根结线虫生防菌SneF8发酵代谢产物稳定性研究

SneF8是沈阳农业大学北方线虫研究所从土壤中分离到的一株生防菌株,该菌株代谢产物能够有效控制南方根结线虫引起的蔬菜根结线虫病。本试验对此菌株及其产生杀线虫活性物质的稳定性进行了系统的研究。试验结果表明,不同处理对南方根结线虫毒力作用具有选择性差异。SneF8发酵液对南方根结线虫具有较好的毒杀活性(处理24 h致死率达到85%以上),其代谢产物具有耐高温和耐贮藏等特点。     

荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)MF11对根结线虫病的防效评价

在根结线虫危害严重的番茄田块采集健康植株的根际,从中分离并筛选对根结线虫病具有防治作用的生防菌株.采用稀释分离法以及离体试验获得16株能显著杀灭南方根结线虫二龄线虫(J2)的菌株,其中菌株MF11对J2的致死率最高.基于生理生化分析、gyrB和16S rRNA基因碱基序列比对,确定菌株MF11为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens).菌株MF11发酵液浸泡番茄幼苗24 h后,J2在番茄根尖的聚集数量显著减少,侵入番茄根尖的虫量下降80.65％,表明菌株MF11可降低J2对番茄的侵染力.温室试验结果表明,菌株MF11发酵液处理可以显著降低番茄植株86.53％根结数,以及70.2％的卵块数.田间试验结果表明,菌株MF11发酵液处理降低了根结线虫病的病情指数,其平均防效达66.71％,与10％噻唑膦颗粒剂处理防效相当.综上所述,菌株MF11不仅对根结线虫具有毒杀作用,还能降低根结线虫的侵染、发育和繁殖能力,从而有效防治作物根结线虫病.     

球孢白僵菌Snef23杀线虫活性物质的分离、合成及对南方根结线虫的毒力评估

采用活性追踪法,从对南方根结线虫(Meloidogyne incognita)有高毒力的生防真菌球孢白僵菌株(Beauveria bassiana)Snef23的次生代谢产物中分离获得活性化合物Snef23-E5-1,经质谱和核磁波谱分析鉴定为N-乙酰-β-甲基苯丙氨酸。以苯乙烯和乙酰氨基丙二酸二乙酯为原料,经加成、取代、水解和脱羧反应合成了N-乙酰-β-甲基苯丙氨酸。通过室内试验测定该化合物对南方根结线虫2龄幼虫(J2)的毒力,结果表明:N-乙酰-β-甲基苯丙氨酸对其具有毒杀作用,药后24h和48h的致死中浓度(LC50)分别为1018.467mg·L~(-1)和614.606mg·L~(-1)。盆栽试验结果表明:N-乙酰-β-甲基苯丙氨酸可显著降低根结指数,具有明显的促生效果。与对照相比,1000mg·L~(-1)的N-乙酰-β-甲基苯丙氨酸根结减退率最高可达68.83%,株高、根长、根鲜重和根干重分别增加29.67%、74.60%、35.71%和10.53%。N-乙酰-β-甲基苯丙氨酸杀线虫活性的发现及其防效的研究可以为新型微生物源杀线虫剂的开发设计提供借鉴和有效的先导化合物。     

枝顶孢霉对南方根结线虫的防治效果

以室内生物测定检测枝顶孢霉悬液对南方根结线虫二龄幼虫的致死率,在黄瓜砧木上,以盆栽试验和温室小区试验检测枝顶孢霉粉剂对南方根结线虫病的防效。结果表明,室内生物测定枝顶孢霉悬液对南方根结线虫的最高致死率为89.7%,毒力曲线为y =-7.5989+1.717826x,R~2=0.9960,LC_(50)=2.15×10~7 CFU/ mL;盆栽试验最佳防效为药后14 d,防效为15.38%~31.57%,各处理有剂量-效应关系,对黄瓜砧木生长有促进作用。温室小区最佳防效为药后120 d,防效为80.47%~84.38%。枝顶孢霉粉剂对南方根结线虫有一定的防效,同时可以促进黄瓜砧木的生长,需要在早期病害较轻时施用,药后4个月左右需要补施一次。     

根际细菌对南方根结线虫的生防活性

离体和盆栽试验测定了9株根际细菌对番茄根结线虫(Meloidogyne incognita)的活性.结果表明,供试细菌中菌株Paenibacillus sp.TX-4、Bacillus cereus 1Re107和Pseudomonas fluorescens 2R37对根结线虫二龄幼虫(J2)致死率分别达82.02%、76.52%和70.06%,对卵的孵化抑制率分别为84.46%、82.70%和77.58%.温室盆栽试验结果表明,菌株Paenibacillus sp.TX-4,B.cereus 1Re107和P.fluorescens 2R37能显著(P<0.01)减少番茄根瘤指数;9个供试菌株对番茄生长有显著(P<0.01)的促生作用.     

生物活性有机肥“红土运”对番茄根结 线虫病抑制的初步研究

【目的】探明生物活性有机肥“红土运”对番茄根结线虫病的抑制效果。【方法】室内测定生物活性有机肥“红土运”不同浓度浸出液对根结线虫虫卵孵化的影响,以及对2龄幼虫(J2)的致死作用;温室盆栽试验采用不同施肥方式,考察生物活性有机肥“红土运”对番茄植株生长状况,以及对根结线虫病的抑制效果。【结果】120、160、200 g/L生物活性有机肥“红土运”浸出液处理36 h对南方根结线虫J2幼虫的校正死亡率分别达62.6%、79.6%、84.5%,处理7 d虫卵孵化率仅为6.00%、2.66%、2.67%,与清水对照差异显著。温室盆栽试验表明,生物活性有机肥“红土运”基肥80 g处理与阿维菌素处理的防治效果无显著差异,抑制效果(相对防效)达到80.3%;表面撒施80 g、作基肥和表面撒施各施40 g处理,根结指数显著降低,相对防效分别为56.6%、47.4%。与对照相比,生物活性有机肥“红土运”可有效增加植株株高、茎粗和地上部分生物量及减轻植株根坏死率。【结论】生物活性有机肥“红土运”对番茄根结线虫病有良好抑制效果,为“红土运”的推广和番茄的安全优质生产提供理论依据。     

一株抗南方根结线虫长形赖氨酸芽孢杆菌的分离鉴定及应用

【目的】筛选对南方根结线虫具有良好活性的生防菌株,为杀线虫制剂的研制与应用提供理论依据。【方法】采用平板稀释法对从抗线虫黄瓜根系附近采集的土壤样品进行芽孢杆菌分离,通过浸渍法筛选出杀线活性高且稳定的菌株,结合形态特征、生理生化特性和16S rDNA序列分析对活性菌株进行分类鉴定,并通过离体、盆栽及田间试验对分离菌株防治南方根结线虫的效果进行验证。【结果】筛选出1株具有较高杀线虫活性的芽孢杆菌C1,经鉴定菌株C1为长形赖氨酸芽孢杆菌（Lysinibacillus macroides）。杀线活性测定结果表明,菌株C1发酵上清液对南方根结线虫卵孵化的相对抑制率为74.50%、对雌虫孵化的相对抑制率为95.17%、对2龄幼虫的24和48 h校正死亡率分别为98.83%和100.00%,且杀虫活性稳定;盆栽试验发现,菌株C1发酵液50倍稀释液对番茄南方根结线虫的防效为73.24%;田间防病试验结果显示,菌株C1发酵液50倍稀释液对黄瓜南方根结线虫病的防效达82.67%,且产量较清水对照增产20.0%。【结论】菌株C1不仅对南方根结线虫病具有良好的防治效果,且能促进作物生长,可作为生物农药和肥料在农业生产中开发利用。     

PGPR接种时期和AM真菌对番茄根结线虫病的影响

作者于温室盆栽条件下研究了植物促生根围细菌(plant growth promoting rhizobacteria,PGPR)Bacillus sp.接种时期和丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza AM)真菌摩西球囊霉(Glomus mosseae)接种对番茄(Lycopersicum esculentum Mill)生长发育及根结线虫(Meloidogyne incognitaMi)病的影响。结果表明于番茄播种时接种AM真菌摩西球囊霉+移栽时接种芽孢杆菌(Bacillus sp.)和南方根结线虫(M.incognita)的处理植株发病率和和病情指数最低、防效最高,分别为24.5%、12.5%和70.90%;并且显著增加番茄植株节点数、株高、茎粗、地上部干重及地下部干重。认为播种时接种AM真菌配合移栽时接种PGPR可以显著减轻南方根结线虫对番茄生长发育造成的危害程度,并且对南方根结线虫有较强的抑制效果。     

厚垣轮枝菌V10菌株对南方根结线虫的寄生和防治作用

在18℃和25℃条件下,室内测定厚垣轮枝菌V10菌株对南方根结线虫卵的寄生效果,结果表明,在18℃和25℃条件下,供试菌剂对南方根结线虫卵的相对寄生率分别为77.22%、73.00%,两者差异不显著,但在25℃条件下,菌株寄生卵的速度较快;该菌株对南方根结线虫二龄幼虫的寄生率很低.在温室进行盆栽试验,用剂量为7.56×10 10V10/m2、1.04×10V1110/m2和1.32×1011V10/m2菌剂处理,90d后,对番茄根结线虫病的防效分别为 45.35%、55.25%和65.27%.     

高杀线活性蜡蚧轮枝菌鉴定与发酵条件优化研究

通过室内试验,筛选得到1株具有高杀线活性的菌株Snef69,其发酵液的60%稀释液对南方根结线虫(Meloidogyne incognita)J2的校正致死率达到91.27%.通过ITS及形态学鉴定,并测定了不同发酵条件下Snef69菌株对南方根结线虫的毒力作用效果,结果表明该菌株为蜡蚧轮枝菌(Verticillium lecanii),随着发酵液浓度的增加,杀线活性增强,当发酵条件中碳源为麦芽糖、氮源为NaNO3、发酵天数为6～7 d、pH值=6时杀线虫效果最明显.     

白刺链霉菌CT205对南方根结线虫的毒杀作用及盆栽防效

[目的]检测白刺链霉菌(Streptomyces albospinus)CT205产生的挥发性有机化合物(volatile organic compound, VOC)和非挥发性有机化合物(nonvolatile organic compound, NVOC),并研究其对黄瓜根结线虫病的生防效果。[方法]分别将线虫悬液和新鲜线虫卵悬液与白刺链霉菌CT205发酵上清液共同培养,测定发酵上清液对根结线虫J2s和虫卵的毒杀作用。用气相色谱-质谱(GC-MS)检测CT205产生VOC的主要组分及含量,采用二分平板来检测CT205 VOC杀线虫活性。通过固体发酵制备白刺链霉菌CT205制剂,开展黄瓜盆栽试验测定CT205制剂对黄瓜根结线虫病的生防效果。[结果]CT205发酵上清液对根结线虫J2s具有较强的杀虫活性,24 h时校正死亡率达91.21%;对根结线虫虫卵同样具有较强的抑卵孵化作用,处理时间在72 h后相对抑制率达80%以上。CT205产生的主要VOC有烯烃类、醇类等化合物,能显著抑制根结线虫J2s活性。CT205菌剂可有效降低黄瓜根结线虫病的发病率促进黄瓜植株生长,对黄瓜根结线虫病的防...     

1株生防芽孢杆菌对黄瓜根结线虫的防治、促生作用及其鉴定

利用1株实验室保藏的、分离自大棚黄瓜根际土壤的芽孢杆菌KN1进行发酵培养,在温室条件下研究KN1菌株对黄瓜根结线虫病的防治效果及其对黄瓜的促生能力,并对该菌株进行分子生物学鉴定。结果表明:接种60 d在温室盆栽试验中,KN1菌剂蘸根处理线虫减退率和防治效果分别为48.2%和41.5%,与单独使用10%噻唑磷颗粒剂效果相当,能够显著减少根结的生成,KN1菌剂蘸根与10%噻唑磷颗粒剂配合使用效果较好,线虫减退率和防治效果分别达71.5%和57.27%;KN1蘸根处理黄瓜植株鲜质量、根系干质量分别比不接种菌剂对照增加30.33%和70.89%;基于16S r DNA系统发育分析结果显示,菌株KN1属于苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis),与苏云金芽孢杆菌serovar konkukian序列的相似度达99.5%,结合该菌的培养特征、形态特征将其鉴定为苏云金芽孢杆菌。菌株KN1的鉴定及对黄瓜的温室盆栽防治效果为研究其生防机制及开发应用提供了依据。     

绿色木霉菌株发酵液及分生孢子悬浮液对南方根结线虫二龄幼虫活性的影响

为研究绿色木霉(Trichoderma viride)菌株对南方根结线虫(Meloidogyne incognita)二龄幼虫(J2)活性的影响,采用不同浓度绿色木霉菌株发酵液(简称发酵液)和绿色木霉分生孢子悬浮液(简称孢子液)触杀二龄幼虫(J2),分别在24、36、48 h测定发酵液和孢子液对二龄幼虫(J2)致死效果。以5%阿维菌素乳油5 000倍液和无菌水为对照,同时对幼虫形态特征变化进行显微观察,探究发酵液和孢子液触杀二龄幼虫(J2)的原因,并通过盆栽试验对发酵液、孢子液预防和防治南方根结线虫的效果进行评价。结果表明,孢子液杀线过程主要依靠分生孢子的寄生作用,孢子寄生于幼虫体腔和体壁,幼虫活力随着孢子生长而降低;发酵液杀线过程主要依靠绿色木霉真菌在发酵过程中产生的拮抗物质。48 h内发酵液处理和孢子液处理中幼虫校正死亡率最高达86%和71%,均对幼虫具有较强致死效果,高于阿维菌素对照(51%),发酵液杀线效果和作用时效均优于孢子液。在盆栽试验中,绿色木霉发酵液和孢子液对南方根结线虫的预防效果分别为60.00%和49.99%,防治效果分别为66.67%和47.62%,生防作用显著。...     

康宁木霉T_2菌株防治根结线虫的应用方法研究

[目的]为解除土壤抑菌作用,提高康宁木霉T2菌株防治根结线虫效果。[方法]室内试验分别测定T2菌株对根结线虫卵的寄生能力,T2菌种发酵液的杀根结线虫幼虫活性,T2菌株分解秸秆及其在土壤中的定殖能力;并通过盆栽试验测定不同土壤处理对番茄根结线虫病害的防治效果。[结果]T2菌株对根结线虫卵的寄生能力强,其代谢物有一定的杀根结线虫幼虫活性;T2菌株能快速降解秸秆,土壤碳氮源对秸秆降解有很大的影响;在添加秸秆粉和乳酸后,T2菌株在土壤中的定殖能力较强。盆栽试验结果表明,在有秸秆粉及乳酸存在的条件下,T2菌株防治番茄根结线虫病害效果达76.4%。[结论]康宁木霉T2菌株与草粉和乳酸联合使用防治根结线虫效果显著,具有一定的田间应用前景。     

3株真菌发酵液对番茄根结线虫的防治效果

利用3个真菌菌株ZB-4、ZW-3、XX-8的发酵液对蕃茄根结线虫2龄幼虫进行室内离体活性测定和温室盆栽的防效试验。结果表明:供试3个菌株不同稀释倍数的发酵液在处理后24、48和72 h对番茄根结线虫都有一定的抑制作用,其中3个菌株的2倍发酵液在处理后72 h对番茄根结线虫2龄幼虫的校正抑制率分别为95.27%、91.27%、86.58%;4倍发酵液在处理后72 h对番茄根结线虫2龄幼虫的校正抑制率分别为68.52%、84.05%、60.33%。在温室盆栽试验中,用3个菌株的2倍发酵液处理番茄苗,与对照相比,处理后45 d番茄根结线虫的减退率分别达到46.7%、43.3%、36.7%,防治效果分别达到23.81%、19.52%、35.71%。此外,处理后22 d和45 d的调查结果显示,3个菌株的2倍发酵液对番茄生长有一定的促进作用。     

海洋放线菌BH3A8代谢产物杀线虫活性研究

植物寄生线虫的危害日趋严重,利用生物防治技术是控制线虫危害的研究重点。对从渤海海域不同深度水样中筛选出的具有杀线活性的菌株BH3A8代谢产物进行研究,测定了BH3A8代谢产物杀线虫谱和对南方根结线虫的温室防效以及对松材线虫形态与运动频率的影响。结果表明,BH3A8代谢产物对南方根结线虫幼虫毒力最强,对松材线虫幼虫毒力次之,对大豆孢囊线虫幼虫毒力最弱。在温室测定中活性菌株发酵液对南方根结线虫防治效果为73.75%。活性菌株代谢产物明显抑制松材线虫运动频率。中毒线虫起初表现为虫体扭曲、颤抖、痉挛,接着线虫游动缓慢、扭动身躯,最后线虫反应迟钝,摆动减慢,首尾同侧展开,标志着线虫死亡。虫体死亡多为僵直状态。BH3A8杀线虫谱广、效果好、使用成本低,在生产上具有很好的应用前景。     

黄瓜内生真菌对根结线虫生防活性测定

为了明确黄瓜根结内生真菌对根结线虫(Meloidogyne incognita)的防效,采用菌株发酵液对根结线虫进行离体活性和盆栽防效测定,结果表明,菌株经形态和18S r DNA鉴定为Plectosphaerella sp.,其发酵液对根结线虫处理48 h的致死活性为93.73%;盆栽试验表明,Plectosphaerella sp.对根结线虫的防效为56.1%。发酵液处理的黄瓜根系卵块数量少于对照,土壤中根结线虫2龄幼虫数量也少于对照。总体来看,Plectosphaerella sp.对根结线虫具有较高的生防活性,能为黄瓜根结线虫生物防治奠定基础。     

甲胺基阿维菌素苯甲酸盐对南方根结线虫的毒力、防效及安全性研究

选用02%高渗甲胺基阿维菌素苯甲酸盐(甲维盐)和18%阿维菌素对南方根结线虫进行室内毒力测定和盆钵药效试验.室内毒力测定结果显示:甲维盐对南方根结线虫二龄幼虫(J2)的毒力高于阿维菌素,甲维盐和阿维菌素的LC50值分别为0164 5、0453 2 mg·L-1.盆钵药效试验结果显示:甲维盐500倍液、1 000倍液对南方根结线虫病的相对防效为9367%、7969%,与阿维菌素防效相当,且甲维盐能显著抑制根结和卵块的产生.安全性测定结果显示:甲维盐各处理浓度对番茄生长均没有不良影响.表明:甲维盐可与阿维菌素交替应用于防治南方根结线虫病.     

不同生物制剂对南方根结线虫杀虫活性与防治效果

为探讨不同生物制剂对南方根结线虫杀虫活性及其防治效果,采用实验室分离培养的10株芽孢杆菌和2种山杏壳木醋液对南方根结线虫进行杀虫活性筛选,并利用温室盆栽番茄实验和番茄田间试验对筛选出的制剂进行防治效果验证。室内生测验证实验表明,有4株芽孢杆菌发酵液和山杏壳木醋液对南方根结线虫有较好的毒杀作用。菌株XYG169发酵液对线虫校正死亡率为84.9%;菌株BMT295发酵液对线虫校正死亡率为100%;菌株BMT256发酵液对线虫校正死亡率为97.9%;菌株YLT74发酵液对线虫校正死亡率为80.7%。山杏壳木醋液稀释100、200、400、600倍和800倍溶液的线虫校正死亡率分别为100%、100%、92.8%、65.4%和42.5%。盆栽实验表明BMT295粉剂4g+山杏壳木醋液300倍液处理防效最好,相对防效为74.00%。田间试验表明BMT295粉剂+山杏壳木醋液300倍液处理对南方根结线虫防治效果最好,其相对防效为64.54%,该结论与盆栽实验结论一致。综合室内生测实验、盆栽实验和田间试验结果,BMT295粉剂和山杏壳木醋液联合使用防治效果显著,可以作为生物杀线虫剂进一步在田间试验推广。     

诱导番茄抗南方根结线虫的青霉Snef1216发酵条件研究

将番茄种子分别用237株真菌处理后,在温室接种南方根结线虫,从中筛选获得了1株具有诱导番茄抗南方根结线虫的青霉Snef1216.通过单因素试验,确定了该菌株的最佳摇瓶发酵条件:培养时间8 d,摇瓶转数150 r/min,pH9.0,接种量20%,装液量50 mL(100mL三角瓶).通过L9(34)正交试验,确定该菌株...