鸭源新城疫病毒和减蛋综合征病毒在同一鸭胚中增殖的观察

用鸭源新城疫病毒（ＮＤ）Ｄ１０株和减蛋综合征（ＥＤＳ—７６）病毒ＧＣ２株同时在同一鸭胚中复制增殖．结果表明：（１）两种病毒同时感染同一鸭胚后，鸭胚平均死亡时间（ＭＤＴ）７３．６ｈ，死亡率８８．２％（１５／１７）．胚体皮肤出血、淤血，绒毛尿囊膜水肿、增厚，尿囊液能凝集人和鸡红细胞．（２）尿囊液感染鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞，致细胞病变（ＣＰＥ），证实尿囊液中存在ＮＤＶ．用间接法Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ检测ＥＤＳ—７６病毒抗原，结果为阳性．（３）电镜观察经提纯浓缩后的尿囊液，可见到两种病毒粒子：ＮＤＶ形态不一，多数直径约１２０～１３０ｎｍ或更大．有囊膜；ＥＤＳ—７６病毒呈圆形，直径约７０ｎｍ，有囊膜．（４）用血凝试验（ＨＡ）测定两种病毒．其生长规律与单独接种时一致．（５）接种灭活的含毒尿囊液的雏鸡，在血清中出现抗两种病毒的ＨＩ抗体及抗ＥＤＳ－７６病毒的中和抗体，对ＮＤＶ强毒攻击有坚强的免疫力。     

鸡减蛋综合征、新城疫二联灭活苗的免疫性试验

在本试验中，比较了每头份疫苗含不同血凝单位病毒的免疫效果，结果每头份合ＥＤＳ病毒２０００血凝单位、ＮＤ病毒分别含２５０血凝单位和３６０血凝单位的疫苗，免疫后ＮＤ抗体峰值分别达１１．５ｌｏｇ２和１１．８ｌｏｇ２，ＥＤＳ抗体峰值达９．５ｌｏｇ２和９．８ｌｏｇ２。用每头份合ＥＤＳ病毒２０００血凝单位和ＮＤ病毒２５０血凝单位的疫苗，免疫接种不同ＮＤ抗体水平的三群试验鸡，结果各试验鸡群的ＮＤ抗体峰值无明显差别，ＥＤＳ抗体峰值也无明显差别。     

JEM-120EXⅡ电镜测量功能在病毒学研究中的应用

 应用JEM-1200EXⅡ透射电子显微镜测量系统观察和测量香石竹斑驳病毒、烟草花叶病毒、马铃薯Y病毒。结果表明:电镜测量的数据准确,测量系统性能可靠。     

鸡减蛋综合征,新城疫二联灭活苗的免疫性试验

在本试验中，比较了每头份疫苗含不同血凝单位病毒的免疫效果，结果每头份含ＥＤＳ病毒２０００血凝单位，ＮＤ病毒分别含２５０血凝单位和３６０血凝单位的疫苗，免疫后ＮＤ抗体峰值分别达１１．５ｌｏｇ２和１１．８ｌｏｇ２，ＥＤＳ抗体峰值达９．５ｌｏｇ２和９．８ｌｏｇ２用每头份含ＥＤＳ病毒２０００血凝单位和ＮＤ病毒２５０血凝单位的疫苗，免疫接种不同ＮＤ抗体水平的三群试验鸡，结果各试验鸡群的ＮＤ抗体峰值无明显差别     

间接Dot—ELISA检测EDS—76病毒抗原的研究

本研究成功地建立了间接酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）用于检测ＥＤＳ－７６病毒抗原的标准化程序。对纯化ＥＤＳ－７６病毒抗原的最低检出量为１ｎｇ／Ｄｏｔ,其敏感性约为ＨＡ的１５．６倍。ＥＤＳ－７６阳性鸡血清特异性阻断试验及交叉反应试验证明,该法对ＥＤＳ－７６病毒抗原的检测具有特异性。试验结果表明,间接Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测ＥＤＳ－７６病毒抗原,具有敏感性高、特异性强、重复性好、经济、方便、快速等优点,适合于大规模样本的检测。     

马传染性贫血病病毒L株前病毒全基因组核苷酸序列分析

 本实验所用的马传染性贫血病毒（ＥＩＡＶ）Ｌ株（ＥＩＡＶ－Ｌ）是我国研制成功的ＥＩＡＶ弱毒疫苗的原始强毒株。以ＥＩＡＶ－Ｌ感染马外周血液白细胞中ＤＮＡ为模板，利用ＰＣＲ技术，分４个片段扩增ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒ＤＮＡ，并分别克隆到载体质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＳＫ中，得到 ４个重组质粒ｐ２．８、ｐ２．４、ｐ３．１和 ｐ１．２，经酶切鉴定后测序。对测序结果分析、拼接，得到 ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒基因组全序列。ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒基因组全长 ８２３５ｂｐ，其中 Ｇ＋Ｃ含量为 ３８％。通过使用计算机软件ＤＮＡＳＩＳ分析，ＥＩＡＶ－Ｌ与马传贫驴强毒和马传贫驴白细胞疫苗毒序列同源性分别为９８．４％和９６．９％。同源性如此接近反映了它们之间的亲缘关系，另外 ＥＩＡＶ－Ｌ与驴强毒的同源性高于其与驴白细胞弱毒疫苗株的同源性，这符合驴白细胞弱毒疫苗株的衍生过程。基因组两端是长为３１６ｂｐ的ＬＴＲ，其中Ｕ３为１９７ｂｐ，Ｒ为８０ＢＰ，Ｕ５为３９ｂｐ。前病毒基因组有 ３个较大的开放阅读框架（ＯＲＦ），分别编码 ｇａｇ、ｐｏｌ和 ｅｎｖ基因。ｇａｇ基因位于 ７１３～１９１２位碱基之间，全长１２００ｂｐ；ｐｏｌ基因位于 １７０８～５１０９位碱基之间，全长     

草莓伪温和黄边病毒抗血清制备及血清学检测技术研究

将提纯的草莓伪温和黄边病毒（ＳｔｒａｗｂｅｒｒｙｐｓｅｕｄｏｍｉｌｄｙｅｌｌｏｗｅｄｇｅｖｉｒｕｓＳＰＭＹＥＶ）作抗原免疫家兔，获得效价较高的抗血清，经ＳＤＳ－对流免疫电泳测其效价为１：１２８．四点疫吸附固定法检测ＳＰＭＹＥＶ效果甚理想，可检测到微量病素，提纯病毒浓度低至０．０５μｇ／ｍｌ仍有效果．酶联免疫吸附测定法检出灵敏度也相当高，当病毒浓度为０．１μｇ／ｍｌ时及病叶汁液稀释至１０２４倍时，仍呈阳性反应．免疫电镜技术检视，ＳＰＭＹＥＶ抗血清能清晰地”捕获”同源病毒，并且有装饰作用，抗血清以稀释为１：５００时“捕获”病毒粒子最多．     

鸭病毒性肝炎发病机理的研究 Ⅲ．实验感染雏鸭血清生化指标的测定

鸭病毒性肝炎发病机理的研究Ⅲ．实验感染雏鸭血清生化指标的测定胡薛英，程国富，周诗其，熊道焕（华中农业大学畜牧兽医学院，武汉４３００７０）关键词鸭病毒性肝炎，发病机理，血清生化指标ＴＨＥＳＴＵＤＹＯＮＴＨＥＰＡＴＨＯＧＥＮＥＳＩＳＯＦＤＵＣＫＬＩＮＧＶ...     

人鼻咽上皮裸小鼠移植及诱癌实验中的EB病毒DNA检测

人鼻咽组织移植于２０只裸小鼠，分三组再分别多次以ＥＢＶ（７头）、ＥＢＶ＋ＴＰＡ（５头）或生理盐水（对照８头）皮下注射，诱癌后处死，将移植物作常规病理切片观察，并同时提取ＤＮＡ为模板，以ＥＢ病毒ＢａｍＨＩＷ片段特异性引物作ＰＣＲ检测ＥＢ病毒。结果显示：ＥＢＶ组与ＥＢＶ＋ＴＰＡ组中，７只可见鼻咽组织移植物发生癌前或癌变（原位癌、早期浸润癌各１只），而对照组均未见上述改变，两组比较差别有显著意义（０．０１＜Ｐ＜０．０５）；无形态变化的受试动物中ＩＢ病毒阳性２只，阴性１１只；有癌前病变和癌变的动物中，阳性５只，阴性２只，两组差别有显著性（０．０１＜Ｐ＜０．０５），提示观察到的病变与ＥＨ病毒感染有关。     

等电聚焦分析兔出血症病毒多肽

人工感染ＮＪ株ＲＨＤＶ病毒死兔肝经低温反复冻融,氯仿处理,ＰＥＧ沉淀、Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ柱层析得纯化病毒。纯化病毒经尿素－聚丙烯酰胺圆盘等电聚聚焦,考马斯亮蓝染色紫外扫描显示８条多肽,其等电点及相对百分含量分别为Ａ：６．３,１８,５１％;Ｂ＝６．７,１１．２２％;Ｃ：７．４％;Ｄ：７．７,８．５３％;Ｅ：８．１,７,２７％Ｆ：８．７,１２．４４％Ｇ：９．０。１６,１８％,Ｈ：９．５,２２．２     

引起猪腹泻的冠状病毒的分离与纯化

取患病典型的死猪小肠或肠系膜淋巴结．经匀浆、差速离心、蔗糖密度梯度离心而获得纯化的ＴＧＥＶ条带．通过电镜观察．病毒是圆形或椭圆形，并呈现冠状结构，经透析、浓缩和Ｆｏｌｉｎ酚试剂测定，病毒蛋白含量为２５０μｇ／ｍｌ．     

新颖抗猪流行性腹泻免疫制剂

以新生乳猪增殖猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ），通过蔗糖密度梯度离心纯化，获得结构较为完整的病毒颗粒，病毒ＥＬＩＳＡ效价为１：３×１０＾５，蛋白含量为３．９６ｍｇ／ｍＬ。将提纯的ＰＥＤＶ免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，融合率为９５．６％。用间接ＥＬＩＳＡ筛选并进行３次再克隆，阳性率达１００％，共获得１５株能稳定分泌特异性抗ＰＥＤＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞。其染     

新城疫病毒F_（48）E_8株cDNA文库的构建

以ＳＰＦ鸡胚繁殖我国标准新城疫病毒Ｆ＿（４８）Ｅ＿８强毒株，经蔗糖密度梯度超速离心纯化病毒。再以酚－ＳＤＳ法提取病毒基因组ＲＮＡ，作为反应模板、采用Ｐｒｏｍｅｇａ公司商品试剂盒合成双股ｃＤＮＡ。以同聚物加尾的方法将ｃＤＮＡ克隆到质粒ｐＧＥＭ３Ｚｆ（一）中，经ＡＩＸ平板筛选，限制性内切酶分析和Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的核酸探针检测，共获得插入外源片段大小在０．６～４．８ｋｂ的阳性克隆７５个，初步构建了Ｆ＿（４８）Ｅ＿８株的ｃＤＮＡ文库     

抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体的提纯和鉴定

取抗鸡传染性法氏囊病毒单克隆抗体．经饱和硫酸铵盐析，透析除盐、葡聚糖凝胶过滤粗提后，经ＤＥＡＥ—２２纤维素离子交换层析，获得纯化的单抗，ＥＬＩＳＡ效价达１０（－６）以上．双向琼扩效价达１：６４以上；抗体回收率达６０％以上；最高浓度达１．２ｍｇ／ｍｌ．经抗鼠全血清双向琼扩结果证明所提取物为纯一的ＩｇＧ．     

测定狂犬病疫苗效价的快速荧光技术

取０．５ｍｌＢＨＫ－２１新鲜健康细胞液和０．１ｍｌ狂犬病病毒细胞液在含小飞片青瓶中混合，培养２４ｈ制片，加抗狂犬病病毒兔抗体感作，用驴抗兔荧光抗体染色，通过荧光显微镜观察细胞浆内黄绿色结构判定病毒是否在细胞内增殖，从而建立了检测狂犬病病毒快速荧光技术法（ＲＦＡＴ）。并用ＲＦＡＴ检测了１５批Ｆｌｕｒｙ－ＬＥＰ株培养液，１５批ＥＲＡ株培养液，和１５批鹿毒８２０２株培养液，ＴＣＩＤ平均滴度分别为５．６８、６．０５、４．８６，并同时进行了小白鼠脑内接种平行试验，ＭＬＤ５０平均滴度分别为５．５０、５．６５、４．２５。从试验结果看，ＲＦＡＴ是取代ＭＬＤ５０测定法的理想方法     

杆状病毒包涵体蛋白基因的进化

在分析了ＨａＳＮＰＶ和ＥｏＳＮＰＶ多角体蛋白基因核苷酸序列的基础上,通过ＭＡＬＩＧＮ程序,比较了目前已发表的２６种杆状病毒包涵体蛋白的序列,ＨａＳＮＰＶ与ＨｚＳＮＰＶ亲缘关系十分接近,两者ａａ序列同源性达９７．６％,ｎｔ序列同源性达９７．４％;ＥｏＳＮＰＶ与黄杉毒蛾核型多角体病毒（Ｏｐ－ＳＮＰＶ）的同源性为最高,ｎｔ序列的同源性为８３．０％,ａａ序列达９４．７％,与其它２０种鳞翅目ＮＰＶ的同源性也很高,ｎｔ序列同源性为７２．６％～８１．９％,ａａ序列为８３．７％～９３．９％;与ＧＶ的同源性较低,为４８．４％～５４．９％;而与锯叶蜂核型多角体病毒（ＮｓＳＮＰＶ）的同源性为最低,仅４４．９％。应用Ｃｌｕｓｔａｌ程序建立了一个包括了２６种包涵体蛋白的系统树,确定了新测定的ＥｏＳＮＰＶ和ＨａＳＮＰＶＰｈ在包涵体蛋白基因系统树中都属于ＮＰＶ中的ＧｒｏｕｐⅡ分枝。     

新城疫病毒F48E8株cDNA文库的构建

以ＳＰＦ鸡胚繁殖我国标准新城疫病毒Ｆ４８Ｅ８强毒株，经蔗糖密度梯度超速离心纯化病毒。再以酚－ＳＤＳ法提取病毒基因组ＲＮＡ，作为反就模板，采用Ｐｒｏｍｅｇａ公司商品试剂合成双股ｃＤＮＡ。以同聚物加尾的方法将ｃＤＮＡ克隆 粒ｐＧＥＭ ３Ｚｆ中，经ＡＩＸ平板筛选，限制性内切酶分析和Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的核酸探针检测，共获得插入外源片段大小在０．６－４．８ｋｂ的阳性克隆７５个，初步构建了Ｆ４８Ｅ８株     

国外液压挖掘机与液电自动控制

综述了国外液压挖掘机的液电自动控制技术发展概况以及一些典型液电自动控制技术的具体应用，如Ｏ．Ｈ．Ｓ系统、ＥＬＬＥ系统、ＯＬＬＳ系统，比例减压阀－ＡＥＣ电子控制器等。     

抗猪细小病毒单克隆抗体在猪细小病毒病诊断上的应用

用淋巴细胞杂交瘤技术，研制出的抗猪细小病毒单克隆抗体，采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法，对本地区所采得的３０８份猪血清进行检测，阳性检出率达６６．６％，其中２０－３５日龄仔猪阳性检出率在８０％以上；４５日龄仔猪阳性检出率为７５．５％；屠宰猪阳性检出率５５．２％。选择７０份被检血清用已建立的检测猪细小病毒抗体的ＥＬＩＳＡ试验与传统的ＨＩ试验进行比较，其敏感性较高，ＥＬＩＳＡ检出阳性率为８５．７     

析城疫病毒强,弱毒鉴定方法的初步研究

不同新城疫病毒Ｆ４８Ｅ８、Ｎ－７９、Ｌａｓｏｔａ、Ｐ和分离株Ｘ以１：１００００倍稀释接种９日龄ＳＰＦ鸡胚、每胚０．２ｍｌ结果发现，Ｆ４８Ｅ８和分离株Ｘ毒力强，可５０ｈ左右致死鸡胚，Ｌａｓｏｔａ、Ｐ和Ｎ－７９较弱。Ｆ４８Ｅ８和Ｘ株接种鸡胚的肌肉、肝脏、脑和尿囊液均有大量病毒存在，而Ｎ－７９、Ｐ和Ｌａｓｏｔａ只在尿囊液中有大量病毒存在，胚体病毒极少。将ＮＤＶ经酶解后接种鸡胚、胰蛋白酶可使弱毒Ｎ－７９、