单瓣长寿花‘萨姆巴’高效快速繁殖体系的构建

选取单瓣长寿花‘萨姆巴’的叶片为外植体,设计正交试验,研究不同种类植物生长激素及其浓度配比的培养基对长寿花叶片愈伤组织的诱导、不定芽的分化和不定芽生根的影响,并研究试管苗炼苗及移栽的成活情况。试验结果表明,诱导长寿花叶片产生愈伤组织的最适培养基是MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L,诱导率是83.33%。诱导愈伤组织不定芽分化的最适培养基是MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,增殖系数是21.4。最适的不定芽生根培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L,生根系数为7.03。试管苗移栽到蛭石∶营养土=1∶1的基质中培养,移栽的成活率可达100%。     

小玉竹组织培养及无性系的建立

以小玉竹根茎为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的6-BA,2,4-D,IAA,NAA,诱导根茎形成愈伤组织,并使愈伤组织分化形成不定芽,培养成生根试管苗,建立起小玉竹无性系。结果表明,MS+6-BA 0.4 mg/L+NAA 1.0 mg/L是根茎愈伤组织诱导的理想培养基;MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L是愈伤组织和不定芽分化培养的理想培养基;1/3MS+IAA 0.4 mg/L是试管苗生根培养的理想培养基。     

艾纳香的组织培养

以贵州药用植物艾纳香的叶片为材料,MS培养基为基本培养基,探讨影响艾纳香组织培养的因素,为艾纳香的组织培养快速繁殖提供重要的参考依据。结果表明:外植体灭菌组合以0.1%氯化汞8 min+75%乙醇5 s最佳;诱导愈伤组织培养基以MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L最佳,诱导率为88.17%;愈伤组织继代培养基以MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L最佳;愈伤组织分化为芽的培养基以MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.1mg/L最佳,以试管苗(由野外艾纳香培育出的完整幼苗)叶片为外植体诱导愈伤组织,其分化率为93%;芽继代培养基以MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L最佳,平均苗高4.3 cm;IBA有利于艾纳香的无根绿苗生根,以MS+IBA 1.4 mg/L培养基培养,生根率为100%。     

太阳扇愈伤组织培养及植株再生体系建立

以太阳扇(Scaevola aemula)嫩叶、老叶、茎段、茎节为材料进行外植体筛选;以太阳扇嫩叶为外植体,研究愈伤组织诱导、不定芽分化及增殖、生根培养的适宜条件.结果表明:嫩叶为太阳扇愈伤组织诱导最佳外植体;MS+6-BA 0.50mg/L+2,4-D 0.20mg/L为愈伤组织诱导最佳培养基;MS+6-BA 0.50mg/L+NAA 0.10mg/L为芽分化最佳培养基,分化率可达96.5%;1/2MS+NAA 0.01mg/L为芽增殖最佳培养基,增殖系数最高可达3.33;糖浓度、NAA均影响太阳扇无菌苗生根,1/2MS+NAA 0.02mg/L+蔗糖30g/L为生根培养最适培养基;g腐殖质∶g珍珠岩∶g细土=2∶1∶1为组培苗移栽最佳基质,移栽成活率达75%.     

翠绿1号假俭草种子愈伤诱导和植株再生

本研究以优良品系翠绿1号假俭草的种子为外植体,成功地建立了再生体系.基本培养基为MS,在添加了2,4-D 1.5 mg/L的培养基上最适于种子愈伤诱导,愈伤诱导率为99%,黄色颗粒愈伤诱导率为4.8%,愈伤最佳继代培养基为MS+2,4-D 1.5 mg/L;在最佳分化培养基MS+ KT 2.5 mg/L上,黄色愈伤分化率为99%,芽最佳生长培养基为MS+ BA2.0 mg/L+NAA0.7 mg/L;试管苗最佳生根培养基为MS+NAA0.6 mg/L,生根率达到99%;生根的试管苗移栽到装有田园土的土盆中,其存活率达到88%.     

叶片诱导大花重瓣矮牵牛植株再生的研究

研究了不同浓度的6-BA和NAA对大花重瓣矮牵牛叶片离体培养愈伤组织诱导、芽分化和生根的影响。结果表明,MS+6-BA 2.0 mg/L对愈伤组织诱导的效果最好;适宜的丛生芽分化培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L;适宜的生根培养基为1/2MS+NAA 0.01～0.10 mg/L。     

非洲菊组织培养与快速繁殖试验研究

以非洲菊的花托、茎尖、花梗为外植体进行组织培养快速繁殖试验,结果表明:适合花托外植体愈伤组织不定芽诱导的培养基为"池上真一培养基"+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L,适合茎尖外植体愈伤组织不定芽诱导的培养基为MS+KT 10 mg/L+IAA 0.5 mg/L,适合花梗外植体愈伤组织不定芽诱导的培养基为MS+6-BA 10 mg/L+IAA 0.5 mg/L;适合非洲菊试管苗继代增殖的培养基为MS+KT 10 mg/L+IAA0.5 mg/L;适合非洲菊试管苗生根培养的培养基为1/2 MS+NAA 0.03 mg/L。     

秘鲁番茄高效再生体系的研究

以秘鲁番茄的叶片和茎段为外植体,研究不同外植体种类、激素配比对秘鲁番茄愈伤组织诱导、分化和不定芽生根的影响,以期建立秘鲁番茄组织培养高效再生体系。结果表明:秘鲁番茄的叶片较茎段更适宜愈伤组织诱导与分化,以叶片为外植体时,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,愈伤组织诱导率高达100.0%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,不定芽的分化率高达92.4%。以茎段为外植体时,最佳诱导愈伤培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA,愈伤组织诱导率高达95.8%;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L IAA,不定芽的分化率高达86.5%。不定芽最适宜的生根培养基为MS+1.0 mg/L NAA,生根率达100.0%。采用草炭土+珍珠岩(体积比1∶1)的混合基质作为移栽基质,移栽成活率可达90%以上。     

红叶石楠离体培养与高效再生体系建立

以红叶石楠(Photinia×frasery)带芽茎段、叶片为外植体,对其启动培养、叶片愈伤诱导与分化、芽增殖、生根培养及试管苗驯化等技术进行了较为系统的研究,建立了红叶石楠离体培养的高效再生体系。结果表明,幼茎启动培养适宜培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达63.3%;叶片愈伤诱导适宜的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,愈伤诱导率达86.0%;愈伤分化不定芽的适宜培养基为N6+6-BA1.5mg/L+IAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达21.6%,增殖率为1.4倍;芽增殖培养适宜的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.7mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,最高增殖率达6.1倍;生根培养方法为用25mg/LNAA溶液浸泡0.5～1.0h后接种于1/2MS培养基中,生根率达93.4%以上;试管苗驯化的适宜混合基质为泥炭∶珍珠岩=3∶1,成活率可达96.7%。     

连翘(Forsythia suspensa (Thunb.)Vahl)的试管苗快速繁殖

[目的]连翘是中国常用中草药,也是庭院绿化的常用树种,需求量较大.建立连翘(Forsythia suspensa (Thunb.) Vahl)的试管苗快速繁殖体系,以期为连翘的大规模栽培育种奠定基础.[方法]以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA与NAA诱导连翘幼茎外植体再生芽的发生;以1/2 MS为基本培养基,添加IAA、IBA或NAA等单一激素,诱导再生芽生根.[结果]结果表明,BA与NAA的比例对于新芽发生有重要影响,NAA的存在通常不同程度导致愈伤组织的发生,当NAA与6-BA比例达到2∶1时,茎段外植体完全脱分化形成愈伤组织.而不含有NAA,即仅含有6-BA单一激素情况下,更有利于芽的发生.对于生根诱导,低浓度IAA或NAA (0.1 mg/L)均不能诱导连翘试管苗生根,高浓度(0.5 mg/L)会导致茎基部先发生愈伤化,之后才有根从愈伤组织处长出.IBA在0.1～0.5 mg/L范围内,均可以诱导90％以上的再生小芽生根.[结论]以连翘的幼茎为外植体诱导连翘的试管苗快速繁殖,MS+6-BA 0.5 mg/L为最佳的芽诱导培养基;1/2 MS+IBA 0.2 mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率达到90％以上.     

黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖

【目的】建立黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖体系。【方法】以黄芩的幼茎、幼叶及叶柄为外植体,在MS培养基上添加不同质量浓度的6-BA、2,4-D与NAA诱导愈伤组织及再生芽;在1/2 MS培养基上添加IAA、IBA或NAA激素,单独或者组合使用,诱导黄芩试管苗生根。【结果】幼叶和叶柄容易褐化死亡,而幼茎显示很好的脱分化和再分化效果;BA与NAA组合可以诱导幼茎外植体脱分化与再分化,而BA与2,4-D组合只能诱导愈伤组织发生。IAA诱导生根率最高,但是茎基部会形成愈伤组织,后期无法驯化成活;IBA及NAA均可以诱导根的发生,但是以IBA效果为佳。【结论】幼茎为最佳外植体,MS+BA0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织诱导及再生芽的分化培养基。1/2MS+IBA 0.1mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率为70.3%。     

黑莓叶片组织培养及植株再生的初步研究

以美国黑树莓叶片作为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA或IAA进行愈伤组织诱导及植株再生试验.结果表明:树莓叶片外植体在培养基MS+6-BA 2.0～ 4.0 mg/L+NAA(IAA)0.01～0.5 mg/L都能不同程度地形成愈伤组织 ,但以MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L愈伤组织的诱导率最高,诱导率可达100%;所试验的各种不定芽分化培养基,都能不同程度地诱导愈伤组织分化出不定芽,在添加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的MS培养基上,愈伤组织分化不定芽的比例最高,达49.7%的;所产生的不定芽在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L的培养基上的生根率可达89.3%.     

H.11648麻离体培养与植株再生的研究

以H.11648麻组培苗叶片为外植体,研究了不同生长调节剂对诱导愈伤、不定芽的分化、增殖及生根的影响。结果表明:在MS+0.5 mg/L 2,4-D+4.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.23%植物凝胶(pH值5.8)培养基上诱导出愈伤组织为佳;在MS+3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA培养基中,愈伤组织不定芽分化率最高;将小苗移栽至基质配比为土壤∶椰糠=2∶1的育苗盆中,成活率达96%。     

金边虎尾兰组织培养的研究

以金边虎尾兰(Sansevieria trifasciata var.laurenttii)肉质叶片作为外植体材料,进行组织培养研究。结果发现,金边虎尾兰叶龄与叶片部位对愈伤组织的诱导有影响,其中采用一年生叶片中部的组织诱导率最高;诱导叶片愈伤组织最适培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖;诱导芽分化最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖;诱导试管苗生根最适培养基为1/2MS+1.0 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖。     

田皂角组织培养及无性系建立的研究

以生长非常旺盛的田皂角嫩茎为外植体,进行愈伤组织诱导和分化、试管苗的生根和移栽的研究,成功地建立起田皂角的无性系。结果表明:MS+BA 0.8mg/L+2,4-D 1.2mg/L是田皂角嫩茎愈伤组织诱导培养和继代培养的理想培养基;MS+AgN03 1.0mg/L+BA1.0mg/L+NAA 0.1mg/L是田皂角愈伤组织和不定芽分化培养的理想培养基;1/2MS+IAA 0.4mg/L+NAA 0.1mg/L是田皂角试管苗生根培养和生根继代培养的理想培养基;移植的试管苗生长旺盛、根系发达,当年可正常开花结果,其所有的植物学性状保持不变。     

卷丹的原球茎诱导及植株再生

以卷丹(Lilium lancifolium)的鳞茎、叶片和珠芽为外植体,建立了卷丹快速繁殖的植株再生体系,探讨了不同外植体、培养基对卷丹原球茎诱导、分化的影响。结果表明,鳞茎是最适合诱导原球茎的外植体,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.00 mg/L 6-BA+1.00 mg/L NAA;诱导原球茎的最佳培养基为MS+0.50 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA+1.00 mg/L 2,4-D;较适合原球茎出芽的培养基为MS+1.00 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA,较适合不定芽生根的培养基为MS+0.50 mg/L NAA。     

激素水平对紫叶酢浆草分化增殖的影响

研究了不同外植体和激素水平对紫叶酢浆草组织培养的影响。结果表明:紫叶酢浆草的叶片比叶柄更容易分化出不定芽,是最适宜的外植体;诱导不定芽分化的适宜培养基为MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.5mg/L,不定芽增殖的适宜培养基为MS+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L,试管苗在MS+2,4-D0.5mg/L培养基上生根较好。     

雪菊的组织培养研究

以雪菊带芽茎段、茎尖、叶片为外植体以MS为培养基添加不同浓度6BA和NAA进行组织培养实验,结果表明适合带芽茎段愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA1.0mg/L＋XAA0.3mg/L;适合茎尖愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA1.0mg/L＋XAA0.1mg/L;适合叶片愈伤组织诱导的培养基为MS＋6BA3.0mg/L＋NAA0.3mg/L,适合雪菊愈伤组织增殖和不定芽诱导的培养基为MS＋6BA2.0mg/L＋NAA0.3mg/L;适合雪菊试管苗生根的培养基为1/2MS＋6BA0.3mg/L＋XAA0.03mg/L,蔗糖减半,以雪菊无菌苗的带芽茎段、茎尖和叶片为外植体成功地诱导出了愈伤组织,其中带芽茎段愈伤组织诱导率最高时间最短效果最好茎尖次之叶片最差.     

大蒜休眠芽愈伤诱导和植株再生

本研究以优良品系‘金乡大蒜'休眠芽为外植体,成功地建立了再生体系.基本培养基为MS,在添加了2,4-D 2.mg/L的培养基上最适于休眠芽愈伤诱导,愈伤诱导率为99.5%,黄色颗粒愈伤诱导率为100%,愈伤最佳继代培养基为MS+2,4-D 2-0 mg/L;在最佳分化培养基MS+6-BA3.0 mg/L上,黄色愈伤分化率为98.6%,芽最佳生长培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+KT1.0 mg/L+GA0.2 mg/L+NAA0.1 mg/L,且适于芽生长的最佳温度为20℃;试管苗最佳生根培养基为MS+NAA0.2 mg/L,生根率达到92.4%;生根的试管苗移栽到装有田园土的土盆中,其存活率达到82%.本试验为今后开展大蒜遗传转化和体系胞突变体筛选工作奠定了良好的实验基础.     

耧斗菜的组织培养

以耧斗菜幼嫩叶片及叶柄为外植体,研究了不同生长调节物质对外植体愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,在培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L上诱导叶柄产生愈伤效果最好,诱导率为80.5%;在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L上叶片愈伤诱导效果最好,诱导率为92.7%。继代培养基为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L。在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中分化芽;分化的芽在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中增殖。生根培养基为1/2 MS+NAA0.1 mg/L或1/2 MS+IBA 0.2 mg/L。