月季“月月红”(Rosa chinensis‘Slater’s crimson China’)愈伤组织诱导及植株再生初报

以"月月红"(R.chinensis‘Slater’s crimson China’)的嫩叶为外植体,采用MS为基本培养基,在添加不同浓度的2,4-D、TDZ、GA3和NAA上,结合不同时间的暗培养,研究"月月红"胚性愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明,2,4-D 5 mg/L暗培养20 d诱导出的愈伤组织,在MS+TDZ 1.0 mg/L+GA30.1 mg/L+NAA0.01 mg/L培养基上暗培养12 d,可以获得较好的胚性愈伤组织;胚性愈伤组织转入光照培养15 d后可形成肉眼可辨的子叶期体胚及具有不定芽和胚根的结构,20 d后可长成绿色的小植株。     

秦艽体细胞胚胎发生及植株再生的研究

以秦艽子叶与胚轴为外植体,诱导秦艽体细胞胚胎发生并建立植株再生体系。结果表明：不同外植体以及植物激素浓度和种类对体细胞胚胎发生均有一定影响,其中秦艽的子叶胚性愈伤组织的诱导率最佳激素组合为2,4-D1.0mg/L,6-BA0.5mg/L,其诱导率为61.3%,对胚轴胚性愈伤组织诱导最佳激素为2,4-D1.0mg/L,其诱导率为42.3%。将胚性愈伤组织转接至MS培养基,都可产生再生植株。     

麻城油茶体细胞胚胎发生及植株再生

为建立油茶通过体细胞胚胎发生方式获得再生植株的技术体系,以湖北麻城油茶7月中旬幼胚为试验材料,消毒后切块接种于分别附加了2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT和5.0 mg/L NAA+1.0 mg/L KT的MS培养基,进行愈伤组织诱导培养。1个月后统计出愈率,两种处理的愈伤组织诱导率分别为83.23%和45.34%;挑选状态良好的愈伤组织继代于附加了1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L KT的MS培养基,培养2个月后可见明显的胚状体形成,统计胚状体平均发生率为15.25%;随后将胚状体继代于附加了1.0 mg/L NAA+3.0 mg/L 6-BA的MS培养基上进行胚状体发育和植株再生培养,获得具备完整子叶的胚状体后,转移至含有3.0 mg/L 6-BA的1/2MS培养基中进行生根培养,获得完整再生植株后驯化移栽至营养钵中继续生长。本研究建立了麻城油茶6个月内获得体细胞胚胎发生及植株再生的技术体系,为建立油茶农杆菌介导的遗传转化技术体系奠定了基础。     

蝴蝶兰愈伤组织诱导和体细胞胚胎发生的研究

研究了蝴蝶兰愈伤组织的诱导和通过体细胞胚胎发生的植株再生。原球茎在含有蔗糖的VW培养基上形成愈伤组织。结果表明,最有效的诱导愈伤组织的培养基为VW+0.1 mg/L BA+0.1 mg/L 2,4-D+60 g/L蔗糖或者VW+0.3 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+40 g/L蔗糖。愈伤组织在被转到不含植物激素的VW培养基上易形成原球茎。组织学观察证实了体细胞胚胎结构的形成,暗示了试验中诱导的愈伤组织即为体细胞胚。     

月季“黄和平”体细胞胚诱导的初步研究

以月季(Rosa chinensis)“黄和平”的幼嫩叶片为外植体,研究了不同植物生长调节剂对其愈伤组织和体细胞胚诱导的影响.结果表明,在愈伤组织诱导试验中,MS+3 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA效果最好,诱导率达94.8％;在体细胞胚诱导试验中,其最适诱导培养基为MS+1.2 mg/L TDZ,暗培养8d后转入光下培养,体细胞胚诱导率最高,达33.3％,暗培养超过8d,外植体易形成愈伤组织而不利于体细胞胚的诱导.     

噻苯隆对月季芽增殖及月季叶片愈伤诱导的影响

为研究噻苯隆( TDZ)对月季的影响,以皇家巴西诺月季的茎段和叶片为外植体,MS为基本培养基,添加一定浓度的细胞分裂素和生长素及不同浓度的TDZ,对其芽增殖和叶片愈伤组织诱导进行了研究.结果表明:促进侧芽增殖的最佳培养基为MS+NAA 0.lmg/L+6BA1.0mg/L+TDZ 2.0mg/L,诱导月季叶片形成愈伤的最佳培养基为MS+NAA 0.5mg/L+2,4D5.0 mg/L+ TDZ 1.0mg/L,0.5 cm×1.0 cm的切块有利于愈伤组织的产生.     

粉和平月季植株再生体系建立研究

以试管苗的幼嫩小叶为外植体,探讨了粉和平月季通过诱导愈伤组织建立植株再生体系的方法。结果表明:2,4-D能有效诱导无菌小叶产生愈伤组织,经5.0mg/L的2,4-D光下诱导愈伤20d后,愈伤组织诱导率最高可达91.11%,且其愈伤质量最优。将生长良好的愈伤组织转至TDZ浓度为0.5～2.0mg/L的MS培养基中发现,暗培养8～16d均能诱导愈伤组织产生不定芽,但暗培养时间超过16d愈伤组织容易褐化死亡。在含1.2mg/LTDZ的MS培养基上暗培养14d后其不定芽诱导率可达30%。将生长良好的不定芽转入壮苗培养基MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.01mg/L中培养25d左右,组培苗芽枝叶粗壮,生长旺盛;将长至2～3cm长的健壮小苗转入生根培养基,生根率最高仅为8%。     

大花香水月季再生体系的初步建立

 以大花香水月季（Rosa odoratavar. gigantea）为材料,研究了影响愈伤组织诱导和分化的因素,包括不同生长调节剂浓度和组合、暗培养时间等。结果表明,以带有腋芽的茎段为外植体,MS为基本培养基,腋芽萌发的最适激素浓度组合为6-BA 1.5mg/L+NAA0.12mg/L;最适诱导愈伤培养基为MS+2,4-D 4.0mg/L,诱导率为93.33%;最适诱导不定芽培养基为MS+TDZ 3.0mg/L+GA3 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,暗培养15d,再生率为18%。本研究通过间接器官再生途径初步建立的大花香水月季植株再生体系,为利用外源基因对月季进行遗传改良奠定了基础。     

月季优质品系的高效繁殖体系研究

以古老月季优质品系的小叶及复叶柄为外植体,探讨了月月粉（Rosa chinensis‘Pink China’）自交后代一优良品系月月红粉（Rosa chinensis‘Red and Pink’）的愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生与增殖及植株高效再生的方法。结果表明,2,4-D可能是月月红粉最适宜愈伤诱导的生长激素;最佳外植体为复叶柄;同时添加L-p和AgNO₃对体细胞胚发生有促进作用;在MS+（3.0,4.0,5.0,6.0 mg/L）2,4-D+400 mg/L L-p+10 mg/L AgNO₃+3%Glucose+3 g/L GEL培养基上,外植体最初形成愈伤组织,经过16周培养后均不同程度发生体细胞胚;适合月月红粉体细胞胚增殖的培养基为:MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.05 mg/L BA+3%Glucose+0.3%GEL。体细胞胚在萌发培养基1/2 MS+3%Glucose+0.3%GEL+1.0 mg/L BA+0.01 mg/L NAA上萌发培养,最终建立了以月月红粉体细胞胚发生途径为基础的高效再生体系,为加快蔷薇属植物...     

不同浓度TDZ和2,4-D组合对草莓花药组织培养的影响

为探究草莓花药离体再生体系最适宜培养条件,以草莓品种“枥乙女”花药为试材,研究细胞分裂素TDZ和生长素2,4-D对草莓花药愈伤组织诱导、分化和增殖的影响,筛选不同阶段最适寅草莓花药组织培养激素配比.结果 表明,TDZ和2,4-D激素组合可成功培养出草莓花药再生植株,最适宜诱导培养基为MS+2,4-D 0.2 mg/L+TDZ 1.5 mg/L,最适宜分化培养基为MS+2,4-D 0.05 mg/L+TDZ 2.0 mg/L,最适宜增殖阶段培养基为MS+TDZ 0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L.     

越南紫薯胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎形成

【目的】越南紫薯〔Ipomoea batatas（L.）Lam〕品质优良,薯块均匀,商品性好,但产量偏低,产量性状亟待遗传改良,体细胞胚胎发生是快速繁殖和保持种性稳定的基础,对紫薯的遗传改良有重要意义。采用激素处理越南小紫薯外植体,研究越南紫薯的体细胞胚胎再生途径,为通过体细胞无性系变异筛选紫薯高产优质新材料提供新方法。【方法】以市场销售的越南紫薯为材料,以叶片和茎段作外植体,探讨植物生长调节物质种类（6-BA、NAA、2,4-D、ABA）及配比对越南紫薯培养的影响,建立越南紫薯体细胞胚胎发生及再生植株体系。【结果】叶片和茎段诱导愈伤组织培养基相同,难易程度一致,诱导配方为 MS+6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L;在普通愈伤组织诱导形成胚性愈伤组织过程中,2,4-D 起重要作用,其他激素起辅助作用,较好的诱导配方为 MS+6-BA 0.1 mg/L + 2,4-D 2.0 mg/L;在胚性愈伤组织诱导产生体细胞胚过程中,ABA 起着重要作用,并进一步发育和分化的适宜的培养基为 MS+6-BA 0.1 mg/L + NAA 0.2 mg/L + ABA 0.5 mg/L。【结论】叶片和茎段愈伤组织诱导最佳培养基为 MS+6-BA 1.0 mg/L+0.2 mg/L NAA,愈伤组织转化为胚性愈伤最佳培养基为 MS+6-BA 0.1 mg/L +2,4-D 2.0 mg/L;胚性愈伤形成体细胞胚胎最佳培养基为 MS+6-BA 0.1 mg/L + NAA 0.2 mg/L + ABA 0.5 mg/L。     

月季体胚诱导和植株再生的研究

以丰花月季品种"红帽子"叶片为试材,研究了不同植物生长调节剂及暗培养时间对月季体胚诱导和植株再生的影响。结果表明,在5 mg/L 2,4-D的MS培养基上光下培养,20 d的愈伤组织诱导效果最好,诱导率达98%;在MS 1.2 mg/L TDZ 0.1 mg/L NAA 0.1 mg/L的培养基上暗培养8 d后转入光下培养,体胚诱导率为33.3%,植株再生率为16.7%,暗培养时间超过8 d,外植体易形成愈伤组织而不利于体胚的分化。     

紫果西番莲愈伤组织诱导分化及不定芽增殖研究

以紫果西番莲离体培养的子叶为实验材料,对其愈伤组织进行诱导、分化及不定芽增殖。结果表明:在愈伤组织诱导中,以MS培养基+2,4-D 1.0 mg/L+TDZ 0.5 mg/L+琼脂3.8 g/L+蔗糖30 g/L的诱导效果最好,其诱导率为73.33%。在愈伤组织不定芽诱导中,以MS培养基+2,4-D 0.5 mg/L+TDZ 2.0 mg/L+琼脂3.8 g/L+蔗糖30 g/L的诱导率最佳,为46.67%。对不定芽继续进行增殖培养,以MS培养基+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖30 g/L最佳,增殖倍数为2.97。从而建立了西番莲植株再生体系,可进行优良材料的离体快繁。     

芝麻菜愈伤组织诱导及植株再生*

 以芝麻菜(Eruca sativa Mill)无菌苗的下胚轴、子叶和子叶柄作为外植体,研究了不同的激素浓度和组合对其愈伤组织诱导和植株再生的影响。结果表明,分别以MS+0.8mg／L 2,4-D,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.1mg／L 6-BA,MS+0.8mg／L 2,4-D+0.2mg／L 6-BA为下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织诱导培养基时,效果较好,出愈率依次为86.3%,78.2%,97.6%;将下胚轴、子叶柄和子叶的愈伤组织分别转移到分化培养基MS+3.0mg／L 6-BA+0.1mg／L　NAA,MS+3.0 mg／L 6-BA+0.2mg／L NAA上再生不定芽,效果最佳,不定芽再生频率分别为72.7%,63.6%,69.2%。将不定芽切下转移至1／2 MS+0.5mg／L IBA培养基上诱导生根,生根率达81％以上。     

不同植物生长调节剂对大苞白山茶叶片愈伤组织诱导的影响

以大苞白山茶叶片为外植体,研究不同生长调节剂6-BA、TDZ、KT、2,4-D和NAA对其愈伤组织诱导的影响.结果表明:MS+3.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA愈伤诱导率最高,但以MS+2.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA愈伤组织分化最好;在6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基中分别加入2,4-D (0.5～2.5 mg/L)、KT(0.5～2.5 mg/L)和TDZ(0.1～0.5 mg/L)后,2,4-D和TDZ均可提高愈伤组织的诱导率,最高可达100％和94.8％,KT的加入反而降低了愈伤组织的形成;适宜的分化培养基为MS+ 2.5 mg/L 6-BA+ 0.02 mg/LTDZ+ 0.05 mg/L NAA.     

东北天南星体细胞胚胎发生及植株再生体系的优化

为建立东北天南星体细胞胚胎发生体系,以东北天南星幼叶为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导、体细胞胚胎发育及植株再生的培养基。结果表明,东北天南星叶片胚性愈伤组织及胚性细胞复合体诱导最适宜的培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L,诱导率为98%;体细胞胚胎发育及植株再生最适宜的培养基为MS+6-BA 0.9 mg/L+NAA 0.1 mg/L+IAA 0.1 mg/L,体细胞胚萌发率为99.5%,萌发的胚20 d后全部发育成完整植株。     

刺槐子叶的不定芽诱导及植株再生

以刺槐种子在无菌条件下播种生长7 d的子叶为外植体,研究不同植物生长调节剂和继代培养次数对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明:生长调节剂种类和质量浓度对刺槐子叶的愈伤组织诱导及愈伤组织再分化有一定影响,刺槐子叶诱导愈伤组织的最佳培养基:MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.2 mg/L,诱导率为98.9%,愈伤组织再生不定芽的最佳培养基:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L,再生率为74.4%。愈伤组织的不定芽诱导率随继代次数的增加呈下降趋势。对刺槐子叶进行了直接诱导不定芽的试验,诱导率最高达87.8%,其培养基为:MS+6-BA 5.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L。     

新疆雪莲的体细胞胚胎发生及植株再生

通过对新疆雪莲进行胚性愈伤诱导培养(MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.05 mg/L),体细胞胚胎发生诱导培养(MS+2,4-D 0.1mg/L),体细胞胚胎分化培养(MS+PEG 25 g/L),体细胞胚胎萌发(MS+GA35 mg/L)和壮苗培养(MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.3 mg/L),首次通过体细胞胚胎发生途径实现了新疆雪莲的植株再生,生根率100%,成活率达60%,为其大规模人工栽培奠定了基础。     

南瓜离体培养及植株再生的研究

研究了不同外植体、消毒方法、激素水平等对南瓜离体培养及植株再生的影响。结果表明:以子叶作为外植体可以通过愈伤组织途径之后形成再生植株;而以子叶节作为外植体可以直接诱导不定芽形成再生植株。诱导不定芽的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA;诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L 2,4-D;诱导南瓜不定根的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L6-BA+0.5 mg/LIAA。     

北美蓝云杉体细胞胚发生技术研究

研究北美蓝云杉体细胞胚发生技术,对该树种的胚胎发生机理和建立相关的快繁技术体系等具有一定的理论意义。以成熟胚为外植体,分别对基本培养基、生长调节剂种类和浓度对其体细胞胚发生各阶段的影响进行了研究,同时观察体细胞胚发生过程的形态特征。结果表明:1)胚性愈伤组织诱导培养基,首先在DCR培养基+2,4-D5.0mg/L+6-BA4.0mg/L+KT2.0mg/L诱导15d后,之后转入DCR培养基+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L+KT0.5mg/L,胚性愈伤诱导率最高为45.3%;2)胚性愈伤组织保持与增殖培养基为1/2LM培养基+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.5mg/L+KT0.5mg/L+PEG40001.0g/L,胚性愈伤组织增殖率最高为102.27%;3)IBA可促进成熟体细胞胚的诱导,以1/2LM+IBA0.5mg/L+ABA2.0mg/L(以上4种培养基均附加蔗糖30g/L,谷氨酰胺450mg/L,水解酪蛋白500mg/L,琼脂5.0g/L,pH=5.8)的体细胞胚诱导率最高,为38.10%;4)在1/2MS+1.0g/L活性炭的培养基上,体细胞胚萌发,子叶生长但胚根发生较少。北美蓝云杉体细胞胚诱导过程中出现严重的畸形胚现象及生根难的问题,今后有待进一步研究。