干细胞能够维持正常核型,对间充质干细胞特异性表面标记 CD105、CD73、CD90、CD166、CD44呈阳性,对 CD14(单核细胞和巨噬细胞标记物),CD19(b细胞标记物),CD34(造血干细胞标记物),CD45(泛白细胞标记物)和 HLA-DR均呈阴性,具有成脂、成骨与成软骨多向分化潜能。表明成功分离羚牛骨髓间充质干细胞并对其表面抗原与分化潜能进行鉴定,为羚牛生物多样性保护与内源物种间充质干细胞的应用研究奠定基础。     

针刺大椎、百会、人中穴对大鼠脑缺血再灌注损伤后ES蛋白表达的影响

目的 探讨针刺大椎、百会、人中穴对内皮抑素（Endostatin,ES）作用于大鼠脑缺血再灌注损伤后的表达变化及影响,研究ES作用于脑保护的部分机制。方法 将50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组各10只,其余30只大鼠参照ZeaLonga线拴法制作大脑中动脉缺血模型,造模成功后再随机分为模型组、依达拉奉组、针刺组,10只/组。正常组、假手术组、模型组仅捆绑,依达拉奉组以3 mg/kg （稀释至1 mL）腹腔注射,针刺组行大椎、人中、百会穴针刺,每12 h行1次治疗,6次后行神经功能缺损评分,再行Western Blot法检测ES表达。结果 （1）神经功能缺损评分对比：治疗后,与正常组、假手术组比较,其余3组评分较高（P<0.01）;与模型组比较,依达拉奉组及针刺组评分下降,差异均有统计学意义（P<0.01）;治疗前后依达拉奉组及针刺组组内比较,差异有统计学意义（P<0.01）。（2） ES比较：治疗后与正常组及假手术组比较,其余3组差异均有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较,依达拉奉组及针刺组差异均有统计学意义（P<0.01）。结论 大鼠脑缺血再灌注损伤后,针刺能使神经功能缺损评分下降,并能在一定程度上减少缺血区域海马组织ES的表达,达到减轻脑缺血再灌注损伤的作用机制,促进脑组织的修复。     

苗药小血藤对缺血性脑卒中大鼠的作用研究

目的 研究苗药小血藤对缺血性脑卒中大鼠的治疗作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法 用改良线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型。将造模成功的大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性组、苗药小血藤高、中、低剂量组（3.75、1.875、0.937 5 g/kg）,给予相应药物1次/d灌胃给药,连续7 d。TTC染色观察脑梗死面积;试剂盒检测血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（maleic dialdehyde,MDA）含量;HE染色观察脑组织病理改变。结果 与模型组比较,小血藤水煎液各剂量组脑梗死面积明显减少（P<0.05）,大鼠脑组织匀浆中所含SOD活性显著提高（P<0.05）;MDA含量显著降低（P<0.05）;HE染色发现,小血藤水煎液各剂量组可一定程度上改善MCAO大鼠海马区病理损伤。结论 小血藤水煎液对MCAO导致的脑缺血大鼠可以减少梗死面积,促进其神经功能恢复,对缺血造成的损伤具有一定的保护作用,其机制可能与小血藤抗氧化应激损伤有关。     

Bone marrow stromal cells generate muscle cells and repair muscle degeneration

Bone marrow stromal cells (MSCs) have great potential as therapeutic agents. We report a method for inducing skeletal muscle lineage cells from human and rat general adherent MSCs with an efficiency of 89%. Induced cells differentiated into muscle fibers upon transplantation into degenerated muscles of rats and mdx-nude mice. The induced population contained Pax7-positive cells that contributed to subsequent regeneration of muscle upon repetitive damage without additional transplantation of cells. These MSCs represent a more ready supply of myogenic cells than do the rare myogenic stem cells normally found in muscle and bone marrow.     

骨髓间充质干细胞对肿瘤细胞的生物学行为的影响

骨髓来源的间充质干细胞(Bone marrow-derived mesenchymal stem cells,MSCs)具有良好的向损伤部位归巢的能力,有利于组织修复和再生。肿瘤被认为是一种特殊的不愈合创伤,MSCs通过向肿瘤组织的归巢和向间质成分分化,改变肿瘤微环境,并影响肿瘤的生长和转移。研究发现MSCs对肿瘤细胞的影响并不统一,存在双向性。目前,MSCs与肿瘤细胞之间关系的研究越来越受到学者的关注。MSCs作为一种肿瘤治疗的靶向新型载体,在临床上具有广阔的应用前景,但MSCs在临床应用中也存在潜在的恶性转化风险,特别是致癌机制。文章主要介绍MSCs对肿瘤细胞相关生物学行为的影响以及在癌症治疗方面的应用。     

补阳还五汤对去势脑缺血雌性大鼠海马神经干细胞增殖及ERK/CREB信号通路的影响

目的 探讨补阳还五汤对去势脑缺血雌性大鼠海马神经干细胞（neural stem cells,NSCs）增殖及ERK/CREB信号通路的影响。方法 采用双侧卵巢切除术（OVX）结合大脑中动脉阻塞（MCAO）法复制去势雌性大鼠脑缺血复合模型,将造模后的36只大鼠随机分为双假手术组、复合模型组、雌激素组、雌激素+G15组、补阳还五汤组及补阳还五汤+G15组6组,每组6只,术后24 h给予相应药物灌胃连续干预14 d,同时每天腹腔注射BrdU、G15分别标记增殖细胞和阻断GPER-1。采用免疫荧光BrdU/Nestin双标法检测各组大鼠缺血侧海马齿状回NSCs增殖情况,免疫组化SP法检测ERK1/2、CREB1磷酸化蛋白表达水平。结果 补阳还五汤组和雌激素组缺血侧海马DG区BrdU/Nestin双标阳性细胞及pERK1/2、pCREB1阳性细胞表达均增加,与复合模型组比较有显著性差异（P<0.05）,但补阳还五汤组要多于雌激素组（P<0.05）。与补阳还五汤组比较,补阳还五汤+G15组缺血侧海马DG区BrdU/Nestin双标阳性细胞及及pERK1/2、pCREB1阳性细胞表达均减少（P<0.05）。结论 补阳还五汤可以促进去势脑缺血雌性大鼠缺血侧海马DG区神经干细胞增殖,激活ERK/CREB信号通路,可能是其发挥类雌激素作用、促进内源性神经再生作用机制之一。