小麦离体培养性状的遗传分析

对５个小麦亲本双列杂交的分析表明，小麦未成熟胚的离体反应是受到复杂遗传控制的，其基因作用以加性为主，在研究的性状上，愈伤组织分化率一主要性状具有相对较高的遗传力。各性状的杂种Ｆ１的表现不尽一致，合子胚提早萌发率和根诱导率两性状表现了较大的杂种优势，而愈伤组织分化率则表现倾低亲遗传。在愈伤组织诱导率，合子胚提早萌发率，愈伤组织分化率，体细胞胚数目Ⅱ等性状上存在着正反交差异，杂种Ｆ１的表现受杂交组合方     

不同基因型玉米幼胚愈伤诱导及植株再生研究

本研究通过对不同基因型的玉米幼胚进行愈伤组织诱导实验,从49份玉米自交系材料中筛选出了5个胚性愈伤组织诱导率较高的自交系,其中,K6-64,K6-39,DL283-1诱导出的Ⅱ型胚性愈伤,具有很强的长期继代能力和再生能力,适宜作为转化受体材料进行遗传转化研究。对玉米幼胚在离体培养过程中影响因素进行了研究,1.5～2.0 mg/L 2,4-D能够较好的诱导玉米幼胚产生胚性愈伤组织。一定浓度的6-BA和KT都能够较好的促进玉米愈伤组织分化。     

不同基因型玉米幼胚愈伤组织的培养特性

为了研究不同基因型玉米自交系幼胚愈伤组织的培养特性,选取19个玉米自交系(属于5个杂种优势类群)为试验材料,以授粉后10～12 d的玉米幼胚为外植体,研究不同基因型和培养基对玉米幼胚愈伤组织诱导率的影响。结果表明,供试材料均能通过幼胚愈伤诱导培养形成愈伤组织,其中11个自交系的愈伤组织能分化获得再生植株。Reid、旅大红骨和其他种质3个杂种优势类群中的B73、黄C、478,综31,178、501、先早17、旱21等8个自交系具有较好的幼胚培养特性和植株再生特性,愈伤组织诱导率高,且愈伤整齐、大小适中、植株再生率高,适宜作为受体材料进行遗传转化。幼胚在附加4 mg／L 2,4-D且去掉水解酪蛋白和L-脯氨酸的N6改良培养基上,幼芽及根的数量少、出愈率高、愈伤组织质地好,并明显减少了幼胚自发性芽分化的趋势,有利于保持愈伤组织胚性、提高再生植株频率,为玉米自交系幼胚诱导的适宜培养基。     

玉米幼穗培养及植株再生

基本培养基加脯氨酸和水解酪蛋白组成的诱导培养基Ⅲ,可诱导参试的大多数玉米自交系、杂交种及远缘杂交后代,１０￣１５ｍｍ长的雌雄幼穗产生胚性愈伤组织,并通过继代增殖分化再生完整植株。各种基因型之间,愈伤组织诱导率差异较大,有的诱导率为０,有的高达８０％,大致有杂交种〉自交系〉远缘杂交后代的趋势。雌幼穗的诱导率略高于雄幼穗。     

小麦离体培养性状的遗传分析

对5个小麦亲本双列杂交的分析表明,小麦未成熟胚的离体培养反应是受到复杂遗传控制的,其基因作用以加性为主。在研究的性状上,愈伤组织分化率这一主要性状具有相对较高的遗传力。各性状的杂种 F_1的表现不尽一致,合子胚提早萌发率和根诱导率两性状表现了较大的杂种优势,而愈伤组织分化率则表现倾低亲遗传。在愈伤组织诱导率、合子胚提早萌发率、愈伤组织分化率、体细胞胚数目Ⅱ等性状上存在着正反交差异,杂种 F_1的表现受杂交组合方向的影响。对于愈伤组织分化率和体细胞胚数目两性状,其高值与隐性效应相联系,低值与显性效应相联系,低值呈部分显性。相关分析得出愈伤组织诱导率与愈伤组织生长速度呈显著正相关,与愈伤组织分化率无相关,分化率高者其愈伤组织容易出现提早萌发现象,同时也易于获得产生的体细胞胚。     

玉米成熟胚愈伤组织的诱导

以玉米自交系齐319、郑58、昌7-2、Lx9801和81162的成熟胚为外植体诱导愈伤组织,研究了基因型、外源激素组合、低温处理对愈伤组织诱导的影响。结果表明,基因型对玉米成熟胚愈伤组织诱导的影响显著。在供试的5个基因型中,齐319的愈伤组织诱导率最高,诱导出的愈伤组织质量也较好,为致密、松脆、淡黄色或乳白色,昌7-2不仅愈伤组织诱导率低而且不能产生胚性愈伤组织：在所试验的外源激素组合中,以4,0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L 6-BA对愈伤组织的诱导最为有效;4℃低温预处理3 d对愈伤组织的诱导具有明显的促进作用。经处理,齐319愈伤组织的诱导率由67.5%提高到78.3%。研究确定了愈伤组织诱导的最佳条件,为建立高效的玉米成熟胚再生体系奠定了基础。     

不同培养基对玉米自交系4112幼胚愈伤组织诱导的研究

[目的]研究不同培养基对玉米自交系4112幼胚愈伤组织诱导的影响,进一步优化玉米自交系愈伤组织诱导条件,为建立高效的玉米转基因受体系统奠定基础。[方法]用6种含有相同浓度和配比的植物激素的培养基N6、MS、NBM、NM、MB、NMB对玉米自交系4112幼胚进行组织培养,观察诱导愈伤组织的效果。[结果]6种不同培养基均能诱导出愈伤组织,但幼胚在每种培养基中产生愈伤组织的情况存在差异。N6培养基或N6复合培养基比MS培养基对玉米自交系4112幼胚愈伤组织的诱导效果更好。[结论]植物激素与培养基成分的相互作用对玉米幼胚愈伤组织的诱导也有影响。     

4种玉米自交系幼胚遗传再生体系的建立

选取4种玉米自交系H99、A188、7922和1322的幼胚作为外植体,接种于10种不同诱导培养基上,诱导愈伤组织并建立遗传再生体系,同时探讨了不同基因型、培养基种类、幼胚大小、蔗糖浓度、激素浓度和配比对愈伤组织诱导率的影响。结果表明:基因型对愈伤组织诱导率高低影响显著,4种基因型玉米幼胚在诱导培养基中均产生了愈伤组织,但继代培养后只有H99能诱导出胚性愈伤组织,诱导率为46.2%;对于不同基因型培养基诱导效果依次为N6MBMS;选择幼胚长度为1.5~2.0 mm、添加蔗糖浓度为30 g/L、2,4-D浓度为2.0 mg/L及Ag NO3浓度为10 mg/L时玉米愈伤组织诱导率最高且质量较好。     

玉米自交系幼胚培养体系的建立

以重庆地区常用的8个玉米自交系幼胚为外植体,研究不同基因型和培养基对玉米幼胚愈伤组织诱导率的影响.结果表明:自交系082在N6B5培养基的愈伤诱导率最高,达到98%,Hy04未诱导出愈伤组织,不同基因型愈伤诱导率的差异具有高度统计学意义.海09042在G1继代培养基的胚性愈伤组织呈颗粒状分散、结构松软、淡黄色,愈伤接种在加KT或加NAA的分化培养基中,以加NAA的绿苗数多.     

玉米幼胚培养胚性愈伤的影响因素分析

通过对5个玉米自交系的幼胚进行离体培养，研究不同基因型、不同培养条件对幼胚离体培养的反应，同时对愈伤诱导率与继代力的关系进行探讨分析。结果表明，5个自交系材料在相同培养条件下其愈伤诱导率存在显著或极显著差异。2，4-D用量对愈伤诱导率的影响显著，NAA的添加不能显著提高愈伤诱导率。愈伤组织的诱导率和继代力之间相关不显著。二者可能受不同的遗传因子所控制。     

黄瓜花药培养影响因素

以10个多代自交系黄瓜为试材,对影响黄瓜花药培养中愈伤组织诱导的因素进行研究.结果表明:不同基因型间愈伤组织诱导率差异显著,FJ代诱导率介于两亲本之间,且显著高于低诱导率的亲本,表现出杂种优势；活性炭对黄瓜愈伤组织诱导有一定抑制作用,抑制作用随活性炭浓度增加而增大；添加三十烷醇能提高黄瓜愈伤组织的诱导率,三十烷醇浓度为1mg/L时诱导率最高,三十烷醇浓度继续增加时其促进作用略有下降；添加0.5-1.0mg/L6-BA时诱导效果较好,且对低诱导率品种促进作用明显；接种后30d转接愈伤组织成活率最高.     

玉米优良自交系E28愈伤组织继代及再生

利用８１１４培养基对玉米优良自交系Ｅ２８组织培养条件进行了分析,结果表明：继胚长度以１．２－１．５ｍｍ胚性愈伤组织出愈率最高;幼胚盾片放置方向对出愈率无显著影响;２,４,－Ｄ与Ｄｉｃａｍｂｅｒ对Ｅ２８愈伤组织诱导效果相似。     

4种骨干玉米自交系幼胚愈伤组织诱导条件的优化

采用10种含有不同植物激素的愈伤组织诱导培养基,研究了4种骨干玉米自交系的愈伤组织诱导情况。结果表明,基因型对愈伤组织诱导率影响显著,且基因型和培养基之间存在互作;2,4-D对玉米幼胚愈伤组织的诱导是必需的,2.0～3.0mg/L的2,4-D大多能诱导出胚性愈伤组织;幼胚长为1.5～2.0mm时,玉米愈伤组织诱导率较高且质量较好;10mg/L的AgNO3可以明显提高愈伤诱导率,6-BA对愈伤组织的诱导率没有明显影响。     

玉米转基因受体材料的筛选研究

玉米胚性愈伤组织的诱导率直接影响玉米遗传转化效率。本研究利用N6培养基诱导玉米幼胚产生胚性愈伤组织,以筛选玉米转基因受体材料。从215个玉米基因型中筛选出28个胚性愈伤组织诱导率较高的材料,其中,6个基因型的诱导率高于对照A188和Hi-II。基因型"吉V130"胚性愈伤组织诱导率最高,作为受体材料进行转基因研究中,获得了较高的转化效率。该基因型在今后玉米基因功能研究和基因工程育种中可作为重要的受体材料。     

玉米幼胚和源于幼苗的幼嫩叶段愈伤诱导及其植株再生的比较

 【目的】以育种上常用自交系的幼胚和源于幼苗的幼嫩叶段为外植体,研究它们在愈伤诱导及植株再生之间的区别与联系,为建立以叶段为外植体的另一高效稳定的玉米组培体系提供技术参考。【方法】选用6个育种上常用自交系,以幼胚和幼嫩叶段为外植体分别进行愈伤诱导及植株再生,研究2,4-D对不同外植体初级愈伤组织诱导的影响,对不同来源的6个自交系分别统计诱导率及分化率,并观察愈伤组织的形态。【结果】不同外植体对2,4-D浓度的要求不同,且幼嫩叶段相对幼胚较难诱导愈伤且需要的2,4-D浓度更高。同一基因型的幼胚和幼嫩叶段形成的愈伤形态基本无区别,不同基因型之间愈伤形态有差异。不同来源的6个基因型的愈伤诱导率、分化率也存在差异。【结论】通过再生过程中幼胚和叶段多方面的比较,筛选到3个诱导率较高且愈伤形态优良的基因型齐319、Mo17和鲁原92。     

玉米成熟胚高效苗再生体系的建立

本研究以6种玉米自交系的成熟胚为外植体,通过优化玉米成熟胚愈伤组织诱导、继代及分化等培养环节,建立了高效的苗再生体系。结果表明,使用切除胚芽和胚根的半胚为外植体,以MS(Murashige&Skoog)培养基作为基础培养基诱导形成的愈伤组织最好,初级愈伤组织率高达80%。在继代培养过程中添加0.5 mg/mL 2,4-D和18mg/mL Dicamba有利于提高胚性愈伤组织诱导率,将胚性愈伤组织诱导率提高到88.89%。添加20 g/L甘露醇可以将褐化率降低到19.44%。分化培养过程中加入2 mg/L Zeatin和6 mg/L TDZ可以将愈伤组织的绿苗分化率提高到48.88%。     

超甜玉米胚性愈伤组织诱导体系的建立

以超甜玉米自交系S1和品种粤甜3号为材料研究了影响愈伤组织诱导和胚性形成的几个关键因素。结果表明,2种基因型都是高诱导力的材料,自交系S1能够诱导出高质量的Ⅱ型胚性愈伤,是理想的基因转化材料。2,4-D浓度为2 m g/L时,2种基因型出愈率和胚性愈伤率达到最高,胚性愈伤率分别达到45.88%和35.00%;在培养基中添加9 m g/L的A gNO3极显著地提高了胚性愈伤率,比对照提高了31.25%;添加700 m g/L的脯氨酸,胚性愈伤率显著地提高了12.41%。据此建立了高效稳定的超甜玉米转基因胚性愈伤组织诱导体系。     

玉米茎尖培养诱导愈伤组织及植株再生的研究

以黑龙江省8个优良玉米自交系为试验材料,研究了玉米茎尖培养诱导愈伤组织及愈伤组织继代培养和植株再生的效果。结果表明,不同培养基和基因型的愈伤组织诱导再生能力差异大,单一培养基效果不如复合培养基。2,4-D和6-BA的浓度及比例是影响愈伤组织诱导的重要因素。8种基因型中只有3种成功获得愈伤组织诱导、继代和分化植株,另有3种基因型获得水性愈伤但不能继代,2种基因型未产生愈伤。     

四种玉米幼胚培养性状的基因效应分析

【目的】了解玉米幼胚培养主要性状的遗传变异规律。【方法】选用玉米高幼胚培养能力自交系R18-599（红）与低培养能力自交系R15获得6个世代，幼胚培养测定胚性愈伤组织诱导率、非胚性愈伤组织诱导率、愈伤组织克隆力和愈伤组织绿苗再分化数4个性状，采用6世代平均值分析法和主基因+多基因混合遗传模型世代联合分析法分别进行遗传分析。【结果】胚性愈伤组织诱导率受2对加性-显性-上位性主基因+加性-显性-上位性多基因控制；非胚性愈伤组织出愈率受两对加性-显性-上位性主基因控制；再分化数受1对主基因+加性-显性多基因控制；克隆力受2对主基因+多基因控制，但2种方法对克隆力的上位性效应鉴定结果不同。【结论】比较2种方法的分析结果，世代联合分析法不仅提高了试验结果的精确度，同时还提供了更多的遗传信息。     

小麦幼胚愈伤组织的诱导

为建立小麦(Triticum aestivum Linn.)幼胚的转化体系,获得转基因的小麦再生植株,对小麦幼胚进行愈伤组织诱导。以新春6号和新春9号小麦幼胚为试验材料,选择不同诱导培养基对幼胚进行愈伤组织诱导。结果表明,4种培养基诱导的愈伤组织质量和诱导率有明显的差异,其中MCIMA+KT高于其他3种培养基,新春6号和新春9号诱导率分别为53.80%和52.25%,愈伤组织的质量级别为A级,属于极适宜进行遗传转化状态。SD2培养基上诱导出的2个小麦品种愈伤组织分别为0.002%和0.59%,是不适宜进行遗传转化的培养基。新春6号和新春9号2个基因型诱导的愈伤组织数量和质量之间没有明显差异,适于进行遗传转化。