腹泻羔羊中大肠埃希氏杆菌共同性保护抗原初探

用从某疫群腹泻羔羊中分离得到的6株大肠埃希氏杆菌(Escherichia coli)单独和混合免疫绵羊制备高免血清,于次年注射初生羔羊预防和治疗腹泻,均无效果。选不同年份分离出的8株菌分别高免家兔制备抗血清,对74株菌进行筛选,每种血清可凝集的菌株为9.5％—18.0％。采集疫群病愈羔羊血清分别与本群或其他疫群分离出的菌株作平板凝集试验,未找出共同抗原性菌株。     

浓缩苹果汁生产环境中嗜酸耐热菌的分离与初步鉴定

为了解和控制我国浓缩苹果汁中的嗜酸耐热菌,对浓缩苹果汁生产过程主要工段和生产车间的空气及用水,进行了采样和分离鉴定,并与标准菌株A.acidoterrestris和已知分离菌珠进行了比较分析。结果表明,共分离得到了3株污染浓缩苹果汁的嗜酸耐热菌;在耐热、耐酸性检验中,这3株菌均可以较好地生长,符合脂环酸芽孢杆菌属嗜酸耐热的特点。与标准菌株和已知分离菌株细胞、菌落形态观察、生长条件和生理生化反应等方面的比较表明,这3株菌与标准菌株有较大的相似性,与标准菌应为同属不同种。     

动物性食品源弓形菌23S rRNA基因PCR检测方法的建立

建立了一种快速、准确检测弓形菌(Arcobacter)的PCR方法。根据弓形菌23S rRNA基因序列设计引物,对弓形菌标准菌株、弓形菌食品分离株及非弓形菌属菌株进行PCR扩增。结果表明,弓形菌标准菌株和35株弓形菌食品分离株扩增后均可得到688 bp的目的条带,11株非弓形菌属菌株均未见任何扩增条带,对弓形菌的最低检测限为1.12×103CFU/mL。该方法操作简单、检测周期短、灵敏度高、特异性好,可用于食品中弓形菌的快速检测。     

猪源马链球菌兽疫亚种灭活疫苗对小鼠的免疫效力评价

 【目的】评价中国不同地区猪源马链球菌兽疫亚种分离株抗原性的差异,为猪链球菌病疫苗的研制提供指导。【方法】取从国内10省市分离的10株猪源马链球菌兽疫亚种分离株,分别制备灭活疫苗,免疫12周龄ICR小鼠,用同源菌株和ATCC35246株攻击。【结果】以同源菌株攻击免疫小鼠,除CG-74-63株外,其余菌株的保护率均在90％以上;而以异源菌株ATCC35246进行攻击,免疫小鼠的免疫保护率为80%～100%。【结论】中国不同地区的猪源马链球菌兽疫亚种分离株的抗原性差异不大,单一菌株制备的疫苗具有保护性。     

鸭疫巴氏杆菌防制研究

在江西部分地区的鸭群中分离到12株鸭疫巴氏杆菌,经生化及血清学试验,确定其中11株属鸭疫巴氏杆菌血清1型,另1株为血清2型。药敏试验表明分离菌对氟苯尼考、利福平等药物高度敏感。用分离菌株制成的灭活菌苗免疫当地小鸭,免疫保护率可达98.3%。     

闽北地区鸡致病性大肠杆菌的分离与血清型鉴定

从闽北地区几个大型养鸡场的发病鸡群的病、死鸡的内脏和死胚中分离到１１８株大肠杆菌,对其进行了生化试验、致病性试验和血清型鉴定,其中有７６株具有致病性,占分离菌的６４．４％;除了１４株未能定型外,共鉴定出６２株分离菌的Ｏ血清型,这些定型菌株共１１血清型,以Ｏ７８、Ｏ２、和Ｏ１为优势血清型,分别占鉴定菌株的３８．７％、１９．４％和１１．３％。     

分离自小麦赤霉病和玉米茎基腐病的禾谷镰孢菌的致病性研究

采用单花滴注方法和注射法交互接种,分别对8株分离自小麦赤霉病穗和11株分离自玉米茎基腐病茎的禾谷镰孢菌进行致病力测定。结果表明,所有供试菌株均能够成功交互侵染小麦和玉米,二者致病能力不同,存在明显差异。小麦赤霉病和玉米茎基腐病都是土传病害,染病作物病残体会造成跨寄主侵染,在小麦玉米轮作区两种病害可能会出现日渐严重的趋势。     

宁夏沙坡头地区根瘤菌特性分析：Ⅰ.数值分类研究

本实验分析了分离自宁夏沙坡头地区的２０株根瘤菌和２６株参比菌的１２５项生理生化性状，经数值分类表明，全部供试菌株在８４％，相似性水平上分为１２个亚群，未知菌与各已知菌群差异明显，其中１３个菌株分别组成３个亚群，其分类地位有待于进一步分析确定。     

东北地区镰孢菌种群动态分析

甜瓜枯萎病的致病菌尖孢镰孢菌是我国重要的土传病原真菌,可产生多种毒素,对农产品造成污染,严重影响作物产量以及人类和牲畜的健康。由于瓜类枯萎病种内分类复杂,许多种群之间还存在交叉侵染现象,防治困难。本文分别在辽宁省、吉林省、黑龙江省、内蒙古通辽地区采集供试菌株72株,采用传统的形态学分类学方法,对镰孢菌进行分类和鉴定。共鉴定出镰孢菌种72株,其中尖孢镰孢菌49株(辽宁省分离出19株、吉林省分离出14株、黑龙江省分离出16株),占供试菌株的68.06%;禾谷镰孢菌18株(辽宁省分离出11株、吉林省分离出3株、黑龙江省分离出4株),占供试菌株的25.00%;层生镰孢菌3株(吉林省分离出2株、内蒙古通辽分离出1株),占供试菌株的4.16%;轮枝镰孢菌2株,均为吉林省分离出,占供试菌株的2.78%。     

高效秸秆发酵剂优良菌种的分离筛选与鉴定

用ＳＬ选择性培养基从青贮饲草中分离出１０株乳酸菌,并从革兰氏染色特性,形态特征,培养特性和生化反应等方面进行了初步鉴定,结果明串株菌２株,片球菌２株,植物乳杆菌３株,发酵乳杆菌３株,按不同菌株搭配制成发酵剂,经发酵剂处理的秸秆喂牛增重效果显著。     

鸽源多杀性巴氏杆菌血清学鉴定

对分离自陕西渭南的２４株鸽源多杀性巴氏杆菌,用Ｃａｒｔｅｒ英膜群鉴定法和Ｈｅｄｄｌｅｓｔｏｎ热稳定抗原鉴定法进行血清学分型研究。结果表明,在鉴定２４株多杀性巴氏杆菌中,除３株未能分群外,其余２１株均为英膜Ａ群。     

禽霍乱蜂胶灭活疫苗研制中的铁螯合剂适宜浓度确定

以含4%鸡血清的营养琼脂为培养基,进行了铁螯合剂2,2'-联吡啶对禽多杀性巴氏杆菌C48-3株的抑菌试验.结果表明,对于含4%鸡血清的营养琼脂培养基,铁螯合剂2,2'-联吡啶的合适添加量为200 μmol/L.     

禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究（Ⅳ报）——疫苗的田间试验

1材料与方法 1．1二联营的制备与质量检验 1．1．1毒株来源与二联苗的制备。禽A型为杀性巴氏杆菌（APM）效力检验用强毒为C48．1株,鸡新城疫病毒（NDV）效力检验用强毒为北京株、APM1502株和NDVLaSota株,均购自中国兽药监察所。将APM强毒1502株培养菌液与NDV弱毒LaSota株感染鸡胚尿囊液混合,经甲醛溶液灭活后,按马闻天等的方法制备5批二联油乳剂灭活疫苗（批号05-1—05-5）。     

黑龙江省鸡霍乱多杀性巴氏杆菌血清学分型的研究(第一报)

本文报道了由我省部分县病死鸡中分离的47株鸡霍乱多杀性巴氏杆菌血清型。报道了利用国际多杀性巴氏杆菌标准菌株,按照郭大和等修改的Carter的间接血凝鉴定荚膜法和Namioka的试管凝集菌体分型法进行血清学分型工作。结果表明,39株为A群,8株未定群,菌体血清型均为05。因而总的血清型:39株为5:A,8株为5:一。     

兔巴氏杆菌病的诊断

郑州某兔场青紫蓝兔发生疫情,通过对病兔进行血清学检查、组织触片观察、细菌分离培养、生化实验和动物试验,再结合发病情况、临床症状和病理剖解结果诊断该病为由兔多杀性巴氏杆菌引起的兔巴氏杆菌病。     

猪源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及荚膜血清分型

为了解各血清型的多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida,Pm）在四川、重庆、云南的流行情况,对2013-2014年间四川、重庆、云南等地8个规模化养殖场的125份病死猪肺炎样品进行细菌分离,并用PCR方法对分离的多杀性巴氏杆菌进行鉴定及荚膜血清分型。结果表明：从有肺炎症状病死猪的肺脏样品中共分离出11株多杀性巴氏杆菌,其中有7株为A血清型（63.6%）,3株为D血清型（27.3%）,1株为F血清型（9.1%）,没有发现B和E血清型。表明在该区域内,猪肺疫主要是由A型Pm感染引起。另外,此次还分离出了1株较少见的F型多杀性巴氏杆菌。该结果可为上述地区巴氏杆菌病的防治提供科学材料。     

11株禽多杀性巴氏杆菌OmpA基因克隆测序及其序列分析

为了解国内禽多杀性巴氏杆菌流行株（Pasteurella multocida,Pm）OmpA基因的变异情况,参考GenBank中已发表的多杀性巴氏杆菌序列设计一对特异性引物,采用PCR方法对11个禽Pm菌株和3个荚膜型参考株（A,B,D）的OmpA基因进行扩增,将各菌株纯化回收的扩增产物与pMD18-T载体连接,筛选阳性克隆进行测序。结果表明：14个菌株的OmpA基因开放阅读框在1 047～1 077 bp之间,其中长度为1 062 bp的有9个菌株;Signal IP 4.0预测表明,信号肽均为N端21个氨基酸残基,成熟蛋白氨基酸残基数量在327～332之间,推测的分子量为35.19～36.35 kD。与GenBank中12个菌株OmpA基因核苷酸序列比对及遗传进化分析发现,核苷酸同源性为85.3%～100%;氨基酸同源性为83.1%～100%;其中C48-1,1010,9003,890920,921012,xj等6个国内禽Pm分离株OmpA序列同源性为100%。由此可见国内禽Pm菌株OmpA基因非常保守。     

禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究 (Ⅳ报)——疫苗的田间试验

[目的]评价禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗的临床应用效果,为联合防制禽霍乱和新城疫提供条件。[方法]将禽A型多杀性巴氏杆菌1502强毒株与鸡新城疫病毒La Sota弱毒株混合,制备成5批合格的二联油乳剂灭活苗,用于鸡、鸭和鹅的田间安全性和免疫保护试验。[结果]田间安全性试验表明,免疫鸡、鸭和鹅均未出现不良反应;鸡的田间免疫效力试验表明,7～14日龄雏鸡和60～90日龄青年鸡免疫3周后新城疫血凝抑制（ND-HI）抗体效价均比对照组高2～3 log2,可持续4个月以上,禽多杀性巴氏杆菌攻毒保护率均达到75.0%以上,免疫效力可持续6个月;鸭和鹅的田间免疫效力试验表明,接种3周后免疫组ND-HI抗体效价均≥4.2 log2,对照组均≤2 log2;鸭、鹅的禽多杀性巴氏杆菌攻毒保护率分别在75.0%和62.5%以上。[结论]该二联苗免疫禽类安全可靠,具有良好的免疫效果。     

天峻县牦牛巴氏杆菌的多重PCR检测

为确诊天峻县3头牦牛死亡的病原,对该病病原进行分离培养、动物试验、生化鉴定和多重PCR鉴定.结果表明,从3头牦牛中分离出3株多杀性巴氏杆菌;根据设计的特异引物通过多重PCR扩增,获得大小为460 bp的多杀性巴氏杆菌的种特异性Kmt1基因和760 bp的血清型bcbD基因的特异性条带,这3株巴氏杆菌的血清型是荚膜B型;3株分离菌对喹诺酮类合成抗菌药物如氧氟沙星、培氟沙星、氟罗沙星,氯霉素类药物氟苯尼考及部分头孢类药物如头孢曲松、头孢噻肟、头孢西丁、头孢唑啉等敏感.     

PCR检测鸭疫里默氏菌的研究

对本研究室分离、鉴定并保存的42株鸭疫里默氏菌(包括8个血清型)、9株鸭源大肠杆菌和4株鸭源禽多杀性巴氏杆菌进行PCR扩增，结果所有的鸭疫里默氏菌均能扩增出809bp的特异性DNA片段，而鸭源大肠杆菌和鸭源禽多杀性巴氏杆菌均为阴性。试验证明以细菌DNA和全菌体分别作模板，对PCR的扩增结果无影响。经过优化的该PCR方法能检测出的最低DNA量为1pg。