大花蕙兰类原球茎薄切片高频诱导体系的建立

通过对大花蕙兰离体诱导类原球茎几个主要影响因素的研究,构建优良、高效的离体诱导体系.研究表明,不同外植体类型再生能力有显著差异,其中以类原球茎(protocorn-like body,PLB)横切片(transverse thin cell layers,tTCLs)为外植体可获得最高的PLB再生频率,叶片再生频率及数量最低.不同激素配比影响tTCLs的再生能力,其中在1/2 MS TDZ 1.0 mg/L KT 0.5 mg/L NAA 0.5 mg/L上最高诱导频率为91.20%.在上述培养基中添加3.0 mg/L AgNO3可提高tTCLs上PLBs的形成,但作用不显著.可见,以tTCLs为外植体诱导大花蕙兰PLBs切实可行.     

日本草莓生产现状和最新动向

日本既是草莓生产大国，也是消费大国。日本草莓生产以鲜食为主，而且力求鲜果周年供应，设施栽培极其发达。早熟品种选育和促进花芽分化理论研究及实践都处于世界领先水平。品种特点是果实大、外观美、味甜、休眠浅、花芽分化早，但抗病虫弱、果实软、贮运性差。栽培方式几乎都是促成栽培，与之相应的肥料、CO2气肥、加温和电照等     

硼、钙和农药对草莓花粉萌发和花粉管生长的影响

采用花粉液体培养法研究温度、硼、钙及农药对草莓花粉萌发和花粉管生长的影响。结果表明,(1)草莓花粉萌发和花粉管生长适宜的温度为25～30℃。(2)外源硼酸为草莓花粉萌发必需物质,适宜质量浓度为0.3g/L,低质量浓度促进花粉萌发和花粉管生长,而高于0.3g/L则起抑制作用。(3)外源钙为非必需物质,但适量的外源钙离子有利于花粉萌发,适宜质量浓度为0.3g/L,高钙抑制花粉萌发。(4)在培养液中分别加入常规浓度的7种农药,每处理几乎无花粉萌发,加入1/10常规体积分数的7种农药中,只有一遍净、速克灵、奥美特等3种农药处理有少量花粉萌发,说明农药对花粉萌发和花粉管生长有强烈抑制作用。     

几种珍贵荷花品种组织培养技术研究

以MS培养基为几种荷花茎尖组织培养的基本培养基，通过添加不同浓度的植物激素BA、GA、NAA和IBA，观察不同激素水平对诱芽、增殖及生根的影响，筛选出较为合适的诱导培养基：MS＋BA0.4mg/L GA0.2mg/L；增殖培养基：MS＋BA0.8mg/L GA0.5mg/L；生根培养基：MS＋IBA1.4mg/L。试管苗移栽基质以西湖淤泥的成活率最高，达到72．7％。     

羽衣甘蓝花药离体培养研究

以羽衣甘蓝的花药为外植体,通过不同消毒处理时间,采用不同分化阶段的花药、不同激素浓度配比对羽衣甘蓝花药进行离体培养,筛选出最佳消毒处理时间、最佳分化阶段的花药、最佳诱导分化培养基.结果表明,用羽衣甘蓝花蕾大小为4～5 mm时期的花药,经0.1%HgCl2消毒处理8 min,在MS BA 3 mg/L NAA0.3 mg/L诱导分化培养基中诱导愈伤组织及不定芽的总体效果最好.     

春兰GLO基因的克隆和实时定量表达分析

采用RT-PCR结合RACE技术从春兰(Cymbidium goeringii)中分离到一个GLO基因.该基因含有一个630 bp的开放阅读框(ORF),共编码210个氨基酸.系统进化树分析显示,该基因属于B类MADS-box基因的PI/GLO家族,其编码的蛋白与其他植物PI/GLO类蛋白具有很高的同源性,命名为CgGLO(登录号HM106984).实时荧光定量表达分析表明,CgGLO主要在第二轮花器官唇瓣和花瓣中表达,在萼片、子房和叶片中表达较少,在蕊柱和根中表达量最少,这种表达模式支持了van Tunen对ABC模型的修正,也显示了CgGLO基因可能在春兰花器官以及子房的形成过程中起着重要作用.     

春兰AGL6基因的克隆及实时定量表达分析

本研究采用RT-PCR结合RACE技术从春兰(Cymbidium goeringii)中分离到一个AGL6基因。序列分析表明,该基因含有一个729bp长的开放阅读框(ORF),共编码242个氨基酸。系统进化树分析显示,该基因属于MADS-box基因家族AP1/AGL9组的AGL6同源基因,其编码的蛋白与其它植物AGL6类蛋白具有较高的同源性,命名为CgAGL6(基因登录号为HM208533)。实时荧光定量表达分析表明,CgAGL6基因春兰不同组织中均有表达,其中在唇瓣、花芽和子房中的表达量较高,在花瓣和萼片中的表达量次之,在根、叶和蕊柱中的表达量最低,显示了CgAGL6基因可能在春兰成花转变和花器官的形成过程中起着重要作用。     

草莓主栽品种丰香高效离体再生体系的研究

以目前国内草莓主栽品种丰香为试材，研究影响不定芽再生的各种因素，以建立简单、快速、高效的叶片离体再生体系。结果表明，对某一特定的基因型来说，外植体类型和外源激家种类对其再生芽的发生频率和数量都有明显的影响。TDZ对芽再生的效果明显比BA强。丰香叶片在LS TDZ2.0mg/L 2,4-D0.1mg/L IBA0.2mg/L的分化培养基上再生频率可稳定在46％～52％，平均每叶片再生芽数为1．6～2．2，10～28天叶龄的叶片再生能力较高。     

蕙兰Flowering locus T基因的克隆及其对开花的影响

【目的】 探讨CfFT基因在蕙兰成花中的作用。【方法】采用RT-PCR结合RACE技术从蕙兰(Cymbidium faberi)中克隆Flowering locus T（FT）同源基因CfFT。采用实时定量RT-PCR对不同组织及不同花发育时期CfFT进行表达分析。将该基因克隆到PBI121载体上导入烟草中,并对不同转基因烟草株系中的CfFT、NFL、NtFUL和NAP1基因进行实时定量RT-PCR分析。【结果】对蕙兰花芽分化不同时期的CfFT的表达分析表明,CfFT在花芽分化初期的表达量最高,之后随着花芽的成熟表达量逐渐降低。将CfFT导入烟草进行异源表达,转基因株系表现出明显的早花表型。对开花时间不一的转基因株系中的CfFT表达分析表明,其表达量与转基因烟草开花时间早晚成正比。进一步对这些株系内源的NFL、NAP1和NtFUL表达分析表明,NFL、NAP1和NtFUL基因的表达量与CfFT表达成正比,说明NFL、NAP1和NtFUL的表达受FT基因的上游调控。【结论】在烟草中异源表达蕙兰中的CfFT基因能促进烟草提前开花。     

不同外植体对草莓病毒脱除效果及病毒的多重RT-PCR检测

以草莓茎尖和花药为外植体,多重RT-PCR为检测方法研究了不同培养材料对3种草莓病毒,即斑驳病毒(strawberry mottle virus,SMoV)、轻型黄边病毒(strawberry mild-yellow edge virus,SMYEV)和镶脉病毒(strawberry vein-band virus,SVBV)的脱除情况。结果表明,花药愈伤组织再生苗途径对3种病毒的脱除率为100%。而不同大小茎尖脱除病毒效果不同:0.2mm茎尖可完全脱除3种病毒,但成苗率低;0.5mm茎尖可有效脱除SMoV和SVBV,但对SMYEV脱除不彻底;0.5mm茎尖成苗率明显高于0.2mm茎尖,但较难脱除SMYEV。综合病毒脱除率和成苗率,对花药再生频率较高的草莓基因型(如红颊)可以采用花药愈伤组织再生途径进行病毒脱除,而对于花药再生困难的基因型可以考虑选用茎尖分生组织途径获取脱毒苗。