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亲环蛋白(CyP)能与免疫抑制剂环孢霉素A(CsA)结合而作为CsA的胞内受体。在已构建的家蚕蛹cDNA文库中获得了家蚕亲环蛋白A(BmCyPA)基因的cDNA序列。利用生物信息学方法对此序列的开放阅读框(ORF)和序列同源性等进行分析,并以家蚕蛹总RNA反转录的cDNA为材料克隆了BmCyPA,通过原核表达目的蛋白后,将纯化的BmCyPA融合蛋白免疫新西兰兔得到抗血清,Western blotting检测目的蛋白在蚕体中得到表达。利用荧光定量PCR方法检测家蚕5龄幼虫各组织中BmCyPA mRNA的转录水平,由高到低依次为脂肪体、丝腺、中肠、马氏管、表皮、头部、气门、卵巢;Western blotting检测BmCyPA在5龄幼虫各组织中的表达水平,由高到低依次为脂肪体、气门、表皮、马氏管、中肠、丝腺、头部和卵巢。亚细胞定位显示Bm-CyPA在细胞质与细胞核中均有分布。推测BmCyPA与家蚕的生长发育以及促进蛋白质折叠和介导免疫应答等有密切联系。 相似文献
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家蚕肌钙蛋白CⅢ(TnCⅢ)是肌钙蛋白C(TnC)的一种亚型结构,本研究利用大肠杆菌表达TnCⅢ融合蛋白,并制备其多克隆抗体.从本实验室的家蚕(Bombyx mori)蛹cDNA文库中搜索到1条编码家蚕肌钙蛋白CⅢ亚型的cDNA序列,将其命名为BmTnCⅢ(Bombyx mori TnCⅢ).该cDNA序列含有完整的ORF,可编码153个氨基酸残基组成的TnCⅢ蛋白.根据该cDNA序列,设计带有BamH Ⅰ和HindⅢ酶切位点的引物,通过RT-PCR的方法从家蚕蛹总RNA中扩增到BmTnCⅢ亚型基因的完整的ORF序列(GenBank登录号为DQ889211),并将其重组到原核表达载体pET-28a相应的酶切位点上.将获得的重组质粒pET-28a-BmTnCⅢ转化大肠杆菌(Escherichia coli)Rosetta(DE3),经1 mmol/L IPTG诱导表达重组蛋白后,在分子量约21 kD处出现融合蛋白条带.用亲和层析的方法纯化目的蛋白His-Tag BmTnCⅢ,并以此为抗原免疫雄性新西兰白兔(Oryctolagus cuniculus),制各了该融合蛋白的多克隆抗体.Western blot结果表明,该多克隆抗体具有较高的特异性,可用于后续的组织分布与定位研究. 相似文献
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临安市天目生猪合作社创办于2002年。经过五年的苦心经营,合作社社员从166户发展到192户,生猪年出栏数从4万头增加到目前的12万头,养猪户年利润从450万元增加到2560万元。目前,天目生猪合作社建有省级无公害生猪基地、杭州市生猪养殖示范园区,影响辐射7个乡镇,经济实力逐年增强 相似文献
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临安市板桥乡罗塘村骆贤祥科学喂养甲鱼,打出了“天目源”优质品牌,甲鱼产品在市场上销售量大增,年销售甲鱼2万多只,收入20余万元,走出了一条自产自销的致富路子。年仅40岁的骆贤祥,肯吃苦,善钻研。高中毕业回乡后,就开始钻研甲鱼养殖技术,从开始养2500只,发展到现在的10万只。 相似文献
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临安市潜川镇新梅村养猪女能手毛应莲是全镇千头养猪大户之一.2002年,饲养肉猪1200头,母猪20头,全年出售肉猪900多头,获利8万元. 相似文献
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临安县湍口镇塘溪村是个山多田少的山村,全村720人住在两山夹一垄的山岙里,人均耕田0.37亩,山林20.66亩。村两委会干部面对现实,做到上促青山,下稳粮田,积极引导农民奔小康。去年该村人均收入达3594元。人均口粮达300公斤以上,村级经济积累年年增多,农民生活水平年年提高。其关键是: 相似文献