小尾寒羊血液蛋白(酶)位点上多胎性的比较研究

[目的]为了研究小尾寒羊血红蛋白和酯酶多态性与多胎性之间的相关性。[方法]采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳对118只小尾寒羊的血红蛋白和酯酶多态性进行了分析,并对有产羔记录的2.5岁经产母羊在血红蛋白和酯酶位点上的多胎性进行了比较。[结果]小尾寒羊在血红蛋白位点上的优势基因为HbB,基因频率为0.795;在酯酶位点上的优势基因为Es-,基因频率为0.598。在小尾寒羊产羔性状上,血红蛋白HbBB型和酯酶Es++型占优势,其中酯酶Es++型的产羔数显著高于其他基因型。[结论]血红蛋白和酯酶多态性与多胎性之间的相关性,可作为小尾寒羊育种中的早期选择依据。     

甘肃滩羊血清酯酶和α-淀粉酶多态性分析

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(PAGE)对甘肃滩羊产区皋兰、景泰及靖远3293只滩羊的血清酯酶(Es)、α-淀粉酶(α-Amy)基因座多态性进行了检测分析。结果表明:甘肃滩羊Es基因座存在3种基因型Es++ 、 Es+- 、 Es-- ,它们由Es+、Es-两个共显性等位基因控制,其中Es+-基因型在3个群体中均占优势,频率分别为0.620 0(皋兰)、0.666 6(景泰)、0.730 0(靖远);在皋兰群体和景泰群体中,Es-基因占优势,基因频率分别为0.540 0和0.548 4,而在靖远群体中优势基因则为Es+,其基因频率为0.525 0。在α-Amy基因座上没有检测到多态性。     

小尾寒羊血清酯酶多态性及其与产羔性能关系的研究

[目的]为小尾寒羊的多胎品种选育及鉴定提供理论依据。[方法]采用垂直板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）检测小尾寒羊血清酯酶（Es）位点的多态性,将不同基因型个体与其产羔数进行统计分析,根据结果分析Es多态性与产羔数之间的相关性。[结果]Es位点有3种基因型,其中优势基因型为Es＋＋。3种基因型母羊的第1胎产羔数差异不显著（P〉0.05）,第2胎和第3胎产羔数以Es＋＋型显著（P〈0.05）高于Es--型和Es＋-型 Es＋＋型平均产羔数极显著（P〈0.01）高于Es--型和Es＋-型,Es--和Es＋-之间差异均不显著（P〉0.05）。[结论]Es位点可以作为小尾寒羊高产母羊早期选择的遗传标记位点,Es＋＋为其高产基因型。     

豫西脂尾羊的血清酯酶与体尺性状的关联分析

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(PAGE)对豫西脂尾羊血清酯酶(Es)的多态性进行检测和分析。结果表明,在豫西脂尾羊上Es基因座有2个等位基因即Es~+和Es~-,而且Es~+和Es~-的基因频率别为0.55和0.45,有3种基因型Es~(++)、Es~(+-)、Es(~--),其频率分别为0.425、0.250和0.325。不同基因型西清酯酶对体尺的影响结果表明,在荐高方面,Es~(++)基因型显著高于Es+-基因型(P0.05),而两者均与Es~(--)基因型没有显著差异(P0.05)。在胸围方面,Es~(++)基因型极显著高于Es~(--)基因型(P0.01),而两者均与Es~(+-)基因型的胸围没有显著差异(P0.05)。Es对其他指标都无显著影响(P0.05)。     

兰州大尾羊血清淀粉酶酯酶及苹果酸脱氢酶同工酶的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶水平板电泳,对131只兰州大尾羊的血清淀粉酶(Amy)、酯酶(Es)和苹果酸脱氢酶(MHD)的多态性进行检测和分析。结果发现,Amy2基因座2个等位基因Amy2A和Amy2O的基因频率分别为0.166 4和0.833 6,3种基因型Amy2AA*、Amy2AO和Amy2OO的频率分别为0.007 7、0.277 6和0.694 7;Es基因座2个等位基因Es+和Es-的基因频率分别为0.409 4和0.590 6,3种基因型Es++、Es+–、Es––的频率分别为0.169 6、0.483 6和0.348 8;MDH基因座2个等位基因MDSF和MDHS的频率分别为0.264 8和0.735 2,3种基因型FF、FS和SS的频率分别为0.142 9、0.207 7和0.649 4。     

小尾寒羊血液蛋白多态性与多羔性研究

通过非连续性垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对小尾寒羊的8种血液蛋白(酶)进行多态性检测,同时以甘肃藏羊作为对照,探索绵羊多羔性与血液生化遗传的相关性。结果表明:Hb位点的HbB基因、Tf位点的TfC基因、Es的Es-基因与绵羊多羔性可能存在相关性,Ep是否可以作为小尾寒羊多羔性的遗传标记,还需进一步探讨,其它4个蛋白(酶)AIb、Pr、AMY、LDH与绵羊多羔性不相关;同时得出与多羔性相关的蛋白位点基因与目前所研究的多胎基因FecB等主效基因均不连锁,但存在相关性。     

安宁果下马酯酶多态性的研究

本研究采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测了安宁果下马和建昌马血清酯酶(Es)多太位点的基因型和基因频率。并利用贵州中型马、广西中型马、贵州矮马、广西矮马、吐卡拉矮马、北海道矮马和雪特兰矮马Es的基因频率资料,计算出遗传距离和进行聚类分析。结果表明,安宁果下马自成一类。     

撒坝猪日增重生化遗传标记的筛选

 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对撒坝猪的前白蛋白(Pa)、转铁蛋白(Tf)、酯酶(Es)、淀粉酶(Am) 和碱性磷酸酶(Akp) 等5个血清蛋白(或酶) 座位的多态性进行了检测,采用多座位广义线性模型(GLM)对血清蛋白多态性与生长速度的关系进行了分析。结果表明,所检测的5个血清蛋白(或酶) 多态座位的基因频率均处于Hardy Weinberg 平衡状态; Pa,Es,Am 和Akp 4个座位对部分阶段日增重的基因型效应均达到了显着水平,其中,一些基因型具有显着提高或降低某一阶段日增重的效应,显示了血清蛋白多态性用作猪生长速度的遗传标记以进行标记辅助选择的可能性。同时,还对广义线性模型用于筛选猪经济性状生化遗传标记的问题进行了一些初步的探讨。     

甘肃滩羊血液蛋白多态性与部分生产性能相关关系的研究

应用SPSS for windows统计软件(version 8.0),结合甘肃滩羊血液蛋白质多态性研究成果,分析探讨了血液蛋白质多态性与滩羊体重、体尺之间的相关关系。统计分析表明,甘肃滩羊血液蛋白多态性中具有血红蛋白(HbAA)、酯酶(Es++)基因型个体,在滩羊体重和体尺二者之间存在正相关,初步确定HbAA、Es++是滩羊肉用性能的高产基因型。并分别建立了高产基因型HbAA、Es++个体体重与体尺间的多元线性回归数学模型,为HbAA 、Es++作为生化遗传标记辅助选择运用于滩羊的选育,探索了一条符合目前生产实际的可行途径。     

小尾寒羊GnRH基因组织表达、多态性及其与产羔性状关联分析

为揭示GnRH基因在小尾寒羊下丘脑-垂体-卵巢轴(Hypothalamic-pituitary-ovarian axis,HPOA)中的表达规律、多态性及其与产羔数的关系,深入了解其对小尾寒羊多羔的作用,采用实时荧光定量PCR技术对6只小尾寒羊(FecB++型单、多羔母羊各3只)的生殖组织及脑组织中GnRH基因的表达谱进行分析,同时采用Sequenom MassARRAY~?SNP技术对380只小尾寒羊和共380只的小尾寒羊、滩羊、苏尼特羊、策勒黑羊、湖羊和草原型藏羊GnRH基因2个单核苷酸多态性位点(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)的进行多态性检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联分析。结果显示,GnRH基因在下丘脑、卵巢和子宫组织均有表达,其中在下丘脑高表达。在小尾寒羊多羔群体中,GnRH基因在卵巢、大脑、下丘脑、垂体的表达均极显著高于单羔群体(P0.01),暗示其可能参与了小尾寒羊多羔性状调控。分型发现GnRH基因2个位点基因型频率和等位基因频率在单、多羔品种间差异均不显著(P0.05)。关联分析表明,GnRH基因的2个SNPs位点的多态性与小尾寒羊各胎产羔数差异均不显著(P0.05);2个SNPs在所有绵羊品种中均表现为低度多态(PIC0.25);卡方适合性检验表明,2个SNPs在各个绵羊品种中均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P0.05)。     

绵羊高繁殖力候选基因GDF9的多态性分析

为寻找与绵羊产羔数相关的分子遗传标记,根据生长分化因子9(GDF9)基因序列设计引物,采用PCR-SSCP技术检测GDF9基因突变位点的多态性,研究不同基因型和小尾寒羊产羔数间的相关性.检测结果表明:小尾寒羊、白萨福克和特克赛尔绵羊都检测出AA、AB和BB 3种基因型,而在藏羊中只检测到AA、AB 2种基因型.测序结果表明,BB型为突变纯合型,其外显子2的75个碱基发生了C→T的突变(G2突变),没有引起氨基酸的改变,为沉默突变.小尾寒羊产羔数的最小二乘均值关系为AB>AA>BB,但3种基因型间差异不显著(P>0.05).GDF9基因的G2突变对小尾寒羊高繁殖力没有显著影响.     

小尾寒羊血浆转铁蛋白多态性与生长性状关系的研究

采用垂直聚丙烯酰胺电泳技术对85只小尾寒羊在转铁蛋白(Tf)位点上的6个生长性状进行了研究。结果表明:Tf位点检出6种表现型TfAA、TfBB、TfCC、TfAB、TfAC、TfBC, 受4个等位基因(TfA、TfB、TfC、TfD)控制, 其中TfC为优势基因;血清转铁蛋白位点的不同表现型之间,羊只的6个表型性状间均有一定的差异,除在体重和体长位点上TfCC型显著大于TfBB型外(P<0.05), 其余4个性状均表现为弱相关(P>0.05);TfCC型可作为小尾寒羊体重和体长两生长性状上早期选种的辅助标记。     

MTNR1A基因ExonⅡ T/C突变与绵羊季节性繁殖的关联性分析

【目的】分析MTNR1A基因ExonⅡ T/C突变与绵羊季节性繁殖性状的关联性,为深入研究MTNR1A基因在绵羊繁殖活动中的作用机制打下基础。【方法】以季节性繁殖的阿勒泰羊和中国美利奴羊(军垦型)及常年繁殖的湖羊和小尾寒羊为研究对象,采用PCR-SSCP及测序技术检测MTNR1A基因ExonⅡ T/C突变在4个绵羊品种群体中的分布情况,并分析其与绵羊季节性繁殖性状的关联性。【结果】MTNR1A基因ExonⅡ T/C突变致使MTNR1A蛋白的胞内无规卷曲结构域构象发生变化。在4个绵羊品种群体MTNR1A基因ExonⅡ处均可检测到T/C突变,其中阿勒泰羊和小尾寒羊中以TT基因型为主,T等位基因频率分别为C等位基因的3.4和11.2倍;在中国美利奴羊(军垦型)中则以TC基因型为主,TC基因型频率分别为TT和CC基因型的17.6和19.6倍;在湖羊中3种基因型的分布无明显差异。在阿勒泰羊群体中MTNR1A基因ExonⅡ T/C突变位点处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),而在中国美利奴羊(军垦型)、湖羊和小尾寒羊群体中处于极度不平衡状态(P<0.01)。【结论】在季节性繁殖的阿勒泰羊和中国美利奴羊(军垦型)及常年繁殖的湖羊和小尾寒羊群体MTNR1A基因ExonⅡ处均可检测到T/C突变,但该突变与绵羊的季节性繁殖性状无关联。     

山东省地方绵羊品种的mtDNA D-loop序列多态性及系统进化研究

为了进一步了解山东省绵羊起源、群体遗传结构、群体遗传关系,利用线粒体DNA(mtDNA)分析了小尾寒羊、大尾寒羊、洼地绵羊3个地方绵羊品种(群体)的遗传多样性和起源进化。通过PCR和测序技术测定了3个绵羊群体82个个体的线粒体D-loop 1182 bp全序列,采用DnaSP 5.0进行多态性分析,并利用MEGA 5.05的邻接法(NJ)构建系统发育树。结果显示,3个绵羊群体mtDNA D-loop碱基组成:A、T、G、C平均含量分别为32.88%、29.33%1、8.28%、19.50%,A+T含量明显高于G+C含量;碱基突变以转换为主,说明绵羊线粒体碱基替换存在转换偏倚现象。mtDNA D-loop区的核苷酸多样度分别为0.03240、0.02455和0.03172;单倍型多样度分别为0.9710、.728和0.932,表明小尾寒羊和洼地绵羊mtDNA D-loop区具有较高的多态性,遗传资源相当丰富,大尾寒羊相对较低,需要加强资源保护。构建的NJ系统发育树表明3,个绵羊品种内、品种间存在基因交流,品种间存在共同的起源。     

利用PCR-SacⅡ-RFLP技术检测绵羊IGFBP-3基因多态性的研究

[目的]将IGFBP-3基因作为候选基因,寻找与绵羊羊毛品质等经济性状相关的SNP位点.[方法]利用PCR-SSCP和DNA测序快速筛查SNP位点;在此基础上建立PCR-RFLP检测方法,分析该位点在不同品种绵羊中的基因型和等位基因分布情况;通过多重比较分析不同基因型与中国美利奴羊部分羊毛性状的关联性.[结果]以绵羊基因组DNA为模板扩增得到了249 bp的特异条带,PCR-SSCP及测序分析显示在该序列的140碱基处发生了G/T突变,导致SacⅡ酶切位点消失.经PCR-SacⅡ-RFLP检测,哈萨克羊和中国美利奴羊细毛羊得到三种基因型:TT(249 bp)、GG(139 bp/110 bp)和TG(249 bp/139 bp/110 bp);杜泊羊中出现GG和TG两种基因型;湖羊、小尾寒羊以及萨福克羊中只有GG一种基因型.关联性分析表明不同基因型与部分羊毛性状没有明显的相关性.[结论]在绵羊IGFBP-3基因嫩含子4区发现一个新的SNP位点,玻建立PCR-SacⅡ-RFLP检测方法;该位点不同等位基因和基因型在不同绵羊品种中的分布具有一定规律性;不同基因型与中国美利奴细毛羊部分羊毛性状中间没有明显的相关性.     

微生态制剂对小尾寒羊羔羊育肥性能的影响

[目的]为微生态制剂在肉羊生产中的应用提供理论依据.[方法]以小尾寒羊为试验对象,研究微生态制剂对小尾寒羊羔羊育肥性能的影响.[结果]试验期内试验组和对照组小尾寒羊羔羊的平均增重分别为18.86和16.09 kg,试验组增重比对照组高17.22％,差异显著（P＜0.05）.试验组和对照组平均日增重分别为209.56和178.78 g.试验组体尺和屠宰性能均比对照组有不同程度提高.[结论]在日粮中添加微生态制剂可以提高小尾寒羊对饲料的利用效率,改善小尾寒羊的育肥性能,具有较大的推广价值.     

青海小尾寒羊血清运铁蛋白多态性研究

[目的]探讨青海小尾寒羊血清运铁蛋白不同表型的优势程度,为繁殖性状的早期选择提供参考依据。[方法]采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对引入青海省的89只小尾寒羊的血清运铁蛋白（TF）的多态性进行研究。[结果]在被检的小尾寒羊的血清运铁蛋白位点上共测出16种基因型,受TFA、TFB、TFL、TFD、TFM、TFC和TFE7个等位基因控制,其中TFCC为优势基因型（33.71%）,TFC优势等位基因（0.455 1）,基因杂合度为0.714 3,有效等位基因数为3.500 2,基因纯合度指数为0.277 6。[结论]引入青海小尾寒羊TF显现出丰富的生物多样性和高度的遗传变异性。     

绵羊微卫星OarJL36和FecB基因的多态及连锁分析

 【目的】阐明微卫星座位OarJL36与小尾寒羊高繁殖力主效基因FecB之间的连锁关系,为绵羊高繁殖力的标记辅助选择提供依据。【方法】分析与FecB基因最紧密连锁的微卫星座位OarJL36在高繁殖力绵羊品种（小尾寒羊和湖羊）与低繁殖力绵羊品种（特克塞尔和多赛特）中的遗传多态性,探讨该微卫星与小尾寒羊FecB基因的连锁不平衡关系。【结果】高繁殖力小尾寒羊和湖羊在骨形态发生蛋白受体IB（bone morphogenetic protein receptor IB,BMPR-IB）基因编码序列第746位碱基处发生了与Booroola Merino绵羊相同的FecB突变（A746G）,低繁殖力特克塞尔和多赛特绵羊则未发生这种突变;小尾寒羊BB、B+、++型频率分别为0.500、0.386和0.114,湖羊BB、B+、++型频率分别为0.800、0.200和0.000;微卫星座位OarJL36在4个绵羊品种463个个体中共检测到10个等位基因和31种基因型,最小等位基因为160 bp,最大等位基因为200 bp;182 bp等位基因在小尾寒羊（n = 308）和湖羊（n = 60）中处于优势等位基因,频率分别为0.696和0.925,在特克塞尔（n = 47）和多赛特绵羊（n = 48）中的频率分别为0.085和0.125,在BB型小尾寒羊（n = 154）和BB型湖羊（n = 48）中该等位基因频率更高,分别为0.916和0.938,而在++型小尾寒羊（n = 35）中的频率为0.129;OarJL36在小尾寒羊、湖羊、特克塞尔、多赛特以及BB、B+、++型小尾寒羊和BB、B+型湖羊中的多态信息含量分别为0.475、0.139、0.661、0.768、0.152、0.588、0.843、0.115和0.212;连锁不平衡分析显示小尾寒羊FecB基因B等位基因与OarJL36微卫星座位182 bp等位基因之间存在较强的连锁关系,但仍有一定的重组（D′=0.614）,而+等位基因与OarJL36微卫星座位上的160、192、196、200 bp等位基因完全连锁（D′=1.000）。【结论】OarJL36微卫星座位182 bp等位基因与小尾寒羊FecB基因B等位基因之间存在较强的连锁关系,是与小尾寒羊多羔主效基因紧密连锁的一个遗传标记。