Landersberg生态型拟南芥愈伤组织的诱导和植株再生体系的研究

以landersberg生态型的拟南芥为试材,建立了一套简便有效的组培体系。无菌苗的生长采用竖直培养,易于收集外植体。莲座叶、叶柄、下胚轴、根分别作为外植体在B5+5 mg/L2,4-D+0.5 mg/L KT培养基上诱导愈伤组织,结果表明,莲座叶作外植体出愈慢,出愈率低,愈伤组织质量较差;叶柄、下胚轴和根作外植体出愈快,且愈伤组织质量好,后期易分化。根外植体在MS+5 mg/L KT+0.1 mg/L IAA配方的出芽诱导培养基上诱导2～3周后,愈伤组织能有效分化出芽,分化率达100％。分化出的芽移至MS+2 mg/L NAA培养基上竖直培养,2周左右诱导分化出根,然后移至MS培养基上开花结果。     

新疆紫草愈伤组织诱导及植株再生研究

以新疆紫草根、下胚轴、子叶、真叶为外植体,MS附加各种激素进行愈伤组织诱导及其分化、植株再生研究。研究结果表明:①根、胚轴、子叶、真叶的平均出愈率差异不大,但出愈速度差异明显;子叶出愈快,愈伤生长量最大;不定芽分化率依次为下胚轴>根>真叶>子叶。②诱导脱分化的效应KT优于6-BA;降低2,4-D浓度有利于愈伤组织的增殖。激素与外植体有互作效应。③真叶在MS NAA0.5 mg/L KT0.4 mg/L的培养基上能直接形成丛生芽。④不定芽在MS IAA0.5 mg/L KT1.0 mg/L培养基中生根率为83.3%;由此建立了新疆紫草再生体系。⑤不同外植体均可诱导出红色愈伤,颜色深浅依次为真叶>子叶>胚轴>根,且激素可以调控不同外植体愈伤红色的程度;同时红色愈伤能分化产生红色不定根。利用进一步优化的体系可进行快繁并提取愈伤组织中的紫草素。     

不同激素配比对紫花苜蓿不同外植体愈伤组织诱导的影响

[目的]为紫花苜蓿外植体培养筛选最佳激素配比培养基。[方法]分别以盛世无菌苗的下胚轴、子叶、叶片、叶柄、根为外植体。在MS附加不同激素配比的培养基上诱导愈伤组织,研究不同处理对愈伤组织诱导率的影响。[结果]5种外植体均能诱导出愈伤组织,其中下胚轴的愈伤组织诱导率最高（达87．5％）,且愈伤组织长势良好,其次为子叶〉叶柄〉叶片〉根;不同外植体愈伤组织的形成时间为下胚轴〉子叶〉叶柄和根〉叶片;2,4-D诱导愈伤组织的效果优于NAA.[结论]2,4-D、NAA、6-BA和KT配合使用的培养基上形成的愈伤组织浅黄带绿,表面突起,松软,带簇状芽或单芽或形成胚状体.     

薏苡愈伤组织的诱导与分化

为薏苡优良品种的脱毒快繁和基地化脱毒种苗的生产提供科学依据,以薏苡气生根、种子胚、嫩茎为材料,研究了2,4-D、KT、NAA不同浓度配比对愈伤组织的诱导、分化和成苗的影响。结果表明,KT是薏苡芽分化及脱毒种苗生成的主要影响因素,气生根是诱导胚性愈伤组织及胚状体最合适的外植体,其最佳分化培养条件为MS+2,4-D 0.4mg/L+KT 1.5mg/L+NAA 0.8mg/L,最佳成苗培养基为MS+2,4-D 0.4mg/L+KT 1.5mg/L+NAA 1.0mg/L。     

植物激素对大豆愈伤组织诱导和继代培养的影响

以3个基因型大豆无菌实生苗的真叶和胚轴为外植体,在MS培养基上附加不同浓度的TDZ、NAA、6-BA以及2,4-D,研究不同激素浓度对大豆愈伤组织诱导及继代培养的影响,结果表明:在愈伤组织诱导阶段,以真叶为外植体时,吉农28+1.5 mg/L TDZ+0.2 mg/L NAA+200 mg/L活性炭为最佳组合;以胚轴为外植体,吉农17+1.0 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA+200 mg/L活性炭为最佳组合。在继代组织培养阶段,对真叶诱导形成的愈伤组织而言,吉农17+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+3.0 mg/L2,4-D为最佳组合;对胚轴诱导的愈伤组织而言,吉农17+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+2.0 mg/L2,4-D为最佳组合。     

外源激素对生药防风组培苗生长发育的影响

为研究外源激素NAA、KT、6-BA对愈伤组织不定芽的分化、生根诱导及移栽成苗的影响,设计实施了3因素4水平正交试验。结果表明：MS＋NAA0.6＋KT0.5＋6-BA1.0是适合防风愈伤组织芽分化的最佳培养基,芽分化率达到70.0%;不定芽在MS＋NAA0.4培养基上产生的根白色、较粗壮,生根率达100%,当根长至3～4cm、苗高5cm左右时即可进行炼苗移栽。     

大豆顶芽和子叶节组织培养再生成苗的研究

以大豆品种小黑豆的顶芽作外植体,研究了激素、基本培养基对愈伤组织诱导及植株再生的影响.B_5+2,4-D0.5mg/L+KT0.1mg/L 作诱导培养基,愈伤组织诱导率达92.4%;愈伤组织在 MS+6-BA1mg/L+KT0.5mg/L+ZT0.5mg/L 的培养基上,分化频率47.2%.以子叶节为外植体,通过附加外源的6-BA 刺激子叶节处潜在的分生细胞,使其不断分裂,结果子叶节膨大增粗.切下子叶节培养,结果每个子叶节最高能分化出11棵正常的苗.     

南方型紫花苜蓿Millennium组织培养及其再生

以南方型紫花苜蓿Millennium种子发育5~7 d无菌苗的子叶、下胚轴为外植体,对紫花苜蓿愈伤组织诱导和植株再生进行了研究。结果表明,在愈伤组织诱导中,下胚轴为最佳外植体材料,出愈率随着2,4-D质量浓度的增加呈明显的升高趋势,最佳愈伤组织诱导培养基为2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,诱导率达到100%。紫花苜蓿诱导最佳愈伤组织的分化培养基为MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L,下胚轴愈伤组织分化率达到58%,子叶愈伤组织分化率达到40%。将苗切下转接到1/2 MS+20 g/L蔗糖质量浓度时,培养6 d即可诱导生根,诱导生根率达到100%,完成植株再生仅需60~70 d。成功地建立了南方型Millenni-um紫花苜蓿子叶和下胚轴的离体培养再生途径,并获得了再生植株。     

基本培养基和6-BA对花生去子叶胚离体培养形态发生的影响

将已去子叶的粤优1号花生（Arachis hypogaea L.）的胚、胚芽、上胚轴、下胚轴、胚轴作外植体在MS、1/2MS和B5培养基上进行离体培养,结果表明,B5对愈伤组织的诱导和萌发成苗的效果最好,外植体中以胚轴诱导愈伤组织最好,成苗诱导以胚最好.在B5＋0.20mg/L NAA上,6-BA含量为0.20mg/L时胚萌发的幼苗生长最好,根、茎的POD活性及木质素含量也较高,含量太低或偏高均不利于幼苗的形态发生.     

新疆大叶紫花苜蓿(Medicago sativa.L)子叶、下胚轴、根的植株再生

随着植物抗逆性研究和植物转基因技术的发展,通过异源目的基因转化培育耐盐碱苜蓿品种的研究已引起人们的关注,植物受体高频再生体系的建立是异源转化高效的基础。选取新疆大叶紫花苜蓿种子萌发5～7d无菌苗的子叶、下胚轴及根为外植体,诱导愈伤培养基为MS 2,4-D0.1～3.0mg/L(8种不同水平)或MS 2,4-D2.0mg/L KT0.01～0.5mg/L(10种不同水平),诱导芽培养基为MS 6-BA0.5mg/L NAA0.05mg/L,生根培养基为MS。结果表明,外植体在MS 2,4-D2.0mg/L KT0.2mg/L培养基中能够产生状态较好可再分化的愈伤组织,子叶、下胚轴、根的平均出愈率分别为93.1%、100%、100%。愈伤组织在MS 6-BA0.5mg/L NAA0.05mg/L培养基中培养40～80d中均可分化芽,子叶、下胚轴、根的芽平均分化率为50%、78%、50%,将2cm以上的芽转入MS培养基中诱导生根,14d后,生根的小植株炼苗移入花土中,成活率达90%以上。子叶、下胚轴、根在该体系中均能获得再生植株,根也是一种较好的植株再生材料,以根为外植体进行植株再生的研究报道还较少。     

羊角槭愈伤组织诱导、增殖与分化

以羊角槭Acer yangjuechi幼嫩茎段和叶片为外植体,研究基本培养基和植物生长调节剂6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）,萘乙酸（NAA）,激动素（KT）和N-苯基-N'-1,2,3-噻二唑-5-脲（TDZ）对愈伤组织诱导、增殖与分化的影响。试验通过植物组织培养技术诱导外植体产生愈伤组织,并对愈伤组织进行增殖与分化。结果表明:最适宜愈伤组织诱导的外植体为茎段,基本培养基和适当的植物生长调节剂配比均能促进愈伤组织的诱导增殖与分化;诱导效果最好的基本培养基为木本植物培养基（WPM培养基）。在诱导中,6-BA的效果显著高于NAA和KT。羊角槭愈伤组织诱导最佳培养基为WPM+0.3 mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-1 KT+0.5 mg·L-1 6-BA,诱导率达62.9%;愈伤组织增殖最佳培养基为WPM+1.0 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA,增殖倍数达2.4倍。TDZ对分化有重要作用,WPM+1.0 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1 NAA+1.5 mg·L-1 TDZ能促进愈伤组织产生最多不定芽芽点。     

葡萄柚不定芽再生体系建立研究

为建立葡萄柚上胚轴离体再生体系,且为遗传转化技术在葡萄柚上的应用提供产参考,以葡萄柚种子实生苗上胚轴为材料,研究了不同激素种类与浓度对上胚轴愈伤组织诱导与分化及无菌苗生根的影响。结果表明:在添加KT 1.5～2.0 mg/L的MT培养基上,上胚轴切口愈伤发生率及对应的不定芽发生率均高于对照及其它处理;在KT 2.0 mg/L的基础上,添加浓度为0.2～0.3 mg/L的NAA对愈伤分化无增加作用,但对不定芽分化率有较大的提高作用,不定芽分化率达87.23%;3种激素比较,ABT 1.0 mg/L的生根效果高于其它处理,生根率达81.3%;卡那霉素对上胚轴的选择压力为60mg/L。综上所述,MT基本培养基中添加KT 2 mg/L及NAA 0.2～0.3 mg/L对葡萄柚上胚轴的不定芽发生率有显著的促进作用;ABT是无菌苗生根的较合适激素;卡那霉素对上胚轴的选择压力为60 mg/L。     

荞麦愈伤组织培养及其分化的研究

以荞麦的成熟胚，幼胚，下胚轴为外植体，在不同激素浓度配比，不同基本培养基质培养基上的组织培养研究表明：以成熟胚为外植体时，对愈伤组织诱导和生长最适培养基是２．４－Ｄ２．０，ＮＡＡ１．０，６－ＢＡ。０．５的Ｂ＿５培养基；以幼胚为外植体时，对愈伤组织的诱导和生长最适合的培养基是２．４－Ｄ２．０，ＮＡＡ１．０，６－ＢＡ０的ＭＳ培养基；以下胚轴为外植体时，Ｂ＿５和ＭＳ两种培养基均不适合愈伤组织的生长。２．４－０对荞麦愈伤组织根的分化有一定的促进作用。     

钙果愈伤组织诱导和植株再生的研究

对钙果愈伤组织的诱导及植株再生的研究结果表明,在MS KT0.3 mg/L NAA0.5 mg/L的培养基中,叶片愈伤组织诱导率达到98.7%;叶片比茎段更适宜作为诱导愈伤组织的外植体,其诱导率比茎段为外植体时高12.7%,而且形成的愈伤组织致密、色泽正常、表面突起均一;愈伤组织分化为芽时,MS 6-BA0.1 mg/L IAA1.5 mg/L培养基的效果最好,分化率达到96%,平均芽数为3.38;不定芽在生根培养基1/2MS IAA0.5 mg/L上,生根率达到70%,平均根长为4.03 cm,平均根数达到5.90。移栽时选用腐殖土为基质,小苗成活率达88%。     

6-BA、NAA对苜蓿不同外植体愈伤组织培养的影响

以新牧1号和新疆大叶两个苜蓿品种为试材,研究了7个培养基对不同无菌苗外植体愈伤组织诱导和生长影响,以及不同浓度的植物生长调节物质6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)对愈伤组织生长及分化的作用.结果表明:(1)浓度在2～8 mg/L,NAA有利于苜蓿愈伤组织的诱导,随浓度的增大呈促进作用,而在1～3 mg/L,1mg/L 6-BA有利于苜蓿愈伤组织的诱导,随浓度的增大呈抑制作用;(2)MS+2,4-D 2 mg/L+NAA 4 mg/L+6-BA 1 mg/L即MS4为新牧1号的较佳诱导培养基,MS+2,4-D 2 mg/L +NAA 8 mg/L +6-BA 1 mg/L即MS5为新疆大叶苜蓿的较佳诱导培养基;(3)以无菌苗下胚轴、子叶及叶片为外植体,确定下胚轴为诱导愈伤组织的最佳外植体.     

浙贝母鳞茎愈伤组织诱导分化及植株再生研究

以狭叶、宽叶和多籽浙贝母品种鳞茎为材料,研究了不同消毒方法、不同激素配比培养基对浙贝母愈伤组织诱导和分化及植株再生的影响。结果表明,0.1%升汞处理20 min为最佳的消毒方法;在诱导培养基MS+NAA 1.5 mg ·L-1+KT 0.5 mg ·L-1中诱导率最高,达到36.7%;在分化培养基MS+NAA 4.0 mg ·L-1+KT 1.0 mg ·L-1中分化率最高,达到80.7%。研究结果还发现,不同基因型浙贝母对鳞茎愈伤组织诱导与分化及植株再生有较大影响。     

常绿萱草组培快繁技术研究

以常绿萱草茎尖为外植体,研究了不同消毒方式、培养基配方对于外植体生长的影响,并探索了最适于愈伤组织形成、不定芽增殖和生根的培养基配方。结果表明:在无菌条件下,用75%酒精消毒30S,再转入0.1%升汞溶液浸泡8分钟消毒效果最好;有利于外植体产生愈伤组织的培养基配方是MS+2.0mg/LBA+0.2mg/LNAA;适合愈伤组织诱导生芽培养基配方是MS+1.0mg/L2.4-D+1.0mg/LKT;适合幼苗生根的培养基配方是MS+NAA0.5mg/L+活性炭0.2mg/L。     

玫瑰天竺葵组培快繁技术的研究

分别以玫瑰天竺葵的幼叶、叶柄、茎尖为外植体进行离体组培快繁技术研究,结果表明:最适宜的外植体为幼叶。经优化,叶柄丛生芽诱导的最佳培养基为:MS BA 1.0 mg/L NAA 0.2 mg/L;茎尖丛生芽诱导的最佳培养基为:MS BA 0.5 mg/L KT0.5 mg/L;继代增殖培养基为:MS BA 2.0 mg/L NAA 0.1 mg/L;生根培养基为:1/2MS IBA 0.5 mg/L。     

结缕草组织培养及转化因子的初步研究

以破除休眠的结缕草种子为试材，对其愈伤组织的诱导、分化及农杆菌介导转化的关键因子作了探索，结果表明：结缕草种子愈伤组织的诱导以含2，4-D 1mg/L NAA 3mg/L 6-BA0．2mg/L、分化以KT 3mg/L 6-BA 3．5mg/L NAA 0．1mg/L、生根培养以含0．2mg/L NAA的MS培养基效果最佳。通过瞬间表达的研究表明，以继代培养2周的愈伤组织为材料，农杆菌介导感染10min进行转化为佳。