紫花地丁抗菌活性成分研究

采用超声波提取技术提取紫花地丁中的抗菌活性成分,通过抑菌试验进行活性部分追踪,运用化学方法进一步分离纯化其抗菌活性成分,并用紫外光谱分析和高效液相色谱法(HPLC)测定其纯度,最后用试管比浊法测定其抗菌活性。结果表明,分离纯化所得的化合物为黄酮类,纯度为97.50%;该化合物对沙门氏菌和乳房炎病原菌包括金黄色葡萄球菌、乳房链球菌、停乳链球菌、无乳链球菌及大肠杆菌的最低抑菌浓度分别为312,39,156,156,312及39μg/mL,最低杀菌浓度分别为625,312,312,312,625及312μg/mL。     

蚕沙不同溶剂萃取物的抑菌活性

采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次对蚕沙70％乙醇粗提物进行萃取，对不同溶剂萃取物的化学成分进行预试，采用药敏纸片法测定了不同萃取物分别对停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、乳房链球菌、大肠杆菌、沙门氏菌的抑菌活性。结果表明，各萃取物的抑菌活性由强到弱的顺序为；乙酸乙酯相〉石油醚相〉氯仿相〉正丁醇相，主要抑菌活性成分为香豆素／内酯和黄酮类／酚类。     

石荠芋提取物的体外抑菌作用及抗氧化活性研究

为研究石荠苧提取物的体外抑菌作用和抗氧化活性,分别用水和无水乙醇提取石荠苧活性成分,并对乙醇总提取物依次用石油醚、氯仿、正丁醇进行分步萃取,得到不同极性的各部分提取物,分别采用管碟法、倍比稀释法测定沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对提取物的敏感性,同时采用DPPH法和Fenton法研究不同溶剂萃取的提取物的体外抗氧化活性.结果表明,石荠苧水提液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌均有抑制作用,最小抑菌浓度(MIC)分别为15.63、125.00、125.00 mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)分别为31.25、250.00、250.00 mg/mL;乙醇总提取物对金黄色葡萄球菌有抑制作用,MIC、MBC分别为125.00、250.00 mg/mL.氯仿萃取物、正丁醇萃取物、乙醇总提取物、水提液清除DPPH·的IC50分别为422.5、425.8、413.4、611.4 mg/mL,其中乙醇总提取物清除作用最强;氯仿萃取物、正丁醇萃取物、乙醇总提取物、水提液清除·OH的IC50分别为542.2、577.1、925.5、781.2 mg/mL,其中正丁醇萃取物清除能力最强.综上,石荠苧提取物对细菌有抑制作用和抗氧化作用.     

石荠苧提取物的体外抑菌作用及抗氧化活性研究

为研究石荠苧提取物的体外抑菌作用和抗氧化活性,分别用水和无水乙醇提取石荠苧活性成分,并对乙醇总提取物依次用石油醚、氯仿、正丁醇进行分步萃取,得到不同极性的各部分提取物,分别采用管碟法、倍比稀释法测定沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对提取物的敏感性,同时采用DPPH法和Fenton法研究不同溶剂萃取的提取物的体外抗氧化活性。结果表明,石荠苧水提液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌均有抑制作用,最小抑菌浓度(MIC)分别为15.63、125.00、125.00 mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)分别为31.25、250.00、250.00 mg/mL;乙醇总提取物对金黄色葡萄球菌有抑制作用,MIC、MBC分别为125.00、250.00 mg/mL。氯仿萃取物、正丁醇萃取物、乙醇总提取物、水提液清除DPPH·的IC_(50)分别为422.5、425.8、413.4、611.4 mg/mL,其中乙醇总提取物清除作用最强;氯仿萃取物、正丁醇萃取物、乙醇总提取物、水提液清除·OH的IC_(50)分别为542.2、577.1、925.5、781.2 mg/mL,其中正丁醇萃取物清除能力最强。综上,石荠苧提取物对细菌有抑制作用和抗氧化作用。     

茜草提取物对奶牛乳房炎主要病原菌的抑菌试验

[目的]明确茜草（Rubia cordifolia L．）乙醇提取物不同萃取部分的抑菌活性。[方法]选择金黄色葡萄球菌、停乳链球菌、无乳链球菌、大肠杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌为代表菌种,用不同极性的溶剂对茜草根的乙醇提取物进行分步萃取,筛选出对奶牛乳房炎主要病原菌有较强抑制作用的萃取部分。[结果]茜草提取物的石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取部分具有抗菌活性。其中乙酸乙酯萃取部分对奶牛乳房炎5种病原菌的抑菌效果最强．氯仿与石油醚萃取部分作用相当,正丁醇萃取部分对6种病原菌不敏感。丙酮萃取部分无抑菌作用。     

牛心朴子生物碱对奶牛乳房炎病原菌的体外抑菌试验

对4例临床型奶牛乳房炎的乳汁进行病原分离及鉴定,分离出了金黄色葡萄球菌、无乳链球菌和大肠杆菌。选择牛心朴子生物碱,采用试管2倍稀释法进行体外抑菌试验,测其最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果显示：牛心朴子生物碱对3种菌都有不同程度的抑制作用,对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、大肠杆菌分离株的MIC及MBC分别是12.5mg/mL、1.561 25mg/mL、6.25mg/mL和6.25mg/mL、1.561 25mg/mL、3.125mg/mL。     

紫花地丁对奶牛乳房炎主要病原菌体外抑菌试验

采用中药常规的煎煮法提取紫花地丁的有效成份,对筛选出的耐药大肠杆菌和金黄色葡萄球菌进行敏感性试验。结果显示:紫花地丁提取物对奶牛乳房炎大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有不同程度的抑制和杀灭作用,耐药的大肠杆菌中最大的抑菌圈是18mm,金黄色葡萄球菌中最大的抑菌圈是19mm,这2种病原菌的最小抑菌浓度(MIC)均为31.25mg·mL-1,最小杀菌浓度(MBC)均为62.5mg·mL-1,表明紫花地丁对耐抗生素的乳房炎大肠杆菌和金黄色葡萄球菌能够起到较佳的抑制效果;比较春、秋两季采集的紫花地丁的抑菌效果结果显示春季效果强于秋季。由此,紫花地丁可在临床上应用于奶牛乳房炎的防治。     

苜蓿提取液抑菌活性研究

[目的]研究苜蓿提取液对4种常见菌绿脓杆菌、停乳链球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活性。[方法]采用二倍稀释法和血平板鉴定相结合的方法测定其最低抑菌浓度(MIC)。[结果]苜蓿提取液对绿脓杆菌和停乳链球菌的MIC分别为0.674和1.347mg/ml;对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC均为2.695 mg/ml。[结论]苜蓿提取液对绿脓杆菌和停乳链球菌有较好的抑菌活性,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果一般。     

草珊瑚不同提取物抑菌活性研究

目的研究草珊瑚不同提取物的抑菌活性。方法以水作为溶剂,采用回流提取方式得到草珊瑚的水提液后, 依次采用石油醚（30℃~60℃）、乙酸乙酯、正丁醇等溶剂对草珊瑚水提液进行萃取得到不同草珊瑚提取液,旋转浓缩得 到相应浸膏,并用水复溶成不同浓度梯度溶液,利用琼脂平板打孔法评价不同草珊瑚提取物对小麦赤霉病菌、须癣毛 癣菌、炭疽病菌、红色毛癣菌、烟草赤霉病菌、白术根腐病菌、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌的抑菌活性。结果在供试 菌种中,草珊瑚水提液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、须癣毛癣菌、烟草赤霉病菌表现出不同程度的抑制作用,进一步 对草珊瑚水提液进行萃取发现,不同草珊瑚提取物抑菌活性均有一定的抑制效果,且随着不同提取物的浓度增大其抑 菌效果也逐渐增强。其中,正丁醇和乙酸乙酯萃取物的抑菌活性较好,正丁醇萃取物对须癣毛癣菌最小抑菌浓度为 15 mg/mL,对金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度为15 mg/mL,对大肠杆菌最小抑菌浓度为10 mg/mL;乙酸乙酯萃取物对 烟草赤霉病菌最小抑菌浓度为15 mg/mL。结论:草珊瑚提取物具有一定的抑菌活性,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、 须癣毛癣菌、烟草赤霉病菌具有抑菌作用,采用正丁醇和乙酸乙酯对草珊瑚水提液进行萃取的得到的提取物抑菌效果 更好,草珊瑚可作为一种天然抑菌植物进一步进行开发。     

小花棘豆总生物碱抑菌作用的研究

[目的]研究小花棘豆总生物碱的抑菌作用.[方法]通过体外抑菌试验研究小花棘豆总生物碱的抑菌活性、最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)和影响小花棘豆总生物碱抑菌效果的因素.[结果]小花棘豆总生物碱对金黄色葡萄球菌、乳房链球菌、化脓链球菌和枯草芽孢杆菌有抑菌作用;其对乳房链球菌和化脓链球菌的MIC为6.3 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的MIC为1.6 mg/mL,对枯草芽孢杆菌的MIC为0.8 mg/mL.生物碱在不同pH值下的抑菌活性发生变化;高温使其抑菌活性消失;紫外照射对其稳定性没有影响.[结论]小花棘豆总生物碱对部分革兰氏阳性菌有较好的抑菌作用.     

魔芋飞粉生物碱的抑菌活性及抑菌机理研究

【目的】探究魔芋飞粉生物碱(Alkaloid from konjac powder,AKP)的抑菌作用及其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌机理,为新型天然抑菌剂和防腐剂的开发提供理论依据。【方法】采用液体倍比稀释法,确定AKP对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌4株供试菌的最小抑菌质量浓度(Minimum inhibitoryconcentration,MIC),并采用牛津杯法测定AKP对上述4株供试菌的抑菌圈大小;通过测定在AKP作用下,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长曲线、菌体培养液电导率及观察细胞膜完整性、细胞形态等,对AKP的抑菌作用及其机理进行分析。【结果】AKP对4株供试菌均有明显的抑制作用,对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强(MIC为10mg/mL),大肠杆菌次之(MIC为20mg/mL)。AKP对供试菌的抑菌圈直径依次为金黄色葡萄球菌大肠杆菌枯草芽孢杆菌鼠伤寒沙门氏菌。菌体生长曲线显示,AKP对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长有明显的抑制效果。AKP作用后,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细胞膜受损,存活率显著降低,菌体培养液电导率显著上升。电镜观察发现,AKP使菌体细胞膜出现破损,部分菌体出现空腔。【结论】AKP具有抑菌作用,其可能通过破坏细菌细胞膜结构而导致内容物外泄,进而影响细胞的生长代谢或造成细胞死亡,从而抑制其生长。     

肉桂醛对耐药性肺炎克雷伯菌的抑菌活性及其机制

采用微量肉汤稀释法、平板涂布法及通过生长曲线测定,研究肉桂醛对耐药性肺炎克雷伯菌的抑菌活性;通过电导率、膜电位、DNA渗出量探讨肉桂醛对该菌细胞壁、细胞膜的影响;运用扫描电子显微镜观察肉桂醛作用后该菌的形态变化;通过SDS–PAGE试验探究肉桂醛对该菌胞内蛋白量的影响;采用结晶紫染色法分析肉桂醛对该菌生物膜形成的抑制作用。结果表明：肉桂醛对耐药性肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度为512～1024μg/m L,最低杀菌浓度为512～2048μg/mL;与对照组相比,添加肉桂醛1 h时,耐药性肺炎克雷伯菌培养液中电导率极显著增加达到最大,菌体内DNA渗透量极显著升高达到最大;肉桂醛作用后,菌体细胞膜电位极显著升高,出现超极化现象;SDS–PAGE电泳图谱显示,肉桂醛药物作用浓度与细菌胞内蛋白减少量呈正相关;菌体超微结构显示,肉桂醛作用导致菌体细胞壁及细胞膜损伤,且随浓度升高损伤程度增加;生物膜试验结果显示,在所有亚抑菌浓度肉桂醛作用下,肺炎克雷伯菌生物被膜的形成均受到显著抑制,抑制程度与药物浓度呈正相关。综上所述,肉桂醛可通过损伤耐药性肺炎克雷伯菌的细胞膜和细胞壁、破坏菌体可溶性蛋白质代谢和菌体...     

美洲大蠊血淋巴抗菌活性诱导差异比较

报道了不同诱导源处理美洲大蠊（Periplaneta americana L.）后对抗菌物质的诱导结果。结果表明，不同诱导源均可诱导抗菌物质的产生，但抗菌活性有差异。在供试诱导源中，大肠杆菌（Escherichia coli K88）所诱导产生的抗菌活性最强，其次为溴氰菊酯。日龄10d以内的成虫诱导后的24h即表现抗菌活性，其中，10日龄以内的雄成虫抗菌活性比例以及诱导后的存活率最高。     

具抗菌活性的红树林细菌的分离筛选

从广西山口红树林保护区采集的样品中分离得到32株细菌,以金黄葡萄球菌为指示菌初筛得到7株细菌具有抗菌活性,同时检测它们对其他4株指示菌的抗菌情况,结果发现SK-01对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和黑曲霉均有明显的抗菌活性。选取SK-01进行初步研究,结果发现SK-01在3号培养基、pH值7.0、盐浓度0的条件下生长最好;在1号培养基、pH值7.0、培养时间48 h、盐浓度1%的条件下产活性物质效果最好;对SK-01进行传代试验,结果显示SK-01具有良好的遗传稳定性,可以进行进一步的开发和利用。     

银杏酚酸杀灭鱼类病原菌和指环虫的研究

提取银杏外种皮中的银杏酚酸,测定了其含量,并对其杀灭鱼类病原菌和指环虫的活性进行了研究。结果表明,分离物中银杏酚酸的总含量为867 m g/g,各单体C15∶1,C17∶1,C13∶0,C15∶0,C17∶2的相对含量分别为499,226,201,32和29 m g/g;银杏酚酸对鱼害粘球菌的最低抑菌浓度(M IC)和最低杀菌浓度(M BC)均为7.81μg/mL,对鳗弧菌、点状产气单胞菌点状亚种、嗜水气单胞菌3株病原菌无明显的抑制效果,其M IC和M BC值均大于1 000μg/mL;银杏酚酸对指环虫的最佳杀虫浓度为1.70 m g/L,48 h杀灭率达95%~100%;其质量浓度为3.5m g/L时试验金鱼开始出现中毒现象,48 h的死亡率为60%。     

海岛棉枯萎病抗性相关基因 RGBCH 的克隆、原核表达及抑菌活性分析

为明确海岛棉抗枯萎病相关基因（RGBCH ）是否抑制海岛棉重要土传真菌枯萎菌的生长,克隆了海岛棉抗枯萎病基因相关基因 RGBCH 的全长编码序列,将该基因编码序列亚克隆到原核表达载体 pET-30a 上,构建成pET-30a-RGBCH 融合蛋白表达载体。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导,获得了以包涵体形式表达的pET-30a-RGBCH 重组蛋白。经过裂解、洗涤、溶解、复性等处理,获得了纯化的 pET-30a-RGBCH 融合蛋白。体外抑菌试验表明,RGBCH 蛋白显著抑制枯萎病病原菌的生长。     

小果博落回总生物碱的抑菌活性研究

【目的】获得抑菌活性更强的小果博落回的生物碱成分。【方法】采用4种亲核性溶剂(甲醇、乙醇、丙酮和饱和Na2CO3碱溶液)和1种非亲核性溶剂(四氢呋喃),分别从吸附了小果博落回总生物碱的D101树脂上洗脱生物碱,用薄层层析法(TLC)进行成分分析,以金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、大肠杆菌、肠形点状产气单胞菌、嗜水气单胞菌、巴氏杆菌、蜡样芽孢杆菌和鳗弧菌等8种菌株为供试菌,采用药敏纸片法进行抑菌活性测定,研究小果博落回在不同溶剂处理下所得的总生物碱成分和抑菌活性的变化。【结果】TLC分析结果表明,经过乙醇、甲醇、碱溶液和丙酮作用后,所得总生物碱(分别为SEtOH、SMeOH、Sbase和Sacetone)与直接用酸提取的总生物碱(Saw)在成分上存在差异;5种总生物碱均具有抑菌活性,其抑菌活性依次表现为SMeOH>SEtOH≈Sacetone≈Sbase>Saw。【结论】提取过程中使用亲核性溶剂,可引起小果博落回总生物碱成分的变化和抑菌活性的改变,其中以甲醇提取的总生物碱的抑菌活性较强。     

中药结核康体外抗结核分支杆菌活性的实验研究

目的观察中药结核康在体外对结核分支杆菌的抑制和杀灭作用．方法采用改良罗氏法和7H9液体培养基中测定中药结核康的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度．结果结核康在7H9液体培养基中最小抑菌浓度4（MIC）为40mg／L,在改良罗氏培养基中最小杀菌浓度为（MBC）800mg／L．结论结核康在体外对结核分支杆菌具有抑制和杀灭作用．     

刺参机体酵母菌组成及其拮抗活性的研究

采用PDA、YPD、MEA培养基从刺参Apostichopus japonicus的体表、肠道和呼吸树分离出23株酵母菌,使用玻璃珠破碎方法提取其DNA,然后用酵母菌通用引物NL-1/NL-4从DNA中成功扩增出26S rDNA片段,将PCR产物迸行测序,将各菌株序列在GenBank数据库中进行检索,从Blast比对结果中取相似性最高的序列,用Mega 4.0软件对所有序列进行聚类分析,采用邻接法构建系统发育树.结果表明:从大连柏岚子海域刺参中分离出的菌株分别属于红酵母属、梅奇酵母属和丝孢酵母属,从大连市黑石礁海域刺参中分离出的菌株分别属于红酵母属、假丝酵母属、德巴利氏酵母属、有孢汉逊酵母属和毕赤酵母属;以8株刺参病原菌作为指示菌,采用双层琼脂扩散法对分离菌株的拮抗活性进行测定,获得拮抗酵母菌17株,占总测试菌株的73.9％,从刺参机体的体表、肠道和呼吸树可以筛选出不同得率的活性菌株,其抗菌谱和活性强度各不相同,其中C11菌株的抗菌谱最广,抗菌活性最强;从肠道分离出的拮抗菌C11、C14和C21菌株的胞外产物经硫酸铵沉淀后也具有抗菌活性,C14菌株胞外产物经65％硫酸铵沉淀获得的粗提物对热和蛋白酶K敏感,表明其拮抗物质为蛋白质.     

不同育龄三角帆蚌血细胞吞噬率和血浆抗菌活力的比较

以2～5育龄三角帆蚌Hyriopsis cumingii为对象,研究了三角帆蚌血浆对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、溶壁微球菌、嗜水气单胞菌的抗菌活力和血细胞对金黄色葡萄球菌的吞噬率。结果表明：4种育龄的育珠蚌血浆对金黄色葡萄球菌的抗菌活力最强,其次为溶壁微球菌、大肠杆菌和嗜水气单胞菌,其中3龄育珠蚌对4种细菌的抗菌活力最强;4龄育珠蚌对金黄色葡萄球菌的吞噬率最高,达到36.6%,吞噬指数达到3.75,其次为5龄育珠蚌,2龄育珠蚌对金黄色葡萄球菌的吞噬率最低,仅为25.2%,吞噬指数为2.95。本研究结果证实：在2～5育龄内,3～4育龄的三角帆蚌育珠蚌的吞噬率和抗菌活力最强,抵抗外来病原菌的能力最高;但随着育珠年龄的增长,三角帆蚌免疫能力不断下降,因而养蚌育珠过程中要加强对高龄蚌抗病防病能力的管理。