甲状腺素联合多奈哌齐对成年期甲减 大鼠海马SNAP-25的影响

阐明甲状腺素联合多奈哌齐对成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠海马突触小体相关蛋白25(SNAP-25)表达的影响,探讨成年甲减脑功能损伤及恢复机制。结果显示甲减大鼠血清T3、T4及海马CA1、CA3区和齿状回(DG)SNAP-25蛋白水平显著升高。单独甲状腺素或联合治疗后血清T3、T4水平恢复正常,但单独甲状腺素治疗后,海马SNAP-25水平仍显著高于对照组大鼠,联合治疗后海马各层SNAP-25蛋白水平与对照组无显著差异。这些结果提示,成年期甲减可致海马内SNAP-25蛋白表达增加,单独甲状腺素治疗后SNAP-25蛋白表达恢复不理想,与多奈哌齐联合治疗使甲减大鼠海马内SNAP-25蛋白恢复到正常水平。     

SNAP-25在成年期甲减大鼠海马内表达变化及甲状腺素治疗效应

观察成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠海马内突触相关蛋白SNAP-25(synaptosomal associated protein of 25 kD)改变及不同剂量甲状腺素治疗后的恢复状况,探讨甲减脑损伤及恢复可能的分子机制。结果显示,甲减大鼠血清T3、T4水平显著低于正常对照组(P<0.05),背侧海马突触小体内SNAP-25的表达水平显著高于正常对照组(P<0.05);常规剂量替代治疗组大鼠血清T3、T4恢复至正常水平,SNAP-25表达水平与甲减组比较未见明显改变(P>0.05);经大剂量替代治疗后血清T3、T4高于正常;SNAP-25的表达恢复到正常水平(P<0.05)。这些结果提示,成年期甲减大鼠海马内SNAP-25表达增加,甲状腺素治疗能使其恢复,大剂量替代治疗使SNAP-25表达恢复至正常水平。     

成年期甲减大鼠海马Synaptotagmin 1改变及甲状腺素的治疗效应

观察成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠海马突触蛋白synaptotagmin 1(syt 1)改变及替代治疗和冲击治疗的影响.结果显示,甲减大鼠血清T3及海马CA1、CA3区和齿状回 (dentate gyrus, DG) syt 1水平显著性降低,替代治疗后血清T3恢复正常,但syt 1水平仅DG分子层显著性增加,而经冲击治疗后血清T3、T4高于正常,海马CA1区和DG区各层及CA3区锥体细胞层syt 1的水平几乎均恢复正常.这些结果提示,成年期甲减可致海马内syt 1蛋白表达减少,甲状腺素治疗能使其恢复,短期冲击治疗较替代治疗效果好.     

运动疲劳大鼠可能通过海马LTP抑制及CaN蛋白表达增多降低学习记忆功能

目的:通过观察运动疲劳对大鼠学习记忆、海马CA1区长时程增强(LTP)效应和钙神经素(CaN)蛋白表达的影响,探讨运动疲劳影响学习记忆功能的生理机制.方法:32只健康雄性8周鼠龄SD大鼠,随机分为安静对照组(CG)和运动疲劳组(FG),每组16只.运动疲劳组做连续7天递增负荷跑台运动,每天运动至力竭,对照组不加干预.7天建模结束后,运用避暗穿梭实验检测2组大鼠学习记忆能力,并分别采用在体脑立体定位—神经电生理方法观察海马CA1区LTP效应和免疫组织化学方法观察大鼠海马CA1区CaN蛋白表达水平.结果:与CG大鼠相比,FG大鼠避暗潜伏期缩短,错误次数增加,日差异显著(P＜0.01);最大场兴奋性突出后电位(fEPSP)的平均幅值FG大鼠(113.81％±2.36％)较CG大鼠(129.31％±2.38％)显著降低(P＜0.01);FG大鼠CaN蛋白表达也较对照组显著上调(P＜0.01).结论:运动疲劳可降低大鼠学习记忆能力,抑制海马CA1区LTP效应,上调CaN蛋白表达.提示:运动疲劳降低大鼠学习记忆功能的生理机制可能与海马CA1区LTP抑制及CaN蛋白表达增多有关.     

氟对大鼠海马中SNAP-25基因表达的影响

通过建立氟中毒大鼠模型,研究一定剂量氟化钠下大鼠海马中氟突触体相关蛋白-25(SNAP-25)基因表达量,为探讨氟对神经系统造成的影响提供动物性试验依据。结果表明,与饮用去离子水组相比,染氟突触体相关蛋白-25基因mRNA的表达明显下调。     

黄精水煎剂对β-淀粉样蛋白诱导的大鼠 学习记忆能力下降的保护作用研究

本研究旨在探讨黄精水煎剂(PCD)对β-淀粉样蛋白(Aβ)致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的保护作用及可能机制。通过Aβ25-35微量注射至大鼠双侧海马CA1区建立AD模型,同时用PCD干预,研究PCD对AD模型大鼠学习记忆能力、海马组织损伤和CA1区神经元中过度磷酸化tau蛋白(p-tau)表达的影响。结果表明,PCD可明显缩短模型大鼠逃避潜伏期,对模型大鼠学习记忆能力损伤有保护作用;能改善大鼠海马神经元损伤,减少CA1区在thr231位点tau蛋白的过度磷酸化。这些结果提示,PCD对学习记忆能力有显著的保护作用,这可能与其减少海马内p-tau-thr231水平和消除组织氧化逆境有关。     

β淀粉样蛋白(25-35)对AD大鼠海马Beclin-1表达及学习记忆的影响

研究β淀粉样蛋白(25-35)对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠海马自噬相关蛋白Beclin-1的表达和学习记忆功能的影响。通过行为学以及免疫组织化学检测,观察模型大鼠学习记忆功能以及海马Beclin-1表达的变化。行为学检测表明:模型组的学习记忆功能明显低于正常组,模型组Beclin-1表达明显降低(P<0.01)。海马CA1区注射β淀粉样蛋白(25-35)大鼠学习记忆力下降,Beclin-1表达下调,提示Beclin-1蛋白的表达降低很可能是β淀粉样蛋白(25-35)致神经元可塑性降低的关键环节。     

胚胎晚期母体暴露LPS对子代中年CD-1子鼠背海马SynaptotagminⅠ含量的影响

探讨胚胎晚期母体暴露细菌脂多糖(LPS)对中年CD-1子鼠背海马突触前囊泡蛋白 synaptotagmin Ⅰ(Syt Ⅰ)含量的影响.结果表明Syt Ⅰ蛋白在CD-1子鼠背海马DG、CA1和CA3区均有表达,胚胎晚期母体暴露LPS后的中年CD-1子鼠较同年龄对照组海马各区Syt Ⅰ含量显著增高.这些结果提示胚胎晚期母体暴露LPS可增加CD-1子鼠中年时背海马Syt Ⅰ含量.     

益母草总黄酮对去卵巢大鼠下丘脑和海马雌激素受体α及β mRNA表达的影响

目的：观察益母草总黄酮对去卵巢大鼠下丘脑和海马雌激素受体α及β mRNA表达的影响,探讨其对绝经后骨质疏松的作用机制。方法选取10~11月龄SD雌性大鼠48只,随机分为对照组、去势组、益母草总黄酮组和雌二醇组,以双侧卵巢切除法建立大鼠骨质疏松模型。益母草总黄酮组、雌二醇组分别用益母草总黄酮、雌二醇给药4个月,采用RT-PCR法检测各组下丘脑和海马雌激素受体α及β mRNA的表达。结果大鼠卵巢切除后,血清中雌二醇水平、椎骨骨密度、子宫湿重、下丘脑和海马雌激素受体α及βmRNA的表达均明显下降。雌二醇治疗后血清中雌二醇水平、椎骨骨密度、子宫湿重升高,下丘脑和海马β mRNA的表达均明显下降。益母草总黄酮治疗后,血清中雌二醇水平、椎骨骨密度、下丘脑和海马雌激素受体α及β mRNA的表达均明显升高,子宫湿重无明显改变。结论益母草总黄酮对切除卵巢所致的骨质疏松大鼠有防治作用,对子宫无不良影响。     

胚胎晚期母体暴露细菌脂多糖对中年CD-1子鼠背海马synaptotagmi Ⅳ的影响

对胚胎晚期母体腹腔注射细菌脂多糖或生理盐水,利用免疫组化法对CD-1中年子鼠背海马CA1、CA3区和齿状回各层突触蛋白synaptotagmin IV的表达进行研究。结果显示synaptotagmin Ⅳ在背海马各层均有表达。与盐水对照组相比,细菌脂多糖处理组子鼠背海马CA1、CA3区各层和齿状回分子层的synaptotagmin Ⅳ含量显著增高(Ps<0.05)。结果表明胚胎晚期母体暴露细菌脂多糖可显著增加中年子鼠背海马Syt IV表达。     

中年CD-1小鼠背海马syntaxin 1水平的改变

应用免疫组化技术检测13月龄(中年)和5月龄CD-1小鼠背海马突触前蛋白syntaxin 1的表达水平.结果显示,13月龄小鼠齿状回、CA1及CA3区各层syntaxin 1的相对含量较5月龄均显著下降.表明中年CD-1小鼠背海马syntaxin 1含量全面下调.     

中年CD-1小鼠背海马syntaxin1水平的改变

应用免疫组化技术检测13月龄(中年)和5月龄CD-1小鼠背海马突触前蛋白syntaxin 1的表达水平。结果显示,13月龄小鼠齿状回、CA1及CA3区各层syntaxin 1的相对含量较5月龄均显著下降。表明中年CD-1小鼠背海马syntaxin 1含量全面下调。     

日粮铜水平对大鼠肠道和肝脏组织形态、铜离子代谢及氧化还原平衡的影响

[目的]本试验旨在研究日粮铜水平对大鼠血清生化指标、肠道和肝脏组织形态及氧化还原平衡、肝脏铜离子代谢的影响,为探讨仔猪日粮适宜铜水平提供参考。[方法]采用单因素试验设计,选择21日龄雄性斯泼累格·多雷(SD)大鼠60只,随机分为3组:对照组(C,6 mg·kg~(-1)Cu);处理组1(T1,120 mg·kg~(-1)Cu);处理组2(T2,240 mg·kg~(-1)Cu),每组5个重复,每个重复4只大鼠,预试期1周,正式饲喂8周后,每个处理组选择10只大鼠(每个重复2只),采集血清、肝脏、小肠(十二指肠、空肠、回肠)组织及食糜(回肠和结肠)样品,观察肝脏及小肠组织形态,测定氧化还原反应、血清生化指标、肝脏铜转运相关蛋白基因表达。[结果]与C组相比,T2组大鼠血清中胰岛素(insulin)、胃饥饿素(ghrelin)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平和肝脏中锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性显著升高(P0.05),T1和T2组大鼠空肠和回肠组织中一氧化氮(NO)水平及回肠SOD活性显著降低(P0.05),大鼠肝脏SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性显著升高(P0.05)。与C组和T2组相比,T1组大鼠肝脏铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)活性显著升高,大鼠肝脏组织中铜锌超氧化物歧化酶基因(Sod1)、金属硫蛋白基因(Mt1a)和铜蓝蛋白基因(Cp)mRNA表达水平显著上调(P0.05)。与C组和T1组相比,T2组大鼠回肠绒毛高度和隐窝深度显著降低,大鼠肝脏铜转运蛋白基因(Ctr1)mRNA表达水平显著下调(P0.05)。血清TNF-α水平与大鼠回肠食糜铜含量(r=0.54)及结肠食糜铜含量(r=0.63)显著正相关(P0.05),回肠食糜铜含量与回肠组织NO水平(r=-0.57)和SOD活性(r=-0.62)显著负相关;大鼠肝脏中铜含量与肝脏SOD(r=0.59)和CuZn-SOD活性(r=0.70)及其伴侣蛋白基因(Ccs)mRNA表达水平(r=0.65)显著正相关。[结论]大鼠长期摄入120 mg·kg~(-1)铜日粮时,肝脏抗氧化酶活性及铜转运相关基因表达水平升高,有利于大鼠保持肝脏铜的稳态;大鼠采食240 mg·kg~(-1)铜日粮,肝脏中Ctr1表达显著下调,铜离子摄取减少,肝脏铜稳态得以维持。日粮中铜(120和240 mg·kg~(-1))吸收率低,主要滞留于肠道,大鼠回肠食糜铜积累引起回肠组织的损伤,改变回肠组织氧化还原平衡,引起大鼠机体炎症反应,不利于大鼠的健康。     

DON、ZEA及其联合作用对小鼠T淋巴细胞活化及MAPK信号通路的影响

为揭示脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、玉米赤霉烯酮(ZEA)及其联合作用的免疫抑制机制,试验研究霉菌毒素DON、ZEA单独及联合染毒对小鼠离体脾脏淋巴细胞活性、T淋巴细胞活化及其MAPK信号通路的影响。以小鼠原代混合淋巴细胞为材料,以刀豆蛋白A (Con A)为混合淋巴细胞活化刺激剂,设ZEA、DON单独及联合染毒组, CCK-8法检测不同毒素组处理细胞24 h后细胞活性的变化;流式细胞术检测T淋巴细胞活化标识分子CD25以及共刺激分子CD278(ICOS)的表达情况; Western blot检测T淋巴细胞内MAPK通路相关蛋白ERK、JNK、p38等表达情况。结果表明:与细胞对照组相比, Con A组混合淋巴细胞相对存活率极显著上升;与Con A组相比, ZEA或DON单染组及联合染毒组细胞相对存活率显著或极显著下降。与对照组相比, Con A组CD4~+CD25~+/CD4~+及CD4~+CD278~+/CD4~+比例均极显著上升;与Con A组相比, ZEA、DON及联合染毒组CD4~+CD25~+/CD4~+比例均极显著下降, CD4~+CD278~+/CD4~+比例均不同程度下降,染毒浓度越高下降越明显。此外,不同浓度毒素处理组对T淋巴细胞MAPK通路相关蛋白ERK、JNK、p38等表达均有促进作用。这一研究提示, DON、ZEA及其联合可通过抑制CD25、CD278(ICOS)的表达来干扰T淋巴细胞的活化过程, DON、ZEA及其联合作用通过对MAPK信号通路的影响调控T淋巴细胞的存活。     

内毒素对肝脏Caspase-3蛋白表达的影响及阳离子A的保护效应

为研究内毒素(ET)致大鼠肝细胞凋亡变化、对肝脏Caspase-3蛋白表达的影响及阳离子A(CA)的保护效应.将试验动物随机分为3组:对照组(Ⅰ组)、ET组(Ⅱ组)和CA保护组(Ⅲ组).3组动物经相应处理后分别在3、4、8、12 h采集肝脏检测肝细胞凋亡情况和Caspase-3蛋白的表达情况.结果表明,肝细胞凋亡与Caspase-3蛋白的表达成正相关的关系.ET可上调Caspase-3蛋白在肝脏的表达,诱导肝细胞凋亡,最终导致肝脏受损;而CA则能明显下调Caspase-3在肝脏的表达,抑制肝细胞凋亡,对由ET诱导的肝损伤具有显著的保护效应.     

外源性γ-氨基丁酸抵抗仔猪氧化应激的效果及机制

【目的】 研究外源性γ-氨基丁酸（GABA）抵抗仔猪氧化应激的作用效果,及海马神经元GABA受体调节凋亡信号通路在其中可能的介导作用,为GABA作为动物应激调节剂的应用提供科学依据。【方法】 基于成功构建的仔猪活体和大鼠海马神经元氧化应激模型,考察外源性GABA对仔猪血清及海马组织中氧化/抗氧化相关指标、仔猪日增重、脑海马GABA受体以及大鼠海马神经元中GABA受体及凋亡信号通路相关基因表达水平的影响。【结果】 低、中、高浓度的GABA灌喂组（LD+OS; MD+OS;HD+OS）仔猪血清的MDA含量均极显著低于氧化应激（OS）组(P<0.01),而GSH水平均极显著高于OS组(P<0.01),同时HD+OS 组仔猪血清T-AOC水平极显著高于OS组和对照组(P<0.01);且高浓度(100 mg·kg^-1 BW)GABA降低仔猪血清MDA含量和增加GSH水平的幅度均高于低浓度(20 mg·kg^-1 BW)和中浓度(60 mg·kg^-1 BW)GABA。因此,后续研究仅考察100 mg·kg^-1 BW GABA的作用效果及其抗氧化应激的机制。OS组仔猪0-7、8-14和0-28日龄的日增重极显著低于对照组(P<0.01),而HD+OS组0-7、8-14和0-28日龄仔猪的日增重极显著高于OS组(P<0.01);OS组仔猪15-28日龄的日增重显著低于对照组(P<0.05),HD+OS组15-28日龄的日增重极显著高于OS组(P<0.01)。以上结果表明,100 mg·kg^-1 BW GABA的灌喂极显著地增加了仔猪的日增重。对照组、OS组和HD+OS组在前、中、后期的腹泻率均无显著差异(P>0.05)。氧化应激组海马组织的MDA含量极显著高于对照组和HD+OS组 (P<0.01),而T-AOC和GSH的水平均极显著低于另外两组(P<0.01),表明GABA能提高仔猪海马组织抗氧化能力。HD+OS组的海马组织GABA_A和GABA_B受体水平均极显著高于对照组和氧化应激组(P<0.01),表明GABA提高了海马组织GABA_A和GABA_B的水平。氧化应激组脑海马Bcl-2蛋白水平显著低于对照组(P<0.05),Bax和Caspase-3蛋白水平极显著高于对照组(P<0.01)。HD+OS组的Bcl-2蛋白水平极显著高于氧化应激组（P<0.01）,Bax蛋白水平极显著低于氧化应激组（P<0.01）,Caspase-3蛋白水平显著低于氧化应激组（P<0.05）。与此一致的是,氧化应激组、GABA+OS+Picrotoxin组和GABA+OS+CGP54626组大鼠海马神经元的Bax和Caspase-3蛋白水平均显著高于对照组和GABA+OS组（P<0.05）,表明GABA缓解了氧化应激状态下海马神经元的损伤,而GABA受体抑制剂的添加阻挡了GABA的抗应激损伤作用。【结论】 GABA降低了仔猪海马的氧化应激水平,而GABA抗应激的作用机制可能与其降低凋亡蛋白基因的表达相关,而GABA_A和GABA_B受体介导了该过程。     

慢性肾衰竭患者甲状腺激素水平的变化及临床意义

目的了解慢性肾衰竭患者甲状腺激素水平与病情的关系。方法选取本院82例慢性肾衰竭患者为观察组,40名同期体检的健康者为对照组,用化学发光免疫法测定血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)及促甲状腺素(TSH)水平。结果观察组各期慢性肾衰竭患者的血清T3、FT3水平与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);T4和FT4水平除肾功能不全代偿期外,其他各期与对照组比较亦差异有统计学意义(P<0.01);而TSH水平则与对照组无差别(P>0.05)。尿毒症期患者的T4、FT3水平显著低于肾功能不全代偿期患者(P<0.01),FT4水平与其他各期的患者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论慢性肾衰竭患者常出现甲状腺激素水平异常,主要表现为低T3、低T4综合征;慢性肾衰竭患者甲状腺激素水平的测定对于判断病情、估计预后、指导治疗有一定的价值。     

三聚氰胺与三聚氰酸混合物对小鼠睾酮生成和调控的影响

[目的]本文旨在研究三聚氰胺与三聚氰酸混合物对小鼠睾酮生成和合成调控的影响。[方法]选40只4周龄雄性ICR小鼠随机分成4组,每组10只,分为三聚氰胺(MA)与三聚氰酸(CA)混合物(MC)低剂量组(MA、CA各1 mg·kg~(-1),MC2)、中剂量组(MA、CA各5 mg·kg~(-1),MC10)、高剂量组(MA、CA各25 mg·kg~(-1),MC50)和对照组(玉米油灌胃),连续灌服28 d;放射免疫法测定血清中睾酮含量,荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法分别检测与睾酮合成相关的蛋白(St AR、P450scc、P450 17α和17β-HSD)及其基因的表达变化,免疫组织化学方法检测睾丸间质细胞数量。[结果]MC10和MC50组小鼠血清中睾酮含量显著低于对照组(P0.05);与对照组相比,混合物处理各组的St AR mRNA和17β-HSD mRNA表达量明显下调(P0.05),MC10和MC50组的P450 17αmRNA表达量以及MC50组的P450scc mRNA表达量也明显降低(P0.05);睾酮合成相关的蛋白表达与mRNA水平变化一致,混合物处理各组的17β-HSD蛋白表达明显低于对照组,MC50组的P45017α蛋白表达以及MC10和MC50组的St AR及P450scc蛋白表达也明显低于对照组(P0.05);MC50和MC10组的小鼠睾丸间质细胞数量极显著低于对照组(P0.01)。[结论]三聚氰胺与三聚氰酸混合物减少了间质细胞的数量并下调了睾酮合成相关蛋白的表达,导致血清中睾酮水平降低。     

长期口服阿卡波糖对SAMP8小鼠背海 马synaptotagminⅠ的影响

利用免疫组化法检测长期口服阿卡波糖对SAMP8小鼠背海马突触蛋白synaptotagminⅠ（SytⅠ）表达的影响。结果显示,SytⅠ在背海马CA1、CA3区和齿状回各层均有表达。老年对照组小鼠背海马各区SytⅠ的相对含量显著高于青年对照组（Ps<0.05）。阿卡波糖处理组小鼠背海马各区SytⅠ的相对含量显著低于同龄对照组（Ps<0.05）。上述结果提示长期口服阿卡波糖可减轻SAMP8小鼠背海马年龄相关性SytⅠ增加的水平。     

甲状腺素对猪卵巢卵泡颗粒细胞类固醇激素合成及增殖的影响

[目的]本试验旨在探究甲状腺素对猪卵巢卵泡颗粒细胞类固醇激素合成功能以及增殖的影响。[方法]首先采用免疫组化法鉴定甲状腺素受体(TRα/β)在猪卵巢组织的表达情况,随后体外培养猪卵巢原代颗粒细胞,选取低(10-8mol·L~(-1))、中(10-7mol·L~(-1))、高(10-6mol·L~(-1))3种浓度的甲状腺素(T4)孵育24 h,采用酶联免疫法检测细胞培养液中孕酮(P4)和雌二醇(E2)水平,并采用蛋白印迹法检测颗粒细胞内激素合成相关酶蛋白(3β-HSD、CYP19)的表达情况。采用MTT法检测各浓度甲状腺素对细胞活力的影响,利用增殖细胞核抗原(PCNA)免疫荧光染色验证不同浓度甲状腺素对颗粒细胞增殖的影响。[结果]免疫组化结果显示:TRα/β在猪卵巢不同发育阶段卵泡的颗粒细胞、膜细胞中有广泛表达,在卵母细胞的胞质中也有分布,在闭锁卵泡中也见明显表达。猪卵巢原代颗粒细胞经甲状腺素处理后,细胞培养液中的孕酮和雌激素水平都显著低于空白对照组(P0.05),并且各剂量处理组间孕酮呈现出剂量依赖性降低趋势;雌激素在低浓度和高浓度甲状腺素处理组较中浓度处理组高。蛋白免疫印迹结果显示:与对照组相比,3β-HSD和CYP19蛋白在较高浓度甲状腺素(10-7和10-6mol·L~(-1))处理组的表达量均显著降低(P0.05);而在低浓度甲状腺素(10-8mol·L~(-1))处理组,CYP19蛋白表达量显著降低(P0.05),但3β-HSD蛋白表达无显著差异。此外,MTT细胞毒性和增殖试剂盒检测结果显示:不同浓度甲状腺素处理并不影响细胞活力,这与PCNA免疫荧光强度统计结果一致,进一步证实了甲状腺素对原代颗粒细胞增殖没有影响。[结论]甲状腺素能够作用于卵巢颗粒细胞,干扰类固醇激素的合成,其作用机制可能是通过改变激素合成相关蛋白3β-HSD和CYP19的表达来完成的。而甲状腺素对颗粒细胞激素合成的干扰效应并不影响细胞增殖状态。