香石竹茎尖试管苗继代培养玻璃化现象的研究

香石竹红色品种茎尖试管苗继代培养玻璃化现象是香石竹脱毒试管苗生产的一个主要障碍.采用改善光照,在培养中提高糖和琼脂的浓度,降低细胞分裂素的用量,对克服香石竹茎尖试管苗继代培养玻璃化有明显效果,但对一些红色系品种效果并不理想,继代培养玻璃苗率仍达61%以上.     

玻璃化法及小液滴玻璃化法对香石竹茎尖超低温保存效果的影响

[目的]探索更有效的香石竹茎尖超低温保存方法,为球宿根花卉的超低温保存提供相关技术支持。[方法]以香石竹茎尖为材料,研究预培养条件(蔗糖浓度、预培养时间)、玻璃化处理时间和玻璃化方法(常规玻璃化法、小液滴玻璃化法)对香石竹茎尖超低温保存效果的影响。[结果]在0.5 mol/L的蔗糖浓度培养基上预培养5 d香石竹茎尖成活率最高,为88.3%;玻璃化处理80 min成活率最高,可达86.7%;常规玻璃化法成活率及再生率在80%以上,小液滴玻璃化法成活率可达90%以上且全部再生,小液滴玻璃化法再生天数比常规玻璃化法少3~5 d。[结论]小液滴玻璃化法是一种有发展前景的超低温保存方法。     

玻璃化法超低温保存香石竹种质资源的研究

以香石竹"云恋蝶"离体茎尖为试材,研究玻璃化法对香石竹茎尖的高体超低温保存.通过正交设计试验对影响存活率的主要因素(预培养培养基中蔗糖浓度、预培养时间、装载时间和PVS2处理时间)进行分析,结果表明,预培养1 d,预培养基中蔗糖浓度为0.5 mol/L,装载40 min,PVS2液处理40 min,液氮处理1 d,在40℃水浴化冻后的香石竹茎尖,成活率达44.13%,且超低温再生苗与其常温苗的生理生化指标无显著差异.本试验成功地建立了香石竹种质资源玻璃化法超低温保存的技术,为香石竹种质资源的长期保存提供了一条有效途径.     

不同培养条件对香石竹组培苗玻璃化现象的影响

香石竹茎尖试管苗继代培养玻璃化现象是香石竹脱毒试管苗生产的一个主要障碍。为探讨不同培养条件对香石竹组培苗玻璃化的影响,以香石竹健壮组培苗为材料,以MS为基本培养基,研究了不同浓度6-BA、蔗糖和琼脂以及添加活性炭对防止香石竹组培苗玻璃化现象的作用。结果表明,降低6-BA的浓度,适当提高蔗糖和琼脂的浓度,组培苗增殖系数较高,玻璃化率低。其中,MS+蔗糖30.0 g+琼脂8.0 g+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L+活性炭4 g/L的培养基可以有效降低香石竹组织培养中的玻璃化现象。     

克服香石竹试管苗玻璃化现象的研究

 香石竹试管苗玻璃化现象是香石竹组织培养中的一大障碍,采用强光照10000～20000lx,在培养基中提高糖和琼脂的浓度,降低细胞分裂素的用量,对克服香石竹试管苗玻璃化有明显的效果.青霉素对消除香石竹试管苗玻璃化无明显效果,但对生根有促进作用,其作用机制还有待于进一步研究.     

组织培养技术筛选香石竹低玻璃化无性系初报

采用离体培养的方法,对香石竹红色品种‘多明格’的茎尖培养试管苗进行连续多代剔除玻璃苗和畸形苗的筛选,继代培养27代后获得了玻璃化率稳定在8%左右的低玻璃化无性系。该无性系经10代的增殖培养,定植到大田后仍然保持母本的优良性状,无明显的有害变异。     

香石竹茎尖的改良小液滴玻璃化法超低温保存

香石竹(Dianthus caryophyfllus L.)为石竹科石竹属常绿亚灌木花卉,是世界著名的切花之一,其栽培种及野生种的资源有效保存对香石竹的国产化至关重要。超低温保存(-196℃)是无性繁殖的植物种质资源最安全经济的保存方法。超低温保存方法中常用的为玻璃化法,近年来在传统玻璃化法上发展出来小液滴法,即将植物材料经玻璃化处理后,在铝箔上滴成小液滴,后直接投入液氮进行迅速冷冻。由于冻存及解冻速度快,组织不易形成冰晶,易成活再生,是一有发展前景的方法。超低温保存中,茎尖大小及结构的完整性对超低温保存的成活率及恢复培养均有影响。我们以香石竹为模式植物,结合包埋法及小液滴法的特点,对相关技术进行改进,探索一种适用于植物茎尖超低温保存方法及冷冻植株后再生的技术。试材为香石竹红花品种,从上海花卉市场购买。切取花茎繁殖试管苗,获得花茎无性繁殖系。取组培继代3个月以上的无菌组培苗。茎尖超低温保存的试验方法为:1、常规玻璃化法:(1)剥取1~2mm无菌苗茎尖,接种到含0.3 mol·L-1蔗糖浓度的MS培养基中,在25℃下培养1~3d;(2)经预培养后,将茎尖置于含预处理液(含2 mol·L-1甘油及0.4 mol·L-1蔗糖的MS培养液)的2ml冷冻管中,于室温下处理60min,然后将预处理液吸出,换入预冷玻璃化保护剂PVS2中在冰浴中处理60~120min;(3)冷冻管换入预冷新鲜PVS2约0.5ml,迅速投入液氮中保存。解冻取出在液氮中冻存1 h以上的冷冻管,立即放入40℃水浴中快速解冻2 min。(4)茎尖在室温下用含1.2mol·L-1蔗糖的MS培养液洗涤2~3次,每次5~10 min。(5)洗涤后的茎尖在滤纸上吸干后,转移至恢复培养基中暗培养,等茎尖返绿并有萌动迹象时再转入MS固体培养基中常光培养。2、小液滴法:步骤(1)、(2)同常规玻璃化法;(3)在冻存前5min将含有1个茎尖的液滴(约5ul)滴在5mm×20mm的无菌铝箔条上,每个铝箔条含5个茎尖,将含液滴的铝箔条直接投入装满液氮的安培管中。(4)解冻时直接将含液滴的铝箔条投入洗涤液中进行解冻20 min。步骤(5)同上。3、改良小液滴法:(1)剥取1~2mm无菌苗茎尖,浸入2%的无钙离子海藻酸钠溶液中轻蘸,即用镊子将茎尖轻放在3mm×20mm无菌滤纸小条上,每个滤纸条上放5~10个茎尖;(2)将含有茎尖的滤纸小条浸入到0.1%氯化钙溶液中,经10min固定,在无菌滤纸上吸干多余液体;(3)将带有茎尖的滤纸小条放入0.3 mol·L-1蔗糖的MS液体或固体培养基中,培养1~3d;(4)经预培养后,将带有茎尖的滤纸小条置于预处理液(含2 mol·L-1甘油及0.4 mol·L-1蔗糖的MS培养液)中于室温下处理60min,然后转入玻璃化保护剂PVS2中在冰浴中处理60~120min;(5)将带有茎尖的滤纸小条直接投入液氮中,长期保存可转移至无菌冷冻管;(6)解冻时将带有茎尖的滤纸小条由管中拿出后迅速放入含1.2 mol·L-1蔗糖的MS培养液解冻及洗涤20min;(7)将带茎尖的滤纸条在无菌滤纸上吸干后放入恢复培养基进行培养,经恢复培养后茎尖可直接生长成植株。结果表明:3种玻璃化法冻存的香石竹茎尖成活率及再生率均可达80%。其中小液滴玻璃化法在优化程序下进行冻存,最高存活率可达95%,高于常规玻璃化法(82%)及改良小液滴玻璃化法(87%)。恢复培养时,最快1d即可见茎尖萌动,再生时间较常规玻璃化法要短3~5d,但再生率不稳定(60%~100%),易形成愈伤组织及玻璃化苗。改良小液滴法成活率(80%~90%)略高于常规玻璃化法,再生时间与常规玻璃化法相同(7~13d),植株再生率均在80%以上且植株生长健壮一致。改良小液滴法结合包埋法及小液滴法的特点,并采用滤纸小条为操作载体,以批量处理茎尖以提高操作效率,减少在操作过程中机械损伤,从而达到稳定的成活率及再生率,受操作者水平影响较小,可用于种质库批量化植物茎尖资源超低温保存。     

包埋玻璃化法超低温保存沙生柽柳休眠茎尖的研究

[目的]采用包埋玻璃化法,对沙生柽柳休眠茎尖成功地进行冷冻保存。[方法]将沙生柽柳休眠茎尖包埋在含3%褐藻酸钙的胶球中,研究了预培养中蔗糖浓度、培养时间和不同玻璃化保护液处理的时间对沙生柽柳休眠茎尖存活率的影响。[结果]含沙生柽柳茎尖的胶球在0.8mol/L蔗糖溶液中培养24h可获得较高的存活率;胶球经玻璃化保护液[40%甘油＋45%（0.4mol/L）蔗糖＋10%聚乙二醇（分子量4000）＋5%二甲基亚砜]在25℃处理20min可以明显提高存活率,在优化条件下存活率可高达48.3%。[结论]蔗糖浓度和预培养时间是决定沙生柽柳茎尖存活率的关键因素。     

应用组培技术繁育香石竹无毒苗的试验

采用微茎尖组培技术可以大量繁育香石竹的无病毒生产用苗株,在培殖培养中的选用不加激素的ＭＳ培养基,小容积容器及透气封口膜处理容器口,均可有效地降低培养过程中的玻璃化株率,生根培养基的配方以ＭＳ＋ＮＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ为最适用,香石竹组培主根苗的繁育系数９个月可以达到１１６７倍,本试验以指示植物苋色藜汁液摩擦接种法鉴定所繁育的香石竹苗有无环斑,斑驳病毒。     

乙烯释放剂克服香石竹试管苗玻璃化的研究

用香石竹(Diamthus caryphyllus L.)为试验材料,乙烯前体ACC和乙烯释放剂乙烯利为生长调节剂进行试验。试验结果表明,ACC对克服香石竹试管苗玻璃化有显著效果,并能一次成苗,正常试管苗的诱导频率达98％。从外部形态观察,茎叶充实度好,根系发达;茎横切面显微观察,茎内厚壁组织发达,细胞排列紧密;生理指标测定结果,蛋白质、干物质、叶绿素含量均高于玻璃苗,干物质为玻璃苗的1.7倍,叶绿素为玻璃苗的5.5倍。乙烯利培养的试管苗生长情况与ACC培养的相近。添加ACC、乙烯利的培养瓶中,乙烯释放量明显高于对照,说明乙烯对克服香石竹试管苗玻璃化有良好作用。     

浅谈饲料中有效能的测定技术

饲料中有效能是供动物生长发育的基础.不同动物所用的有效能体系不同,目前大多数动物采用消化能、代谢能体系,但随着研究的发展与深入,发现最能反映饲料有效能的是净能体系.无论哪种体系,采用合理的测定技术准确测定饲料中的有效能值显得尤其重要,通过对饲料有效能值的准确测定可以实现动物所需能量的精确供给,减少养殖成本,使经济效益最大化.文章综述了几种有效能评价体系的测定技术.     

《河北农业大学学报》创刊年代考

清光绪二十八年(1902)河北农业大学前身—直隶农务学堂诞生,经几易其名,于1958年更名为河北农业大学至今。清光绪三十一年(1905)直隶高等农业学堂时期创办了《北直农话报》,清光绪三十四年(1908)更名为《直隶农务官报》,中华民国七年(1918)改出《农学月刊》,中华民国十七年(1928)易名为《河大农刊》,中华民国二十三年(1934)更名为《河北通俗农刊》,中华民国二十四年(1935)易名为《河北农林学刊》,1948年更名为《河北农学院研究专刊》,1959年更名为《河北农业大学学报》至今。《河北农业大学学报》前身诸刊都与现时的《河北农业大学学报》有着一脉相承的历史渊源,各刊之间联系紧密,连续性、继承性强。因此,《河北农业大学学报》的创刊时间应追溯至1905年创办的《北直农话报》。     

高校贫困生认定工作面面观

国家贫困生资助政策实施以来,对贫困生帮助很大,同时在实际运行中还存在着一些问题。本文提出贫困生认定工作仍需要进一步采取各种相关配套措施,以推动和保障贫困生资助工作更好地开展。     

生态旅游潜在客源市场特征的调查研究--以湖南永州金洞森林旅游开发为例

为探明客源市场生态旅游消费的潜在特征，采用问卷调查的形式，就长沙市居民对湖南金洞生态旅游开发的意向等问题进行抽样调查．结果显示，生态旅游符合人们“回归自然”的旅游新时尚，有着极大的开发空间，指出生态旅游的开发要注重环境保护和可持续发展．开发的产品要以休闲度假类的大众产品为主，开发生态旅游都市客源市场还要多种渠道并用，尤其是要注重媒体的宣传．     

山茱萸多糖提取工艺优化及马钱苷含量测定

采用L（934）正交设计试验,对山茱萸浸提液中山茱萸多糖的酶水解法提取工艺进行了优化研究,并对浸提液的中有效成分马钱苷含量进行了HPLC法分析。结果表明,山茱萸多糖浸提的最佳工艺为：液料比1∶5,浸提时间4 h,浸提温度80℃,果胶酶添加量0.55 g/L。用HPLC法测定出的山茱萸浸提液中马钱苷平均含量为0.512 ...     

施用SODm增效剂对水稻干物质积累及肥料利用率的影响

通过设置不同SODm增效剂施肥量梯度,研究SODm增效剂对提高肥料利用率和水稻干物质积累与转换的影响,结果表明SODm增效剂分别较普通肥处理和复混肥处理可显著提高肥料利用率6.8%和5.04%。施用SODm增效剂可以显著提高水稻抽穗前后干物质生产,以及抽穗后物质转运效率,相对于普通肥处理增产8.4%。     

甘肃省日光温室生产发展对策的探讨

甘肃省设施农业发展历史悠久,古代创造了麦草覆盖生产韭 黄及泥碗护苗等传统设施农业技术,至今仍然受到农民欢迎,在 甘肃省中部应用面积约5万多hm2。建国后,甘肃设施农业获得 了新生,大致经历了三个阶段;第一阶段为引进应用北京改良式 温室阶段,时间在20世纪50-60年代;第二个阶段为塑料拱棚 与地膜覆盖栽培阶段,时间在20世纪70-80年代:第三阶段为     

GEF7基因过表达拟南芥植株幼苗表型分析

利用已构建的过表达拟南芥(Arabidopsis)GEF7基因植株,在光照培养箱中进行培养,并与野生型植株进行对比分析,对GEF7基因过表达植株的幼苗表型进行了观察分析。结果表明,GEF7基因过表达植株幼苗的根长比野生型对照明显增加;其子叶形态、数目和幼苗形态等方面均有异常表型,表明GEF7基因的功能与根的发育有关,并参与调控植物的发育过程。     

水牛梭形住肉孢子虫包囊抗原的纯化技术

应用萄聚糖凝胶柱层析对水牛梭形住肉孢子虫包囊包溶性抗原进行了纯化。结果表明：纯化水牛梭形住肉孢子虫包囊抗原的最适条件为：选用萄聚糖凝胶Ｇ—１００柱层析系统；洗脱液为０３ＭＰＢＳ（ｐＨ７２），床体积为１０ｃｍ×１６５ｃｍ，上样体积为５００ＨＬ；流速为１２ｍＬ／ｈ。纯化抗原可使琼脂凝胶双扩散试验的阳性检出率提高３０％。     

黑豆不同部分馏油的体外抗氧化性比较

[目的]通过体外抗氧化体系比较黑豆不同部分馏油抗氧化性活性。[方法]通过正交试验优化索氏提取黑豆馏油的最佳工艺,提取黑豆不同部分馏油;研究黑豆不同部分馏油对羟基自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)的清除能力。[结果]在样品浓度为1.0 mg/mL时,黑豆不同部分馏油对·OH的清除率分别为全豆馏油83.9%、豆黄(黑豆去皮部分)馏油64.8%、豆皮馏油17.3%,对DPPH·的清除率分别为全豆馏油41.3%、豆黄馏油33.2%、豆皮馏油77.9%。[结论]黑豆不同部分馏油均具有较好的抗氧化性,是良好的天然抗氧化剂。黑豆不同部分馏油对·OH的清除能力从大到小依次为全豆馏油、豆黄馏油、豆皮馏油,对DPPH·的清除能力从大到小依次为豆皮馏油、全豆馏油、豆黄馏油。