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相似文献
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1.
用烟草赤星病菌的悬浮液免疫家兔,得到效价为1:64O的抗血清,按硫酸该沉淀法和DEAE纤维素离子交换柱层析法提取抗体球蛋白IgG,用ELISA间接法进行试验,结果表明:辣根过氧化物酶标记羊抗兔结合物的最适稀释度为1:100,最适抗体球蛋白IgG的浓度为4~6μg/mL。该抗体球蛋白IgG对来自吉林省内的5个市县的8个烟草赤星病菌株全部呈阳性反应.而对Alternariacuucumerina和Alternariaporri则呈阴性反应,对种子分离得到的Fusariumsp.和Phyllostictasp.等4种真菌及烟草野火病菌和Xanthomonassp.均呈阴性反应,表明该抗体球蛋白IgG的特异性很强。对7种不同浓度孢子悬液接种花器所获种子进行检测.均呈阳性反应,对来自3省6个品种13份种子进行检测,8价呈阳性反应.5份呈阴性反应,与种子分高培养结果一致。用ELISA法检测烟草种子是否带有赤星病菌是一种快速而准确的方法。  相似文献   

2.
不同方法提取鸡血清IgG及纯度鉴定   总被引:3,自引:0,他引:3  
本文用Na_2SO_4和(NH_4)_2SO_4两种盐沉淀鸡血清r-球蛋白,再经SephadexG200柱和DEAE-32柱进一步纯化,将获得的IgG利用免疫电泳和聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳进行纯度鉴定,结果表明:在本试验条件下,盐析方法获得的r-球蛋白经SephadexG200柱分离获得高纯度的鸡IgG,DEAE-32柱经0.1MPBS(PH7.4)洗脱,2MNaCl解离获得的IgG纯度较差。  相似文献   

3.
以提纯的CMV作为抗原,经静脉注射、肌肉注射和足垫注射等对家兔进行免疫,获得高效价的抗血清(琼脂双扩散效价为1/256);在间接ELISA试验过程中,用PBS+0.05%TritonX-100作为样本研磨液,用1:16000稀释度的CMV抗血清或Zμg/mlCMV抗血清的IgG作为第一抗体,用1:1000稀释度的冻干辣根过氧化物酶标记的羊抗兔的IgG作为第二抗体,以待测样本光密度值与阴性对照光密度值之比大于或等于3作为判断待测样本为阳性反应的标准,结果表明:间接ELISA试验的灵敏度比生物检测的灵敏度要高32~160倍。用间接ELISA检测矮牵牛的病毒样本30份,CMV占70%。  相似文献   

4.
免疫增强剂对蛋用雏鸡免疫功能的影响   总被引:27,自引:0,他引:27  
用维生素E-硒(VE-Se)注射液、中草药1号、硫酸锌、牲血素、胸腺肽和左旋咪唑作免疫增强剂,采用β-微量鸡新城疫血凝抑制试验(ND-HI)、醋酸纤维薄膜电泳(测血清丙球蛋白γ-Ig)以及α-蔡酯酶法(ANAE),检测了参试雏鸡的3种免疫学指标。结果表明:VE-Sc注射液对蛋用雏鸡的ND-HI抗体、γ-Ig和ANAE^+淋巴细胞均比对照组明显提高,差异极显著(P<0.01)。中草药1号具有与VE-  相似文献   

5.
以提纯的CMV作为抗原,经静脉注射,肌肉注射和足垫注射等对家兔进行免疫,获得高效价的抗血清(琼脂双扩散效价为1/256),在间接ELISA试验过程中,用PBS+0.05%,TritonX-100作为样本研磨液,用1:16000稀释度的CMV抗血清或2μg/mlCMV抗血清的IgG作为第一抗体,用1:1000稀释度的冻干辣根过氧化物酶标记的羊抗兔的IgG作为第二抗体,以待测样本光密度值与阴性对照光密  相似文献   

6.
用维生素E-硒(VE-Se)注射液、中草药1号、硫酸锌、牲血素、胸腺肽和左旋咪唑作免疫增强剂,采用β-微量鸡新城疫血凝抑制试验(ND—HI)、醋酸纤维薄膜电泳(测血清丙球蛋白γ-Ig)以及α-萘酯酶法(ANAE),检测了参试雏鸡的3种免疫学指标.结果表明:VE—Se注射液对蛋用雏鸡的ND—HI抗体、γ-Ig和ANAE+淋巴细胞均比对照组明显提高,差异极显著(P<0.01).中草药1号具有与VE-Se注射液相似的免疫增强效果.补锌组在49日纷呈现良好的免疫增强作用(P<0.05).补铁剂和胸腔肽只对γ-Ig有升高作用.左旋咪唑不产生明显的免疫增强效果.  相似文献   

7.
家兔黄艾美耳球虫活虫苗免疫的血清抗体消长规律研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
应用建立的ELISA成功地检测了家兔黄艾美耳球虫活虫苗免疫后的血清IgG抗体水平。结果表明,在首兔15d可检测到血清IgG抗体,首免25d左右血清IgG抗体达到高峰值,二免30 ̄35d左右又测到一个高峰值,攻虫后血清IgG抗体明显升高,重复免疫所诱发的血清抗体IgG水平,但是血清IgG水平与保护率无相关性。  相似文献   

8.
嗜水气单胞菌HEC毒素单克隆抗独特型抗体研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
用嗜水气单胞菌HEC毒素免疫Balb/C小鼠,通过一次性杂交瘤融合,在筛选HEC毒素单克隆抗体(McAb1)的同时,用兔抗HEC毒素血清(PAb)包板的ELISA方法,筛选到两株抗HEC毒素的单克隆抗独特型抗体(McAb2)。两株McAb2腹水ELISA效价分别为1:20480和1:5120,属于IgG1亚类。HEC毒素的模拟抗原McAb2不能溶解人的O型红细胞,但能与相应的PAb反应,并能阻断PAb与HEC毒素的结合。将McAb2连接到同源小鼠红细胞(MRBC)后免疫小鼠,用HEC毒素包板的ELISA检测其血清,呈阳性结果,说明McAb2能模拟HEC刺激机体产生抗HEC毒素的抗体(Ab3)。  相似文献   

9.
应用酶联免疫吸附测定技术检测香蕉束顶病毒   总被引:3,自引:0,他引:3  
为探讨快速而准确的检测香蕉束顶病毒的方法,采用本所制备的香蕉束顶病毒多克隆抗体IgG和台湾的香蕉顶病毒单克隆抗体2H6,用酶联免疫吸附测定技术双抗体夹心法测定了漳州市天宝的香蕉束顶病病株。试验结果表明,多抗和单抗相结合的DAS-ELISA法能检测到病组织汁液的最大稀释度为1:640,而单独使用单抗的最大稀度为1:10。  相似文献   

10.
取抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体.经饱和硫酸铵盐析,透析除盐、葡聚糖凝胶过滤粗提后,经DEAE—22纤维素离子交换层析,获得纯化的单抗,ELISA效价达10(-6)以上.双向琼扩效价达1:64以上;抗体回收率达60%以上;最高浓度达1.2mg/ml.经抗鼠全血清双向琼扩结果证明所提取物为纯一的IgG.  相似文献   

11.
在应用ELISA鉴定7株抗奶牛IgM、IgA、IgG1,IgG2和Ig-轻链的单克隆抗体反应性中发现这些mAb均是特异地与相应Ig分子中的轻链或重链的抗原决定簇结合,用夹心法和抑制法均证明了这点。  相似文献   

12.
用酶联免疫印迹对弓形虫抗原组分分析的结果显示:经SDS-PAGE后的弓形虫抗原组分分别为1.78KD,21.3KD,30KD,36.5KD,39.1KD和50.2KD。电转印至硝酸纤维膜上的各抗原组分,用ELIB分析,弓形虫感染宿主的血清能与抗原组分蛋白起反应,其中39.1KD和21.3KD分子量组分蛋白带色显色最深,提示这二种组分蛋白是弓形虫IgG抗体识别的主要组分蛋白,而对照血清与各组分蛋白为  相似文献   

13.
李决  张鹏举 《郑州牧专学报》1997,17(1):26-27,30
从河南部分地区收集鸡血清312份,用ELISA法分别检测:(1)抗甲型肝炎病毒抗体-IgM(HAVIgM);(2)乙型肝炎病毒“两对半”;(3)抗丙型肝炎病毒抗体。其结果312份鸡血清抗HAVIgM和抗HCVAb全部阴性。乙肝病毒“两对半”血清阳性数分别为:HBsAg18份,抗-HBs16份,HBeAg14份,抗-HBe2份;抗-HBc零份。  相似文献   

14.
蚕豆萎蔫病毒单克隆抗体研制   总被引:2,自引:0,他引:2  
用蚕豆萎蔫病毒提纯病毒粒子免疫BAL B/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用纯化的BBWV病毒对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经三次有稀释法克隆,成功获得了2株BBWV特异性单克隆抗体的细胞株,分别命名为4D11,3G12.2株单抗腹水间接ELISA效价高达1:640000,抗体类型均为IgG1,经Western-blotting分析表明,2株单抗均是针对BBWV 44.7kD的外壳蛋白  相似文献   

15.
禽大肠杆菌血清型O2,O78融合双价弱毒菌株免疫原性的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
试验鸡在10d龄用禽大肠杆菌O2、O78融合双价弱毒菌苗免疫,免疫后14d对O2、O78强毒株攻击的保护率分别为73%和80%,免疫后42d的保护率分别为667%和733%,与对照组比较差异极显著(P<001).采用ELISA检测免疫鸡血清抗O2、O78的IgM、IgG、IgA等类抗体的消长情况,结果显示,血清中各类抗体的ELISA总滴度与保护效果呈正相关.其中,IgM在免疫后2周内起主要保护作用,IgG在2周后起主要保护作用,IgA在血清中出现迟缓.  相似文献   

16.
检测禽霍乱抗体间接ELISA法的建立   总被引:2,自引:0,他引:2  
以方阵滴定法选择出最适ELISA反应条件,用系列稀释法测定21份血清样品的禽霍乱抗体ELISA效价(ET),并与相应血清样品1:200倍稀释的P/N值配对,作线性回归分析,得到回归方程y=219.673a-183.570(r=0.944)和标准曲线,从而建立起快速定量测定禽霍乱抗体的间接ELISA方法-阳阴比值ELISA效价法(P/NI-ET法)利用该法,血清样品只需作1:200倍稀释,测定其P/  相似文献   

17.
抗鸡IgC单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立   总被引:4,自引:0,他引:4  
利用纯化鸡血清IgC免疫的Balb/c小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用ELISA间接法和夹心法作阳性抗体检测,经有限稀释法克隆,结果筛选出1株可持续分泌抗鸡IgC单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株3E3,其培养上清和诱生Blab/c小鼠腹水的McAb效价分别为1:4×10^2-1.28×10^4和1:8×10^5-1×10^10,经染色体分析可见到两种形态的染色体,该细胞株经体连续  相似文献   

18.
分别以3H—TdR掺入的淋巴细胞转化反应和BA—ELISA方法检测家兔免疫后及攻虫后T细胞及特异性抗体IgG和IgM的动态变化。发现免疫后家兔外周血T淋巴细胞增殖反应于24d达到高峰,第31天开始迅速降低。攻虫后特异性T细胞增殖反应强度未见升高,而特异性抗体Igh、IgM均于第21天达到高峰,攻虫后IgG、IgM分别在第6天和第9天又达到高峰。结果表明,在这种抗锥虫免疫中T细胞没有起主导作用,而特异性抗体IgG和IgM起主导作用。  相似文献   

19.
黄培春  陈锦 《湛江医学院学报》1998,16(3):184-185,197
了解EB病毒IgA/VCA和IgA/EA检测在鼻咽癌诊断中的价值。方法:IgA/VCA和IgA/EA测定用间接免疫酶法,NPC经活体组织检查确诊。结论:EB病毒IgA/VCA和IgA/EA检测对NPC的辅助诊断具有重要价值。  相似文献   

20.
兔异源蛋白与自身蛋白作为载体制备克伦特罗抗血清   总被引:24,自引:1,他引:23  
将β2激动剂克伦特罗(CL)偶氮化后分别连接牛血清白蛋白(BSA),兔血清白蛋白(RSA)和兔IgG(RGG),分别用上述连接物免疫3组新西兰兔。经琼脂扩散试验,间接ELISA和间接抑制ELISA检测表明,BS,RSA和RGG均能作为载体制备CL抗血清。BSA作为载体制备的抗血清含有大量针对载体的抗体,面RSA和RGG作为载体制德的抗血清不含有针对载体的抗体,显示自身蛋白可作为载体,且优于异源蛋白  相似文献   

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