几种中国兰种子试管培养根状茎发生的研究

对蕙兰和墨兰的种子进行解剖学观察,可以看到种皮由一层透明的细胞组成,种胚为发育不完全的球形胚,胚内不含淀粉,仅含脂类作为储存营养物质．试管培养条件下,球形胚顶端细胞分裂,胚体积增大,胀破种皮,形成类原球茎．其顶端分生组织细胞继续分裂,形成根状茎．在激素诱导下,根状茎的表皮和皮层细胞可分裂形成侧生分生组织．然后顶生和侧生分生组织分化出叶原基,表皮和皮层细胞分化出不定根．在种子萌发成苗的过程中,脂类逐渐消失,蛋白质在分生组织细胞中含量较多,淀粉粒多分布在薄壁细胞中,与形态发生有密切关系．     

春兰根状茎离体培养的研究

以春兰种子诱导出来的根状茎为材料,探讨培养方式、培养条件等因素对春兰组培快繁的影响.结果表明:春兰根状茎在液体振荡培养与固体培养的交替培养中不仅增殖率高,而且生长迅速.光照是根状茎分化成苗的必要条件;28℃时,根状茎的分化率可达62.5％,高温下(30℃)根状茎分化受抑制;另外,春兰不定芽基部保留适当长度的根状茎有利于其生根.     

墨兰组织培养中原球茎的形态解剖研究

通过对墨兰（Ｃｙｍｉｄｉｕｍ ｓｉｎｅｎｓｅ）组织培养中原球茎外部形态、内部结构的观察研究,发现墨兰茎尖组织培养中产生的原球茎和丛生型原球茎虽外形差别较大,但内部结构都具有根的典型特征。牙的分生组织可以在原球茎表层、丛生型原球茎或其顶端发生。芽的顶端分生组织与随后产生的根的顶端分生组织共同构成胚状结构,其形态与种子胚相似。由于墨兰组培中先后产生的原球茎和丛生型原球茎其内部结构都属典型的根结构,故称     

兰花高频再生体系探究

[目的]为兰花转基因工程研究奠定基础。[方法]以大花蕙兰原球茎、小苗和春兰种子为材料,以MS为基本培养基,将原球茎切成薄片slice、小苗叶片切成小段进行诱导培养,用舍有GFP基因的农杆菌对春兰幼小原球茎进行转化,检测GFP,的瞬间表达。[结果]薄层切片较薄时,褐化和死亡率较高,但从切口处长出的原球茎多而圆;薄层切片较厚时,褐化和死亡率较低,但切口处无再生原球茎产生;对切片进行7d的暗处理可提高薄层的再生率,黑暗中再生的白色原球茎见光培养2～3d后即可转绿,并很快分化出小芽;叶片原球茎仅在叶片基部的居间分生组织处产生;小于1min的类原球茎为最佳转化受体,GFP的瞬间表达率可达60％。[结论]建立了兰花高频再生体系。     

大花蕙兰原球茎的诱导、增殖及其解剖结构研究

通过诱导根状茎上的休眠芽萌发,以其茎尖和幼茎段材料为外植体进行组织培养,建立了大花蕙兰(Cymbidium hynridum)的无菌繁殖体系,并筛选出大花蕙兰无菌繁殖的最佳培养基组成。原球茎诱导的较适宜的培养基为MS 1.5 mg.L-16-BA 0.1 mg.L-1KT 0.05 mg.L-1NAA,诱导率达15%;原球茎增殖培养基在诱导培养的基础上添加150 g.L-1香蕉泥,其增殖系数1个月内可达15~35。原球茎是由顶端分生组织后面的薄壁细胞脱分化,形成胚性细胞,经球状胚发育而来。     

蕙兰种子无菌萌发及植株再生

以中国传统国兰之一的蕙兰‘大一品'种子为外植体进行无菌萌发,然后对形成的根状茎进行诱导、增殖和成苗.结果表明:种子离体培养在附加HAA0.5 mg·L-1的改良Ms培养基上,3个月后开始萌发形成原球茎;低无机盐浓度的培养基适合蕙兰种子萌发.将原球茎转移到附加NAA2.0 mg·L-1的培养基上后,原球茎逐渐转变为根状茎形式进行增殖.50 ml·L-1椰子汁可大大促进根状茎的诱导和增殖.MS基本培养基中添加0.5～2.0 mg·L-1BA和1 g·L-1活性炭,60 d后根状茎可形成芽苗.     

春兰杂交种子无菌萌发及植株再生培养技术

研究了春兰种内杂交种和种间杂交种的结实情况,种子无菌萌发和植株再生培养技术。结果发现,春兰种内杂交、春兰与蕙兰种间正反交结果率和种子量都比较正常,春兰种内杂交种萌发率明显高于种间杂交种;春兰种内杂交种第1年杂交种子萌发数大于50的占到11.11%,第2年杂交种子萌发数大于50组合为2.4%,第3年杂交种子萌发数大于50的占到38.27%,春兰品种自交种、种子萌发原球茎出现不同程度的白化变异;春兰和大花蕙兰种间正反交结果率差异较大,蒴果种子量少,但种子萌发数多,种子培养第1年萌发数均大于100;春兰种内杂交种子萌发后根状茎增殖和芽诱导液体培养方式的增殖生长量和形成优势数明显优于固体培养。在"环球荷鼎×九章梅"杂交种组培小苗根诱导试验中,当活性炭浓度为1 g/L,NAA浓度为0.5 mg/L时,组培苗平均新根数和平均新根长数最大。     

春兰根状茎增殖及其分化影响因子

以春兰无菌根状茎为材料,研究不同激素配比及接种极向对其增殖和分化的影响.结果表明:添加2 mg/LKT有利于春兰根状茎增殖；横向平放接种处理的春兰根状茎分化数量显著高于倒接和正接处理；添加ZT能显著促进春兰根状茎分化.     

不同有机添加物及柠檬酸钠组合对春兰根状茎增殖的影响

通过添加不同浓度猕猴桃汁、香蕉汁、梨汁、苹果汁、白萝卜汁、胡萝卜汁、土豆汁、红薯汁等8种有机物及柠檬酸钠组合,研究其对春兰根状茎增殖及抗褐化效果的影响。结果表明,单独添加猕猴桃汁100.0 g·L-1、梨汁100.0 g·L-1或柠檬酸钠1.0 g·L-1比对照能显著促进根状茎增殖,增殖中生长倍数分别为3.9、2.4和2.2,梨汁和猕猴桃汁处理中,根状茎中细胞分裂相关基因CgCki、CgCKS、CgClins、CgE2F和CgRb表达量显著提高。1/2MS+NAA5.0 mg·L-1+活性炭1.0 g·L-1+猕猴桃汁100.0 g·L-1+柠檬酸钠1.0 g·L-1组合对春兰根状茎增殖及抗褐化效果最好,根状茎增殖的生长倍数为4.2,细胞分裂相关基因CgCDKS、CgCki、CgCKS、CgClins、CgE2F和CgRb表达显著提高。因此,在春兰组培快繁过程中猕猴桃汁+柠檬酸钠组合可以有效地促进根状茎增殖,并防止根状茎褐化。     

霍山石斛拟原球茎生长及植株再生过程中微观结构与元素的变化

采用SEM/EDS技术,研究霍山石斛拟原球茎生长及植株再生过程中结构和元素的变化,分析其发育过程及药效成分。结果表明:适当的组培条件会使外植体表层具有分生能力的细胞不断分裂和增殖形成拟原球茎和次拟原球茎。其中拟原球茎分化出芽和根,完成幼苗的形态发育。30 d后幼苗的根无明显的根毛和根被组织;茎表皮多纵向皱褶,横切面边缘具波状棱角,细胞内含物黏液状,外韧有限维管束散生;等面叶,四列型气孔只分布于下表皮,保卫细胞肾形。拟原球茎形成期,含有较多的Na、S、K、Al、Si、Fe,分化期P、Cl、Mn、Ca增多,幼苗所含K、Ca增幅较大,其他元素减少或变化不明显。     

中国兰花远缘杂交及杂交种子萌发的研究

以兰属，文心兰属，蝴蝶兰属的兰花为材料，对中国兰花远缘杂交及其杂交种子的萌发进行了研究，结果表明：（1）国兰类各种间杂交易成功，结果率为80％以上；（2）墨兰和大花蕙兰杂交，结果率和杂交种子数量胡品种和正反交不同而异；（3）兰属和其他属兰花杂交，结果率较低，且的杂交种子量很少；（40兰花杂交种子萌发形成的中间繁殖全的种类和数量，随杂交组合不同而不同，墨兰和大花蕙兰的杂交种子萌发后形成原球茎，其余组合产生根状茎，通过原球茎和根状茎途径已生产兰共杂种试管苗近万株，并对中国兰花远缘杂交育种和杂种试管苗生产进行了讨论。     

春兰杂交种子无菌萌发及根状茎增殖的研究

研究了杂交塑果的成熟度、植物激素、有机添加物及培养方式对春兰杂交种子无菌萌发和根状茎增殖的影响。结果表明：成熟度为五个月的春兰杂交蒴果萌发率最高,杂交种子高萌发率和中等萌发率的比例也比较高。1/2MS＋0.3 mg/L NAA＋20g/L蔗糖＋7.0g/L琼脂和1/2MS＋1.5 g/L蛋白胨＋20g/L蔗糖＋7.0g/L琼脂的培养基配方培养根状茎的增殖系数较高,根状茎生长优良;薄层液体培养有利于根状茎的增殖。     

大面积稻田病虫优化防治技术的研究

1997～1999年,在对湖南桃江县水稻主要病虫不同年度的灾变特点和病虫发生新动向调查的基础上,筛选出大面积稻田病虫优化防治技术,即县域统防,社区统治,分田施治,依据病虫发生的特征制定防治对策.初步筛选出一批低残留、高防效、有利保护天敌的新农药.采用优化防治技术与依据传统经验进行防治的方法相比,可节省防治费用21.31%,增加单产44 0 kg/hm2.     

春兰菌根的显微结构观察

应用石蜡切片法,借助于光学显微镜观察春兰无菌组培苗、接菌组培苗的根及野生状态下的新生营养根、老根,结果表明:接菌组培苗的根及野生状态下的新生营养根、老根,其皮层组织细胞内有大量的菌丝结等兰科菌根的典型结构,而无菌组培苗的根则无菌丝、菌丝结等结构.菌根真菌自外皮层薄壁通道细胞侵入根的皮层细胞,春兰菌根是典型的地生兰菌根.     

根系的发育及其激素调控研究

概述了植物根系的发育及其激素调控的研究进展。侧根的发生起源于特定的中柱鞘细胞,发生过程可分为起始、侧根原基的形成、侧根分生组织的形成与活化。不定根由根原基发育而来,不定根原基按其形成的时间、部位和形成的原因,可分为先生根原基和诱生根原基。生长素、赤霉素等生长调节剂都可以促进植物根系生长。     

分枝列当茎的发育解剖学研究

分枝列当茎的初生分生组织由原表皮、原形成层和基本分生组组织组成。在原形成层束分化为初生维管束的过程中,维管束可通过束内分化出１或几列薄壁细胞的方式分离形成２－４个维管束,使维管束的数目迅速增加。在初生生长过程中,部分髓射线薄壁细胞转变为异常形成层束,异常形成层束再分化产生新的维管束。     

油松针叶束离体培养下器官建成的解剖学研究

油松针叶束经离体培养形成幼苗的整个过程，可划分为三个阶段，即愈伤组织的起源与形成；根原基的发生和不定根的形成；芽的萌动与生长。发生在针叶束切口上的愈伤组织起源于形成层和韧皮部的薄壁细胞，经脱分化恢复分生组织的生理机能，并进行分裂活动形成愈伤组织。根原基主要是从愈伤组织内发生，属于愈伤组织生根类型。在愈伤组织内分化出来的分生组织结节和维管组织结节，经单向极性分裂活动形成根原基，并继续生长突破愈伤组织成为不定根。芽在愈伤组织出现后起动，生长锥进行缓慢的分裂活动，由扁圆形芽体变为长圆形，并形成初生叶原基与幼叶紧包生长锥。移植后芽生长迅速，长出数枚窄条状初生叶，不久即抽梢。