枯草芽孢杆菌AR11菌株对南方根结线虫的生物防治

用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilus)AR11菌株处理南方根结线虫(Meloidogyne incognita)的二龄幼虫(J2)和卵，以评价生防菌AR11对南方根结线虫的防治效果。结果表明：在处理12、24、36和48h后，5倍稀释菌液(AR11-5)对J2的活性抑制率分别比对照(清水)高55．7％、59．5％、58．0％和47．5％；用10倍稀释菌液(AR11-10)和5倍稀释上清液(S—AR11-5)处理卵8d后，卵孵化率分别比对照高29．1％和29．7％。用不同浓度的AR11菌液进行温室盆钵实验，结果显示：8周后根系上的根结和卵块数明显减少，其中以10倍稀释菌液处理组减少最为明显，分别比对照少68．2％和75．0％；同时番茄的冠重比对照组高25．6％。上述结果表明：AR11菌株对番茄根部根结和卵块的形成有明显的抑制作用，可抑制二龄幼虫的活性，但对雌虫产卵能力没有影响；低浓度的菌悬液和上清液对卵的孵化有促进作用；此外，该菌株还对番茄的生长有促进作用。     

GJ23 生防菌剂防治南方根结线虫研究

用不同浓度的GJ23生防菌剂菌悬液和发酵上清液原液,对南方根结线虫的二龄幼虫和卵进行处理,评价GJ23生防菌对南方根结线虫的生物防治效果。结果显示,GJ23生防菌剂的菌悬液和上清液原液的不同稀释倍数均可抑制根结线虫二龄幼虫的活性,但可促进其卵的孵化。温室盆钵试验结果表明,2倍稀释的GJ23菌液对南方根结线虫的产卵能力和根结的形成有显著的抑制作用,对番茄生长有促进作用。     

不同根际细菌对南方根结线虫抑制效果的研究

采用稀释平板涂布方法从番茄根结土壤中初步筛选出对明胶有水解作用的菌株。通过各菌株发酵上清液对南方根结线虫二龄幼虫死亡率和虫卵孵化率抑制作用,以及拮抗菌悬浮处理番茄根系30 d后观察番茄根结数量变化,进一步筛选获得高效菌株。通过16S rDNA基因序列分析,对能显著抑制根结线虫生长的2株菌株进行了鉴定。结果表明:筛选出了10株对明胶有明显水解圈的细菌,其中菌株BTG和X5具有较强的明胶水解能力。菌株BTG和X5发酵的上清液处理二龄幼虫24 h后的死亡率比无菌上清液处理死亡率提高了72.13%和62.14%;而用菌株上清液处理14 d后的虫卵孵化率比无菌上清液处理的孵化率降低了38.62%和30.73%。菌株BTG和X5的菌悬液处理的番茄根结数比不加菌悬液对照处理根结数分别降低了80.49%和73.17%。经16S rDNA基因序列分析表明,菌株BTG和X5都属于芽孢杆菌。通过比较各株细菌对二龄幼虫(J2)死亡率,虫卵孵化率及番茄根结数量的影响,筛选出了2株可用于生物防治作物根结线虫的芽孢杆菌。     

3株真菌发酵液对番茄根结线虫的防治效果

利用3个真菌菌株ZB-4、ZW-3、XX-8的发酵液对蕃茄根结线虫2龄幼虫进行室内离体活性测定和温室盆栽的防效试验。结果表明:供试3个菌株不同稀释倍数的发酵液在处理后24、48和72 h对番茄根结线虫都有一定的抑制作用,其中3个菌株的2倍发酵液在处理后72 h对番茄根结线虫2龄幼虫的校正抑制率分别为95.27%、91.27%、86.58%;4倍发酵液在处理后72 h对番茄根结线虫2龄幼虫的校正抑制率分别为68.52%、84.05%、60.33%。在温室盆栽试验中,用3个菌株的2倍发酵液处理番茄苗,与对照相比,处理后45 d番茄根结线虫的减退率分别达到46.7%、43.3%、36.7%,防治效果分别达到23.81%、19.52%、35.71%。此外,处理后22 d和45 d的调查结果显示,3个菌株的2倍发酵液对番茄生长有一定的促进作用。     

类芽孢杆菌TX-4菌株对根结线虫的生防活性

采用类芽孢杆菌属TX-4菌株发酵提取液的不同浓度处理南方根结线虫2龄幼虫(J2)和卵。结果表明,TX-4发酵液的不同浓度提取液对线虫卵有显著的抑制作用,对J2幼虫有显著的致死作用。线虫卵的抑制率和J2幼虫的致死率,随着浸渍时间的加长和提取液浓度的升高而加大。用高浓度(10倍稀释液)提取液浸泡根结线虫卵2 d,对卵的孵化抑制率达70.4%。应用不同浓度的TX-4菌株发酵提取液或TX-4菌株细胞悬浮液防治接种J2(1000头/盆)的盆栽试验表明,两种处理均显著(P<0.01)减少番茄根瘤指数和线虫种群数量。     

荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)MF11对根结线虫病的防效评价

在根结线虫危害严重的番茄田块采集健康植株的根际,从中分离并筛选对根结线虫病具有防治作用的生防菌株.采用稀释分离法以及离体试验获得16株能显著杀灭南方根结线虫二龄线虫(J2)的菌株,其中菌株MF11对J2的致死率最高.基于生理生化分析、gyrB和16S rRNA基因碱基序列比对,确定菌株MF11为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens).菌株MF11发酵液浸泡番茄幼苗24 h后,J2在番茄根尖的聚集数量显著减少,侵入番茄根尖的虫量下降80.65％,表明菌株MF11可降低J2对番茄的侵染力.温室试验结果表明,菌株MF11发酵液处理可以显著降低番茄植株86.53％根结数,以及70.2％的卵块数.田间试验结果表明,菌株MF11发酵液处理降低了根结线虫病的病情指数,其平均防效达66.71％,与10％噻唑膦颗粒剂处理防效相当.综上所述,菌株MF11不仅对根结线虫具有毒杀作用,还能降低根结线虫的侵染、发育和繁殖能力,从而有效防治作物根结线虫病.     

蔬菜根结线虫生防细菌的筛选

从广西蔬菜地分离到359株细菌菌株,用其细菌菌悬液和发酵上清液对南方根结线虫Meloidogyne incoqnita的二龄幼虫进行处理,评价其对南方根结线虫的毒力.结果显示,有336株菌株的菌悬液对南方根结线虫二龄幼虫具有杀伤能力,其中49株菌株对南方根结线虫的室内校正死亡率达60%以上;用细菌发酵上清液处理二龄幼虫,也表现出对幼虫活性的抑制作用,48h后有8株菌株发酵上清液原液校正死亡率达80.00%以上.     

甲胺基阿维菌素苯甲酸盐对南方根结线虫的毒力、防效及安全性研究

选用02%高渗甲胺基阿维菌素苯甲酸盐(甲维盐)和18%阿维菌素对南方根结线虫进行室内毒力测定和盆钵药效试验.室内毒力测定结果显示:甲维盐对南方根结线虫二龄幼虫(J2)的毒力高于阿维菌素,甲维盐和阿维菌素的LC50值分别为0164 5、0453 2 mg·L-1.盆钵药效试验结果显示:甲维盐500倍液、1 000倍液对南方根结线虫病的相对防效为9367%、7969%,与阿维菌素防效相当,且甲维盐能显著抑制根结和卵块的产生.安全性测定结果显示:甲维盐各处理浓度对番茄生长均没有不良影响.表明:甲维盐可与阿维菌素交替应用于防治南方根结线虫病.     

产黄青霉Snef2367菌株代谢产物对南方根结线虫的防效评价

根结线虫是危害最严重的植物寄生线虫,其分布广、寄主多,是威胁农业生产的重要病原物。生物防治是控制根结线虫病的有效措施之一。本课题组前期筛选获得1株对南方根结线虫有高毒力的生防真菌产黄青霉(Penicillium chrysogenum)Snef2367。通过室内试验测定该菌株代谢产物对南方根结线虫(Meloidogyne incognita)2龄幼虫(J2)的毒性和卵孵化抑制的效果,并利用盆栽和温室试验进一步验证其生防效果。室内试验测定结果表明:该菌株代谢产物对南方根结线虫J2具有强毒杀作用,处理24h和72h时,J2的校正致死率分别高达89.16%和98.44%;该菌株代谢产物也显著抑制卵的孵化,处理48 h和72h时,相对抑制率分别高达80.20%和67.63%。盆栽试验结果表明,产黄青霉Snef2367代谢产物可显著降低根结指数和土壤中J2数量,并且显著增加株高、根长、根鲜重和根干重,具有明显的促生效果。温室田间试验结果与盆栽试验结果基本一致,均可显著降低根结指数和土壤中J2数量,并且显著增加株高和根长,但由于田间根结线虫发生严重,使番茄植株根鲜重和根干重显著低于对照处理。同时,盆栽试验显示Snef2367代谢产物对番茄根结线虫的减退率高达56.67%,温室田间试验的防效高达64.29%。可见,产黄青霉Snef2367菌株代谢产物具有很好的促生和防病效果,为植物线虫病的生物防治提供了新的生防资源。     

淡紫拟青霉与放线菌代谢物复配对南方根结线虫的防治

对淡紫拟青霉和放线菌的拮抗特性及其复配菌剂对南方根结线虫的防治进行了研究.采用杯碟法和平板对峙法测定了淡紫拟青霉菌株PL1和PL2与放线菌菌株LH117和LH121的拮抗性,结果表明两种生防菌4个菌株之间没有明显的拮抗作用;效价法测定结果显示,LH121的发酵上清液对PL2的菌丝生长有轻微抑制作用,抑制率为14.5%.室内生物测定表明,按等体积比例配成的淡紫拟青霉孢子液和放线菌发酵上清液组合的4种复配菌剂处理对根结线虫的卵孵化抑制率和二龄幼虫杀死率分别可达到66.6%和78.0%,明显高于各单菌株处理;温室盆钵试验结果表明,PL1孢子液和LH117发酵上清液的复配菌剂对番茄的根结形成和根结线虫卵块形成的抑制率分别为68.7%和58.4%.上述结果表明:淡紫拟青霉与放线菌的复配菌剂对根结线虫的防治效果比单菌株的防治效果显著,复配菌剂的防治效果与生防菌株间的相瓦拮抗性可能密切相关.     

木醋液的杀线活性及对根结线虫病的防治效果研究

 【目的】初步探究木醋液对根结线虫2龄幼虫的抑制作用,以及木醋液及其配剂对根结线虫病的田间防治效果。【方法】采用浸渍法测定不同稀释浓度的木醋液对根结线虫2龄幼虫抑制作用,根据实验室测定结果设计小区试验,进行木醋液及其配剂对石榴根结线虫病、番茄根结线虫病的大田防治。【结果】不同稀释浓度的木醋液对4种常见根结线虫的2龄幼虫均有抑制作用,随着稀释倍数的增加,抑制作用减小。木醋液稀释浓度为150倍处理72 h时,北方根结线虫、花生根结线虫、南方根结线虫、爪哇根结线虫的校正死亡率分别达到了76.3%、78.４%、77.9%和72.2%。木醋液和木醋液配剂对石榴根结线虫病有较好的防治效果,防治效果分别达到了63.9%和50.5%。木醋液和木醋液配剂对番茄根结线虫病的防治效果,寻甸分别为54.1%和28.6%,个旧的为27.8%和19.6%。【结论】初步证明木醋液对根结线虫2龄幼虫有抑制作用,对石榴根结线虫病和番茄根结线虫病有防治效果,对防治根结线虫病有研究价值、应用价值和开发前景。     

绿色木霉菌株发酵液及分生孢子悬浮液对南方根结线虫二龄幼虫活性的影响

为研究绿色木霉(Trichoderma viride)菌株对南方根结线虫(Meloidogyne incognita)二龄幼虫(J2)活性的影响,采用不同浓度绿色木霉菌株发酵液(简称发酵液)和绿色木霉分生孢子悬浮液(简称孢子液)触杀二龄幼虫(J2),分别在24、36、48 h测定发酵液和孢子液对二龄幼虫(J2)致死效果。以5%阿维菌素乳油5 000倍液和无菌水为对照,同时对幼虫形态特征变化进行显微观察,探究发酵液和孢子液触杀二龄幼虫(J2)的原因,并通过盆栽试验对发酵液、孢子液预防和防治南方根结线虫的效果进行评价。结果表明,孢子液杀线过程主要依靠分生孢子的寄生作用,孢子寄生于幼虫体腔和体壁,幼虫活力随着孢子生长而降低;发酵液杀线过程主要依靠绿色木霉真菌在发酵过程中产生的拮抗物质。48 h内发酵液处理和孢子液处理中幼虫校正死亡率最高达86%和71%,均对幼虫具有较强致死效果,高于阿维菌素对照(51%),发酵液杀线效果和作用时效均优于孢子液。在盆栽试验中,绿色木霉发酵液和孢子液对南方根结线虫的预防效果分别为60.00%和49.99%,防治效果分别为66.67%和47.62%,生防作用显著。...     

植安灵对南方根结线虫的控制效果及其作用方式探讨

测定了植物源杀虫剂“植安灵”在温室盆钵中对南方根结线虫（Meloidogyne incognita）的控制效果。结果表明：该药剂对根结线虫有较高的活性，100倍稀释液对根结形成抑制率达75．6％，对卵块形成抑制率为66.7％，但稀释倍数大于400倍时的抑制作用不明显；在离体条件下，植安灵对南方根结线虫二龄幼虫（J2）有明显的驱避作用；对虫卵孵化有较强的抑制作用；对J2有很强的击倒活性，100倍稀释液处理24h的击倒率达86．7％，但大多数被击倒的虫体可以在清水中恢复活动能力，100倍稀释液24h内的致死率只有36．0％。抑制而不是直接杀死J2，对J2的驱避作用及卵孵化的抑制是植安灵防治根结线虫的主要作用机制。     

黄瓜内生真菌对根结线虫生防活性测定

为了明确黄瓜根结内生真菌对根结线虫(Meloidogyne incognita)的防效,采用菌株发酵液对根结线虫进行离体活性和盆栽防效测定,结果表明,菌株经形态和18S r DNA鉴定为Plectosphaerella sp.,其发酵液对根结线虫处理48 h的致死活性为93.73%;盆栽试验表明,Plectosphaerella sp.对根结线虫的防效为56.1%。发酵液处理的黄瓜根系卵块数量少于对照,土壤中根结线虫2龄幼虫数量也少于对照。总体来看,Plectosphaerella sp.对根结线虫具有较高的生防活性,能为黄瓜根结线虫生物防治奠定基础。     

刀孢蜡蚧菌的鉴定及其对南方根结线虫不同生活阶段的定殖

【目的】明确卵寄生真菌（Lecanicillium psalliotae）刀孢蜡蚧菌对根结线虫的防治潜力。【方法】采用分离自山东青岛城阳丝瓜根结线虫的卵寄生真菌CGMCC5329,通过形态学特征观测及分子生物学分析,鉴定该菌株为刀孢蜡蚧菌。显微观察刀孢蜡蚧菌对南方根结线虫（Meloidogyne incognita）不同生活阶段的定殖。【结果】刀孢蜡蚧菌能够寄生南方根结线虫生活史中的卵、2龄幼虫和雌虫,同时对卵块内卵孵化具有明显的抑制作用。该菌菌丝在卵表面形成侵染钉,卵壳皱缩凹陷,卵胚胎发育停止和内容物凝集,卵内长满菌丝,有时可见到菌丝上形成瓶梗细胞和分生孢子。第6天卵寄生率为85.76%;15 d卵块相对孵化抑制率为91.41%。被真菌寄生的2龄幼虫体表形成致密菌网,穿透体壁,体内长满菌丝,5 d后寄生率为79.23%。寄生的雌虫体壁形成致密菌网和侵染钉,体壁皱缩变形,有时内容物外渗。【结论】刀孢蜡蚧菌CGMCC5329不仅能寄生根结线虫生活史中定居态的雌虫和卵,还能寄生侵染态2龄幼虫。该菌是具有生物防治应用潜力的根结线虫寄生真菌。     

新型鸡粪发酵提取液对番茄生长及根结线虫病的影响

[目的]研究鸡粪发酵提取液对番茄生长及根结线虫病防治效果的影响,为科学利用鸡粪防治作物根结线虫病提供参考.[方法]设5、10、25、50、100、300、500和1000倍8个稀释倍数的鸡粪发酵提取液处理,以清水为对照,通过浇灌已接种南方根结线虫的盆栽番茄,研究其对番茄植株生长及根结线虫病防治效果的影响;通过室内培养2龄根结线虫和根结线虫卵,研究不同稀释倍数的鸡粪发酵提取液对根结线虫致死和根结线虫卵孵化的影响.[结果]50、100和300倍鸡粪发酵稀释液更有利于番茄植株前期生长;5、10和25倍鸡粪发酵稀释液更有利于番茄植株后期生长,且能显著降低根结线虫发病率,最高防效达72.7%.培养试验结果表明,5、10和25倍鸡粪发酵稀释液能显著抑制根结线虫卵孵化,抑制率在70.0%以上;5和10倍鸡粪发酵稀释液对根结线虫的致死作用明显,处理后24 h即达到100.0%的致死效果.[结论]5~10倍稀释的新型鸡粪发酵提取液能促进番茄植株生长,显著抑制根结线虫卵的孵化,杀死2龄线虫,减少根结线虫病的发生,是一种操作简便且环保安全的根结线虫病防治方法.     

放线菌菌株1331发酵工艺优化及对南方根结线虫的作用效果

【目的】研究放线菌菌株1331的最佳发酵工艺条件,并探究其发酵液对南方根结线虫2龄幼虫的抑杀作用。【方法】在摇瓶试验中采用单因素筛选和正交试验对其发酵条件进行优化。【结果】该菌株的最佳摇瓶发酵培养基为发酵培养基Ⅱ;最佳发酵条件为装液量80 mL (500 mL摇瓶),种子液接种量为5%(体积分数),初始pH值7.0,培养温度25℃,150 r/min培养7 d。该条件下菌株1331产孢量为1.68×109 CFU/mL,其5%发酵稀释液处理南方根结线虫卵9 d,卵孵化率与对照相比降低了70.59%;10%和20%发酵稀释液对南方根结线虫2龄幼虫48 h的校正死亡率分别达88.97%和100%。【结论】放线菌菌株1331发酵液可有效抑杀南方根结线虫,具有潜在生防价值。     

番茄内生枝孢霉Wx103对根结线虫毒性的研究

本研究从番茄根结中分离得到一株根结线虫的内生生防真菌Wx103,经鉴定为Acremonium sclerotigenum。该菌株发酵液对南方根结线虫2龄幼虫具有较强的毒杀活性,发酵液处理24 h后的校正死亡率为90. 25%,处理7 d对卵孵化抑制率为41. 04%;盆栽试验中孢子液处理线虫防效为68. 72%,与3%阿维菌素微囊悬浮剂处理无显著差异。本研究丰富了根结线虫生物防治的微生物资源,可为该菌株的开发利用提供一定的理论基础。     

南方根结线虫对不同寄主植物侵染能力的比较

[目的]筛选南方根结线虫的易感寄主。[方法]通过接种试验比较了南方根结线虫对5种寄主植物（黄瓜、番茄、茄子、菠菜及辣椒）的侵染能力。[结果]南方根结线虫对不同寄主植物的侵染能力存在显著差异。黄瓜和番茄的根结百分率显著高于菠菜、茄子和辣椒,黄瓜和番茄根际土壤中2龄幼虫数、雌成虫数及卵块数都显著高于菠菜、茄子和辣椒。[结论]南方根结线虫对黄瓜和番茄的侵染能力显著强于菠菜、茄子和辣椒,为南方根结线虫的易感寄主植物。     

3种化合物对南方根结线虫的抑制作用及对番茄生长的影响

蔬菜根结线虫病是目前我国北方温室大棚和南方露地蔬菜生产中的重要病害之一,为研究常用化学试剂对根结线虫活性的作用,考察3种化合物CuSO4·5H2O、FeCl3·6H2O和NH4HCO3对靶标线虫南方根结线虫(Meloidogyne incognita)卵孵化和2龄幼虫(J2)侵染能力的影响,以及对番茄植株生长的影响。结果表明,3种化合物均对南方根结线虫的卵孵化具有明显的抑制作用,65mmol·L-1NH4HCO3对南方根结线虫卵孵化的抑制作用最强,抑制率可达100%;NH4HCO3和CuSO4·5H2O对番茄根结形成均具有较强的抑制作用,FeCl3·6H2O抑制作用较弱;3种化合物对番茄植株生长均具有抑制作用,NH4HCO3和CuSO4·5H2O对番茄植株生长的抑制作用较强,两者差异不显著,FeCl3·6H2O抑制作用较弱。