UVA 辐射对赤拟谷盗表皮超微结构影响研究

紫外线A（UVA）是一种重要的非生物环境因子。表皮是生物抵御UV 的第一道防线,海洋生 物、高等植物和人能通过改变表皮的形态和生理结构抵抗UV 辐射。通过使用扫描电镜和透射电镜研究赤 拟谷盗的幼虫遭受2 h 或4 h 的UVA 辐照后表皮超微结构的变化,结果表明,随着辐照时间的增加,幼虫表 皮的分泌物增加,外表皮增厚,外表皮的电子致密区增大,但内表皮细胞核,高尔基体和线粒体的形态没有 受到UVA 辐射的影响。这说明赤拟谷盗可通过改变表皮细胞结构抵御UVA 损伤。     

水菖蒲活性物质β-细辛醚对赤拟谷盗的熏蒸作用

为了确定水菖蒲活性成分β-细辛醚对赤拟谷盗的熏蒸效果,采用密封熏蒸方法测定了β-细辛醚对赤拟谷盗幼虫、蛹和成虫的熏蒸作用.结果表明:β-细辛醚对赤拟谷盗3种虫态均有一定的熏蒸作用,且对赤拟谷盗低龄幼虫的熏蒸效果要比高龄幼虫明显;当β-细辛醚熏蒸浓度为200μL/L时,熏蒸48 h后蛹的校正死亡率为34.32%;β-细辛醚对赤拟谷盗成虫熏蒸120 h后的LC50为116.48μL/L.     

4种植物精油对赤拟谷盗的熏杀效果研究

测试木香薷挥发油、八角茴香油、蓝桉叶油、黄樟油4种植物精油对赤拟谷盗的熏杀活性。结果表明:随着熏蒸时间的增加,精油生物活性逐渐增加。熏蒸4种精油24 h后赤拟谷盗的校正死亡率均超过50%,经4种植物精油60 h熏蒸处理后赤拟谷盗的校正死亡率均达到100%。其中,蓝桉叶油的熏杀效果明显高于其他几种精油,12 h后赤拟谷盗校正死亡率为100%。蓝桉叶油对赤拟谷盗的熏蒸毒力测定结果表明,随熏蒸时间的增加达到同样熏蒸效果使用精油的量将减少。     

香料油作为潜在谷物保护剂

国立新加坡大学生物科学院S.H.HO和Y.Hauang报道。从肉豆蔻和大蒜提取的香料油对赤拟谷盗和玉米象进行生物活性的研究。从肉豆蔻种子和大蒜提取的香料油,对玉米象成虫以及赤拟谷盗成虫和幼虫具有毒力作用。对防治玉米象成虫、肉豆蔻油既有触杀也有重蒸作用,并且其防治效果要优于赤拟谷盗成虫。然而,大蒜油对赤拟谷盗成虫更具有毒杀作用。比较这两种香料油,虽然对防治玉米象成虫,肉豆蔻油要比大蒜油有效,但它不能像大蒜油那样去防治赤拟谷盗幼虫。同时,这两种香料油可减少赤拟谷盗卵的孵化;肉豆蔻油也能减少其幼虫的存活率。当食物用这两种香料油处理,玉米象和赤拟谷盗的第一代减少。进一步做营养试验表明,肉豆蔻油能抑制这两种仓虫的生长、取食和对食物的利用。     

甲酸乙酯对赤拟谷盗不同虫态的熏蒸活性研究

在不同的药剂浓度、处理时间和温度下系统研究甲酸乙酯(EtF)对赤拟谷盗T.castaneum卵、低龄幼虫、高龄幼虫、蛹以及成虫的熏蒸致死作用,结果表明处理时间和温度显著影响甲酸乙酯对赤拟谷盗各虫态的熏蒸致死效果。甲酸乙酯具有良好的速效性,在48 h以内就能发挥很好的熏蒸活性,在低温条件下处理比在高温下熏蒸效果好。在20,25,30℃条件下,熏蒸处理赤拟谷盗成虫24 h,其LC50分别为24.239,27.516和29.953μL/L;处理48h时则分别为22.182,25.736,27.295μL/L。未成熟期各虫态对甲酸乙酯的敏感性由强到弱依次为:卵、低龄幼虫、高龄幼虫和蛹。     

甲酸乙酯对赤拟谷盗不同虫态的熏蒸活性研究

在不同的药剂浓度、处理时间和温度下系统研究甲酸乙酯(EtF)对赤拟谷盗T.castaneum卵、低龄幼虫、高龄幼虫、蛹以及成虫的熏蒸致死作用,结果表明处理时间和温度显著影响甲酸乙酯对赤拟谷盗各虫态的熏蒸致死效果.甲酸乙酯具有良好的速效性,在48 h以内就能发挥很好的熏蒸活性,在低温条件下处理比在高温下熏蒸效果好.在20,25,30℃条件下,熏蒸处理赤拟谷盗成虫24h,其LC50分别为24.239,27.516和29.953μL/L;处理48h时则分别为22.182,25.736,27.295μL/L.未成熟期各虫态对甲酸乙酯的敏感性由强到弱依次为:卵、低龄幼虫、高龄幼虫和蛹.     

砂地柏精油的熏蒸杀虫活性初探

用砂地柏精油处理玉米象，赤拟谷盗，粘虫和小菜蛾的成虫或三龄幼虫。结果表明：砂地柏精油对上述４种试虫都有较强的熏蒸活性，且对鳞翅目的的粘虫和小采蛾三龄幼虫的熏蒸活性明显高于对鞘翅目的玉米象和赤拟谷盗成虫，对小菜蛾三龄幼虫的熏蒸活性最高，其毒力次序为小菜蛾〉粘虫〉赤拟谷盗〉玉米象。     

4种植物精油对赤拟谷盗的控制作用研究

采用索氏提取法,以乙醚为提取溶剂提取大蒜、辣椒粉、柑桔皮、臭椿树皮的植物精油,研究其对赤拟谷盗的控制作用。结果表明:臭椿树皮、辣椒粉、大蒜3种植物精油对赤拟谷盗的成虫均有较强的驱避作用,柑桔皮精油对赤拟谷盗成虫具有一定的引诱作用;4种植物精油对赤拟谷盗成虫的触杀作用较弱;4种植物精油对赤拟谷盗当代种群均有一定的抑制作用,其作用大小顺序依次为柑桔皮精油>大蒜精油>臭椿树皮精油>辣椒粉精油;4种精油对赤拟谷盗成虫无明显的熏蒸作用,而对赤拟谷盗幼虫均有显著的熏蒸效果。     

表皮蛋白基因TcCP14.6和TcLCPA3A参与介导赤拟谷盗对磷化氢的抗性形成

【目的】 表皮蛋白是昆虫表皮重要的结构物质,大量研究已经证实表皮蛋白基因参与介导昆虫抗药性形成。以赤拟谷盗（Tribolium castaneum）为研究对象,解析表皮蛋白基因TcCP14.6（cuticle protein CP14.6）和TcLCPA3A（larval cuticle protein A3A）在昆虫磷化氢抗性形成过程中的作用。【方法】 采用联合国粮农组织（FAO）推荐的磷化氢熏蒸方法对采自5个省份赤拟谷盗的磷化氢抗性水平进行测定。基于赤拟谷盗基因组数据获得TcCP14.6和TcLCPA3A的cDNA序列,利用在线生物信息学分析软件预测其编码的氨基酸序列、信号肽和保守结构域。分别提取赤拟谷盗不同组织（头、胸、腹的表皮、翅、足、肠道、马氏管和脂肪体）、不同磷化氢抗性水平以及磷化氢胁迫后试虫的总RNA。以TcRPS和TcRPL为内参基因,运用RT-qPCR技术分析TcCP14.6和TcLCPA3A在赤拟谷盗不同组织、不同磷化氢抗性水平和药剂胁迫下的表达模式。最后,通过RNA干扰技术结合生物测定方法分析TcCP14.6和TcLCPA3A与赤拟谷盗磷化氢抗性的关系。【结果】 生物测定结果表明,江苏（JS,RR=1.7）和云南（YN,RR=3.0）种群对磷化氢保持敏感,湖南种群（HN,RR=20.2）表现为中等抗性,四川（SC,RR=395.4）和广东（GD, RR=862.7）种群表现为极高抗。序列分析结果表明TcCP14.6和TcLCPA3A蛋白均包含信号肽和保守的几丁质结合域。RT-qPCR结果显示,TcCP14.6和TcLCPA3A均在赤拟谷盗表皮组织中高表达,而在内部器官（脂肪体、肠道、马氏管）中的表达量相对较低。此外,TcCP14.6表达量随磷化氢抗性水平的增加呈上调趋势,而TcLCPA3A表达量则呈下降趋势;赤拟谷盗经磷化氢熏蒸处理6 h,TcCP14.6和TcLCPA3A的表达量分别呈现上调和下调趋势。注射dsRNA分别干扰抗性（GD）和敏感（YN）种群两个基因的表达后再用LC₃₀的磷化氢浓度处理试虫。与对照相比,TcCP14.6基因沉默后赤拟谷盗的死亡率显著升高,而TcLCPA3A基因沉默后试虫死亡率显著下降。【结论】 表皮蛋白基因TcCP14.6和TcLCPA3A参与介导赤拟谷盗对磷化氢的抗性。     

赤拟谷盗和杂拟谷盗体内Wolbachia的感染状况和种间传播

为明确沃尔巴克氏体(Wolbachia)在赤拟谷盗和杂拟谷盗体内的感染状况及种间水平和垂直传播情况,首先通过PCR扩增分离细胞分裂蛋白基因(fts Z)目的片段方法检测这2个近缘种拟谷盗体内是否存在Wolbachia,并将同性别或异性别的赤拟谷盗和杂拟谷盗混合饲养40 d,然后测定赤拟谷盗及其与杂拟谷盗的正反交杂种后代体内Wolbachia的感染状况。结果显示,杂拟谷盗体内存在Wolbachia,而赤拟谷盗体内不存在该菌;混合饲养后,赤拟谷盗及其与杂拟谷盗的正反杂交后代体内也均没有检测到Wolbachia的存在,未发现Wolbachia在杂拟谷盗和赤拟谷盗种间的水平和垂直传播。     

60Co γ射线对杂拟谷盗成虫的辐照效应研究

摘要：为了控制杂拟谷盗对烟草的危害。本文利用不同剂量的60Co γ射线对烟草中杂拟谷盗成虫的辐照效应进行了研究。结果表明,100 Gy以上的剂量辐照就可以阻止杂拟谷盗成虫繁育下一代成虫,150 Gy的剂量辐照处理还有少量的幼虫出现,但其不能羽化为成虫;200 Gy及以上剂量辐照可以有效阻止杂拟谷盗成虫取食并最终导致其死亡。因此,200 Gy剂量的60Co γ射线可以作为辐照防治杂拟谷盗成虫的有效剂量。     

水菖蒲超临界CO_2流体萃取物对储粮害虫的活性

研究了水菖蒲超临界CO2流体萃取物对储粮害虫玉米象、谷蠢、赤拟谷盗、杂拟谷盗、长角扁谷盗和锯谷盗的触杀、驱避和熏蒸活性.结果表明,水菖蒲萃取物时长角扁谷盗触杀活性强,处理24 h后的校正死亡率达100%;对杂拟谷盗和赤拟谷盗的触杀活性最弱,处理96 h后的校正死亡率分别为48.31%和24.44%;对谷蠹、赤拟谷盗、杂拟谷盗、长角扁谷盗和锯谷盗的驱避效果较好,驱避率均在90%以上;对玉米象的驱避效果较差,驱避率为76.09%;对谷蠹、长角扁谷盗、锯谷盗的熏蒸作用最明显,处理120 h后的校正死亡率均达100.00%,显著高于其他试虫,对赤拟谷盗和杂拟谷盗的熏蒸作用最差,校正死亡率分别为33.33%和32.22%.试验表明水菖蒲根茎萃取物对6种主要储粮害虫均具有较高的活性,有望开发成为储粮害虫的防护剂或熏蒸剂.     

赤拟谷盗章鱼胺受体3(TcOctβR3)cDNA克隆、表达及功能

【目的】章鱼胺信号系统在调节昆虫行为和生理过程中具有至关重要的作用。赤拟谷盗(Tribolium castaneum)作为一种模式昆虫,被广泛用于解析昆虫生长发育及生理等调控机制的研究工作。本研究以赤拟谷盗为对象,旨在明确章鱼胺受体在调节赤拟谷盗行为和生理方面的功能。【方法】根据Gen Bank登录的相关序列信息(XP_008198078),利用RT-PCR技术克隆赤拟谷盗章鱼胺受体基因Tc OctβR3的c DNA序列。利用在线生物信息学分析软件预测该基因的开放阅读框、编码的氨基酸序列以及跨膜结构域等信息,基于邻接法构建该基因与其他昆虫相关序列的系统发育树,明确系统进化关系。分别提取赤拟谷盗各发育阶段(卵、幼虫、蛹和成虫)、不同组织(中枢神经系统、脂肪体、中肠、后肠、马氏管、精巢和卵巢)以及饥饿胁迫后的RNA,以赤拟谷盗核糖体蛋白S3(Tc RPS3)为内参基因,采用实时定量PCR技术分析该基因在赤拟谷盗不同发育阶段、不同组织以及在饥饿胁迫下的表达模式。运用哺乳动物异源表达系统在人胚胎肾细胞HEK293中瞬时表达Tc OctβR3,进而利用第二信使c AMP含量测定技术分析Tc OctβR3与配体的结合能力。最后,通过体外合成赤拟谷盗Tc OctβR3的双链RNA,利用RNA干扰以及轨迹球行为分析等技术探究该基因的生理功能。【结果】序列分析结果表明,赤拟谷盗Tc OctβR3开放阅读框全长1 305 bp,编码434个氨基酸,序列中含有G蛋白偶联受体典型的7个跨膜结构域。基于邻接法构建的系统发育树表明,该基因编码的蛋白质与小蜂甲(Aethina tumida)的OctβR3亲缘关系最近。实时定量PCR分析结果表明,Tc OctβR3在赤拟谷盗各发育阶段均有表达,尤其在低龄幼虫期转录水平最高,而在其他发育阶段表达量无显著差异;在赤拟谷盗不同组织中,Tc OctβR3在中枢神经系统的表达量显著高于其他组织;赤拟谷盗幼虫在经饥饿处理24 h的过程中,Tc OctβR3的表达量呈先下降后上升的趋势,且在处理6 h的表达量最低,为对照的0.47倍,在16 h表达量最高,为对照的1.80倍,最后恢复到正常水平。通过HEK293细胞异源表达Tc OctβR3后,c AMP测定结果表明章鱼胺(OA)呈浓度依赖性地激活Tc OctβR3,其EC50为8.68×10-7 mol·L-1,萘甲唑啉(NA)的激动活性最高,其有效中浓度EC50为8.56×10-8 mol·L-1。4种供试生物胺激动剂活性强弱为:萘甲唑啉酪胺(TA)章鱼胺多巴胺(DA)。进一步采用RNA干扰技术的分析结果表明,注射ds RNA能有效抑制Tc OctβR3的表达,沉默效率高达61.5%,但干扰该基因表达后不会影响赤拟谷盗成虫的爬行速度和产卵量。【结论】Tc OctβR3在赤拟谷盗中枢神经系统可能发挥重要作用,能调节幼虫对饥饿胁迫的响应。明确了Tc OctβR3的分子生物学特性,可为将来以其为靶标筛选高效激动剂和抑制剂提供理论依据。     

电子束处理对杂拟谷盗的辐照效应

利用不同剂量的电子束对杂拟谷盗幼虫、成虫进行辐照处理,研究其辐照效应.结果表明:杂拟谷盗幼虫对电子束辐照的敏感性高于成虫.幼虫经250 Gy剂量辐照后,可以完全阻止其发育为成虫,在14 d内全部死亡;成虫经250 Gy剂量辐照后,则需42 d才能全部死亡,而且不能产生下一代成虫.250Gy的剂量可以作为电子束辐照防治杂...     

拥挤度和光照条件对赤拟谷盗成虫逃逸行为的影响

【目的】研究赤拟谷盗成虫逃逸活动规律和赤拟谷盗种群控制方法。【方法】以赤拟谷盗成虫为研究对象,分析赤拟谷盗成虫逐日逃逸现象,研究拥挤度、光照条件对其逃逸行为的影响。【结果】全黑暗和自然光周期条件下,赤拟谷盗成虫的逐日逃逸数量与拥挤度呈正相关;拥挤度达到50头/皿以上时,赤拟谷盗成虫逃逸行为频繁,且黑暗条件下的逃逸数量显著小于光照条件。【结论】光照对赤拟谷盗成虫的逃逸行为具有刺激作用,拥挤度的增加,有助于成虫逃逸。     

低氧对几种主要储粮害虫虫态的致死效果

低氧储藏技术是近几年发展起来的一种绿色储藏技术,研究不同低氧条件对几种储粮害虫的致死效果,对于指导充氮低氧的储藏技术具有重要理论参考价值。在30℃、70%RH的温湿度条件下,采用700、900、1 100、1 300、1 500 Pa真空度处理几种主要储粮害虫[米象(Sitophilus oryzae Linnaus)、玉米象(Sitophilus zeamais Motschulsky)、赤拟谷盗(Tribolium castaneum Herbst)、杂拟谷盗(Tribolium confusum Jacquelin du Val)]的成虫、蛹、幼虫、卵,处理时间为2～3 d。结果表明,不同储粮害虫及不同虫态对低氧的耐受性不同,赤拟谷盗、杂拟谷盗的耐受性较强,完全致死时间分别为111、107 h;米象、玉米象对低氧的耐受性较差,完全致死时间分别为85、83 h;不同虫态对低氧的耐受性也有差异,卵、蛹对低氧条件的耐受性较强,但两者间的差异不显著,幼虫、成虫对低氧的耐受程度较弱。各害虫及虫态对真空低氧的耐受情况表现为赤拟谷盗>杂拟谷盗>米象>玉米象,卵>蛹>...     

丁香对赤拟谷盗蛹和成虫的致死作用

桃金娘科植物丁香Syzygium aromaticum可以作为药材、香料。研究了其干燥花蕾粉末对赤拟谷盗蛹和成虫的致死作用。结果表明：丁香对赤拟谷盗蛹羽化有明显的抑制作用,蛹因不能羽化而死亡;对赤拟谷盗成虫有致死作用并且致死时间随着赤拟谷盗成虫寿命的不同而不同;赤拟谷盗成虫的耐饥能力强。     

超临界CO2萃取花椒挥发油的杀虫活性研究

应用超临界CO2萃取技术提取得到的花椒挥发油对玉米象、赤拟谷盗进行了杀虫活性测定.结果表明,花椒挥发油对玉米象、赤拟谷盗具有较强的驱虫、杀虫活性.在7 d内忌避率始终在50%以上;在椒油点滴剂量为0.04μL时,玉米象和赤拟谷盗的死亡率分别为47%和40%;当玉米象的熏杀剂量为1 mL·L-1时,24 h内虫全部死亡,当对赤拟谷盗的熏杀剂量为1.2 mL·L-1时,6 h内虫全部死亡.     

丁香对赤拟谷盗蛹和成虫的致死作用

桃金娘科植物丁香Syzygium aromaticum可以作为药材、香料.研究了其干燥花蕾粉末对赤拟谷盗蛹和成虫的致死作用.结果表明:丁香对赤拟谷盗蛹羽化有明显的抑制作用,蛹因不能羽化而死亡;对赤拟谷盗成虫有致死作用并且致死时间随着赤拟谷盗成虫寿命的不同而不同;赤拟谷盗成虫的耐饥能力强.     

表皮蛋白基因参与锈赤扁谷盗磷化氢抗性形成

【目的】作为昆虫表皮重要的结构物质,表皮蛋白（cuticle protein,CP）在昆虫对农药表皮穿透抗性形成过程中承担重要作用。锈赤扁谷盗（Cryptolestes ferrugineus）磷化氢抗性问题日益突出,论文旨在揭示表皮蛋白基因在该害虫磷化氢抗性形成过程中的作用。【方法】基于联合国粮农组织（FAO）推荐的生物测定方法解析5个地理种群（张家港、湘阴、淮安、怀化和太仓种群)锈赤扁谷盗磷化氢敏感性差异。首先通过锈赤扁谷盗转录组数据鉴定获得4个表皮蛋白基因,进而构建系统发育树,并对相应氨基酸序列进行分析。利用基因定量技术（RT-qPCR）解析上述4个锈赤扁谷盗表皮蛋白基因时空（不同发育阶段和成虫不同组织）和不同磷化氢抗性水平下的表达模式,以及表皮蛋白基因对磷化氢胁迫响应的表达模式。使用RNAi(RNA interference)技术对特定的表皮蛋白基因（CfRR2-1）进行沉默,并研究CfRR2-1被有效沉默后锈赤扁谷盗磷化氢敏感性变化情况。【结果】磷化氢敏感性测定结果显示,不同地理种群锈赤扁谷盗磷化氢敏感性水平差异显著,药剂抗性倍数（RR）范围为7.2—1 906.8。系统发育...