基于血清药理学方法的头花蓼抗炎有效提取物筛选

[目的]通过血清药理学方法,研究头花蓼不同提取物及热淋清颗粒含药血清对小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)释放炎症因子的影响,筛选出头花蓼抗炎有效提取物。[方法]采用头花蓼血清药理学评价方法,10 ng/m L脂多糖(LPS)建立RAW264.7细胞炎症损伤模型,MTT法检测细胞存活率,Griess试剂法检测细胞上清液中NO的释放量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中TNF-α和IL-6的释放量,以考察头花蓼水提物、水提醇沉提取物、水提醇沉沉淀物及热淋清颗粒含药血清(WEPS、PCWEPS、DPCWEPS、RLQS)对巨噬细胞释放炎症因子的影响。[结果]与模型组比较,WEPS、PCWEPS、DPCWEPS、RLQS均能显著抑制LPS刺激的RAW 264.7细胞释放炎症因子NO、TNF-α和IL-6,PCWEPS组抑制细胞释放NO、TNF-α和IL-6的作用最强。[结论]头花蓼水提醇沉提取物为头花蓼主要的抗炎有效提取物。     

泡桐花提取物抑菌抗炎活性评价

[目的]探究泡桐花资源在饲料添加剂中的开发利用.[方法]制备兰考泡桐花不同提取物,采用牛津杯法测定其抑菌活性,采用梯度稀释法确定其最小抑菌浓度.利用二甲苯致小鼠耳肿胀模型和LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型,评价泡桐花提取物抗炎活性.[结果]泡桐花水提物对金黄色葡萄球菌、四联球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的抑制作用最为显著,其醇提物对白色念珠菌具有一定的抑制作用.泡桐花水提物的抗炎作用最佳,在试验浓度范围内2 mg/mL泡桐花水提物对细胞内炎症因子一氧化氮(NO)的清除能力最显著.[结论]泡桐花水提物具有较显著的抑菌抗炎活性,可作为理想的饲料添加剂加以开发.     

蒲公英提取物对急性肺损伤小鼠炎症介质及SOD含量的影响

[目的]研究蒲公英水提物对脂多糖LPS诱导小鼠急性肺损伤（ALI）炎症介质及抗氧化能力的影响。[方法]LPS滴鼻建立小鼠ALI模型,设空白组、模型组、蒲公英剂量（2.5、5.0、10.0 mg/kg）组和地塞米松（0.5 mg/kg）组。测定肺组织中超氧化物岐化酶SOD含量,检测肺泡支气管灌洗液中INF-γ、NO、PGE2含量。[结果]蒲公英水提物可增强LPS诱导的ALI小鼠肺组织SOD的释放,降低BALF中炎症介质INF-γ、NO、PGE2的含量。[结论]为蒲公英的开发利用提供理论依据。     

红芪、黄芪水提液体外清除自由基作用的研究

采用Fenton反应建立羟基自由基(.OH)模型,利用邻苯三酚在碱性环境中自氧化产生超氧阴离子自由基(O2-.)模型,研究了红芪、黄芪水提液体外清除自由基的活性.结果表明:2种水提液在生药浓度为5～80mg.mL-1的剂量范围内对.OH的清除效果呈明显的量效依赖关系,其IC50分别为红芪水提液8.686mg.mL-1和黄芪水提液16.662mg.mL-1;二者在生药浓度为25～200mg.mL-1的剂量范围内对O2-.的清除效果呈现明显的量效依赖关系,其IC50分别为红芪水提液176.636mg.mL-1和黄芪水提液185.123mg.mL-1.红芪、黄芪水提液均具有一定的体外清除自由基活性,且红芪的清除效果优于黄芪,因此在以自由基为诱因的疾病防治中建议优先选用红芪.     

乌苏里瓦韦不同提取物的抗炎作用研究

[目的]对比研究乌苏里瓦韦不同溶剂提取物的抗炎作用。[方法]以浓度70％乙醇与蒸馏水作为溶剂,采用回流提取法对乌苏里瓦韦进行提取,建立二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型评价乌苏里瓦韦各提取液的抗炎作用。[结果]鸟苏里瓦韦水提液高、中剂量组和浓度70％醇提液高剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀均有抑制作用,且浓度70％醇提液高剂量组抑制作用最为显著（P〈0．01）。[结论]乌苏里瓦韦水提液在正常用量（中剂量）下抗炎效果最明显,与相关记载的用法用量及主治相符。     

红鱼眼叶水提物·醇提物体外抑菌作用及其化学成分的初步研究

[目的]研究红鱼眼叶水提物和醇提物的体外抑菌作用,并对其化学成分进行鉴定。[方法]采用连续稀释法对红鱼眼叶水提物和醇提物进行最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)研究;采用常规化学反应鉴别方法检测红鱼眼叶的水提物和醇提物,并对其化学成分进行鉴定。[结果]红鱼眼叶水提物和醇提物对金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌耐药株、大肠杆菌、绿脓杆菌和宋内氏痢疾杆菌均有抑制作用,其醇提物的抑菌作用强于水提物;红鱼眼叶中可能含有多肽、糖类、鞣质、有机酸、黄酮类、酚类、香豆素、内酯类、甾体或三萜类和蒽醌类等化学成分。[结论]该研究为红鱼眼叶中具有抑菌活性的化学成分研究提供了科学依据。     

榆荚仁提取液抗氧化性研究

[目的]研究榆荚仁水提取液和乙醇提取液清除超氧阴离子自由基和羟自由基的能力。[方法]制备榆荚仁醇提液和水提液,并测定乙醇提取液中活性物质的含量以及提取液对羟自由基和超氧阴离子的清除率。[结果]结果表明,榆荚仁的水提液和醇提液都表现出了良好的清除超氧阴离子和羟自由基的能力。相比而言,榆荚仁水提取液清除超氧阴离子的效果比清除羟自由基的效果好,而榆荚仁乙醇提取液清除羟自由基的效果比清除超氧阴离子的效果好。[结论]榆荚仁醇提液和水提液均具有较好的清除羟自由基和抑制超氧阴离子自由基的能力。     

千年健镇痛抗炎药理研究

[目的]研究千年健药材水提物和醇提物的镇痛抗炎作用。[方法]采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型观察千年健的抗炎作用;冰醋酸致小鼠扭体试验观察千年健的镇痛作用。[结果]与正常对照组相比,千年健水提和醇提部位的高、低剂量组能明显降低小鼠耳廓的耳肿胀度,且有显著性差异(P<0.05);千年健水提和醇提部位的高、低剂量组能明显减少0.7%冰醋酸致小鼠的扭体反应次数,且有极显著性差异(P<0.01)。[结论]千年健药材具有良好的镇痛抗炎作用。     

金钗石斛多糖对脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α·NO的影响

[目的]研究金钗石斛多糖对脂多糖（LPS）诱导的小鼠腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、一氧化氯（NO）的影响。[方法]用不同浓度金钗石斛多糖作用于小鼠腹腔巨噬细胞,LPS作为诱导剂,采用放射免疫法检测细胞培养液中TNF—α的含量,硝酸酶还原法测定细胞培养液中NO的含量,荧光法测定细胞内诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的活性,实时PCR（real—time PCR）法测定TNF-α mRNA、iNOS mRNA的表达。[结果]与LPS组比较,金钗石斛多糖在50～400mg／L范围内可干预LPS对小鼠巨噬细胞的作用,使小鼠腹腔巨噬细胞TNF—α、NO合成减少,iNOS活性降低。TNF-α mRNA、iNOS mRNA的表达降低。[结论]金钗石斛多糖可改善LPS对小鼠腹腔巨噬细胞的作用,使TNF—α mRNA、iNOS mRNA的表达降低,TNF—α、NO合成减少,从而起到抗炎的作用、     

杨树花不同提取物对小鼠免疫功能影响

为探究杨树花不同提取物对小鼠免疫功能影响,将180只雄性小鼠随机分成3组,分别为空白对照组、水提物组和醇提物组,每组60只。灌胃剂量均为0.2 mg.kg-1.d-1,空白对照组灌服灭菌水。15 d后,观察各组小鼠免疫学指标变化。结果表明,水提物能显著提高小鼠免疫器官指数、巨噬细胞吞噬率、巨噬细胞吞噬指数、碳粒廓清吞噬指数、脾淋巴细胞增殖能力、迟发性变态反应水平、血清溶血素抗体积数和抗体生成细胞溶血空斑数;醇提物能显著提高小鼠免疫器官指数、巨噬细胞吞噬率、巨噬细胞吞噬指数、碳粒廓清吞噬指数、血清溶血素抗体积数和抗体生成细胞溶血空斑数,极显著提高脾淋巴细胞增殖能力和迟发性变态反应水平;以上各指标水提物和醇提物组间差异显著。说明杨树花水提物和醇提取物均能增强小鼠免疫功能作用,且醇提物作用更强。     

黄芪中黄芪甲苷的提取工艺优化

[目的]优化黄芪（RADIX ASTRAGALI）中黄芪甲苷的提取工艺。[方法]利用均匀设计法,采用小型工业设备TS-NS提取浓缩机组对黄芪进行提取浓缩,考察乙醇浓度、固液比、提取时间及提取次数对黄芪甲苷提取率的影响,并用HPLC-ELSD测定黄芪甲苷的含量,筛选最佳工艺。[结果]黄芪中黄芪甲苷的最佳提取工艺：乙醇浓度为80%,固液比为1∶8,提取次数为3次,提取时间为1 h。[结论]与现有文献报道的方法相比,优选的黄芪甲苷提取工艺简便、可靠,适合工业化生产。     

黄芪多糖单糖组分的气相色谱分析

[目的]研究黄芪多糖的单糖组成。[方法]以2 mol/L硫酸水解黄芪多糖,然后采用吡啶溶解干燥的水解产物,结合三甲基硅烷进行衍生,最后用毛细管气相色谱法测定黄芪多糖的单糖组成。[结果]鉴定出黄芪多糖中含有阿拉伯糖、果糖、葡萄糖和甘露糖,并测定计算出阿拉伯糖-果糖-葡萄糖-甘露糖的摩尔构成比例为1∶10.309∶24.667∶0.462;另外还鉴定出了3种未知物,他们的相对保留时间分别为10.627、14.783和18.249 min。[结论]该方法简便灵敏,可以用于黄芪多糖中单糖的组分分析。     

大孔树脂对黄芪总皂苷的分离纯化研究

[目的]筛选分离纯化黄芪总皂苷的最佳工艺。[方法]利用动态吸附-解析方法,以紫外分光光度法测定黄芪总皂苷的含量,研究最适大孔树脂分离纯化黄芪总皂苷的条件。[结果]AB-8型大孔树脂富集纯化黄芪总皂苷的最优条件为：采用黄芪提取液浓度为0.1g/ml上柱,上样量为3 BV,流速为1.0 ml/min,解吸时先用4 BV蒸馏水淋洗,再用4 BV50%乙醇解吸,收集50%乙醇洗脱液,得黄芪总皂苷提取物浸膏,黄芪皂苷收率可达52.1%。[结论]该工艺简单可行,能满足大生产的要求。     

熟地黄浸提物对培养的小鼠TM4细胞的抑制作用研究

[目的]研究熟地黄浸提物对培养的小鼠TM4细胞的抑制作用。[方法]通过显微镜观察和MTT法研究不同浓度的熟地黄乙醇提取物对小鼠支持细胞系中TM4细胞的影响。[结果]浓度40μg/ml的醇提取物处理组对TM4细胞已经有较明显的抑制作用;而随着处理浓度的增大,这种抑制作用越来越强,当处理浓度达到100μg/ml时,TM4细胞的生长已经基本完全被抑制。[结论]熟地黄醇提取物对TM4细胞的生长和增殖有抑制作用,且呈剂量依赖性。     

红芪钾素吸收和分配规律及施肥响应

[目的]研究红芪钾素吸收和分配规律及施肥效应,为红芪GAP基地的建设提供理论依据。[方法]采用随机区组试验设计来研究不同用量坡缕石和NPK肥配比对红芪吸钾和钾素分配的影响。[结果]7月下旬到8月下旬是红芪单株地上部分钾素的快速积累期,8月下旬到9月下旬是红芪单株根钾素的快速积累期。坡缕石和氮磷钾肥配施能比氮磷钾肥单施提高红芪根的含钾量、地上部分和根的钾素积累量。坡缕石施用量跟红芪的钾肥农学效率呈极显著二项式相关,和钾肥当季利用率呈极显著直线相关。[结论]施用2 250kg/hm2用量的坡缕石能显著促进钾肥的增产效果和红芪对钾肥的利用率。     

人参及其混伪品的紫外谱线组法鉴别研究

[目的]建立鉴别人参及其混伪品桔梗、板蓝根和北沙参的紫外谱线组鉴别方法。[方法]采用水、乙醇、石油醚、乙酸乙酯和氯仿对4种药材分别进行提取,然后进行紫外检测及其一阶导数光谱检测。[结果]正品人参与桔梗、板蓝根和北沙参的紫外吸收光谱的峰位置和吸光度有明显的差异。[结论]该方法简便、准确、灵敏,能够很好的区别人参及其混伪品。     

乌药不同溶剂提取物体外抑菌和杀菌活性研究

[目的]探讨乌药不同溶剂提取物的抑菌和杀菌活性,为其合理开发提供依据。[方法]采用浓度70%乙醇、浓度60%丙酮及沸水提取乌药的活性成分,以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和肺炎克氏菌为供试菌,通过纸片琼脂扩散法测定抑菌圈大小、平板2倍稀释法统计最低抑菌浓度(MIC)和试管2倍稀释法统计最低杀菌浓度(MBC)。[结果]乌药的3种溶剂提取物对4种供试菌均有一定的抑制作用,其中浓度60%丙酮和浓度70%乙醇提取物的抑制效果优于沸水提取物。浓度60%丙酮提取物对金黄色葡萄球菌的抑制效果最明显,抑菌圈大小为(12.08±1.01)mm,MIC和MBC分别为50和125 mg/ml;而浓度70%乙醇提取物对肺炎克氏菌的抑杀效果最好,抑菌圈大小为(11.41±0.65)mm,MIC和MBC分别为200和250 mg/ml。[结论]乌药不同溶剂提取物具有明显的抑菌杀菌作用,尤其是浓度60%丙酮提取物和浓度70%乙醇提取物。     

均匀设计法优选大黄酸提取工艺研究

[目的]探讨提取相关因素与提取物中大黄酸含量的关系,研究大黄中大黄酸的最佳提取工艺。[方法]采用均匀设计法探讨以乙醇水为溶剂时,使用TS-NS系列小试型提取浓缩装置以粉碎度、乙醇浓度、固液比、提取时间为探讨因素,以大黄酸含量作为考察指标,来筛选大黄酸的最佳工艺研究。[结果]大黄酸优选工艺为85%乙醇作为提取溶剂,大黄颗粒过18目筛,固液比为1∶10,提取时间为0.5 h。[结论]该工艺科学、合理,可为以乙醇水为溶剂提取大黄中大黄酸的工艺优选提供科学依据。     

HP20树脂分离纯化赤芍抑菌活性成分的研究

[目的]从赤芍中提取并确定主要抑菌活性成分。[方法]采用乙醇溶液超声波提取、萃取、HP20树脂柱层析等工序处理赤芍,并将提取物对肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌和黏质沙雷氏菌采用液体2倍稀释法进行体外抑菌试验;用傅里叶变换红外光谱仪分析提取物的FTIR光谱。[结果]100%乙醇洗脱液对3种供试细菌的抑制效果最好,最小抑制浓度（MIC）分别为32.00、32.00和125.00 g/L;提取物与芍药苷标准品的红外光谱相似。[结论]芍药苷是赤芍的主要活性成分,具有明显的抑菌作用。     

葛根总黄酮提取物成分的HPLC测定

[目的]测定葛根总黄酮提取物有效成分葛根素、大豆苷含量。[方法]HPLC色谱条件为：色谱柱为C18柱;流动相为乙腈-水（25∶75,V/V）;检测波长为250 nm;流速为0.8 ml/min;柱温为室温;进样量为4μl。[结果]在测定范围内,葛根素、大豆苷对照品线性关系良好;葛根中葛根素、大豆苷平均含量分别为5.41、7.50μg/ml。[结论]该研究为更好的利用葛根提供了依据。