丁酸梭菌对动物致病菌的拮抗作用研究

探讨了丁酸梭茵(Clostridium butyricum)B1株对5种常见动物致病菌的体外拮抗作用.将丁酸梭菌分别与猪大肠杆菌(Escherichia coli)K88、K99、O139株和猪肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)O4Hi株、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)混合接种于GAM培养基进行厌氧培养,并与致病菌单独培养相比较.结果发现,培养48 h后,致病菌菌数显著低于对照,说明丁酸梭菌B1株对猪大肠杆菌K88、K99、O139株和猪肠炎沙门氏茵O4Hi株、金黄色葡萄球菌均有显著抑制作用.     

阿鲁科尔沁草原牛乳中乳酸菌生物学特性的研究 --肠球菌属等的鉴定

本项研究从科尔沁草原的阿鲁科尔沁牧区南北4个苏木16个牧户中采集43个乳样.从43个乳样中分离到64株乳酸菌,对其中的47株进行鉴定,结果分离到肠球菌属(Enterococcus)13株,乳球菌属(Lactococcus)2株,片球菌属(Pedio-coccus)3株.对其中8株分离株进行了种的鉴定,结果为殊异肠球菌(E.dispar)1株,蒙特氏肠球菌(E.mundtii)1株,类鸟肠球菌(E.pseudoavium)1株,屎肠球菌(E.faecium)3株,乳球菌乳脂亚种(L.lactissubspcremoris)1株,乳球菌乳亚种(L.lactissubspLactis)1株,嗜盐片球菌(P.halophilus)1株.通过研究发现,被鉴定菌株的生物学特性基本符合各属和种的鉴定标准,均属于中温性乳酸菌.     

阿鲁科尔沁草原牛乳中乳酸菌生物学特性的研究——肠球菌属等的鉴定（第2报）

本项研究从科尔沁草原的阿鲁科尔沁牧区南北4个苏木16个牧户中采集43个乳样。从43个乳样中分离到64株乳酸菌，对其中的47株进行鉴定，结果分离到肠球菌属（Enterococcus)13株，乳球菌属（Lactococcus)2株，片球菌属（Pedio-coccus)3株。对其中8株分离株进行了种的鉴定，结果为殊异肠球菌（E.dispar)1株，蒙特氏肠球菌（E.mundtii)1株，类鸟肠球菌（E.pseudoavium)1株，屎肠于菌（E.faecium)3株，乳球菌乳脂亚种（L.lactis subsp cremoris)1株，乳球菌乳亚种（L.lactis subsp Lactis)1株，嗜盐片球菌（P.halophilus)1株。通过研究发现，被鉴定菌株的生物学特性基本符合各属和种的鉴定标准，均属于中温性乳酸菌。     

青贮饲料中微生物及乳酸菌特性初步研究

分析青贮饲料中微生物的种类和数量,从中分离鉴定了22株乳酸菌,并研究了这些乳酸菌的特性。结果表明:分离株都是革兰氏阳性、过氧化氢酶阴性和兼性厌氧菌。根据所分离到的乳酸菌的形态学和生理生化特性,这些乳酸菌可被分为6组(A-F)。经表型分类鉴定,A组、B组、C组和D组为典型的乳杆菌属(Lactobacillus)。E组属于肠球菌属(Enterococcus)。F组为明串珠菌属(Leuconostoc)。青贮饲料中的大多数乳酸菌为乳杆菌属(Lactobacillus),占总数的79%以上。     

临床感染猪肠球菌菌株的分离与鉴定

对分离自河南洛阳、济源、许昌、南阳等地送检病猪内脏的42份革兰阳性球菌分离纯化,根据细菌形态学、培养特性和生长耐性试验结果,初步确定为肠球菌,采用V itek-32全自动细菌鉴定系统对其进行鉴定,共鉴定出了34株肠球菌.其中,粪肠球菌(Enterococcus faecalis)10株、屎肠球菌(E.faecium)2株、铅黄肠球菌(E.casselifla-vus)22株.另有8株未鉴定到种的水平.     

饲喂发酵棉粕肉牛牛粪中细菌数量及多样性研究

【目的】研究饲喂发酵棉粕对安格斯肉牛牛粪中细菌数量及多样性的影响。【方法】采用平板计数法计算细菌的数量;采用PCR技术对提出的DNA进行细菌16Sr DNA基因V6-V8区扩增,将PCR产物进行变性梯度凝胶电泳(DGGE)。得到指纹图谱特异性条带切胶回收并进行克隆测序,通过BLAST鉴定细菌菌种。【结果】(1)试验前期,C组和T组总细菌、大肠杆菌和乳酸菌差异显著(P0.05);C组和T组金黄色葡萄球菌差异不显著(P0.05)。试验后期,C组和T组总细菌差异不显著(P0.05);C和T组大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和乳酸菌差异显著(P0.05)。(2)牛粪中存在的菌种有沙门氏菌(Salmonella)、瘤胃球菌(Ruminococcus)、乳酸菌(Lactobacillus)、毛螺旋菌(Lachnospiraceae)、志贺菌(Shigella)、梭菌(Clostridium)、大肠杆菌(Escherichia coli)、肠杆菌(Enterobacter)和肠球菌(Enterococcus),而其中乳酸菌、大肠杆菌可能是牛粪中的优势菌群。【结论】试验前期和后期总细菌、大肠杆菌、金黄色葡萄菌的数量有明显变化,牛粪中存在多种细菌表现了牛粪中微生物菌群的多样性。     

粪肠球菌的生物学特性及其在养殖业中的应用

粪肠球菌(Enterococcus faecalis)是乳酸菌的一类,属于链球菌科(Streptococcaceae)肠球菌属(Enterococcus),细胞呈球形,链状排列,无芽孢,兼性厌氧,为革兰氏阳性菌,是人类和动物肠道中重要菌群之一。粪肠球菌能够调节动物肠道菌群平衡,增强机体免疫力,促进肠道上皮细胞生长与修复,提高饲料转化率,促进动物体生长。该菌容易在动物肠道中定植并发挥作用,具有广阔的应用前景。     

酸马奶中乳酸菌的分离、纯化与鉴定

分别从乌鲁木齐市水西沟镇、伊犁地区、吉尔吉斯斯坦和哈萨克斯坦采集的酸马奶样品中,分离纯化得到乳酸菌21株.经形态学、生理生化特性研究分别鉴定为乳杆菌属(Lactobacillus)17株,分别为干酪乳杆菌(L.casei)、消化乳杆菌(L.alimentarius)、詹氏乳杆菌(L.jensenii)、耐酸乳杆菌(L.acetotolerans) 、戊糖乳杆菌(L.pentosus)、德氏乳杆菌德氏亚种 (L.delbrueckii subsp.delbruerkii)、玉米乳杆菌(L.zeae);乳球菌属(Lactococcus)1株,为植物乳球菌(L.plantarum);肠球菌属(Enterococcus)1株,为粪肠球菌(E.faecalis);明串珠菌属(Leuconostoc) 1株,为肠膜明串珠球菌(L.mesentaroides)中的葡聚糖亚种(subsp. mesentaroides);链球菌属(Streptococcus)1株,为嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus ).     

乳酸菌对Caco-2细胞分泌APRIL和IL-10的影响

【目的】通过检测促炎细胞因子APRIL和抗炎细胞因子IL-10的分泌水平来观察屎肠球菌和乳酸乳球菌对肠上皮细胞先天性免疫应答的调节作用。【方法】Caco-2细胞分别和PBS（CT组,阴性对照组）、Escherichia coli K88（EC组,阳性对照组）,Enterococcus faecium（EF组）或Lactococcus lactis（LL组）共孵育2 h,以及先分别和Enterococcus faecium或Lactococcus lactis共孵育1 h,再和Escherichia coli K88共孵育2 h（EF-EC组和LL-EC组）。试验结束时,用ELISA方法检测细胞培养上清中APRIL和IL-10的含量。【结果】结果表明,2株乳酸菌都促进正常状态下的肠上皮细胞分泌促炎细胞因子APRIL和抗炎细胞因子IL-10,抑制Escherichia coli K88对APRIL分泌的诱导作用,促进Escherichia coli K88感染的肠上皮细胞分泌IL-10。【结论】体外试验条件下,屎肠球菌和乳酸乳球菌能够诱导肠上皮细胞产生先天免疫应答,分泌APRIL和IL-10,抑制大肠杆菌K88引起的促炎反应,表现出抗炎作用。     

加味白头翁散发酵产物对肉仔鸡大肠杆菌病的防治效果及对其肠道菌群的影响

为探讨加味白头翁散发酵产物对鸡大肠杆菌病的治疗效果及对其肠道菌群的影响,将180羽10日龄AA白羽肉鸡随机均分6组,即加味白头翁散发酵产物预防组、加味白头翁散预防组、感染对照组、健康对照组、加味白头翁散发酵产物治疗组、加味白头翁散治疗组。预防组于攻毒前连续饲喂相应药物5 d后,除健康对照组外,其余各组均胸肌接种野毒分离株大肠杆菌DE,然后各组连续给药5 d。结果表明,加味白头翁散发酵产物、加味白头翁散对野毒分离株大肠杆菌DE攻毒预防效果优于治疗效果,差异极显著(P 0. 01);加味白头翁散发酵产物对野毒分离株大肠杆菌DE攻毒预防效果优于加味白头翁散,差异极显著(P 0. 01);加味白头翁散发酵产物、加味白头翁散对野毒分离株大肠杆菌DE攻毒治疗效果差异不显著(P 0. 05)。加味白头翁散发酵产物组和加味白头翁散组肉仔鸡盲肠中大肠杆菌的数量极显著低于感染对照组(P 0. 01),与健康对照组差异不显著(P 0. 05);肠球菌、乳酸菌、双歧杆菌及芽孢杆菌等数量均极显著高于感染对照组(P 0. 01),预防组肠球菌、双歧杆菌数量与健康对照组差异不显著(P0. 05),预防组芽孢杆菌、乳酸菌数量与健康对照差异极显著(P 0. 01)。加味白头翁散发酵产物组肉仔鸡盲肠中大肠杆菌的数量略低于加味白头翁散组,差异不显著(P 0. 05);加味白头翁散发酵产物预防组肉仔鸡盲肠中肠球菌、乳酸菌、双歧杆菌及芽孢杆菌等数量均略高于加味白头翁散组,肠球菌、双歧杆菌处理间差异不显著(P 0. 05),乳酸菌、芽孢杆菌的处理间差异显著(P 0. 05)。因此,加味白头翁散发酵产物能有效预防肉仔鸡大肠杆菌病,恢复肠道微生态平衡。     

乳杆菌竞争性抑制两种病原菌粘附上皮细胞的研究

【目的】研究嗜酸乳杆菌(LAB1)在体外模拟预防和治疗条件下,竞争性抑制致病性大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli )和沙门氏菌(Salmonella choleraesuis,S.cho)对仔猪空肠上皮细胞系（IPEC-J2）的粘附作用。【方法】 用LAB1预处理IPEC-J2后再用E. coli或S.cho攻毒为模拟预防实验;用E. coli或S.cho先攻毒IPEC-J2后再用LAB1处理为模拟治疗试验。提取粘附后的3种菌及IPEC-J2的DNA,使用文献记载和自行设计的引物,利用实时荧光定量PCR方法,量化检测LAB1与E. coli 、S.cho之间的竞争性粘附率。【结果】在模拟治疗试验中,在高（1.0×109 CFU）、中（1.0×108CFU）、低（1.0×107CFU）3种浓度的LAB1处理条件下,能显著抑制高、中浓度S.cho对IPEC-J2的粘附（P＜0.05）;在模拟预防试验中,相同浓度的LAB1能显著抑制相同浓度的S.cho对IPEC-J2的粘附（P＜0.05）。在模拟预防和治疗试验中,3种浓度LAB1均能显著抑制低浓度E. coli对IPEC-J2的粘附（P＜0.05）,高浓度LAB1能显著抑制高、中浓度E. coli对IPEC-J2的粘附（P＜0.05）。【结论】在体外试验条件下,LAB1对E. coli及S.cho粘附IPEC-J2有竞争性抑制作用。在模拟预防和治疗试验中,LAB1对E. coli及S.cho粘附IPEC-J2的竞争性抑制作用效果有所不同。     

芽孢乳杆菌S1对断奶前后仔猪肠道乳酸菌、大肠杆菌和挥发性脂肪酸含量变化的影响

将6窝仔猪随机分成对照组和处理组,研究外源乳酸菌芽孢乳杆菌S1对仔猪空肠和结肠食糜中乳酸菌和大肠杆菌的数量及挥发性脂肪酸(VFA)含量的影响.结果表明:仔猪断奶前,空肠和结肠食糜中乳酸菌和大肠杆菌的数量较稳定;断奶后,仔猪空肠和结肠食糜中乳酸菌和大肠杆菌的数量均明显下降,乳酸菌的下降更显著.与对照组相比,芽孢乳杆菌S1能提高断奶后仔猪空肠和结肠食糜中乳酸菌与大肠杆菌的数量比值.断奶后,仔猪结肠VFA含量明显下降,与对照组相比,处理组结肠VFA含量明显较高.     

中草药黄荆复方提取物的体外抑菌试验*

 用水提法提取黄荆、黄连、大黄等药组成的中草药复方，以不同梯度药物提取物进行体外抑菌试验，观察其对大肠杆菌O₂,O₄,O₅,O₈,O₁₀₁，猪伤寒沙门氏菌C_78-2,猪副伤寒沙门氏菌C₅₀₀,鸡白痢C_79-13，绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、气单胞菌、表皮葡萄球菌等12种细菌的抑制效果。结果表明，黄荆复方除对表皮葡萄球菌无抑制作用外，对其它11种细菌均有较好的抑制作用。     

金华地区仔猪致病性大肠杆菌的血清型鉴定及药敏试验

为了调查金华地区仔猪大肠杆菌的耐药性及流行血清型,从金华地区21个猪场采集96份仔猪大肠杆菌病病料进行病原菌的分离和生化鉴定, 结果分离到大肠杆菌79株,其中致病性大肠杆菌68 株,对68 株致病性大肠杆菌进行了8 种抗生素敏感性试验, 发现对丁胺卡那霉素、氟苯尼考、头孢噻呋最敏感, 庆大霉素、红霉素、环丙沙星等抗菌药虽然有一定效果,但大多是低敏感或中度敏感,而对氨苄青霉素 、诺氟沙星则基本耐药。对分离的68 株致病菌进行了血清型鉴定表明,共有O13,O48,O54,O98,O146,O149,O161等7 种血清型, 其中O13,O54,O98为优势血清型。     

致鸡肝炎大肠杆菌与鸡舍空气致病性大肠杆菌生物学特性比较分析

研究了河北某地区致鸡肝炎大肠杆菌(Escherichia coli)和鸡舍空气致病性大肠杆菌的血清型和耐药性差异。根据细菌分离培养特性、形态学、生化试验、动物试验及玻板凝集试验结果,从病鸡肝脏中分离出了致病性大肠杆菌38株,其O型优势血清型与同地区鸡舍空气分离出的大肠杆菌血清型相似。药敏试验结果显示,O型致鸡肝炎大肠杆菌与已分离出的同地区鸡舍空气致病性大肠杆菌的耐药特征也具有相似性。这说明致鸡肝炎大肠杆菌与同地区鸡舍空气致病性大肠杆菌的某些生物学特性是相同的,大肠杆菌引起的鸡肝炎病与存在于空气中的致病性大肠杆菌有一定的关系。     

鸡大肠杆菌1型菌毛单克隆抗体的研制

将菌毛化的大肠杆菌C600（fim^ ）经0.3%甲醛灭活后作为免疫原，经淋巴细胞杂交瘤技术，用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）筛选获得1F4－1和2C32株抗F1菌毛a或b因子抗原单抗和1株抗F1c因子抗原单抗，它们均为IgG1。免疫印迹试验结果表明：3株单抗均能同禽大肠杆菌1型菌毛反应，识别分子质量为17ku左右的菌毛蛋白。同时对沙门氏菌及猪源大肠杆菌进行检测，结果均无交叉反应性，说明禽病原性大肠杆菌F1菌毛与沙门氏菌1型菌毛及猪大肠杆菌粘附素之间存在很大差异。     

新型化学益生剂对仔猪腹泻的防制

为了探讨新型化学益生剂甘露聚糖 -寡糖 (mannanoligosaccharides,MOS)对家畜肠道致病菌的去粘附及免疫调节作用的机制 ,进行了初生仔猪的饲养试验以及致病性大肠肝菌的分离、鉴定及其与猪红细胞的凝集试验 .初生仔猪的饲养试验选用了三元杂交初生仔猪 6 0只 ,随机分成 2组 ,处理组口服 MOS的商品制剂(Bio- MOS) ,对照组则口服同体积的蒸馏水 ,试验期 2 8d.结果表明 ,初生仔猪添加 Bio- MOS,可明显提高仔猪的日增重 (P<0 .0 5) ,降低腹泻发生率 (P<0 .0 5) ,提高机体的细胞免疫和体液免疫水平 .分离到的致病性大肠杆菌可与猪红细胞发生凝集 ,而此凝集反应可被甘露糖、果糖和 Bio- MOS所抑制 .由此可见 ,致病性大肠杆菌粘附于肠上皮的作用可被这些糖类所阻断 ,因而可以预防仔猪的大肠杆菌性腹泻 .     

益生菌复合制剂的研制

[目的]研制益生菌复合制剂。[方法]分离、筛选纳豆芽孢杆菌xw1、乳酸菌xw2、酵母菌xw3,进行动物灌胃试验与肠道菌群检测试验。[结果]通过饲喂益生菌复合制剂,小鼠肠道厌氧菌菌群有不同程度地增多,且一些致病肠杆菌受到抑制。综合分析,得到1个益生菌复合制剂的适宜配方（108 cfu/m l）：纳豆芽孢杆菌xw1：乳酸菌xw2：酵母菌xw3为2∶1∶1。[结论]益生菌复合制剂有促进动物生长,维持肠道微生态平衡的功效。     

鹌鹑大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的病原分离与鉴定

通过对病鹌鹑的肝脏和脾脏中分离到的细菌，进行培养、生化鉴定及动物接种试验，确诊为大肠杆菌和沙门氏菌混合感染，在不同禽舍中采取的三处水样中，同样分离出了上述两种细菌，分离的6株大杆菌血清型鉴定结果Y2，Y6，Y8为O1；Y3，Y7，Y9为O22，并且均产生肠毒素，药敏试验结果从脏器中分离细菌对庆大霉素、卡那霉素、新霉素高度敏感；水样中分离的细菌对氯霉素高度敏感。     

抗猪大肠杆菌功能性卵黄粉的制备及对小鼠的攻毒保护作用

通过制备抗致病性大肠杆菌特异性IgY及富含特异性IgY的功能性卵黄粉,进行小鼠的攻毒保护试验,探讨功能性卵黄粉对由致病性大肠杆菌引起的疾病的防治作用.结果显示:(1)致病性大肠杆菌与特异性IgY混合后,菌体出现凝集,且病原菌的运动力明显受抑制;(2)浓度为1.3×109CFU·mL-1的致病性大肠杆菌K88、K99和9...