半夏再生体系的建立

【目的】优化半夏再生条件,以获得优质半夏种苗.【方法】筛选出适宜的外植体后,使用3种激素2,4-D,KT,IAA利用正交设计法设置9个处理组对半夏愈伤组织进行诱导.选取长势良好,大小均一的半夏愈伤组织接于4种培养基中进行愈伤组织增殖.选取半夏叶柄诱导出的愈伤组织将其接于5种培养基中进行愈伤组织分化,观察不同培养基对半夏愈伤组织生根和出芽的影响,最后进行炼苗与移栽.【结果】在叶柄、叶片及块茎3种外植体中,叶柄是半夏愈伤组织诱导的最佳外植体;最有利于半夏愈伤组织诱导的培养基为MS+0.5 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT+1.0 mg/L IAA;在暗培养条件下,将半夏愈伤组织继代于MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT+1.0 mg/L IAA中生长最快;MS+0.2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA培养基最有利于半夏愈伤组织的生根和出芽.     

新疆紫草愈伤组织诱导及植株再生研究

以新疆紫草根、下胚轴、子叶、真叶为外植体,MS附加各种激素进行愈伤组织诱导及其分化、植株再生研究。研究结果表明:①根、胚轴、子叶、真叶的平均出愈率差异不大,但出愈速度差异明显;子叶出愈快,愈伤生长量最大;不定芽分化率依次为下胚轴>根>真叶>子叶。②诱导脱分化的效应KT优于6-BA;降低2,4-D浓度有利于愈伤组织的增殖。激素与外植体有互作效应。③真叶在MS NAA0.5 mg/L KT0.4 mg/L的培养基上能直接形成丛生芽。④不定芽在MS IAA0.5 mg/L KT1.0 mg/L培养基中生根率为83.3%;由此建立了新疆紫草再生体系。⑤不同外植体均可诱导出红色愈伤,颜色深浅依次为真叶>子叶>胚轴>根,且激素可以调控不同外植体愈伤红色的程度;同时红色愈伤能分化产生红色不定根。利用进一步优化的体系可进行快繁并提取愈伤组织中的紫草素。     

苜蓿愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以改良SH为基本培养基,研究了不同激素配比和不同外植体对苜蓿愈伤组织诱导的影响,筛选出诱导愈伤组织的最佳外植体是下胚轴、最佳培养基为SH+2,4-D 2mg/L+KT 0.2mg/L;继代增殖后对愈伤组织进行分化再生培养,研究了附加不同浓度外源激素的MS和改良SH培养基对愈伤组织分化的影响,确定最佳分化培养基为改良SH+NAA0.1mg/L+KT 0.5mg/L。     

甘薯的组织培养

以甘薯的叶片为外植体进行组织培养,结果表明:适合甘薯愈伤组织诱导的培养基是MS+KT 2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L和MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L,适宜愈伤组织分化出根的分化培养基是MS+KT 0.5 mg/L或MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5mg/L或MS+KT 2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L,适宜根分化出试管苗的分化培养基为MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;增殖培养基为MS;生根的培养基为1/2 MS.     

普那菊苣再生体系的优化

以普那菊苣叶片、叶柄、茎段为外植体,比较了在含不同激素浓度配比的MS培养基上愈伤组织、芽分化以及根再生的情况,优化普那菊苣组织培养再生体系。结果表明,0.1%Hg Cl2灭菌8 min时,能有效地去除外植体表面上的微生物,而且对外植体的伤害较轻;叶片、叶柄和茎段均能通过组织培养获得再生植株,其中,叶片外植体诱导效果最佳,茎段外植体诱导效果最差;普那菊苣叶片的极性对愈伤组织的形成以及不定芽的产生没有显著影响;外植体类型是影响愈伤组织、芽分化以及根再生的主要因素。优化的普那菊苣再生体系为:使用叶片外植体,愈伤组织和芽分化诱导培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+Ag NO30.5 mg/L+Vc 0.3 mg/L或MS+KT1.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L+CH 100 mg/L,生根培养基为MS+NAA 0.2 mg/L或MS+IBA 0.2 mg/L。     

紫花苜蓿高效遗传转化受体系统的建立

以新疆大叶和新牧一号苜蓿下胚轴和子叶为材料,研究了不同基因型、外植体、培养基及激素配比对其愈伤组织诱导、芽分化和根诱导的影响,建立了适用于这2种苜蓿的再生体系。结果表明,下胚轴是一种较好的外植体材料,其再生能力高于子叶,最高再生率为54.96%;0.2 mg/L KT能辅助2,4-D对愈伤组织的诱导发挥更好的作用;SH培养基相对于MS培养基对愈伤组织的诱导更有效,而MS培养基则有利于愈伤组织的分化;适用于2种苜蓿愈伤组织诱导、分化及生根培养的培养基分别为SH(附加2 mg/L 2,4-D和0.2 mg/L KT),MS(附加1.0 mg/LBAP和0.3 mg/L NAA)和不含激素的1/2 MS(扩繁时附加1 mg/L IBA)。     

长柄紫果槭愈伤组织培养研究

对长柄紫果槭的嫩茎、叶柄和叶片进行愈伤组织的诱导研究,结果表明各个外植体诱导愈伤组织的难易程度为嫩茎>叶柄>叶片;6月份采摘的外植体分化能力强,褐化少,染菌率低,最适合诱导愈伤组织;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L组合诱导愈伤组织诱导率为63%,诱导出的愈伤组织结构致密;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+KT1.0 mg/L组合的继代培养基,增殖系数达到2.9。     

甘薯品种南薯88的组织培养及植株再生研究

[目的]为南薯88的离体筛选及遗传转化奠定基础。[方法]以南薯88的叶片和叶柄为外植体,置于不同激素配比的培养基中,进行组织培养及植株再生,研究不同激素及外植体对南薯88植株再生的影响。[结果]单独使用6-BA、NAA诱导愈伤组织的效果不理想。过高浓度的2,4-D不利于外植体根的形成,也不利于芽的诱导。在MS+NAA1 mg/L+6-BA0.5 mg/L、MS+2,4-D0.05 mg/L+KT1 mg/L培养基中,两种外植体的出愈率均达100%,根分化率均达100%,叶片的芽分化率分别为20%、7%,叶柄的芽分化率均为7%,成功获得再生植株。相同的培养基,不同外植体的愈伤组织生长情况差异不大,器官的分化表现出一定的差异。[结论]南薯88组织培养较适宜的培养基为MS+NAA1 mg/L+6-BA0.5 mg/L、MS+2,4-D0.05 mg/L+KT1 mg/L。南薯88叶片的分化能力大于叶柄。     

一种84K杨再生体系的建立

将脱分化与再分化过程分开,探讨不同培养基和激素配比对黑暗条件下84K杨叶片及茎段外植体产生愈伤组织及愈伤组织诱导出芽的影响.结果表明,84K杨叶片产生愈伤组织的高效培养基为MS+KT 0.5 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;茎段为WPM+KT0.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L.愈伤组织诱导出芽的高效培养基为WPM+TDZ 0.05 mg/L+6-BA 0.5 mg/L.为下一步获得高效的84K杨转基因体系提供一个高效受体系统.     

黑莓松散型胚性愈伤组织的诱导

为了诱导出黑莓松散型胚性愈伤组织,试验采用黑莓试管苗叶片、叶柄和茎段为外植体,在含有不同2,4-D及分裂素的MS培养基上进行愈伤组织的初步诱导,从中筛选出松散型愈伤组织的最佳培养基配方;再将诱导出的黑莓松散型愈伤组织转移到含有不同激素种类和浓度的MS培养基上进行松散型胚性愈伤组织的诱导,从中筛选出最佳培养基配方。结果表明,在1/8 MS+3 mg/L 2,4-D+100 mg/L Vc+10 g/L蔗糖的培养基上可以诱导出松散的黑莓愈伤组织;先在MS+2 mg/L 2,4-D+1 mg/L KT+100 mg/L Vc+30 g/L蔗糖的培养基上进行胚性愈伤的诱导继代2~3次,然后转移到MS+0.5 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+100 mg/L Vc+30 g/L蔗糖的培养基上继续培养并继代3~5次后即可诱导出黑莓的松散型胚性愈伤组织。试验结果将为采用黑莓体细胞诱变育种研究奠定基础。     

新疆大叶紫花苜蓿(Medicago sativa.L)子叶、下胚轴、根的植株再生

随着植物抗逆性研究和植物转基因技术的发展,通过异源目的基因转化培育耐盐碱苜蓿品种的研究已引起人们的关注,植物受体高频再生体系的建立是异源转化高效的基础。选取新疆大叶紫花苜蓿种子萌发5～7d无菌苗的子叶、下胚轴及根为外植体,诱导愈伤培养基为MS 2,4-D0.1～3.0mg/L(8种不同水平)或MS 2,4-D2.0mg/L KT0.01～0.5mg/L(10种不同水平),诱导芽培养基为MS 6-BA0.5mg/L NAA0.05mg/L,生根培养基为MS。结果表明,外植体在MS 2,4-D2.0mg/L KT0.2mg/L培养基中能够产生状态较好可再分化的愈伤组织,子叶、下胚轴、根的平均出愈率分别为93.1%、100%、100%。愈伤组织在MS 6-BA0.5mg/L NAA0.05mg/L培养基中培养40～80d中均可分化芽,子叶、下胚轴、根的芽平均分化率为50%、78%、50%,将2cm以上的芽转入MS培养基中诱导生根,14d后,生根的小植株炼苗移入花土中,成活率达90%以上。子叶、下胚轴、根在该体系中均能获得再生植株,根也是一种较好的植株再生材料,以根为外植体进行植株再生的研究报道还较少。     

南方型紫花苜蓿Millennium组织培养及其再生

以南方型紫花苜蓿Millennium种子发育5~7 d无菌苗的子叶、下胚轴为外植体,对紫花苜蓿愈伤组织诱导和植株再生进行了研究。结果表明,在愈伤组织诱导中,下胚轴为最佳外植体材料,出愈率随着2,4-D质量浓度的增加呈明显的升高趋势,最佳愈伤组织诱导培养基为2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,诱导率达到100%。紫花苜蓿诱导最佳愈伤组织的分化培养基为MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L,下胚轴愈伤组织分化率达到58%,子叶愈伤组织分化率达到40%。将苗切下转接到1/2 MS+20 g/L蔗糖质量浓度时,培养6 d即可诱导生根,诱导生根率达到100%,完成植株再生仅需60~70 d。成功地建立了南方型Millenni-um紫花苜蓿子叶和下胚轴的离体培养再生途径,并获得了再生植株。     

马齿苋的组织培养和植株再生

用马齿苋的幼嫩叶片和茎段建立了马齿苋组织培养及植株再生系统。最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L或2,4-D 1.0 mg/L,愈伤组织诱导率均可达100%。将生长良好的愈伤组织块转入分化培养基中以诱导不定芽的分化,其最适分化培养基为MS 6-BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L,分化率达到87.5%。再生苗在1/2MS IBA 2.0 mg/L的培养基上诱导生根,经过15d培养,100%生根成苗。     

旱半夏组织培养技术的优化研究

以旱半夏无菌苗的叶片、叶柄和块茎为外植体,在不同温度及激素组合的条件下,进行了愈伤组织诱导、芽分化和生根的研究。结果表明:愈伤组织诱导的最适温度为25℃;MS+KT 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L对块茎的愈伤诱导效果最好,诱导率达96.7%。温度对芽分化的影响不明显;最佳的芽分化培养基为MS+KT 3.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L。MS+IBA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L对单芽增殖效果明显。MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L最有利于生根。     

柱花草组织培养研究

以6个柱花草品种为材料，研究了柱花草愈伤组织的诱导、芽和根的分化等组织培养技术，结果表明，外值体和培养基对柱花草组织培养的影响较大．愈伤组织的诱导，6个品种之间无显著性差异，但不同的外值体却表现出极显著的差异，其中真叶的出愈率最高；芽和根的分化，真叶的分化系数、生根率和生根系数最高，最佳芽和根的分化培养基分别为MS＋I．0mg／LNAA＋4．0mg／LKT，1／2MS＋I．0mg／LNAA＋0．5mg／LKT．     

植物激素对三樱椒愈伤组织根的分化及植株再生的影响

对三樱椒下胚轴愈伤组织的分化及植株再生进行了研究。结果表明：（1）NAA（萘乙酸）和BA（6－苄基腺嘌呤）的浓度比值对愈伤组织根的分化有重要作用，其比值越大，越有利于根的分化。（2）细胞分裂素在苗的分化中起决定作用，KT（激动素）2mg/L和KT2mg/L NAA0.02mg/L PP333(多效唑）0.01mg/L配合使用对苗的诱导效果最好。BA2mg/L也可诱导苗的分化，但苗的分化率很低。三樱椒不同品系的下胚轴愈伤组织苗的分化率各不相同。     

花榈木胚轴愈伤组织的诱导及植株再生

［目的］通过愈伤组织诱导途径,建立快速高效的花榈木再生体系。［方法］花榈木成熟种子在MS培养基中萌发获得无菌苗,以幼苗的胚轴为外植体诱导愈伤组织,经继代后进一步诱导不定芽和生根。［结果］诱导花榈木愈伤组织的最适培养基为MS＋ 1.0 mg/L 2,4 D＋0.5 mg/L KT,诱导率达96.7％;诱导愈伤组织分化不定芽的培养基为MS＋0.5 mg/L NAA＋0.1 mg/L TDZ,其不定芽诱导率为85.0％;平均每块愈伤产生不定芽6.2个;生根的最适培养基为1/2WPM＋0.5 mg/L NAA ＋0.5 mg/L IBA,生根率为88.9％。炼苗移栽后,成活率可达85.0％。［结论］花榈木胚轴愈伤组织诱导途径的植株再生是一套快速高效的离体再生体系,可为花榈木种质资源保存、转基因、遗传育种等研究提供重要参考。     

番茄耐低温材料离体再生体系的建立

以筛选出的耐低温番茄TTI1103B-2为材料,以下胚轴为外植体进行离体培养,通过不同激素组合处理,诱导愈伤组织、不定芽及不定根的形成,建立其高效再生体系。结果表明,6-BA、IAA与愈伤组织的诱导和不定芽的分化有极显著差异性,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+3.0mg/L 6-BA+0.2mg/L IAA,诱导不定芽分化的最佳培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA,最适宜生根培养基为MS+IAA0.2mg/L。     

蓬莪术的离体快繁研究

[目的]探索蓬莪术的离体快繁技术。[方法]以蓬莪术嫩叶、块茎和根为外植体,接种在以MS为基本培养基,外加不同浓度激素组合的培养基上进行愈伤组织诱导、增殖和分化培养;以幼芽为外植体,进行幼芽的增殖、生根培养和移栽等。[结果]诱导蓬莪术叶、块茎和根的愈伤组织形成的最适培养基为MS＋2,4-D1.0 mg/L＋6-BA0.5～1.0 mg/L＋NAA0.3 mg/L,其中蓬莪术叶诱导率最高,达96%;愈伤组织增殖和分化培养还有待进一步研究。幼芽最适增殖培养基为MS＋6-BA3.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L＋KT1.0 mg/L,其增殖倍数达3.5以上;而生根培养基以1/2 MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L为最佳,生根率达100%,其移栽成活率达85%以上。[结论]该研究结果为蓬莪术的快速繁殖及工厂化生产奠定了基础。     

黑芝麻愈伤组织的诱导及分化的初步研究

以黑芝麻(Sesamum indicum DC)成熟种子无菌苗的子叶、子叶节、下胚轴作为外植体,选用MS基本培养基,并设置4种蔗糖浓度作愈伤组织诱导培养基,以2,4-D、6-BA、IAA、KT组成16种生长调节剂浓度配伍的分化培养基,对愈伤组织的形成及分化进行了研究.结果表明,蔗糖浓度30 g/L时对子叶、子叶节愈伤组织诱导较为有利,蔗糖浓度40 g/L时对下胚轴愈伤组织诱导较为有利,分化培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L IAA 1.5 mg/L时,子叶愈伤组织的分化率达30.0%,其效果较好.